動(dòng)物醫(yī)學(xué)和畜牧獸醫(yī)的區(qū)別范文

時(shí)間:2023-11-02 18:02:13

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動(dòng)物醫(yī)學(xué)和畜牧獸醫(yī)的區(qū)別

篇1

關(guān)鍵詞:畜牧獸醫(yī)專業(yè);高等教育;就業(yè)問題

中圖分類號(hào):G646 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1674-9324(2014)10-0112-02

隨著高校招生規(guī)模的持續(xù)擴(kuò)大,高校畢業(yè)生人數(shù)呈現(xiàn)跳躍式的增長(zhǎng)。中國(guó)高校畢業(yè)生就業(yè)規(guī)模明顯增大,2003年高校畢業(yè)生人數(shù)212萬人,2005年338萬人,2007年495萬人,2009年610萬人,2011年650萬人。歷年就業(yè)人數(shù)的增長(zhǎng)速度相對(duì)緩慢,高校畢業(yè)生占新增就業(yè)人數(shù)的比重急劇攀升。高校畢業(yè)生占新增就業(yè)人數(shù)比率,2003年為24.68%,2005年為34.85%,2007年為41.11%,2009年為55.35%,2011年為53.24%[1]。社會(huì)經(jīng)濟(jì)方式的變化導(dǎo)致我國(guó)就業(yè)方式發(fā)生了重大轉(zhuǎn)變――由傳統(tǒng)的“統(tǒng)包統(tǒng)配”到現(xiàn)在的“自主擇業(yè)”[2]。高校畢業(yè)生能否順利渡過職業(yè)適應(yīng)期,直接影響到個(gè)人的經(jīng)濟(jì)收人、社會(huì)聲望和權(quán)利地位,一定程度上決定未來的發(fā)展前景,影響勞動(dòng)力市場(chǎng)的穩(wěn)定,也影響高校的健康發(fā)展。十報(bào)告把就業(yè)工作作為一種戰(zhàn)略來對(duì)待,這是一種全新的提法。河南是一個(gè)農(nóng)業(yè)大省,畜牧獸醫(yī)專業(yè)學(xué)生的就業(yè)直接影響河南的經(jīng)濟(jì)發(fā)展,為進(jìn)一步提高畜牧獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)學(xué)生的高質(zhì)量就業(yè),本文對(duì)畜牧獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)的就業(yè)問題進(jìn)行了分析、歸納和總結(jié)。

一、鄭州牧業(yè)工程高等專科學(xué)校畜牧獸醫(yī)專業(yè)畢業(yè)生近年就業(yè)概況

鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校,始建于1957年,是一所為畜牧獸醫(yī)、食品生產(chǎn)、生物技術(shù)等行業(yè)培養(yǎng)高等技術(shù)應(yīng)用型人才的普通高等學(xué)校。2007年11月份,畜牧獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)有藥物工程系、動(dòng)物醫(yī)學(xué)系、畜牧工程系。2011年,藥物工程系就業(yè)率是93.07%,動(dòng)物醫(yī)學(xué)系醫(yī)學(xué)就業(yè)率是99.03%,畜牧工程系就業(yè)率是98.26%;2009年,藥物工程系就業(yè)率93.86%,動(dòng)物醫(yī)學(xué)系醫(yī)學(xué)就業(yè)率是96.67%,畜牧工程系就業(yè)率是93.86%;2008年,藥物工程系總就業(yè)率93.07%,動(dòng)物醫(yī)學(xué)系醫(yī)學(xué)就業(yè)率是99.03%,畜牧工程系就業(yè)率是98.26%。但學(xué)生的初就業(yè)收入明顯偏低。

二、提高畜牧獸醫(yī)專業(yè)學(xué)生高質(zhì)量就業(yè)的措施

學(xué)生就業(yè)的成功與否是對(duì)教育過程的成功與否的直接驗(yàn)證,學(xué)生在順利完成學(xué)業(yè)的同時(shí)能夠給自己未來的人生有一個(gè)更好的起點(diǎn),需要我們教師的引導(dǎo)和教育,學(xué)生的就業(yè)也有利于我們總結(jié)與歸納工作中的經(jīng)驗(yàn)和不足。在學(xué)校,教師和學(xué)生之間應(yīng)該是互容、平等、共享的關(guān)系。這種共享既是文化共享,也是責(zé)任共享[3]。為提高畜牧獸醫(yī)專業(yè)學(xué)生的高質(zhì)量就業(yè),學(xué)校應(yīng)該做好以下幾方面的工作。

(一)教學(xué)大綱、教學(xué)過程、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合大學(xué)生的身心發(fā)展規(guī)律與認(rèn)知規(guī)律

某些商品賣不出去還能回場(chǎng)重造,可我們的畢業(yè)生一旦畢業(yè)了,就無法再回頭重學(xué)了,所以教學(xué)和技能實(shí)踐尤為重要,教學(xué)方式需要不斷地更新、不斷地創(chuàng)新,適應(yīng)就業(yè)市場(chǎng)的需求。符合大學(xué)生的身心發(fā)展規(guī)律與認(rèn)知規(guī)律的教學(xué)大綱、教學(xué)過程、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)有利于提高學(xué)生的就業(yè)質(zhì)量。

1.課程安排上,加大職業(yè)技能課程的比重。加強(qiáng)學(xué)生的能力培養(yǎng),提高就業(yè)資本。在第一年寬口徑的通識(shí)教育中,加入專業(yè)理論課程,讓大學(xué)生了解本專業(yè),有利于大學(xué)生確立職業(yè)目標(biāo);第二年開始,應(yīng)該根據(jù)專業(yè)方向分模塊安排課程,在本專業(yè)方向上的課程盡量開足、開全,讓大學(xué)生形成從業(yè)素質(zhì),構(gòu)建完整的知識(shí)、技能和能力結(jié)構(gòu)。目前很多高校課程體系設(shè)計(jì)更多的是仍然沿用精英教育方式,過于重視知識(shí)性和系統(tǒng)化,課程設(shè)計(jì)的思路也沒有完全擺脫傳統(tǒng)習(xí)慣的影響。很多高校在教學(xué)的方法上更加注重理論知識(shí),教學(xué)方法不靈活,教學(xué)形式比較單一,同時(shí)學(xué)校忽視了對(duì)學(xué)生動(dòng)手能力的培養(yǎng)。地方高校要以應(yīng)用型人才培養(yǎng)為核心,緊緊聯(lián)系生產(chǎn)實(shí)際,構(gòu)建實(shí)驗(yàn)教學(xué)、雙語教學(xué)、科技創(chuàng)新、實(shí)踐基地“四位一體”的綜合性實(shí)踐教學(xué)體系。對(duì)口生和普招生的認(rèn)知能力有區(qū)別,前者接受直觀知識(shí)快,但系統(tǒng)掌握知識(shí)的能力有待進(jìn)一步提高;后者的系統(tǒng)知識(shí)和理論知識(shí)掌握能力強(qiáng),但理論知識(shí)向?qū)嵺`能力的轉(zhuǎn)換需要時(shí)間較長(zhǎng),因此相同專業(yè)的對(duì)口生和普招生的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該有所區(qū)別??茖W(xué)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),有助于學(xué)生找到發(fā)展的契機(jī)、合適的工作,以盡快實(shí)現(xiàn)自己的人生價(jià)值??茖W(xué)合理的教學(xué)大綱,有利于提高學(xué)生的認(rèn)知能力,挖掘他們的潛能。如《獸醫(yī)藥理學(xué)》的教學(xué),教學(xué)大綱應(yīng)該很明確地把理論的教學(xué)目標(biāo)和各論的教學(xué)目標(biāo)區(qū)別,幫助學(xué)生在學(xué)習(xí)本課程后,能用基礎(chǔ)知識(shí)解釋藥物之間的區(qū)別,也能用藥物的特點(diǎn)來詮釋獸醫(yī)藥理的基礎(chǔ)觀點(diǎn)。靈活有趣的教學(xué)過程,有利于普招生的理解,提高對(duì)口生的識(shí)記能力。普招生的專業(yè)知識(shí)基礎(chǔ)薄弱,需要典型案例來幫助他們理解較抽象的理論知識(shí);對(duì)口生歸納總結(jié)知識(shí)的能力不高,需要老師設(shè)計(jì)課堂的整體計(jì)劃,需要在老師的帶領(lǐng)下去歸納總結(jié)。應(yīng)做好頂層設(shè)計(jì),做好畢業(yè)生就業(yè)工作的內(nèi)涵建設(shè),提升高職院校辦學(xué)質(zhì)量,學(xué)會(huì)用準(zhǔn)確、科學(xué)的數(shù)據(jù)說話,為高職院校科學(xué)設(shè)置專業(yè)、深化教育教學(xué)改革、提高人才培養(yǎng)質(zhì)量提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)路徑,為改進(jìn)和提升畢業(yè)生就業(yè)工作提供科學(xué)的決策依據(jù)。

2.教育理念上,重視素質(zhì)教育。在高等教育大眾化的今天,無論是培養(yǎng)研究型人才還是應(yīng)用型人才,都應(yīng)重視職業(yè)技能的訓(xùn)練,必須要具備從事社會(huì)一定職業(yè)的基本素質(zhì)、基本技術(shù)和基本能力,才能在社會(huì)上立足,建功立業(yè)。素質(zhì)教育在中國(guó)實(shí)施多年了,大學(xué)教育還存在一個(gè)明顯的弊端――側(cè)重知識(shí)型與理論型的教育,這恰與企業(yè)要求的復(fù)合型、實(shí)操型、技能型的人才相去甚遠(yuǎn)。畢業(yè)生們還需要從技能培訓(xùn)和職業(yè)化培訓(xùn)兩個(gè)方面加強(qiáng)培養(yǎng),使自己的實(shí)際能力與企業(yè)需求之間實(shí)現(xiàn)成功對(duì)接。

3.專業(yè)設(shè)置上,面向行業(yè)設(shè)置專業(yè)。以適應(yīng)行業(yè)需要為目標(biāo)來組織教學(xué),培養(yǎng)社會(huì)、企業(yè)要求的復(fù)合型、應(yīng)用型、技能型的人才。應(yīng)用型本科教育以“理論應(yīng)用”為主旨來構(gòu)建課程和教學(xué)內(nèi)容體系,培養(yǎng)學(xué)生應(yīng)用科學(xué)理論解決實(shí)際問題的綜合能力和實(shí)踐能力;高職??平逃齽t是直接面向職業(yè)崗位(群)設(shè)置專業(yè),圍繞職業(yè)崗位要求組織教學(xué)內(nèi)容和訓(xùn)練崗位操作能力。

4.具體實(shí)施上,重視實(shí)習(xí)環(huán)節(jié),建立良好的實(shí)習(xí)機(jī)制。完善教育管理理念,切實(shí)推進(jìn)“全程就業(yè)、全員就業(yè)”的工作機(jī)制。發(fā)揮學(xué)生的主體作用[3],開展與職業(yè)相關(guān)的專業(yè)見習(xí)、實(shí)習(xí)和實(shí)踐活動(dòng)。避免安排假設(shè)的、空對(duì)空的活動(dòng),使大學(xué)生確實(shí)能收到成效,養(yǎng)成腳踏實(shí)地的工作作風(fēng)。第一,實(shí)習(xí)有完備的教學(xué)實(shí)習(xí)制度,每個(gè)專業(yè)都要有足夠而穩(wěn)定的實(shí)習(xí)基地和導(dǎo)師,讓大學(xué)生能與真實(shí)的職業(yè)環(huán)境“零距離”接觸,平穩(wěn)過渡到職場(chǎng)。第二,加強(qiáng)管理,重視大學(xué)生職業(yè)素養(yǎng)的學(xué)習(xí)和實(shí)踐,讓大學(xué)生進(jìn)行有效的實(shí)習(xí),安排專門的導(dǎo)師手把手地教會(huì)相關(guān)的職業(yè)技能,基本學(xué)會(huì)某職業(yè)崗位的主要工作內(nèi)容。

(二)、暢通與畢業(yè)生的溝通渠道,切實(shí)做好跟蹤調(diào)查工作

做好畢業(yè)生跟蹤調(diào)查,可以更深入地了解社會(huì)、市場(chǎng)對(duì)人才的需求狀況,能為專業(yè)教育教學(xué)改革提供真實(shí)、可靠的信息,是優(yōu)化人才培養(yǎng)計(jì)劃、進(jìn)行課程體系與教學(xué)內(nèi)容改革的依據(jù),是進(jìn)一步探索高職教育人才培養(yǎng)的新模式、新途徑和培育專業(yè)特色的基礎(chǔ)與保障。要做到人才培養(yǎng)適應(yīng)社會(huì)需求,在畢業(yè)生就業(yè)工作中做好跟蹤調(diào)查工作,做好畢業(yè)生就業(yè)去向的詳細(xì)記錄。所有畢業(yè)生就業(yè)去向的詳細(xì)登記表,包括家里的固定電話、學(xué)生的工作情況、學(xué)生的聯(lián)系方式、QQ、單位的地址、家長(zhǎng)的聯(lián)系方式、家長(zhǎng)的單位、學(xué)生和家長(zhǎng)單位人力資源部門的聯(lián)系方式、甚至學(xué)生的朋友的系列情況等。這份表格一定要存檔備份,而且要不斷地向這份表格內(nèi)添加信息。及時(shí)做好供求與需求關(guān)系的分析與預(yù)測(cè),提高就業(yè)工作的預(yù)見性,為學(xué)校專業(yè)調(diào)整、教學(xué)方法改進(jìn)、教學(xué)質(zhì)量提高、課程建設(shè)的加強(qiáng)與就業(yè)指導(dǎo)工作提供依據(jù)。在實(shí)現(xiàn)比較充分就業(yè)的基礎(chǔ)上,優(yōu)化就業(yè)結(jié)構(gòu),提高就業(yè)質(zhì)量,打造高校畢業(yè)生就業(yè)工作的新局面。

定期把在工作中表現(xiàn)優(yōu)秀的畢業(yè)生邀請(qǐng)回母校作成才講座和諸如“優(yōu)秀校友面對(duì)面”的主題交流活動(dòng),告訴在校的學(xué)生如何去規(guī)劃自己的大學(xué)生活,確立明確的奮斗目標(biāo),努力掌握重要的工作技能和培養(yǎng)相關(guān)的品質(zhì)。

三、完善就業(yè)創(chuàng)業(yè)課程指導(dǎo)體系

就業(yè)教育應(yīng)該從大一新生抓起,大二、大三分階段、分層次、分內(nèi)容進(jìn)行,切實(shí)上好大學(xué)生就業(yè)指導(dǎo)這門課。使學(xué)生明確自己的定位與能力,增加繼續(xù)學(xué)習(xí)的動(dòng)力,為就業(yè)打下良好的基礎(chǔ)。

首先,指導(dǎo)大學(xué)生制定個(gè)人職業(yè)生涯規(guī)劃,讓他們探索出適合自己的經(jīng)過努力能夠?qū)崿F(xiàn)的職業(yè)理想和職業(yè)生涯路線。通過職業(yè)規(guī)劃,讓大學(xué)生了解自己適合的工作領(lǐng)域,然后去了解這個(gè)領(lǐng)域的相關(guān)職業(yè)及工作環(huán)境,職業(yè)所需的素質(zhì)要求,并以此為學(xué)習(xí)和實(shí)踐的目標(biāo),為就業(yè)做好充分的準(zhǔn)備,也能因此縮短職業(yè)適應(yīng)期。再者,對(duì)大學(xué)生進(jìn)行職業(yè)道德和法律教育。對(duì)大學(xué)生進(jìn)行職業(yè)意識(shí)教育,使之認(rèn)識(shí)職場(chǎng),了解社會(huì),認(rèn)知自我,合理調(diào)整職業(yè)期望值。應(yīng)該讓大學(xué)生認(rèn)識(shí)到職業(yè)意識(shí)的重要性。作為一個(gè)有理性有文化的從業(yè)者,生活在如此錯(cuò)綜復(fù)雜的社會(huì)里,應(yīng)當(dāng)擁有很強(qiáng)的職業(yè)目標(biāo)意識(shí)。只有這樣,自己的職業(yè)生活才會(huì)有計(jì)劃性、指向性,才能有充足的動(dòng)力將工作做好,職業(yè)發(fā)展才更快、更有成功的可能。第三,幫助大學(xué)生樹立自信。求職是一種針對(duì)就業(yè)的有計(jì)劃的行為,可以用計(jì)劃行為理論來向?qū)W生解釋整個(gè)求職過程。根據(jù)計(jì)劃行為理論,個(gè)體的態(tài)度、主體規(guī)范越積極、感知到的行為控制力越強(qiáng),則執(zhí)行某種行為的意向越強(qiáng);而這種意向越強(qiáng),則越可能最終執(zhí)行某種行為[4]。

總之,“穩(wěn)定壓倒一切、就業(yè)高于一切、學(xué)生就是一切”是十提出的,每一個(gè)高等教育者都應(yīng)該牢記并從自己的實(shí)際工作做起,切實(shí)服務(wù)于學(xué)生、服務(wù)于社會(huì),提高學(xué)生的就業(yè)質(zhì)量和數(shù)量。

參考文獻(xiàn):

[1]褚福靈.中國(guó)高校畢業(yè)生就業(yè)形勢(shì)與對(duì)策北京勞動(dòng)保障職業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào),2012(6)3:3-6.

[2]周文霞.職業(yè)成功:從概念到實(shí)踐[M].上海:復(fù)旦大學(xué)出版社,2006:137-145.

[3]張春輝.上好獸醫(yī)藥理及毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的方法.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(12):360-361.

[4]張春輝,周延州,郭永剛,等.淺談獸醫(yī)藥理學(xué)和動(dòng)物毒理學(xué)的教學(xué)過程.天中學(xué)刊,2007(2):117-118.

篇2

關(guān)鍵詞:鴨瘟;鴨瘟病毒;分離;鑒定

中圖分類號(hào):S852.65+9.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)19-4644-03

DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2014.19.036

Isolation and Identification of One Duck Plague Virus Strain

FU Shu-lin1, CHEN Xia-bing1, QIAN Yun-guo2, ZHANG Da-bing3, YANG Wen-hai1, HE Bin1, JIN Er-guang1, TONG Wei-wen1, YE Sheng-qiang1, LIU Wu1, TAO Bi-fei1, CHEN Jie1

(1. Wuhan Institute of Animal Husbandry and Veterinary Science, Wuhan 430208,China; 2.Wuhan Vegetable Research Institute, Wuhan 430208, China; 3. College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100083, China)

Abstract: One virus strain was isolated from the liver of the dead ducks in a farm of Wuhan city, Hubei province. Combined with epidemiological investigation and autopsy pathology, it was initially diagnosed as duck plague virus infection. Based on the sequences of plague virus gene in GenBank of UL6 gene, one pair of primers was designed and used to PCR amplification of extracted viral nucleic acids DNA. The PCR products were 416 bp and the similarity was 99% compared with the gene sequence of the Duck Plague Virus UL6 gene published. The duck embryo infection experiment showed that duck embryos began to die in the first four days, with typical symptoms of the duck plague virus infection. It is indicated that the case was the infection of duck plague virus.

Key words: duck plague; duck plague virus; isolation; identification

鴨瘟(Duck plague),又名鴨病毒性腸炎(Duck virusenteritis, DVE),是鴨、鵝和其他雁形目禽類的一種急性、熱性、敗血性傳染病[1]。其特征是流行廣泛,傳播較迅速,發(fā)病率和死亡率較高。鴨瘟臨床表現(xiàn)為精神沉郁、高熱稽留、兩腿麻痹、下痢、流淚和部分發(fā)病鴨頭頸腫大[2]。該病病原為鴨瘟病毒(Duck plague virus),屬于皰疹病毒科α皰疹病毒亞科,核酸類型為線狀雙股DNA[3]。由于對(duì)鴨瘟病毒的分子生物學(xué)研究相對(duì)滯后,基因的功能研究嚴(yán)重滯后,因此目前該病的診斷主要依賴于流行病學(xué)、臨床癥狀、病理變化和病毒的分離、鑒定。但是目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)建立了一些分子生物學(xué)方法對(duì)鴨瘟病毒進(jìn)行鑒別診斷。陳安莉等[4]建立了二重PCR方法能夠區(qū)別新城疫病毒和鴨瘟病毒的感染,張艷芳等[5]建立了二重?zé)晒舛縍T-PCR方法區(qū)分鴨黃病毒和鴨瘟病毒的感染。

本研究根據(jù)GenBank上公布的鴨瘟病毒UL6基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)PCR引物,成功擴(kuò)增出目的基因,并通過鴨胚感染試驗(yàn)證實(shí)了鴨瘟病毒在臨床上的感染。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用9~10日齡櫻桃谷鴨胚由武漢市畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所自行孵化;病毒基因組DNA提取試劑盒為OMEGA公司產(chǎn)品;DL Marker 2000、Taq酶均為寶生物工程(大連)有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 病料收集與處理 送檢病料來自湖北省武漢市某種鴨場(chǎng)40周齡櫻桃谷種鴨。采集病鴨的肝臟組織搗碎,并按照質(zhì)量體積比1∶5的比例加入無菌的PBS液混勻進(jìn)行組織勻漿,然后以4 000 r/min離心10 min,取上清液并用無菌PBS液稀釋作為接種鴨胚的材料。

1.2.2 病毒DNA提取 取送檢死亡的病鴨肝臟,加入無菌的PBS液進(jìn)行組織勻漿,以4 000 r/min離心10 min,取上清液,然后按照病毒基因組DNA提取試劑盒的說明書進(jìn)行操作。

1.2.3 引物設(shè)計(jì)與合成 根據(jù)GenBank上公布的鴨瘟病毒UL6基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)PCR引物,引物由寶生物工程(大連)有限公司合成。上游引物P1:5′-GAGCGTATTTAGATGAAACTGC-3′,下游引物P2:5′-TGTTGTGATTGTTCC-3′。目的片段大小為416 bp。

1.2.4 PCR擴(kuò)增 PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系采用25 μL反應(yīng)體系。2×Premix Taq DNA酶12.5 μL,上下游引物(20 μmol/mL)各1 μL,DNA模板5 μL,滅菌水5.5 μL。PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性2 min;94 ℃變性50 s,54 ℃退火90 s,72 ℃延伸2 min,35個(gè)循環(huán);72 ℃延伸5 min;4 ℃ 30 min。PCR產(chǎn)物于0.8%的瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳分析。

1.2.5 測(cè)序與序列分析 將PCR產(chǎn)物用DNA回收試劑盒進(jìn)行純化回收,并送寶生物工程(大連)有限公司進(jìn)行測(cè)序。使用DNA Star軟件將測(cè)序結(jié)果與GenBank上公布的UL6基因序列進(jìn)行比對(duì)分析。

1.2.6 鴨胚感染試驗(yàn) 將16只9~10日齡的鴨胚隨機(jī)分為2組,每組8只。第一組每只鴨胚接種0.2 mL的病毒稀釋液。第二組每只鴨胚接種0.2 mL的無菌PBS液(陰性對(duì)照)。培養(yǎng)并觀察鴨胚死亡情況和病變情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 鴨瘟病毒的PCR鑒定結(jié)果

用設(shè)計(jì)合成的針對(duì)鴨瘟病毒UL6基因核苷酸序列擴(kuò)增引物對(duì)提取的鴨瘟病毒DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增后,擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)一條約416 bp大小的條帶,與預(yù)期片段大小相符(圖1)。

2.2 鴨瘟病毒UL6基因序列測(cè)定分析結(jié)果

將所測(cè)定的序列通過DNAMAN軟件與GenBank上公布的鴨瘟病毒UL6基因序列進(jìn)行比對(duì)分析,結(jié)果表明所鑒定病毒的UL6基因序列與GenBank上公布的鴨瘟病毒UL6基因序列的相似性達(dá)到99%(圖2)。

2.3 鴨胚感染試驗(yàn)結(jié)果

接種后4 d,攻毒組的鴨胚開始出現(xiàn)死亡,在第六天8只鴨胚全部死亡,而陰性對(duì)照組的鴨胚沒有出現(xiàn)死亡(圖3)。死亡的鴨胚全身水腫,出血,絨毛尿囊膜有灰白色壞死點(diǎn),肝臟有壞死灶出現(xiàn)。

3 小結(jié)與討論

鴨瘟病毒在臨床上造成的死亡情況有較大的差別。不同年齡、性別和品種的鴨均易感。鴨瘟病毒感染鴨后,可侵害鴨的多種組織器官,為全身各組織感染和廣泛的組織嗜性創(chuàng)造條件[6]。本研究中送檢的病鴨拉綠色稀糞,泄殖腔嚴(yán)重充血、出血、水腫;食道黏膜出血,肝臟腫大,表面有灰白色的壞死點(diǎn),心內(nèi)膜與心外膜有出血斑點(diǎn),這與報(bào)道的鴨瘟的臨床癥狀、病理變化等相一致[7]。進(jìn)一步通過擴(kuò)增鴨瘟的UL6基因和鴨胚感染試驗(yàn)證實(shí)送檢的病例為鴨瘟病毒感染。

鴨瘟病毒的天然宿主為鴨、鵝和天鵝,7日齡到成年種鴨均可感染[1]。鴨瘟病毒不能直接使用于雞胚,因此本研究中感染動(dòng)物為鴨胚。在本研究中,感染病毒的鴨胚在感染后4~6 d內(nèi)全部死亡,鴨胚感染后出現(xiàn)典型的鴨瘟病毒感染的病理變化特征。

本研究中根據(jù)GenBank上已經(jīng)公布的鴨瘟病毒UL6基因序列,設(shè)計(jì)合成一對(duì)引物,通過PCR方法特異性擴(kuò)增出416 bp的片段。將擴(kuò)增出的基因片段與公布的基因序列相比較,兩者的相似性為99%。但是,鴨瘟病毒的UL6基因序列在鴨瘟病毒的致病過程中起何作用還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn):

[1] SANDHU T S, SHAWKY S A. Duck virus enteritis (duck plague)[M]. Ames: Iowa State University Press, 2003.354-363.

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[3] 郭玉璞,蔣金書.鴨病[M].北京:北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,1988. 21-28.

[4] 陳安莉,謝芝勛,謝麗基,等.新城疫病毒和鴨瘟病毒二重PCR檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2013,40(11): 192-195.

[5] 張艷芳,謝芝勛,謝麗基,等.鴨黃病毒和鴨瘟病毒二重?zé)晒舛縍T-PCR方法的建立[A].中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C].北京:中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病學(xué)分會(huì),2013.899-903.

篇3

關(guān)鍵詞 整合教學(xué)法;動(dòng)物普通病學(xué);教學(xué);整合情境

中圖分類號(hào) G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739(2016)24-0289-01

Application of Integrative Pedagogy in Teaching of Animal General Diseases

SUN Zi-long NIU Rui-yan BAI Xi-yun

(College of Animal Science and Veterinay Medicine,Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi 030801)

Abstract Animal General Diseases is one of the courses which combines the theory with its application together during its teaching practice.Regarding to the present teaching of this course,it is suggested to prompt the students learning abilities by creating the learning atmosphere through the method of situation integration during the process of both teaching and examination.

Key words integrative pedagogy;animal general diseases;teaching;situation integration

動(dòng)物普通病學(xué)是從臨床實(shí)踐角度研究動(dòng)物器官系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律、診斷和防治措施的一門臨床應(yīng)用性學(xué)科[1],主要講授和實(shí)踐獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)、獸醫(yī)外科學(xué)、獸醫(yī)外科手術(shù)學(xué)和獸醫(yī)產(chǎn)科學(xué)方面的專業(yè)知識(shí)。為了更好地指導(dǎo)教學(xué),吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院[1]和江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院[2]的教師在PBL教學(xué)模式和理實(shí)一體化方面進(jìn)行了有益的嘗試與探索。本文以山西農(nóng)業(yè)大學(xué)為例,對(duì)動(dòng)物普通病學(xué)的教學(xué)現(xiàn)狀和整合教學(xué)法在其中的應(yīng)用進(jìn)行闡述,以作交流。

1 動(dòng)物普通病學(xué)教學(xué)現(xiàn)狀

動(dòng)物普通病學(xué)集理論性與應(yīng)用性為一體,是動(dòng)植物檢疫專業(yè)學(xué)生了解動(dòng)物臨床常見內(nèi)科、外科、產(chǎn)科相關(guān)疾病概念、發(fā)病原因、發(fā)病機(jī)制、臨床癥狀、病理變化、治療、預(yù)防的課程。由于是一門臨床課程,因而要學(xué)好該課程必須具備一定的動(dòng)物解剖學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)與病理學(xué)等學(xué)科的基礎(chǔ)知識(shí),同時(shí)還要以獸醫(yī)臨床診斷學(xué)、獸醫(yī)藥理學(xué)專業(yè)課程為基礎(chǔ)。最終使學(xué)生具備在臨床實(shí)踐中對(duì)疾病進(jìn)行診治的實(shí)際技能,為將來開展畜牧獸醫(yī)工作奠定基礎(chǔ)。

但是,由于該課程涉及內(nèi)容較多,涵蓋了獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)、外科學(xué)、外科手術(shù)學(xué)、產(chǎn)科學(xué)等諸多課程,由張乃生、李毓義主編的《動(dòng)物普通病學(xué)》(第2版)列述了各種動(dòng)物的普通病近750個(gè),然而教學(xué)學(xué)時(shí)有限,如筆者所在學(xué)校動(dòng)植物檢疫專業(yè)的動(dòng)物普通病學(xué)共48學(xué)時(shí)(理論講授36學(xué)時(shí),實(shí)驗(yàn)教學(xué)12學(xué)時(shí)),時(shí)間短、任務(wù)重,給教學(xué)工作帶來了巨大的挑戰(zhàn)。

與動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo)不同,對(duì)于動(dòng)植物檢疫專業(yè)的學(xué)生,培養(yǎng)的重心著眼于動(dòng)物和動(dòng)物產(chǎn)品檢疫和檢驗(yàn)、衛(wèi)生監(jiān)督、產(chǎn)品質(zhì)量控制、評(píng)價(jià)、監(jiān)控管理、動(dòng)物疫病防控和染疫動(dòng)物處理等方面。如何能既全面又重點(diǎn)地講授相關(guān)知識(shí)點(diǎn),既區(qū)別于動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)的授課模式又借鑒其行之有效的教學(xué)方法,需要教師依據(jù)實(shí)際情況,針對(duì)動(dòng)物普通病學(xué)課程本身的特點(diǎn)開發(fā)出一套適合動(dòng)植物檢疫專業(yè)本科生學(xué)習(xí)的教學(xué)方法。

2 整合教學(xué)法概述

20世紀(jì)80年代初,德克特勒(De Ketele)在比利時(shí)首次提出了“最終整合目標(biāo)”(Object Terminal Integration,OTI)這個(gè)概念,這成為整合教學(xué)法的理論基礎(chǔ)。20世紀(jì)80年代末至90年代初,比利時(shí)、瑞士、法國(guó)等歐洲國(guó)家首先在大學(xué)教育、業(yè)培訓(xùn)中引入學(xué)業(yè)整合原則,創(chuàng)設(shè)整合活動(dòng)或者專門的整合課程成為教學(xué)大綱的組成部分和評(píng)估機(jī)制。20世紀(jì)90年代開始,德克特勒和羅日葉(Roegiers)創(chuàng)建的整合教學(xué)法除了在歐洲贏得青睞,同時(shí)在聯(lián)合國(guó)兒童基金會(huì)的支持下,將整合教學(xué)法應(yīng)用于非洲和中南美洲的中小學(xué)教育中[3]。

整合教學(xué)法是一種基于能力的教學(xué)法。這種“能力”指的是為了解決某一問題情境(情境族),以內(nèi)化的方式調(diào)動(dòng)一套被整合了的資源的可能性。情境(Situation)是指針對(duì)某一既定任務(wù)而需要聯(lián)結(jié)起來的一整套背景化的信息,而情境族是多個(gè)既彼此相關(guān)又相對(duì)獨(dú)立的復(fù)雜情境。整合教學(xué)法的最終目標(biāo)就是培養(yǎng)學(xué)習(xí)者處理各種復(fù)雜情境問題的能力。只有在復(fù)雜情境中反復(fù)應(yīng)用所學(xué)的知識(shí)和技能,才能將其牢固掌握,進(jìn)而轉(zhuǎn)化成能力[4]。

整合教學(xué)法的核心就是構(gòu)建整合活動(dòng)。整合出現(xiàn)于如何使用某些知識(shí)和技能,如何在某一情境中結(jié)合其他資源調(diào)動(dòng)這些知識(shí)和技能的時(shí)候。這些資源可以按照不同的方法來獲取,如現(xiàn)在教學(xué)體系中經(jīng)常使用的傳統(tǒng)的講授式教學(xué)法(lecture based learning,LBL)、案例式教學(xué)法(CBL)、以問題為導(dǎo)向的教學(xué)法(problem based learning,PBL)、以團(tuán)隊(duì)為基礎(chǔ)的教學(xué)法(team based learning,TBL)等,稱之為局部性學(xué)習(xí)。接著,進(jìn)入“整合時(shí)期”或“整合模塊”,這個(gè)時(shí)期不再引入新的知識(shí)和技能,學(xué)生通過體驗(yàn)整合情境,調(diào)動(dòng)局部性學(xué)習(xí)資源以及學(xué)科內(nèi)和跨學(xué)科的資源,來學(xué)習(xí)如何應(yīng)對(duì)整合情境。之后,安排新的局部性學(xué)習(xí),獲取新的知識(shí)和技能,然后再進(jìn)入新的整合模塊以提升能力,循環(huán)這一過程直至學(xué)期結(jié)束。

3 整合教學(xué)法在動(dòng)物普通病學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用

如前所述,動(dòng)物普通病學(xué)的課程內(nèi)容繁多,有限的課時(shí)數(shù)需要教師采取多種教學(xué)方法才能達(dá)到預(yù)期的效果。遵循的一個(gè)原則就是“有點(diǎn)有面,靈活應(yīng)用”。首先讓學(xué)生對(duì)普通動(dòng)物病學(xué)有一個(gè)直觀的印象,哪些疾病是多發(fā)病、常見病,哪些疾病之間需要鑒別診斷,哪些疾病需要快速治療等;然后再依據(jù)課時(shí)對(duì)具體疾病做詳略不同的講解,或者幾個(gè)相近的疾病作橫向聯(lián)系,或案例或問題導(dǎo)入,或分小組討論學(xué)習(xí)等。“有點(diǎn)有面”是知識(shí)積累的過程,但課程本身的特點(diǎn)在于臨床實(shí)踐,如何把知識(shí)和技能“靈活應(yīng)用”才是教學(xué)過程中難度最大的地方。

機(jī)體是一個(gè)完整、復(fù)雜、相互聯(lián)系的系統(tǒng),疾病之間既有區(qū)別又有聯(lián)系,系統(tǒng)內(nèi)部、不同系統(tǒng)之間相互滲透交織著。如果在授課過程中缺乏“整合時(shí)期”,那學(xué)到的知識(shí)就是支離破碎的,無法具備處理復(fù)雜情境問題的能力。因此,在分系統(tǒng)、分部位的疾病完成后,會(huì)安排進(jìn)行一次整合情境模擬。如消化系統(tǒng)疾病前胃遲緩、瘤胃積食、瘤胃臌氣、創(chuàng)傷性網(wǎng)胃腹膜炎、瓣胃阻塞之間存在區(qū)別和聯(lián)系,臨床上往往是混合發(fā)病,需要綜合考慮病史、臨床癥狀、病程及預(yù)后等,才能給出合理的治療方案,期間還涉及獸醫(yī)臨床診斷學(xué)、藥理學(xué)、治療學(xué)的課程內(nèi)容。不同系統(tǒng)之間,如很多疾病在發(fā)生發(fā)展過程中往往會(huì)導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和血液及造血器官系統(tǒng)的異常,如何區(qū)分原發(fā)病和繼發(fā)病是處理復(fù)雜情境的關(guān)鍵。再如妊娠期疾病,從獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)、外科學(xué)、外科手術(shù)學(xué)、產(chǎn)科學(xué)不同角度分析,涉及了皺胃變位、酮病、生產(chǎn)癱瘓、蹄病、流產(chǎn)、難產(chǎn)、胎衣不下、子宮內(nèi)膜炎、炎等多種疾病,如何將其有機(jī)地聯(lián)系起來,需要多個(gè)整合情境,從而讓學(xué)生反復(fù)多次應(yīng)用所學(xué)到的知識(shí)和技能,做到“靈活應(yīng)用”。

整合教學(xué)法的應(yīng)用不僅僅局限在教學(xué)過程中,課程考核時(shí)可以通過設(shè)立整合情境,不同層次地回答給予不同的分?jǐn)?shù)或者等級(jí),讓學(xué)生的“能力”再次得以提升。獸醫(yī)教育的最終整合目標(biāo)是讓學(xué)生成為真正的獸醫(yī),與實(shí)際脫節(jié)的大學(xué)教育最終會(huì)導(dǎo)致整個(gè)行業(yè)的滑坡。課程考核是教育過程中重要的一環(huán),情境考核可以促使學(xué)生在平時(shí)的學(xué)習(xí)中牢固樹立學(xué)以致用的思想,不糾纏于某一個(gè)疾病,“只見樹木不見森林”,而是建立系的、整體的思維習(xí)慣。因此,在授課之初就會(huì)告訴學(xué)生,動(dòng)物普通病學(xué)的課程考核會(huì)有整合情境的設(shè)立,以便使整合教學(xué)法會(huì)在整個(gè)學(xué)期發(fā)揮其最大的作用。

4 參考文獻(xiàn)

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篇4

關(guān)鍵詞:年齡;鹿茸形態(tài);梅花鹿;產(chǎn)茸量

中圖分類號(hào):S825 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1007-273X(2017)06-0005-04

眾所周知,鹿茸是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高、有重要藥用價(jià)值的珍貴藥材??茖W(xué)研究表明,鹿茸具有壯腎陽、益精血、強(qiáng)筋骨的作用;可使心率明顯加強(qiáng),降低血壓,減慢心率,對(duì)交感神經(jīng)有興奮作用,可恢復(fù)神經(jīng)系統(tǒng)功能;具有抗氧化作用,可以使脂質(zhì)過氧化減少;還有抗胃潰瘍功能等[1-4]。此外,據(jù)資料表明,鹿茸富含多種蛋白質(zhì)和能量,富含氨基酸和?;撬?,同時(shí),它的粗脂肪含量很低,具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[5-7]。

隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)梅花鹿鹿茸需求量的增大,養(yǎng)鹿I也逐漸興起,在梅花鹿養(yǎng)殖過程中,鹿茸產(chǎn)量對(duì)養(yǎng)鹿的經(jīng)濟(jì)效益有著極大的影響,因此如何提高鹿茸產(chǎn)量是一個(gè)值得研究的課題。然而,影響鹿茸產(chǎn)量的因素很多,國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者在對(duì)如何提高鹿茸產(chǎn)量等方面也進(jìn)行了大量研究。選擇良好的品種是提高鹿茸產(chǎn)量的關(guān)鍵[8],李和平[9]測(cè)定結(jié)果表明,西豐群體具有經(jīng)濟(jì)早熟性,長(zhǎng)白山群體具高產(chǎn)期長(zhǎng)而持久特點(diǎn);西豐、長(zhǎng)白山、雙陽群體鮮茸單產(chǎn)分別為2.895、3.160和3.205 kg。梅花鹿的飼養(yǎng)管理對(duì)鹿茸產(chǎn)量也有一定的影響。高秀華等[10]研究表明,飼糧蛋白質(zhì)水平和能量濃度對(duì)鹿茸產(chǎn)量影響均不顯著(P>0.05)。但從數(shù)值上看,低蛋白(17%)處理組平均鹿茸產(chǎn)量比高蛋白(20%)組高出90.6 g,這說明過高的飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)鹿茸生長(zhǎng)無促進(jìn)作用。也有研究者認(rèn)為適時(shí)合理地收茸是保證鹿茸產(chǎn)量和質(zhì)量,取得養(yǎng)鹿最大經(jīng)濟(jì)效益的重要技術(shù)措施[11,12]。本課題組研究了GH、AR、IGF以及MLT受體MTNR1A的多態(tài)性與梅花鹿茸產(chǎn)量的關(guān)聯(lián)性,結(jié)果表明,各基因的多態(tài)性與其產(chǎn)量相關(guān),提示其在鹿茸的生長(zhǎng)發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用[13-16]。另外,張明海等[17]通過對(duì)光照與鹿茸產(chǎn)量的研究結(jié)果表明,E>300 lx是控光增茸技術(shù)中最適光照強(qiáng)度。高利華等[18]對(duì)梅花鹿茸鮮重與年齡的相關(guān)性進(jìn)行了初步分析,結(jié)果表明,9齡內(nèi)梅花鹿的鹿茸重與年齡呈正相關(guān)(r=0.767,P

隨著我國(guó)養(yǎng)鹿規(guī)模逐漸擴(kuò)大,北方梅花鹿逐漸被引種到廣大南方地區(qū),在南方氣候條件下經(jīng)過長(zhǎng)期馴養(yǎng)后梅花鹿在各個(gè)方面都有一定的變化,有研究表明,年齡、鹿茸的形態(tài)等因素對(duì)梅花鹿鹿茸產(chǎn)量均有一定的影響。因此,研究年齡和鹿茸形態(tài)對(duì)南方地區(qū)梅花鹿鹿茸產(chǎn)量的影響,通過對(duì)年齡、鹿茸形態(tài)與產(chǎn)茸量之間相關(guān)性進(jìn)行分析,以期對(duì)南方梅花鹿在生產(chǎn)實(shí)踐中的選種育種提供一定的參考,對(duì)逐步改善群體的生產(chǎn)性能,提高南方梅花鹿鹿群的產(chǎn)茸能力和養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 數(shù)據(jù)來源 試驗(yàn)對(duì)象為湖北省五三農(nóng)場(chǎng)養(yǎng)鹿場(chǎng)的127頭雄性梅花鹿,共獲得500個(gè)產(chǎn)茸數(shù)據(jù)。

1.1.2 飼養(yǎng)管理 該鹿場(chǎng)的飼養(yǎng)管理方法較為規(guī)范,采取自由采食和飲水的方式進(jìn)行管理。防疫衛(wèi)生工作嚴(yán)格,鹿場(chǎng)內(nèi)外環(huán)境條件相對(duì)一致。

1.2 方法

1.2.1 鹿茸形態(tài) 對(duì)于不同形態(tài)的鹿茸營(yíng)養(yǎng)成分的區(qū)別,一般人認(rèn)為二杠茸比三杈茸更嫩,藥用價(jià)值更高。這種說法沒有得到證實(shí),不過,單就市場(chǎng)價(jià)格來說,二杠茸的價(jià)格確實(shí)略高于三杈茸。也有學(xué)者研究表明鹿茸形態(tài)不一樣,其中所含的一些微量元素的含量也有所不同,但總體上來說,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值是一樣的。因此,在交易市場(chǎng)上,鹿茸的品級(jí)主要是根據(jù)含水量、是否含血、質(zhì)量等方面來判斷的。

毛桃:梅花鹿、馬鹿的雄性鹿,一般在8~10個(gè)月時(shí)額部開始突起的部位。呈圓柱形或錐形,略彎曲,無分杈,長(zhǎng)約15~30 cm,直徑約2~3 cm,皮紅棕色或棕色,密生黃棕色或淺灰色細(xì)毛,茸基底部鋸口略圓形,黃白色或帶血污色,顯骨質(zhì)鏵。中間海綿樣孔隙,基部外壁略有骨釘,氣微腥,味微咸[20,21]。

二杠茸:大挺圓柱形,直立長(zhǎng)15~18 cm,直徑3~4 cm,頂端鈍圓飽薄,向內(nèi)方稍彎曲,習(xí)稱彎頭或稍有皺縮,眉叉亦呈圓柱形,斜向前伸,長(zhǎng)9~15 cm,直徑2.5~3.5 cm,全形略如拇指與食指,作八字樣分開,皮紅棕色或黃棕色,密生黃棕色或淡灰色細(xì)毛茸,鋸口卵圓形,黃白色或淡黃色,有較薄的骨質(zhì),中部密布海綿狀細(xì)孔,體輕如朽木,氣味同上。

三杈茸:大挺略呈方形彎曲,長(zhǎng)20~30 cm,已分生第二枝,大挺及側(cè)枝先端略尖而無彎頭,下部分壁有縱棱線及微突起的疙瘩,習(xí)稱起筋骨釘,皮紅棕色,毛茸較稀而稍粗,外用骨質(zhì)較厚,其余與二杠茸相同。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

運(yùn)用SAS和SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,以P

年齡(鋸次)和鹿茸形態(tài)對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響用GLM單因素方差分析和Duncan氏多重比較雙因素方差分析。鹿茸產(chǎn)量(y)與鹿茸的形態(tài)(x)采用REG程序進(jìn)行回歸分析,線性回歸模型為:y=ax2+bx+c;鹿茸產(chǎn)量(y)與年齡(x)采用REG程序進(jìn)行回歸分析,線性回歸模型為:y=ax3+bx2+cx+d。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同年齡和鹿茸形態(tài)對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響

運(yùn)用SAS生物統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)不同年齡和鹿茸形態(tài)對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響進(jìn)行了GLM單因素方差分析和Duncan氏多重比較雙因素方差分析,不同年齡和鹿茸形態(tài)的鹿茸產(chǎn)量見表1。由表1可知,各年齡鹿茸的形態(tài)對(duì)鹿茸的產(chǎn)量具有極顯著的影響(P二杠茸>毛桃。因而,鹿茸的形態(tài)對(duì)鹿茸的產(chǎn)量影響很大。另外,鹿茸的鋸次對(duì)鹿茸產(chǎn)量也有影響,毛桃一般都是第一鋸,從二杠茸內(nèi)的鋸次對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響來看,第3~10鋸間的鹿茸產(chǎn)量差異均不顯著(P>0.05),但第1鋸和第2鋸鹿茸的產(chǎn)量均顯著低于第3~10鋸;從三杈茸內(nèi)的鋸次對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響來看,第3~10鋸間的鹿茸產(chǎn)量差異均不顯著(P>0.05),本次采樣中三杈茸不含有第1和第2鋸鹿茸。從不同鋸次鹿茸的平均產(chǎn)量來看,第8鋸鹿茸產(chǎn)量最高,平均產(chǎn)量達(dá)到了2 314.31 g,顯著高于第10鋸,極顯著高于第1~5鋸,但與第6鋸、第7鋸和第9鋸鹿茸的產(chǎn)量差異不顯著。從鋸次對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響來看,可以看出鹿茸的產(chǎn)量隨著鋸次的增長(zhǎng)而增加,當(dāng)達(dá)到第8鋸左右時(shí)鹿茸產(chǎn)量最高,而后隨著年齡(鋸次)的增長(zhǎng)鹿茸產(chǎn)量逐漸降低。

鹿茸的形態(tài)與鹿茸產(chǎn)量的關(guān)系曲線見圖1。由圖1可以看出鹿茸形態(tài)對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響呈正相關(guān),相關(guān)方程為:y=477.94x2-866.93x+548.4(y表示鹿茸的產(chǎn)量,x表示鹿茸的形態(tài))。

鹿茸的鋸次與鹿茸產(chǎn)量的關(guān)系曲線見圖2。由圖2可知鋸次與產(chǎn)量之間的相關(guān)方程為:y=-9.367 3x3+124.94x2-166.73x+434.22。其中R2=0.610 3(P

以上結(jié)果表明,在進(jìn)行鹿茸經(jīng)濟(jì)性狀的選擇時(shí)三杈茸的產(chǎn)量是最高的,而鋸次反映了南方梅花鹿的使用年限,當(dāng)達(dá)到第8鋸時(shí)鹿茸的產(chǎn)量最高。因此,在進(jìn)行鹿的淘汰時(shí)適當(dāng)考慮鹿茸的鋸次對(duì)產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效應(yīng)的影響,對(duì)增加南方梅花鹿養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益十分重要。

2.2 不同年齡的鹿茸產(chǎn)量之間的相關(guān)分析

對(duì)1~10鋸的數(shù)據(jù)進(jìn)行了分析,不同鋸次的鹿茸產(chǎn)量之間的表型相關(guān)系數(shù)見表2。

由表2可知,不同鋸次的鹿茸產(chǎn)量之間相關(guān)系數(shù)極大,即它們之間存在顯著或極顯著的相關(guān)性。尤其是第一鋸的鹿茸產(chǎn)量與其他鋸次的鹿茸產(chǎn)量之間的相關(guān)系數(shù)均很高;也就是說,初生茸的質(zhì)量對(duì)于梅花鹿接下來的各鋸產(chǎn)茸量具有極為顯著的影響。同時(shí)可見第4鋸與第5鋸、第5鋸與第7鋸、第8鋸的鹿茸產(chǎn)量之間相關(guān)性不顯著,這其中的原因有待繼續(xù)研究。

2.3 鹿茸產(chǎn)量、鹿茸形態(tài)及鋸次之間的相關(guān)分析

鹿茸產(chǎn)量、鹿茸形態(tài)及鋸次之間的相關(guān)性分析結(jié)果見表3。由表3可見,鹿茸形態(tài)與鹿茸產(chǎn)量、鹿茸形態(tài)與鋸次、鋸次與鹿茸產(chǎn)量之間的相關(guān)系數(shù)均很高,為極顯著相關(guān)(P

3 討論

梅花鹿鹿茸的產(chǎn)量受多種因素的制約,如品種、飼養(yǎng)水平、環(huán)境因子(溫度、濕度、光照)等。然而在諸多因素中,鹿齡(鋸次)的影響最為重要和穩(wěn)定。所以在闡明產(chǎn)茸量同鋸次的相關(guān)性基礎(chǔ)上,才能更好地確立其他因素的影響程度。因此綜合考慮各種影響鹿茸產(chǎn)量的因素對(duì)南方梅花鹿生產(chǎn)和育種工作有一定的指導(dǎo)作用和參考價(jià)值。

3.1 年齡對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響

事實(shí)上,年齡對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響是很大的。一般情況下,梅花鹿在一歲時(shí)會(huì)進(jìn)行第一次鋸茸,因此,年齡對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響就代表著鋸次對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響。當(dāng)梅花鹿的年齡過高時(shí),其生產(chǎn)能力就會(huì)下降,此時(shí)鹿茸的產(chǎn)量和質(zhì)量都會(huì)下降,從而其產(chǎn)值會(huì)下降。因此,我們探討年齡對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響是極有必要的,在理論上可以得到一個(gè)界限年齡,當(dāng)梅花鹿的年齡超過界限年齡時(shí),其經(jīng)濟(jì)效益很低,此時(shí)應(yīng)及時(shí)淘汰,達(dá)到養(yǎng)殖的最佳效益值。從本文的分析結(jié)果可知,南方梅花鹿第一的鹿茸產(chǎn)量與其他各鋸次的鹿茸產(chǎn)量之間的相關(guān)系數(shù)很高,均存在著極顯著的相關(guān)關(guān)系。因此,可推測(cè)南方梅花鹿第一鋸的鹿茸產(chǎn)量對(duì)其以后各鋸次的產(chǎn)量高低有一定的預(yù)測(cè)作用。同時(shí),第4鋸與第5鋸之間、第5鋸與第7鋸之間、第5鋸與第8鋸之間的相關(guān)系數(shù)比較小,但產(chǎn)量差異均達(dá)到顯著水平,說明鹿茸產(chǎn)量從第5鋸以后變化較小,基本趨于穩(wěn)定。當(dāng)達(dá)到第8鋸左右時(shí)鹿茸產(chǎn)量最大,鋸次小于9時(shí),梅花鹿的產(chǎn)茸量與年齡(鋸次)呈正相關(guān),它們之間的線性回歸方程y=

-9.367 3x3+124.94x2-166.73x+434.22,根據(jù)該方程以及不同年齡間的相關(guān)性可以推算出公鹿各年齡階段的產(chǎn)茸量和生茸的最佳時(shí)期,且了解到鹿茸的產(chǎn)量隨著年齡的增長(zhǎng)而增加,到一定年限后后隨著年齡的增長(zhǎng)逐漸降低。趙英杰等[19]的研究結(jié)果表明東北梅花鹿三杈茸在8鋸左右達(dá)到最高產(chǎn)量,4~10歲公鹿三杈茸產(chǎn)量呈逐年上升趨勢(shì),10歲之后趨于穩(wěn)定且有所下降;二杠茸在l~8鋸(3~10歲)產(chǎn)量逐年增加,之后趨于穩(wěn)定且有所下降。同樣高利華等[18]的研究結(jié)果表明,9齡內(nèi)梅花鹿的鹿茸重與年齡呈正相關(guān)(r=0.767,P

3.2 鹿茸形態(tài)對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響

從分析結(jié)果可見,鹿茸的形態(tài)和產(chǎn)茸量呈正相關(guān),各鋸次鹿茸的形態(tài)對(duì)鹿茸的產(chǎn)量均有極顯著的影響(P二杠茸>毛桃。因此,鹿茸形態(tài)對(duì)鹿茸產(chǎn)量的影響很大,二者之間的線性回歸方程為y=477.94x2-866.93x+548.4,根據(jù)該方程,可以為養(yǎng)鹿生產(chǎn)提供一個(gè)參考,在生產(chǎn)實(shí)踐中,梅花鹿的鹿茸品級(jí)為二杠茸優(yōu)于三杈茸。因此在實(shí)際生產(chǎn)中,一定要結(jié)合市場(chǎng)價(jià)格和當(dāng)年梅花鹿個(gè)體狀況來決定鋸茸的狀態(tài),從而獲得最佳的經(jīng)濟(jì)效益。

3.3 不同年齡鹿茸產(chǎn)量之間的相關(guān)分析

本次分析結(jié)果表明,梅花鹿的產(chǎn)茸量從第1鋸到第8鋸呈逐漸上升的趨勢(shì),第8鋸為其產(chǎn)茸巔峰,平均單產(chǎn)為2.31 kg。之后的產(chǎn)茸量則呈下降趨勢(shì),表明五三農(nóng)場(chǎng)的梅花鹿在8鋸以內(nèi)的鹿茸產(chǎn)量隨鋸次的上升而上升。這個(gè)結(jié)果與高利華等[18]的研究結(jié)果基本一致。同時(shí)也可以看到,與江蘇養(yǎng)鹿場(chǎng)的梅花鹿鹿茸產(chǎn)量相比較,湖北五三農(nóng)場(chǎng)梅花鹿場(chǎng)的梅花鹿鹿茸產(chǎn)量是較低的,出現(xiàn)這種情況的原因可能是由于氣候或者梅花鹿的品種以及飼養(yǎng)管理等各方面的差異所造成的。王忠武等[22]研究發(fā)現(xiàn),興凱湖梅花鹿群體產(chǎn)茸性能高,群體平均單產(chǎn)高達(dá)3.428 kg。結(jié)合五三農(nóng)場(chǎng)梅花鹿場(chǎng)的數(shù)據(jù)分析后發(fā)現(xiàn),五三農(nóng)場(chǎng)梅花鹿鹿茸的單產(chǎn)雖然很低,但可以得出一個(gè)規(guī)律,即根據(jù)第一鋸的產(chǎn)量可以預(yù)測(cè)出梅花鹿以后的產(chǎn)茸量,并且可以根據(jù)場(chǎng)內(nèi)梅花鹿的鋸次估計(jì)農(nóng)場(chǎng)一年的產(chǎn)茸總量。五三農(nóng)場(chǎng)梅花鹿單產(chǎn)量低的原因可能是氣候、營(yíng)養(yǎng)因素、飼養(yǎng)管理以及其他方面的綜合影響,對(duì)此可以通過改善外部條件,選擇合適的收茸時(shí)間以及通過各種技術(shù)措施,積極改善和創(chuàng)造條件來提高南方梅花鹿的鹿茸產(chǎn)量,以期得到最大的經(jīng)濟(jì)效益。同時(shí)也可以為南方的養(yǎng)鹿業(yè)提供一個(gè)可參考借鑒的鹿場(chǎng)飼養(yǎng)管理方式,帶動(dòng)南方的梅花鹿養(yǎng)殖。

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篇5

關(guān)鍵詞:雙語教學(xué);內(nèi)科學(xué);建議

中圖分類號(hào):G642 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

1 雙語教學(xué)的內(nèi)涵

2001年,國(guó)家教育部《關(guān)于加強(qiáng)高等教育本科教學(xué)工作,提高教學(xué)質(zhì)量的若干意見》(教高[2001]4號(hào)),在我國(guó)高校中積極倡導(dǎo)開展雙語教學(xué)。根據(jù)《朗曼應(yīng)用語言學(xué)詞典》的定義,雙語教學(xué)(bilingual education)是指在學(xué)校使用第二種語言或外語進(jìn)行各種學(xué)科的教學(xué)。雙語教學(xué)可以分為3種類型,包括:浸入型雙語教學(xué),是指學(xué)校使用的一種不是學(xué)生在家使用的語言進(jìn)行教學(xué);保持型雙語教學(xué),是指學(xué)生剛進(jìn)入學(xué)校時(shí)使用母語,逐漸地使用第二種語言進(jìn)行部分學(xué)科的教學(xué),其他學(xué)科仍使用母語教學(xué);過渡性雙語教學(xué),是指學(xué)生進(jìn)入學(xué)校后部分或者全部使用母語,然后逐步轉(zhuǎn)變成只使用第二種語言進(jìn)行教學(xué)[1]。從我國(guó)雙語實(shí)踐出發(fā),雙語教學(xué)是指除了漢語以外,用一門外語(目前主要是用英語)作為課堂主要用語進(jìn)行學(xué)科教學(xué)??梢?,我國(guó)的雙語教學(xué)環(huán)境決定了它屬于保持型雙語教學(xué)。

雙語教學(xué)對(duì)培養(yǎng)本科生的國(guó)際化水平、開闊視野、提高專業(yè)素質(zhì)、增強(qiáng)專業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力非常有利。廣西大學(xué)獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)從事雙語教學(xué)多年,回顧多年教學(xué)效果,成績(jī)值得肯定,但也有不足。不管同學(xué)們、老師們?nèi)绾慰创p語教學(xué),但國(guó)家改革開放的大局不會(huì)變,因此必須堅(jiān)定不移地進(jìn)行雙語教學(xué),臨床獸醫(yī)學(xué)不僅獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)、而且其他課程也需要開展雙語教學(xué),形成雙語課程群,以便師生們今后從事國(guó)際化的學(xué)習(xí)與交流。目前,由于實(shí)行執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試,獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)課程,在臨床科目中占了20%的比例,是考分占比最高的課程之一。獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)是培養(yǎng)臨床獸醫(yī)的主干課程之一,不僅包含113個(gè)疾病的理論知識(shí),也涉及治療這些疾病的操作方法,在獸醫(yī)臨床專業(yè)教學(xué)中具有重要地位[3]。

2 調(diào)查對(duì)象和方法

《獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)》課程調(diào)查問卷調(diào)查時(shí)間在2013年4月下旬,調(diào)查對(duì)象為修《獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)》課的本科學(xué)生,這些學(xué)生都是2010級(jí)動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)的,其中一班28人,二班26人,三班25人,調(diào)查方式是在課后由各班班長(zhǎng)協(xié)助發(fā)放調(diào)查問卷并于完成后回收問卷。共收回問卷59份,回收率75%, 其中有效問卷59份,有效率100%。這些學(xué)生都正在學(xué)習(xí)《獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)》,因此他們對(duì)調(diào)查的回應(yīng)是建立在對(duì)這門課程有了解的基礎(chǔ)之上的。利用統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所收集數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

本調(diào)查的不足之處主要是調(diào)查問卷份數(shù)較少,降低了統(tǒng)計(jì)的意義;調(diào)查面不夠廣,這些學(xué)生都修了《獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)》,說明他們對(duì)動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)比較感興趣,這樣調(diào)查問卷就不能很好反映其他對(duì)動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)可能不感興趣的學(xué)生的真實(shí)想法。

3 具體的調(diào)查內(nèi)容及結(jié)果

題目 選項(xiàng) 比例/%

1.您現(xiàn)在的英語水平?

A. 四級(jí) 42.4

B. 六級(jí) 3.4

C. 都沒過 54.2

2.您認(rèn)為在本科生中開展雙語課程是否有必要? A. 有必要 37.3

B. 沒有必要 50.8

C. 其他(請(qǐng)注明) 11.9

3.您之前是否修過雙語課程? A. 是 16.9

B. 否 83.1

4.您認(rèn)為雙語課程有哪些收獲? A.提高了學(xué)習(xí)興趣 33.9

B.提高了外語水平 67.8

C.掌握了學(xué)科前沿知識(shí) 10.2

D.開闊了國(guó)際視野 15.3

5.您認(rèn)為本課程適合開展雙語教學(xué)嗎? A.適合(原因) 18.6

B.不適合(原因) 81.4

6. 雙語課老師的授課方式是?

A.英語為主,漢語為輔 40.7

B.漢語為主,英語為輔 22.0

C.英漢結(jié)合,不分主次 30.5

D.其他(請(qǐng)注明) 3.4

7. 對(duì)目前的雙語教學(xué)方式評(píng)價(jià)如何?

A. 很好,英語水平和專業(yè)知識(shí)都有較大提高,很有意義 5.0

B. 一般,和漢語知識(shí)沒有什么區(qū)別,感覺很一般 23.7

C. 不好,不能理解,幾乎沒有提高,感覺意義不大 71.2

8.您認(rèn)為課堂上外語授課比例多少比較合適?

A.30% 47,5

B.50-80% 20.3

C.100% 16.9

D.沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn) 15.3

題目 選項(xiàng) 比例/%

9. 你期望雙語課程的授課方式是?

A.英語為主,漢語為輔 10.2

B.漢語為主,英語為輔 52.5

C.英漢結(jié)合,不分主次 20.3

D.其他(請(qǐng)注明) 16.9

10.以往雙語課的考試方式是?

A.閉卷考試 22.0

B.開卷考試 33.9

C.寫論文或心得 23.7

D.其他(請(qǐng)注明) 20.3

11.你對(duì)以上考試方式的評(píng)價(jià)是?

A.很好 18.6

B.一般 45.8

C.不好 22.0

D.其他(請(qǐng)注明) 13.6

12.你認(rèn)為的哪種考試方式比較合理?

A.外文命題,外文答題 3.4

B.外文命題,中文答題 37.3

C.中文命題,外文答題 11.9

D.外文命題,自由作答 18.6

E.其他(請(qǐng)注明) 28.8

13.您認(rèn)為雙語課程是否會(huì)增加學(xué)習(xí)負(fù)擔(dān)? A.會(huì)(原因) 96.6

B.不會(huì)(原因) 3.4

14.您認(rèn)為決定雙語教學(xué)課程質(zhì)量和效果的最主要因素是?

A.師資 3.4

B.教材 10.2

C.學(xué)生 30.5

D.教學(xué)方法和手段 49.2

E.教學(xué)環(huán)境和條件 16.9

15.教學(xué)內(nèi)容能否與實(shí)際緊密聯(lián)?

A.能 22.0

B.不能 32.2

C.一般 44.0

D.其他(請(qǐng)注明) 3.4

16.能否與學(xué)科前沿相結(jié)合?

A.能 23.7

B.不能 39.0

C.一般 35.6

D.其他(請(qǐng)注明) 1.7

17.對(duì)PPT布局是否滿意?

A.很好 20.3

B.一般 57.6

C.不好(原因) 23.7

18.英語口語講述是否滿意?

A.可以練習(xí)聽力,希望多點(diǎn) 13.6

B.一般 64.4

C.不好(原因) 18.6

D.其他(請(qǐng)注明) 3.4

19.是否需要更多的互動(dòng)過程?

A.需要,希望多互動(dòng) 40.7

B.一般 44.0

C.盡量少點(diǎn)(原因) 11.9

D.其他(請(qǐng)注明) 1.7

20.您在課前平時(shí)能做到預(yù)習(xí)嗎?

A.每次都預(yù)習(xí) 1.7

B.完全不預(yù)習(xí) 15.3

C.根據(jù)情況,有時(shí)間就預(yù)習(xí) 79.7

D. 其他(請(qǐng)注明) 3.4

21您在課后對(duì)本課程的學(xué)習(xí)時(shí)間投入有多少?

A.從來不看 11.9

B.有時(shí)間就看 49.2

C.看情況,想學(xué)才學(xué) 32.2

D. 其他(請(qǐng)注明) 6.8

22.通過雙語課程的學(xué)習(xí)和了解,您認(rèn)為雙語教學(xué)應(yīng)該?

A.大力開展 5.0

B.保證質(zhì)量,穩(wěn)步增加 42.4

C.嚴(yán)格控制規(guī)模 15.3

D.暫不實(shí)施 33.9

E.其他(請(qǐng)注明) 3.4

4 調(diào)查結(jié)果的啟示

4.1 從學(xué)生自身角度出發(fā)

4.1.1 有49.2%的學(xué)生已認(rèn)識(shí)到開展雙語教學(xué)的必要性

在具體的實(shí)施過程中,學(xué)生對(duì)目前雙語教學(xué)效果的滿意度并不是很高,只有5%。盡管如此,他們對(duì)學(xué)校今后的雙語教學(xué)仍充滿信心和期待,有42.4%的同學(xué)希望雙語教學(xué)能夠保證質(zhì)量,穩(wěn)步增加。

4.1.2 同學(xué)們的英語水平參差不齊

調(diào)查顯示只有3.4%的同學(xué)通過大學(xué)英語六級(jí)考試,42.4%的通過大學(xué)英語四級(jí)考試,學(xué)生的英語能力需要加強(qiáng),所以實(shí)行雙語教學(xué)并非每個(gè)學(xué)生都可以接受。部分學(xué)生的英語水平和專業(yè)詞匯與能夠順利接受雙語教學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)還存在一定差距。英語較好的學(xué)生能通過雙語教學(xué)有效提高英語思維能力增加知識(shí)含量以及進(jìn)一步提高了學(xué)習(xí)的興趣;而對(duì)于英語水平中下的學(xué)生,雙語課程往往會(huì)降低學(xué)習(xí)興趣,甚至使學(xué)生放棄對(duì)該課程的學(xué)習(xí)。甚至調(diào)查結(jié)果顯示,有96.6%的學(xué)生認(rèn)為雙語課程增加了學(xué)習(xí)負(fù)擔(dān)。大部分學(xué)生對(duì)高校英文學(xué)習(xí)目的僅是為了能通過大學(xué)英語等級(jí)考試。學(xué)生對(duì)英文學(xué)習(xí)興趣不濃,理解英語的水平有限,其結(jié)果自然就會(huì)降低專業(yè)課程雙語學(xué)習(xí)的效果。

4.1.3 對(duì)雙語課程認(rèn)識(shí)不足,缺乏自主學(xué)習(xí)能力

目前雙語課程的課堂學(xué)習(xí)時(shí)間是非常有限的,因此學(xué)生課前對(duì)課程內(nèi)容的主動(dòng)預(yù)習(xí)和課后復(fù)習(xí),對(duì)雙語課程的學(xué)習(xí)效果起著重要的作用。但是,調(diào)查結(jié)果顯示,僅有2%的人會(huì)進(jìn)行課前預(yù)習(xí),80%的人偶爾會(huì)預(yù)習(xí),15.3%的人從來不進(jìn)行預(yù)習(xí);在對(duì)待課后復(fù)習(xí)的時(shí)間投入上,經(jīng)常進(jìn)行復(fù)習(xí)的學(xué)生人數(shù)也僅占到6.8%。這說明,目前學(xué)生的學(xué)習(xí)習(xí)慣仍停留在課堂聽講,還未能夠進(jìn)行課外自主學(xué)習(xí)、閱讀大量文獻(xiàn)資料的階段。眾所周知,用外文學(xué)習(xí)非語言類的專業(yè)課程難度顯然要超過傳統(tǒng)的母語授課方式。因此,沒有充分的課前準(zhǔn)備就會(huì)對(duì)課堂上教師的講授內(nèi)容一知半解甚至不知所云,所以有些同學(xué)提議需要在課件上標(biāo)注在書本上的位置,可見不預(yù)習(xí)上課的效果是事倍功半。如再不進(jìn)行課后補(bǔ)缺,最后只是通過背記完成考試,其實(shí)并未實(shí)際掌握該門專業(yè)課程的知識(shí)。

4.2 就目前教學(xué)方式

授課模式按照課堂上母語與外語運(yùn)用頻率的不同可分為3種:術(shù)語引導(dǎo)型,即以中文講解為主,穿插使用英語術(shù)語;交叉滲透型,即根據(jù)教學(xué)內(nèi)容,中英文交替使用;完全滲透型,既完全以英語授課,用英文進(jìn)行課堂提問和作業(yè)[4]。雖然制作了全英文課件也采用了全英文教材,但是同學(xué)們普遍反映難度較大,無法達(dá)到掌握專業(yè)知識(shí)和增強(qiáng)英語能力的雙重目標(biāo)。調(diào)查結(jié)果顯示,10.2%的學(xué)生期望授課英語為主,漢語為輔,52.5%期望漢語為主,英語為輔,這門課程從2002年開始雙語教學(xué),則選擇從術(shù)語引導(dǎo)到完全滲透的逐漸深入方式。這說明學(xué)生還是愿意接受英文授課方式,只是由于自身英語能力水平的限制希望能采取循序漸進(jìn)分階段的授課模式。而調(diào)查顯示,有40.7%的同學(xué)希望課堂上與老師有更多的互動(dòng),甚至有的提議可以增加一些如問答式、討論式、挑戰(zhàn)式、競(jìng)賽式等能激發(fā)學(xué)習(xí)興趣的活動(dòng)。而且57.6%的同學(xué)更希望在課件上用圖片圖表和視頻這些直觀的方式來理解專業(yè)知識(shí),也有35.6%同學(xué)希望老師上課的時(shí)候可以再多加入一些國(guó)際前沿的研究進(jìn)展。

4.3 從教學(xué)效果的角度

目前,教學(xué)效果的好壞大多數(shù)情況都依據(jù)于學(xué)生們的考試成績(jī),但對(duì)于雙語教學(xué),有些同學(xué)擔(dān)心由于自己的英語水平限制而不能將專業(yè)知識(shí)很好的表述。所以對(duì)于這么課程的考核方式,有33.9%的同學(xué)希望開卷考試,23.7%的希望寫論文和心得,只有22%的希望閉卷考試,還有20.3%的希望可以采用,開卷,閉卷,半開卷相結(jié)合的方式。對(duì)于考試形式,只有3.4%的希望英語命題,英語答題,37.3%的希望英語命題,漢語答題,11.9%的希望中文命題,外語答題,18.6%的希望外文命題,自由作答,28.8%的建議可采用靈活多變的考試形式。同學(xué)們建議對(duì)于一些比較基礎(chǔ)、簡(jiǎn)單的題目,要求用英文解答;對(duì)于一些難度較大、技術(shù)性較強(qiáng)的問答題,允許用中文回答,而對(duì)英語基礎(chǔ)好的能用英文回答的給予獎(jiǎng)勵(lì)。以提高學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性,增強(qiáng)他們的語言表達(dá)能力和專業(yè)知識(shí)。

通過調(diào)查問卷,可以知道同學(xué)們是怎樣看待本門課程雙語教學(xué)的,知道了他們的想法,也知道了最應(yīng)該加強(qiáng)的方面在哪里。從國(guó)家發(fā)展角度來看,同學(xué)們用英語學(xué)習(xí)的觀點(diǎn)態(tài)度還需要轉(zhuǎn)變,必須與國(guó)家發(fā)展目標(biāo)相一致,作為教育工作者,任重道遠(yuǎn),不僅要較好專業(yè)知識(shí),更重要的還要和同學(xué)多交流,端正同學(xué)們學(xué)習(xí)觀念,樹立立足國(guó)內(nèi)、放眼全球的理想。因此,此次調(diào)查問卷,將為以后更好地開展雙語教學(xué)提供了不斷改進(jìn)的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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篇6

[關(guān)鍵詞] 補(bǔ)虛藥;水煎劑;抗疲勞;抗缺氧;抗應(yīng)激

[中圖分類號(hào)] R286 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616(2013)17-36-03

人參、黨參、黃芪和枸杞子均為常用補(bǔ)益中藥,四者在心血管系統(tǒng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗應(yīng)激等方面有共同的藥理作用,臨床應(yīng)用廣泛,甚至在日常生活中人們也常用這些藥物進(jìn)行自我保健補(bǔ)益,而獲得了很好的療效,但關(guān)于四者抗應(yīng)激作用的比較卻未見文獻(xiàn)報(bào)道。為了更好的了解人參[1-2]、黨參[3-5]、黃芪[6-12]和枸杞子[13-14]等常用補(bǔ)虛中藥在抗應(yīng)激作用方面的區(qū)別,以期探討常用補(bǔ)虛中藥在臨床應(yīng)用過程中的差別運(yùn)用,為進(jìn)一步補(bǔ)虛中藥的抗應(yīng)激機(jī)制奠定基礎(chǔ),本實(shí)驗(yàn)采用低溫游泳實(shí)驗(yàn)和常壓缺氧實(shí)驗(yàn)比較了人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠抗應(yīng)激作用的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種健康小鼠由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)

物許可證號(hào):SCXK(渝)2002-0001,雌性,體重(20±2)g,重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑

人參、黨參、黃芪、枸杞子水煎液(按一般水煎液方法制備),每毫升相當(dāng)于原生藥2g。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

小鼠游泳裝置:圓柱型不銹鋼盆(50cm×50cm,內(nèi)裝冰水混合物,水深40cm,水溫0℃);秒表;300mL磨口廣口瓶(凡士林密封)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 實(shí)驗(yàn)分組

小鼠50只,體重(20±2)g,隨機(jī)分成5組,每組10只,劑量按0.4mL/10g灌胃給藥。見表1。

2.2 常見補(bǔ)虛藥水煎液對(duì)小鼠低溫游泳時(shí)間的影響

本方法是根據(jù)低溫實(shí)驗(yàn)和小鼠游泳實(shí)驗(yàn)兩種方法綜合得出的實(shí)驗(yàn)方法。各組給藥后第1小時(shí),在小鼠尾根部束體

重5%的鉛絲,然后將小鼠放入不銹鋼盆(50cm×50cm,內(nèi)裝冰水混合物,水深40cm,水溫0℃),木棒敲打不銹鋼盆邊緣,刺激小鼠快速游動(dòng);記錄小鼠游泳開始至嗆水的時(shí)間。

2.3 常見補(bǔ)虛藥水煎液對(duì)小鼠耐缺氧的影響

將上述開始嗆水的小鼠轉(zhuǎn)移到300mL磨口廣口瓶中(每瓶一只),用凡士林密封瓶口后開始計(jì)時(shí),記錄小鼠從瓶口密封到小鼠死亡的時(shí)間。數(shù)據(jù)收集后用EXCEL計(jì)算具體時(shí)間。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS19.0進(jìn)行方差分析,同時(shí)作F測(cè)驗(yàn)和采用字母標(biāo)記的新復(fù)極測(cè)驗(yàn)(SSR測(cè)驗(yàn))。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 常見補(bǔ)虛藥水煎液對(duì)小鼠低溫游泳時(shí)間的影響

常用補(bǔ)虛藥人參、黨參、黃芪及枸杞子水煎液組與生理鹽水組經(jīng)方差分析,見表2,區(qū)組間F值F0.05及F0.01值,說明不同水煎液處理之間差異大于個(gè)體之間的差異,不同水煎液對(duì)小鼠低溫游泳時(shí)間具有不同的效應(yīng)。

對(duì)本實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,采用新復(fù)極差分析法,結(jié)果見表3,人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠低溫游泳與生理鹽水比較差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,人參水煎液與黃芪和枸杞子水煎液差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參、黃芪和枸杞子水煎液處理差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參和人參水煎液處理差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;人參與枸杞子水煎液差異存在極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參和人參水煎液與生理鹽水處理差異存在極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參、黃芪和枸杞子水煎液差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.2 常見補(bǔ)虛藥水煎液對(duì)小鼠耐缺氧的影響

常用補(bǔ)虛藥人參、黨參、黃芪及枸杞子水煎液組與生理鹽水組經(jīng)方差分析,結(jié)果見表4,區(qū)組間F值F0.05及F0.01值,說明不同水煎液處理之間差異大于個(gè)體之間的差異,不同水煎液對(duì)小鼠耐缺氧時(shí)間具有不同的效應(yīng)。

對(duì)本實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,采用新復(fù)極差分析法,結(jié)果見表5,人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠耐缺氧與生理鹽水比較差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,人參與黨參、黃芪和枸杞子水煎液處理,黨參與黃芪水煎液處理差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參和枸杞子、枸杞子和黃芪水煎液處理之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;人參與黨參、黃芪及枸杞子水煎液,黨參與黃芪水煎液處理差異存在極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參與枸杞子、枸杞子與黃芪水煎液、黃芪水煎液與生理鹽水處理差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4 討論

中藥最常用是水煎劑,本研究通過常用補(bǔ)虛中藥人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠在低溫下抗疲勞和耐缺氧實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明這幾味補(bǔ)虛中藥都能提高小鼠抗疲勞和耐缺氧能力,但是不同藥物之間存在明顯差異,人參對(duì)于提高小鼠耐缺氧能力作用顯著強(qiáng)于其他三味藥物,人參在抗疲勞方面也明顯強(qiáng)于黃芪和枸杞子,但是人參和黨參在抗疲勞方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;人參、黨參和黃芪屬于補(bǔ)氣類中藥,它們對(duì)心血管系統(tǒng)具有強(qiáng)心、調(diào)節(jié)血壓、抗休克、擴(kuò)張冠脈血流量、改善心肌血氧供應(yīng)、提高心肌抗缺氧能力,具有抗心肌缺血等藥理作用,這些藥理作用在小鼠受到很大的刺激時(shí),都能起到保護(hù)小鼠身體各個(gè)器官的作用,這些作用對(duì)于小鼠抗應(yīng)激能力的提高都有促進(jìn)作用,所以,能顯著提高小鼠抗疲勞和耐缺氧的能力;枸杞屬于補(bǔ)陰類藥物,盡管在抗疲勞和抗缺氧方面與人參差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但是枸杞子水煎劑對(duì)小鼠具有顯著的抗缺氧抗疲勞的作用。

本實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果表明人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液中含有豐富的生物活性物質(zhì),這些物質(zhì)能顯著提高小鼠的

抗缺氧及抗疲勞作用,各個(gè)藥物之間其作用效果差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,對(duì)于臨床處方的指導(dǎo)意義在于藥物之間替代時(shí)配伍時(shí)需要通過劑量的調(diào)整達(dá)到預(yù)期的目的。

[參考文獻(xiàn)]

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篇7

關(guān)鍵詞:讀書觀察指導(dǎo)法 寵物 解剖 組織 胚胎

我在多年的教育理論學(xué)習(xí)與生物形態(tài)類課程教學(xué)實(shí)踐中體會(huì)到“讀書觀察指導(dǎo)法”是教師指導(dǎo)學(xué)生把讀書與觀察相結(jié)合地進(jìn)行學(xué)習(xí)的一種方法,是生物形態(tài)類課程的主導(dǎo)性教學(xué)方法,是教與學(xué)相結(jié)合、理論與實(shí)踐相結(jié)合、傳授知識(shí)與培養(yǎng)能力相結(jié)合,一般性教學(xué)方法與特征性教學(xué)方法相結(jié)合地進(jìn)行教學(xué)方法研究的成果。

1 什么是讀書觀察指導(dǎo)法

教材是教學(xué)過程的基本載體之首,即使是在網(wǎng)絡(luò)時(shí)代的今天,教材的作用仍然是不可替代的。在生物形態(tài)類課程教學(xué)中,要想真正轉(zhuǎn)變那種把學(xué)生當(dāng)作接受知識(shí)的消極容器的教學(xué)思想,要想避免那種填鴨式的教學(xué)方法,要想使學(xué)生真正成為教學(xué)過程中的主體,要想密切結(jié)合行業(yè)企業(yè)崗位工作能力需求,結(jié)合教材培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)能力和分析問題解決問題的能力,就必須注意運(yùn)用讀書指導(dǎo)法進(jìn)行教學(xué)。

寵物解剖組織胚胎課程是具有明顯應(yīng)用性的生物形態(tài)課,而生物形態(tài)類課程的核心內(nèi)容是機(jī)體的形態(tài)結(jié)構(gòu)。要想使學(xué)生掌握形態(tài)結(jié)構(gòu),就離不開對(duì)各種形式、各個(gè)層次的形態(tài)構(gòu)造的觀察,要想使這種觀察符合以教師為主導(dǎo)、學(xué)生為主體的教學(xué)思想,就離不開在教師指導(dǎo)下,由學(xué)生自己進(jìn)行觀察的觀察指導(dǎo)法。

從學(xué)生的角度來看,讀書的目的是掌握形態(tài)構(gòu)造,而掌握形態(tài)構(gòu)造僅靠讀書是不夠的,必須在讀書的基礎(chǔ)上進(jìn)行觀察,才能加深理解、加強(qiáng)記憶。所以,讀書離不開觀察。觀察的目的同樣是掌握形態(tài)結(jié)構(gòu),要想掌握形態(tài)構(gòu)造的名稱、寫法、位置關(guān)系及作用等,必須在讀書的基礎(chǔ)上觀察,并帶著觀察中發(fā)現(xiàn)的問題重新讀書,才能對(duì)觀察到的形態(tài)構(gòu)造加深理解,加強(qiáng)記憶??梢?觀察也離不開讀書。因此,從教師的角度來說,讀書指導(dǎo)法與觀察指導(dǎo)法,應(yīng)該成為相互依賴、不可分割、相輔相成的有機(jī)整體。

生物形態(tài)類課程有兩大特點(diǎn):一是名詞術(shù)語多,二是這些名詞術(shù)語絕大部分是機(jī)體形態(tài)結(jié)構(gòu)的概念和名稱。學(xué)生要想提高學(xué)習(xí)效率和質(zhì)量,必須注意把讀書與觀察有機(jī)地結(jié)合起來,成為自己學(xué)習(xí)生物形態(tài)類課程的主要學(xué)習(xí)方法。而教師為了達(dá)到這個(gè)目的就必須把讀書指導(dǎo)和觀察指導(dǎo)這兩種方法有機(jī)地融合成為一個(gè)整體,以形成課程的主導(dǎo)性教學(xué)方法。只有這樣才能在教師的指導(dǎo)下,讓學(xué)生把讀書與觀察最大限度地結(jié)合在一起,從而充分發(fā)揮讀書與觀察的作用,提高學(xué)生認(rèn)識(shí)和掌握生物形態(tài)結(jié)構(gòu)的能力,達(dá)到在傳授知識(shí)的同時(shí),訓(xùn)練學(xué)生的學(xué)習(xí)技能,培養(yǎng)學(xué)生的自學(xué)能力和分析問題解決問題的能力,進(jìn)而達(dá)到提升其崗位工作能力的目的。

綜上所述,筆者認(rèn)為,為了區(qū)別于一般所說的讀書指導(dǎo)法和觀察指導(dǎo)法,尤其是從生物形態(tài)類課程教學(xué)特殊需要的角度,有必要提出讀書觀察指導(dǎo)法的概念,以便進(jìn)一步豐富教育理論中關(guān)于教學(xué)方法的內(nèi)容,達(dá)到更有效地指導(dǎo)生物形態(tài)類課程教學(xué)實(shí)踐的目的。

2 怎樣掌握讀書觀察指導(dǎo)法

無論是“讀書”還是“名詞術(shù)語”,說到底是個(gè)理論的問題,無論是“觀察”還是“形態(tài)結(jié)構(gòu)”,說到底是個(gè)實(shí)踐的問題,把讀書與觀察放到一起,形成一個(gè)新的概念,用以表示把讀書與觀察相結(jié)合的這種學(xué)習(xí)方法,充分地體現(xiàn)了理論與實(shí)踐相結(jié)合這一重要原則在教學(xué)方法研究工作中的重要作用。

教學(xué)過程是教師的“教”和學(xué)生的“學(xué)”有機(jī)結(jié)合的過程。“學(xué)”是目的,“教”是手段,學(xué)生是主體,教師則起主導(dǎo)作用,兩者的最佳結(jié)合點(diǎn)在這里是由指導(dǎo)二字來體現(xiàn)的。讀書指導(dǎo)側(cè)重于傳授知識(shí),觀察指導(dǎo)則側(cè)重于培養(yǎng)能力,而把讀書指導(dǎo)與觀察指導(dǎo)相結(jié)合,則充分地體現(xiàn)了傳授知識(shí)和培養(yǎng)能力相結(jié)合的原則。而這種結(jié)合又是在老師指導(dǎo)下由學(xué)生自己完成的,就更進(jìn)一步體現(xiàn)了這一原則。

讀書指導(dǎo)法也好,觀察指導(dǎo)法也好,在教育理論和實(shí)踐中早有記載,廣為人知,經(jīng)常使用。但是,它們畢竟是一般性的教學(xué)方法,雖然它們也很好地體現(xiàn)了學(xué)生是主體,教師是主導(dǎo)的思想并在一定的程度上反映了各種課程教學(xué)的特征,但是并沒有充分地反映出生物形態(tài)類課程教學(xué)的特點(diǎn)。把讀書指導(dǎo)和觀察指導(dǎo)這兩種方法融合為有機(jī)的整體,則即體現(xiàn)了一般教法論的基本原則,又創(chuàng)造出適合生物形態(tài)類課程教學(xué)特點(diǎn)的特征性教學(xué)方法,因而集中地體現(xiàn)了關(guān)于教學(xué)方法理論研究中的抽象與具體、一般與特殊的關(guān)系。

所以,如果清楚地認(rèn)識(shí)到理論與實(shí)踐的對(duì)立統(tǒng)一、教與學(xué)的對(duì)立統(tǒng)一、傳授知識(shí)與培養(yǎng)能力的對(duì)立統(tǒng)一和教學(xué)方法的一般性與特殊性的對(duì)立統(tǒng)一關(guān)系,抓住了這四個(gè)結(jié)合點(diǎn),就能更深刻地理解讀書觀察指導(dǎo)法的確切含義,也就能更快地掌握這種有效的教學(xué)方法,就能更加適應(yīng)生物形態(tài)類課程教學(xué)的特殊需要,就抓住了生物形態(tài)類課程教學(xué)方法研究的關(guān)鍵,就能更有效地指導(dǎo)教學(xué)實(shí)踐,從而提高生物形態(tài)類課程教學(xué)的質(zhì)量,把生物形態(tài)類課程的教學(xué)方法改革推向深入。

3 如何運(yùn)用讀書觀察指導(dǎo)法

在多年的生物形態(tài)課程教學(xué)實(shí)際工作中,我深深地體會(huì)到:使用讀書觀察指導(dǎo)法進(jìn)行生物形態(tài)類課程教學(xué)必須打好基礎(chǔ)、創(chuàng)造條件、選擇方法、掌握規(guī)律、精心設(shè)計(jì)和靈活運(yùn)用,才能正確處理這種主要教學(xué)方法與其他教學(xué)要素和教學(xué)方法之間的關(guān)系,達(dá)到最大限度地發(fā)揮其提高教學(xué)效率和質(zhì)量的作用。

3.1打好基礎(chǔ)、創(chuàng)造條件

使用讀書觀察指導(dǎo)這種教學(xué)方法要求學(xué)校和教師努力提高教師業(yè)務(wù)素質(zhì),搞好實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)條件建設(shè)、教材建設(shè)和師資隊(duì)伍建設(shè)工作,為應(yīng)用這種方法做好必要的準(zhǔn)備。

首先,教師要鉆研教材,通過通讀、精讀、選讀等方法對(duì)所用教材、參考教材、網(wǎng)絡(luò)信息和參考資料等進(jìn)行鉆研,達(dá)到掌握教材,不斷完善自己的知識(shí)結(jié)構(gòu)的目的。其次,教師要掌握教具,要圍繞教學(xué)需要對(duì)標(biāo)本、模型、多媒體課件等在內(nèi)的各類教學(xué)工具手段進(jìn)行學(xué)習(xí),掌握其在教學(xué)應(yīng)用方面的知識(shí)與技能,而且還應(yīng)注意鉆研教材和掌握教具之間的關(guān)系,要注意教師間的相互學(xué)習(xí)和共同提高。

讀書觀察指導(dǎo)法對(duì)教師的數(shù)量與質(zhì)量都有更高的要求。因此,必須有一支有一定數(shù)量、質(zhì)量較高的教師隊(duì)伍和多種形式的高質(zhì)量的、配套適用的教材和教具,這就要求教師本身非常注重師資隊(duì)伍建設(shè)工作和實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)條件建設(shè)工作以及立體化教材建設(shè)工作。

3.2選擇方法、掌握規(guī)律

各種教學(xué)方法都不可能完全脫離其他教學(xué)方法而單獨(dú)地存在于一門課程的教學(xué)過程之中。即便是在一次課的教學(xué)過程中也是如此。

但是,對(duì)于一門課程或一類課程的教學(xué)來說,一般應(yīng)以一種或幾種教學(xué)方法為主,以另外若干方法為輔。對(duì)于生物形態(tài)類課程來說,只要條件基本具備的話,就應(yīng)以讀書觀察指導(dǎo)法為主要教學(xué)方法,而以讀書指導(dǎo)法、觀察指導(dǎo)法和講授法等其它教學(xué)方法為輔教學(xué)方法。也就是說讀書觀察指導(dǎo)法適合于生物形態(tài)類課程教學(xué)的大部分而不是全部。

對(duì)于具體的一次課來說,教學(xué)方法如何確定,在教學(xué)條件一定的情況下,主要由教學(xué)內(nèi)容來決定。如在動(dòng)物解剖及組織胚胎課程中,緒論部分比較抽象,又是剛剛引導(dǎo)學(xué)生入門,應(yīng)以講授法為主。各章節(jié)的概述部分比較抽象,但學(xué)生畢竟已經(jīng)漸漸入門了,最好以讀書指導(dǎo)法為主。對(duì)于一些浸制標(biāo)本的觀察和尸體解剖,如果條件較差,刺激性較強(qiáng),尸體不易防腐時(shí),因?yàn)椴灰组L(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行觀察,則以觀察指導(dǎo)法為主。除上述內(nèi)容之外的大部分內(nèi)容(如寵物解剖組織胚胎課程中的細(xì)胞、基礎(chǔ)組織和各器官系統(tǒng)的大體解剖、器官組織以及胚胎的內(nèi)容),最好采用讀書觀察指導(dǎo)法進(jìn)行教學(xué)。

在一個(gè)具體的授課周期中,從講授法入手,然后根據(jù)教材內(nèi)容、教學(xué)條件、學(xué)生基礎(chǔ)及接受情況逐漸過渡到讀書指導(dǎo)法和觀察指導(dǎo)法,最后進(jìn)入運(yùn)用讀書觀察指導(dǎo)法進(jìn)行教學(xué)這個(gè)主體階段。同時(shí)這個(gè)從講授法經(jīng)過讀書指導(dǎo)法和觀察指導(dǎo)法到讀書觀察指導(dǎo)法的過程,也應(yīng)該是一個(gè)生物形態(tài)類課程的新教師,掌握讀書觀察指導(dǎo)法的漸進(jìn)性過程。

3.3精心設(shè)計(jì)、靈活運(yùn)用

在一次課的主要教學(xué)方法確定之后,還要確定每個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)直至每部分教學(xué)內(nèi)容的教學(xué)方法,這就要求教師在制定具體授課方案時(shí),對(duì)每個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)、每部分內(nèi)容進(jìn)行精心的設(shè)計(jì)。以寵物解剖中的后肢骨這次課為例,筆者曾作授課計(jì)劃如下:復(fù)習(xí)舊課,前肢骨,觀察指導(dǎo)法,8分鐘。講授新課,后肢骨組成,讀書觀察指導(dǎo)法,5分鐘。髖骨,讀書觀察指導(dǎo)法,分組指導(dǎo),20分鐘。師生共同總結(jié),8分鐘。股骨,讀書觀察指導(dǎo)法,分組指導(dǎo),15分鐘。師生共同總結(jié),5分鐘。膝蓋骨,講述法2分鐘。小腿骨,讀書觀察指導(dǎo)法,分組指導(dǎo),8分鐘。共同總結(jié),2分鐘。跗骨,讀書觀察指導(dǎo)法,分組指導(dǎo),7分鐘。學(xué)生總結(jié),3分鐘。后足骨,讀書觀察指導(dǎo)法,5分鐘。鞏固新課,讀書觀察指導(dǎo)法,10分鐘。課外作業(yè),講述法,1分鐘。

在執(zhí)行這樣較為祥細(xì)的課時(shí)授課計(jì)劃的時(shí)候,還可能出現(xiàn)一些考慮不到的問題。比如在指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行讀書觀察時(shí),某個(gè)學(xué)生提出了一個(gè)帶有普遍性而又比較重要的有一定實(shí)用價(jià)值問題,而這個(gè)問題又不宜采用讀書觀察指導(dǎo)法來進(jìn)行教學(xué)。此時(shí),教師則應(yīng)及時(shí)改用相應(yīng)的方法,使全體學(xué)生都明確地了解這一問題之后,再回到原來的教學(xué)方法上去。

這就要求教師充分發(fā)揮主導(dǎo)作用,善于“駕馭”課堂,較熟練地運(yùn)用多種教學(xué)方法,在各種方法的綜合運(yùn)用之中,來保證主要教學(xué)方法的實(shí)施,努力做到“教學(xué)有法,教無定法”。

以上是筆者結(jié)合教學(xué)經(jīng)驗(yàn)總結(jié),研究教學(xué)方法的一些體會(huì),特提出與對(duì)此感興趣的同行共同探討。

作者簡(jiǎn)介:

韓行敏(1956-),男,黑龍江雙城人,農(nóng)學(xué)碩士,教授,主要從事高職動(dòng)物解剖生理教學(xué)與研究及畜牧獸醫(yī)類教學(xué)管理工作。

參考文獻(xiàn):

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[3]楊耀防.人體解剖學(xué)教學(xué)內(nèi)容與方法改革探索.中華醫(yī)學(xué)教育雜志.2007,6(62~64)

[4]陳耀星等.動(dòng)物解剖學(xué)課程的建設(shè)與教學(xué)實(shí)踐.高等農(nóng)業(yè)教育 2004,3(66~68)

篇8

AP-PCR基本原理與常規(guī)PCR類似,均為引物指導(dǎo)下的DNA擴(kuò)增,同樣包括變性、退火、延伸的基本步驟,其不同之處在于普通PCR使用的是序列特異性引物而AP-PCR過程中的引物是10個(gè)左右非特異性寡聚核苷酸鏈(隨機(jī)引物)。AP-PCR之所以能進(jìn)行是因?yàn)樵诜磻?yīng)過程中引物和模板并不需要完全的匹配,在較低的退火溫度下,只要引物的一部分特別是3′端有3~4個(gè)以上堿基與模板(DNA或RNA反轉(zhuǎn)錄的cDNA)互補(bǔ)復(fù)性且方向正確,距離在一定長(zhǎng)度范圍內(nèi),在TaqDNA聚合酶的作用下就可擴(kuò)增出一定長(zhǎng)度的DN段,利用多個(gè)隨機(jī)引物可使檢測(cè)區(qū)域擴(kuò)大至整個(gè)基因組(Babu等,2014)。擴(kuò)增后的產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,核酸染料或放射性自顯影得到DNA指紋圖譜,從而分析比較其多態(tài)性或進(jìn)一步克隆分析(Babu等,2014)。

2、AP-PCR的技術(shù)方法和優(yōu)缺點(diǎn)

2.1模板DNA提取和質(zhì)量檢測(cè)

模板DNA提取的方法有很多,應(yīng)根據(jù)組織的不同和試驗(yàn)需要確定,但其基本的原理相同,都是通過酶或有機(jī)試劑裂解組織使核酸游離出來,然后通過有機(jī)溶劑或吸附柱純化后提取。核酸的濃度和質(zhì)量可通過UV分光光度計(jì)讀取D260nm與D280nm的比值和1%瓊脂糖凝膠電泳等檢測(cè)來確定(Mohini等,2011)。目前已有很多商品化的核酸提取試劑盒可供選擇,使用方便并可得到較高質(zhì)量的模板(DNA或cDNA)。

2.2隨機(jī)引物的選擇

隨機(jī)引物長(zhǎng)度通常為10個(gè)堿基,GC的含量為60%~80%的寡聚核苷酸鏈,隨機(jī)引物不僅核苷酸的排列順序是隨機(jī)的,而且所有引物的序列無直接相關(guān)性(韋莉萍,2001)。理論上,如果1條隨機(jī)引物反應(yīng)可產(chǎn)生x個(gè)獨(dú)立的條帶,那么a條隨機(jī)引物同時(shí)參與反應(yīng)就可得到xa2個(gè)條帶,但多條引物同時(shí)參與反應(yīng)會(huì)相應(yīng)的增加結(jié)果的復(fù)雜性和不穩(wěn)定性(Nandani等,2014)。隨機(jī)引物雖然可用于所有物種,但并不是所有的隨機(jī)引物擴(kuò)增出來的結(jié)果都有意義,想要得到較為理想的結(jié)果仍需根據(jù)研究對(duì)象和研究目的進(jìn)行引物的篩選和反應(yīng)條件的優(yōu)化,一般來說選擇能產(chǎn)生中等復(fù)雜度的圖譜的引物(Nandani等,2014)。

2.3AP-PCR擴(kuò)增條件

AP-PCR也包括變性、退火、延伸的經(jīng)典PCR過程。變性過程在94℃進(jìn)行,一般來說預(yù)變性3~5min;退火溫度在35~38℃,也可根據(jù)引物Tm值來確定,一般退火溫度比引物Tm值低3~5℃;延伸溫度在72℃,在此溫度下Taq酶的合成效率約為2000bp/min(Kumari等,2013)。AP-PCR的試驗(yàn)條件、模板的質(zhì)量和濃度及反應(yīng)體系中Mg2+的濃度等都可能對(duì)擴(kuò)增的結(jié)果產(chǎn)生影響,想要得到較為理想的試驗(yàn)結(jié)果,反應(yīng)體系的優(yōu)化和試驗(yàn)操作的標(biāo)準(zhǔn)化是非常重要的(Mohini等,2011;Kumari等,2013;Babu等,2014)。

2.4AP-PCR的優(yōu)點(diǎn)

AP-PCR延續(xù)了PCR的效率高、靈敏度高、樣品用量少等優(yōu)點(diǎn),同時(shí)又兼有自身的優(yōu)點(diǎn):①不同種類的生物樣品即可使用通用的隨機(jī)引物進(jìn)行基因分析(Welsh等,1991);②可在對(duì)研究對(duì)象不了解的情況下進(jìn)行基因多態(tài)性分析,從而對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行遺傳分析和分類研究(Williams等,1990;Welsh等,1991);③對(duì)于研究對(duì)象DNA樣品量有限的情況也適用(Nandani等,2014);④隨機(jī)引物易獲得,試驗(yàn)成本低,技術(shù)容易掌握,除此之外,可對(duì)AP-PCR產(chǎn)生的基因條帶進(jìn)行純化和克隆,以便進(jìn)一步分析(Ge等,2014)。

2.5AP-PCR的局限性

AP-PCR雖然具有很多獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),但目前仍處于應(yīng)用的探索階段,其本身仍有局限性:①AP-PCR技術(shù)通常是對(duì)顯性基因標(biāo)記進(jìn)行分析,這就意味著不能將純合子與雜合子區(qū)別開(Babu等,2014);②由于無明確的目的序列,如果發(fā)生擴(kuò)增條帶的缺失就無法得知是什么原因?qū)е碌?,不利于?duì)擴(kuò)增結(jié)果的分析(Kumari等,2013);③AP-PCR的結(jié)果分析需要專業(yè)的帶譜分析知識(shí),否則很難從結(jié)果中得到有意義的信息;④AP-PCR結(jié)果的重復(fù)性問題一直是限制其廣泛應(yīng)用的主要原因,由于其結(jié)果受DNA模板的質(zhì)量、反應(yīng)體系成分和反應(yīng)條件的變化等因素的影響,其擴(kuò)增產(chǎn)物的穩(wěn)定性難以控制(Mohini等,2011);⑤AP-PCR結(jié)果通過凝膠電泳來觀察,但遷移率相同的譜帶的核苷酸同源型不明等情形易造成干擾,有時(shí)電泳遷移率相同的片段并非同源,這就給結(jié)果分析帶來很多不確定性(Nandani等,2014)。

3、AP-PCR技術(shù)研究進(jìn)展

3.1AP-PCR技術(shù)自身的優(yōu)化

近年來,不斷有研究者對(duì)AP-PCR技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)和優(yōu)化,使其更具可操作性、實(shí)用性和更廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域。劉剛等(2004)對(duì)AP-PCR進(jìn)行了優(yōu)化,建立了多重隨機(jī)引物PCR(M-RAPD)技術(shù),M-RAPD通過使用3條組合的隨機(jī)引物在較高的退火溫度下對(duì)肺炎鏈球菌、糞腸球菌和大腸埃希菌耐藥菌株等的染色體DNA進(jìn)行擴(kuò)增獲得了穩(wěn)定的種株特異性的DNA指紋圖,其所提供的基因信息要遠(yuǎn)多于傳統(tǒng)的RAPD技術(shù)。Xiong等(2012)對(duì)AP-PCR進(jìn)行了反應(yīng)程序優(yōu)化和隨機(jī)引物中G/(G+C)不同比例研究,結(jié)果表明,反應(yīng)程序中從退火步驟到延伸步驟的時(shí)間延長(zhǎng),溫度變化由3℃/s下降到0.3℃/s時(shí),PCR產(chǎn)物條帶明顯增加,這可能是由于延長(zhǎng)溫度變化的時(shí)間可提高引物與模板結(jié)合的穩(wěn)定性(Fu等,2000),在比較了隨機(jī)引物中G/(G+C)不同比例的PCR產(chǎn)物后發(fā)現(xiàn),當(dāng)G/(G+C)比例在0.7時(shí)PCR產(chǎn)物的條帶最多,也更適用于進(jìn)行AP-PCR反應(yīng),因此反應(yīng)程序的溫度變化和隨機(jī)引物中G/(G+C)的比例可能也是影響AP-PCR結(jié)果的重要因素。Zou等(2003)報(bào)道了利用兩步AP-PCR方法在微量DNA樣品中擴(kuò)增未知序列DNA并進(jìn)行克隆。第1步PCR利用29個(gè)核苷酸序列的引物進(jìn)行擴(kuò)增,Ran5-29(5′-GTTCTACACGAGTCACTGCA-GNNNNNNNTGGC-3′),這一隨機(jī)引物包括21個(gè)已知核苷酸序列部分,7個(gè)隨機(jī)核苷酸序列和1個(gè)3′端TGGC的卡子結(jié)構(gòu),在隨機(jī)序列前6個(gè)核苷酸序列構(gòu)成了1個(gè)PstⅠ位點(diǎn),其中3′端卡子結(jié)構(gòu)在退火時(shí)可與含有GCCA位點(diǎn)結(jié)合,保證了隨機(jī)序列可與GCCA上游的序列匹配,3′端TGGC的卡子結(jié)構(gòu)可使引物與模板的匹配數(shù)增加7~11個(gè)核苷酸,PstⅠ位點(diǎn)決定PCR產(chǎn)物的長(zhǎng)度,并保留1個(gè)黏性末端,保證了克隆的順利進(jìn)行。第2步PCR使用可與Ran5-29相匹配的19個(gè)核苷酸的Fix5-29(5′-GTTCTACACGAGTCACTGC-3′)作為引物,獲得的產(chǎn)物進(jìn)行純化、克隆分析。結(jié)果表明這種策略可檢測(cè)臨床樣本DNA的最小量在1pg,克隆靈敏度達(dá)到100fg目的DNA模板。這種方法較普通AP-PCR靈敏度更高,適用于樣本量極少的臨床樣品檢測(cè)。Clem等(2007)在對(duì)比了AP-PCR方法的不同擴(kuò)增策略,在此基礎(chǔ)上建立一種快速有效的檢測(cè)不明病原的多重隨機(jī)RT-PCR方法。在對(duì)血液樣本進(jìn)行過濾后加入了DNase和RNase消化,利用宿主基因?qū)Nase和RNase敏感而衣殼保護(hù)的病毒對(duì)其不敏感的特點(diǎn),去除宿主自身基因的污染。其利用單一十聚核苷酸為引物,引物序列為(V8A2)5′-VVVVVVVVAA-3′,V=A、G或C,3′2個(gè)A提供了一個(gè)“l(fā)ock”結(jié)構(gòu),引物中不含有胸腺嘧啶脫氧核苷酸(T)可避免發(fā)生引物二聚體,但這一結(jié)構(gòu)不可避免的會(huì)影響引物與模板的結(jié)合。試驗(yàn)結(jié)果一旦監(jiān)測(cè)到病毒的擴(kuò)增產(chǎn)物即可通過鳥槍法克隆測(cè)序鑒定。這一方法對(duì)病毒的出現(xiàn)或重組進(jìn)行快速監(jiān)測(cè)和鑒定有很強(qiáng)的實(shí)用性,其檢測(cè)靈敏度達(dá)到1000克?。痬L,應(yīng)用這一技術(shù)成功從血液樣品中檢測(cè)并獲得了3種獨(dú)立病毒的部分序列。

3.2以AP-PCR為基礎(chǔ)衍生的分子生物學(xué)技術(shù)

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,單一的AP-PCR技術(shù)已不能滿足研究的需要,因此為了克服AP-PCR的一些缺點(diǎn)在其基礎(chǔ)上衍生出包括非序列依賴單引物PCR(SISPA)、簡(jiǎn)并核苷酸引物PCR(DOP-PCR)、DNA擴(kuò)增指紋印記(DAF)、微衛(wèi)星引物PCR(MP-PCR)等分子生物學(xué)技術(shù)。SISPA方法最早是由Reyes等(1991)建立起來的,其以AP-PCR為基礎(chǔ),非對(duì)稱的單一引物與DNA模板的鈍末端直接連接,隨后經(jīng)過若干循環(huán)的變性、退火和延伸后,模板的數(shù)量得到擴(kuò)增,后經(jīng)克隆、測(cè)序、分析得到基因序列。Breitbart等(2005)在SISPA的基礎(chǔ)上建立了DNase-SISPA聯(lián)用的方法,增加了樣品過濾和DNA酶消化等步驟,成功的從人的血液臨床樣品中發(fā)現(xiàn)了新的病毒基因。Djikeng等(2008)在已有研究基礎(chǔ)上進(jìn)行了新的改進(jìn),在樣品的處理中加入RNase酶以清除外源RNA的污染如核糖體RNAs。針對(duì)有polyA尾的病毒,在反轉(zhuǎn)錄過程中加入六聚核苷酸隨機(jī)引物5′端加入一段病毒特異性引物序列,形成結(jié)合引物(FR26RV-N:5′-GCCGGAGCTCTGCAGATATC-NNNNNN-3′),同時(shí)加入連接polyT的引物(FR40RV-T:5′-GCCGGAGCTCTGCAGATATC-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-3′)以增加對(duì)病毒基因3′端的覆蓋率。這種在六聚體隨機(jī)引物連接一保守序列即病毒特異性引物,可增加對(duì)病毒基因5′的捕獲,從而使SISPA的成功率大大提高。DOP-PCR技術(shù)是在AP-PCR基礎(chǔ)上建立起來,其引物(DOP-ORI-Xho)由22個(gè)核苷酸組成,3′和5′端的特異核苷酸序列和中間的6個(gè)核苷酸構(gòu)成的隨機(jī)引物組成(Telenius等,1992)。由于隨機(jī)引物的簡(jiǎn)并性,每個(gè)反應(yīng)包含著數(shù)以千對(duì)的引物。DOP-PCR的反應(yīng)程序包含2個(gè)不同的部分,前5個(gè)循環(huán)引物的3′端至少有12個(gè)連續(xù)的核苷酸與模板DNA相結(jié)合,對(duì)引物和模板的匹配度要求不高,在隨后的30~40個(gè)循環(huán)里,擴(kuò)增錯(cuò)配的幾率會(huì)逐漸降低。初始反應(yīng)產(chǎn)物將成為模板,用相同的引物進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物通過克隆測(cè)序即可獲得基因序列(韓燾等,2013)。Csaba等(2002)打破了DOP-PCR只用同一種引物的傳統(tǒng),嘗試了5條新的可用于反應(yīng)的引物,使反應(yīng)時(shí)間由原來的7~8h縮短為2h,縮短了變性過程的時(shí)間,在取得理想結(jié)果的同時(shí),減少了擴(kuò)增酶的用量,提高了DOP-PCR的效率和實(shí)用性。DAF是一種改進(jìn)的AP-PCR分析技術(shù),與AP-PCR技術(shù)不同的是,DAF使用的引物濃度更高,長(zhǎng)度更短(約5~8個(gè)堿基),在PCR反應(yīng)上只包含2個(gè)溫度的循環(huán),省去了延伸的步驟,使用聚丙烯酰胺凝膠電泳,通過銀染方法觀察結(jié)果。DAF通常會(huì)產(chǎn)生非常復(fù)雜的帶型,因此它所提供的譜帶信息也比AP-PCR大得多(Caetano-Anolles等,1993)。Al-h(huán)ag等(2007)應(yīng)用DAF鑒定8株細(xì)胞系,研究結(jié)果表明,DAF可產(chǎn)生穩(wěn)定的可供區(qū)分的PCR譜帶。Ehsan等(2011)應(yīng)用DAF技術(shù)對(duì)分離到的25株牛隱孢子蟲進(jìn)行亞型的鑒定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)分離的25個(gè)蟲株分屬于為3個(gè)不同的亞型。MP-PCR是以AP-PCR為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)。Ma等(1996)發(fā)現(xiàn)真核生物基因組中存在短串聯(lián)重復(fù)序列,又稱微衛(wèi)星DNA或簡(jiǎn)單重復(fù)序列(simplesequencerepeats,SSR)。真核生物基因組中SSR的分布是隨機(jī)的,大約每隔10~50kb就有1個(gè)SSR。SSR位點(diǎn)最常見是雙核苷酸重復(fù),即(CA)n和(TG)n,每個(gè)微衛(wèi)星DNA的核心序列結(jié)構(gòu)相同,重復(fù)單位數(shù)目10~60個(gè)。MP-PCR的引物是與SSR位點(diǎn)互補(bǔ)的二聚或三聚核苷酸重復(fù)序列,如其引物序列可是(TA)10或(CGA)6,擴(kuò)增的是SSR之間不同長(zhǎng)度的DNA序列,將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳,根據(jù)分離片段的大小決定基因型并計(jì)算等位基因頻率(Dawson等,2013)。MP-PCR克服了AP-PCR引物的不確定性,增加了PCR產(chǎn)物譜帶的穩(wěn)定性和針對(duì)性,該技術(shù)也已廣泛應(yīng)用于物種分子標(biāo)記、基因圖譜繪制和基因差異性分析等方面(Tian等,2014;Ding等,2014;Wei等,2014)。

3.3AP-PCR與其他分子生物學(xué)技術(shù)的聯(lián)用

擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(AFLP)技術(shù)是將基因組DNA先用限制性內(nèi)切酶切割,然后將雙鏈接頭連接到DN段的末端,接頭序列和相鄰的限制性位點(diǎn)序列,作為引物結(jié)合位點(diǎn)(Rikalainen,2013)。針對(duì)AP-PCR結(jié)果譜帶核苷酸同源性無法確定的缺點(diǎn),Tan等(2011)將AP-PCR與AFLP進(jìn)行聯(lián)用,利用2種方法各自的優(yōu)勢(shì),在對(duì)可能含有未知病原的臨床樣品進(jìn)行檢測(cè),以實(shí)驗(yàn)室確診的登革1型病毒為陽性對(duì)照,首先用AP-PCR對(duì)有限的樣品基因進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增,然后使用AFLP技術(shù)對(duì)進(jìn)行擴(kuò)增從而得到樣品穩(wěn)定的DNA多態(tài)性標(biāo)記。此方法克服了AP-PCR的同源性不明問題,同時(shí)比單獨(dú)使用的AFLP方法進(jìn)行檢測(cè)的靈敏度提高100倍,在臨床樣品的檢測(cè)中有很大的實(shí)用價(jià)值。高通量的測(cè)序技術(shù)也被稱為下一代的測(cè)序技術(shù),其與AP-PCR技術(shù)的配合使用,讓AP-PCR有了更廣闊的應(yīng)用前景。Hang等(2012)首先使用錨定隨機(jī)引物P17N8(5′-GTTTCCCAGTAGGTCT-CNNNNNNNN-3′)進(jìn)行RNA反轉(zhuǎn)錄,在通過錨定隨機(jī)引物P17N8和P21(5′-CGCCGTTTCCCAG-TAGGTCTC-3′)同時(shí)進(jìn)行AP-PCR擴(kuò)增,再通過高通量的測(cè)序技術(shù)對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,對(duì)得到的基因序列進(jìn)行拼接處理,從而得到了奧羅普切病毒和卡拉帕魯病毒L片段完整基因序列。vanderHeij-den等(2012)利用序列非依賴性病毒基因片段擴(kuò)增方法與Roche-454測(cè)序技術(shù)聯(lián)用,成功的從患急性肝炎病犬的肝臟組織檢測(cè)出犬Ⅰ型腺病毒基因,研究結(jié)果表明AP-PCR技術(shù)和下一代的測(cè)序技術(shù)聯(lián)合使用的方法在獲得病毒完整基因序列和檢測(cè)病原等方面的實(shí)用性。

4、AP-PCR技術(shù)在動(dòng)物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

4.1在傳染病流行病學(xué)和病原遺傳學(xué)分類中的應(yīng)用AP-PCR由于其獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢(shì),在獸醫(yī)傳染病學(xué)和病原遺傳學(xué)分類中已得到廣泛應(yīng)用。Leh-marn等(1992)用此技術(shù)對(duì)念珠菌屬的分離菌進(jìn)行分析,試驗(yàn)結(jié)果表明,同一菌種的不同菌型間呈現(xiàn)出DNA長(zhǎng)度的多態(tài)性;此帶型圖在同一菌種的不同菌型間,其相似程度遠(yuǎn)大于不同種的菌株,這也說明每種菌的隨機(jī)引物PCR帶型極具特征性。Louie等(1996)用2種引物檢查15株李斯特單核菌相關(guān)流行分離株和36株不相關(guān)流行分離株。經(jīng)擴(kuò)增后的帶型分析,將其分為9個(gè)型,每個(gè)型中又分有不同的亞型。Zadoks等(2000)在牛乳樣品中分離到23株金黃色葡萄球菌,經(jīng)AP-PCR鑒定1~8株屬于Ⅰ型菌,9~20株屬于Ⅱ型菌,其余3株分別屬于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型菌。Butler等(2001)應(yīng)用該技術(shù)對(duì)3次牛霉形體暴發(fā)流行菌株進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果表明,發(fā)生在其中2個(gè)養(yǎng)牛場(chǎng)的流行病原菌具有一致的指紋圖,引而具有相同的感染來源,而在另一牛場(chǎng)分離的菌株間則顯示了指紋圖譜的顯著異型性,說明它們具有多個(gè)感染來源。王雪敏等(2011)利用多組隨機(jī)引物對(duì)副雞禽桿菌10個(gè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株、血清C型疫苗株和4個(gè)國(guó)內(nèi)分離株進(jìn)行AP-PCR擴(kuò)增,結(jié)果顯示,所有菌株可分為11個(gè)譜型,聚為4類。劃分的11個(gè)譜型可和現(xiàn)有分型方法中的不同亞型一一對(duì)應(yīng),提示這種方法可區(qū)分不同血清亞型。AP-PCR作為寄生蟲遺傳學(xué)分類鑒定的方法已得到廣泛應(yīng)用,克服了傳統(tǒng)分類方法難以解決的問題。Macph-eson等(1993)應(yīng)用AP-PCR技術(shù)區(qū)分來自不同宿主的7種艾美爾球蟲,結(jié)果表明選擇合適的引物可對(duì)7種球蟲進(jìn)行鑒別。張偉信等(2003)應(yīng)用該技術(shù)對(duì)雞柔嫩艾美耳球蟲不同地理株的多態(tài)性研究,結(jié)果表明不同地理株間及同一地理株親代與子代間均存在DNA多態(tài)性差異,其中不同地理株間種內(nèi)變異程度較大,同一地理株子代與親代間也發(fā)生遺傳變異,但變異程度較小。

4.2在病原差異基因分析中的應(yīng)用

AP-PCR技術(shù)進(jìn)行RNA指紋圖譜分析不僅能鑒定基因的表達(dá)差異,而且能顯示低水平表達(dá)的基因差異。Nicho-las(2000)應(yīng)用此方法鑒定了絲裂霉素C誘導(dǎo)下鼠傷寒沙門氏菌SOS調(diào)控基因表達(dá)的差異,結(jié)果表明,絲裂霉素C誘導(dǎo)后21條基因譜帶出現(xiàn)表達(dá)水平的上調(diào),其中20個(gè)基因片段對(duì)應(yīng)的是可辨識(shí)的基因序列,15個(gè)基因序列與數(shù)據(jù)庫中基因序列無同源性,被確定為新的表達(dá)序列,6個(gè)基因片段與SOS基因編碼的調(diào)控蛋白有關(guān)。Diana等(2005)應(yīng)用AP-PCR技術(shù)對(duì)芐硝唑作用下克氏錐蟲基因表達(dá)差異多態(tài)性的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)芐硝唑敏感和對(duì)芐硝唑抵抗種群之間系統(tǒng)指紋圖譜存在一定的差異,其中可能存在克氏錐蟲對(duì)芐硝唑擁有抗性的表達(dá)機(jī)制,雖然抗性種群在芐硝唑作用下系統(tǒng)指紋圖譜沒有明顯的變化,但敏感種群間的系統(tǒng)指紋圖譜卻有著明顯的變化。AP-PCR技術(shù)為鑒定基因差異提供了一種快速有效的方法。

4.3在未知病原檢測(cè)中的應(yīng)用

病原微生物引起的動(dòng)物疫病呈現(xiàn)出復(fù)雜性和非典型性等特征,普通的臨床診斷方法很難確定病原的種類,這種情況下使用傳統(tǒng)PCR方法檢測(cè)臨床樣品的效率不高,而且存在漏檢可能。AP-PCR技術(shù)提供了一個(gè)更為全面、快速和靈活的檢測(cè)方法,對(duì)病原微生物進(jìn)行全基因組的檢測(cè)(姚四新等,2010)。Djikeng等(2008)使用DNase-SISPA技術(shù)在牛的血清中分離到牛鼻病毒基因。Clem等(2007)利用改進(jìn)的AP-PCR方法,從血液樣品中檢測(cè)并獲得了3種獨(dú)立病毒的部分序列,即腺病毒17、卡薩奇病毒A7和呼吸道合包體病毒B。周斌等(2004)在研究鴨病毒性肝炎病毒時(shí),發(fā)現(xiàn)其種毒可能受到污染,隨后挑選4條隨機(jī)引物對(duì)其進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增,共擴(kuò)增出3條基因片段??寺y(cè)序的結(jié)果表明,與禽腺病毒(雞胚致死孤兒病毒)基因組部分序列同源性分別高達(dá)99.5%、99.6%和99.5%,從而確定了鴨病毒性肝炎病毒雞胚尿囊液種毒受到禽腺病毒的污染。黃欣梅等(2011)采用DNase-SISPA對(duì)導(dǎo)致鴨、鵝產(chǎn)蛋下降的病原基因進(jìn)行擴(kuò)增,并在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)了1對(duì)特異性引物成功的擴(kuò)增出新型鵝黃病毒JS804毒株基因。

5、小結(jié)