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【摘要】:目的:尋找出一種適合基層使用的簡單?方便的鑒別藥材的方法。方法:通過不同儀器下觀察藥物的實驗,以對藥材的分辨率,觀察的清晰度為指標,以不同的儀器?底色的不同?光線的強度差別為主要考察因素,探索半顯微性狀鑒別最佳方法及條件。結果:體視顯微鏡觀察最清楚,掃描儀也能比較清楚地觀察,放大鏡觀察的結果就不太理想,且底色與藥材的對比度不同對實驗結果也有影響。結論:此種方法簡便易行,對操作人員的專業(yè)知識要求不高,是一種很好的適用于基層的藥材鑒別方法。

【關鍵詞】:半顯微性狀鑒定放大鏡掃描儀體視顯微鏡

傳統(tǒng)中藥作為中國寶貴資源,在臨床治病及養(yǎng)生保健方面有著極其重要的作用,由于藥物療效與藥材的質量關系密切,因此對藥材進行鑒別而保證藥物療效就非常重要?，F(xiàn)已被廣泛應用的藥材鑒定方法有顯微鑒定,性狀鑒定等。顯微鑒定是利用顯微技術對中藥的細胞?組織?構造特征進行顯微觀察與分析,以確定其品種和質量的一種鑒定方法;性狀鑒定是一種傳統(tǒng)的鑒別方法,是通過眼觀?手摸?鼻聞?口嘗?水試?火試等十分簡便的鑒定方法,來鑒別藥材的外觀性狀。本文則建立了一種介于性狀和顯微鑒別方法之間的另一類鑒別方法,它是借助放大鏡?掃描儀?體式顯微鏡等儀器觀察中藥材細微的外觀性狀,可稱它為半顯微性狀鑒定。“半顯微“是指它對中藥表面特征的放大是界于肉眼和生物顯微鏡之間,例如它可以把一個蘇子放大到一個乒乓球大小,非常清楚地顯示其表面的紋理,但它還不能看清楚植物細胞的形態(tài),所以它還是屬于“性狀鑒別”范疇。但由于它是借助儀器對藥材表面的肉眼看不清的特征進行觀察,這也與傳統(tǒng)的性狀鑒定有較大的區(qū)別。半顯微性狀鑒別法主要用于細小的果實種子類?扁平的中藥飲片?葉類及花類藥材的觀察。對于形體大而厚的藥材的整體觀察則不適用,但亦可用于觀察其表面細微處的特征。按照這種方法所用到的儀器不同,可分為放大鏡半顯微形狀鑒定,掃描儀半顯微形狀鑒定,體視顯微鏡半顯微性狀鑒定。

1放大鏡半顯微性狀鑒定

放大鏡法就是利用一般的放大鏡來觀察藥材,此種方法簡便易行,放大鏡又方便攜帶,所以是鑒別藥材形狀的一種經(jīng)常使用的基本方法。但缺點是放大鏡的分辨率不是很高,對于一些藥材的更為細微的特征,放大鏡的效果就不是很理想。而且利用放大鏡所得的觀察結果很難記錄下來,除非親自觀察,否則很難從觀察者的描述中得到很深的印象。

2掃描儀半顯微性狀鑒定

掃描儀法是利用電腦掃描儀來鑒別藥材的方法,掃描儀已是常用的辦公用具。它除了有文件掃描功能,還有兩個強大的功能——實物掃描功能和圖像放大功能,后兩個功能可被利用對中藥材進行半顯微性狀鑒別。具體方法如下:

2.鑒別用儀器一臺中等以上配置的電腦,像素為1200~2400的掃描儀。

2.軟件在電腦中加裝Photoshop6.0以上的圖像處理軟件。

2.2.軟件介紹Photoshop是一種現(xiàn)被廣泛使用的圖形處理和瀏覽軟件,其功能之齊全是一般的其它圖形處理軟件所不能比的。包括了所有圖形的基本處理,對圖形進行加工。能支持數(shù)碼相機?掃描儀?體視顯微鏡直接捕獲圖象。我們就是利用它的這種功能將它應用于掃描儀半顯微性狀。具體功能?使用方法將在下面進行詳細介紹。

2.3掃描過程

2.3.打開軟件打開Photoshop,點左上角的[文件]下拉出菜單,指向[導入],就可以看到你的掃描儀的型號了,雙擊掃描儀的型號,即可在Photoshop的背景下進行掃描。

2.3.普通掃描選擇好藥材樣品,將需要放大的部分朝下放,上面蓋上合適顏色的背板(通常情況下,用白紙即可),在掃描儀上進行預掃;再用取景框框住要掃描的藥材,在24bit色彩,像素300~600間(根據(jù)景框的大小選擇)對藥材進行普通掃描,可見藥材的圖像被直接展示在Photoshop中。

2.3.3高精掃描為了得到更加清晰的掃描結果,能更好地選擇掃描指數(shù)來觀察藥材,選擇要放大的區(qū)域(區(qū)域選擇不能太大,否則會占用很大的電腦空間),把像素調至2400,進行掃描,可見藥材被放大的圖像也被直接展示在Photoshop中。觀察這一圖像,看看你對光線的強弱,對比度的大小等,滿意不滿意,如果你感覺不行,可以調整后重新掃描。

2.3.4圖像的進一步放大關掉掃描儀,這時的Photoshop調整亮度和對比度,一般都可以得到較好的圖像,可以清楚地看見藥材的細微特征。就可以看到放得很大的藥材圖像。如果對圖像不夠滿意,還可以點Photoshop就可以起用了,用工具欄中的放大鏡對圖像進行放大,你上的[圖像]下拉出菜單,指向[調整],在下拉菜單中點[亮度/對比度],分別調整亮度和對比度,一般都可以得到較好的圖象,可以清晰地看見藥材的細微特征。

3體視顯微鏡半顯微性狀鑒定

體視顯微鏡法與掃描儀法很相似,就是利用體視顯微鏡對藥材的表面特征進行觀察鑒定。它可以直接觀察,也可以用一臺體視顯微鏡和電腦相連,通過電腦中的軟件觀察顯微鏡中藥材的表面特征,并可以拍攝下來的一種藥材鑒別方法。這種體視顯微鏡與普通生物顯微鏡不同,它的放大倍數(shù)一般在10-40之間,生物顯微鏡的放大倍數(shù)則多在40倍以上。由于兩者光的來源不同,因而觀察樣品的圖象部位也有所區(qū)別,體視顯微鏡的光源為反射光,適合于觀察物體的表面,可以清楚地看到其表面特征,與物體的厚度無關;普通生物顯微鏡的光源為透射光,適合于觀察薄片樣品內部的組織構造等,當薄片的厚度超過一定范圍之后就不容易看清楚了。體視顯微鏡法與放大鏡相比的優(yōu)點就是比普通放大鏡的分辨率高,能將肉眼無法看到的細微特征分辨得很清楚。下面將仔細介紹這種方法的使用儀器和具體操作步驟:

3.鑒別用儀器一臺中等以上配置的電腦,體視顯微鏡一臺,電子目鏡一個,連接電腦的數(shù)據(jù)線。

3.軟件電腦中加裝Uleadphotoexplorer軟件。

3.2.軟件介紹這也是一個圖形處理和瀏覽軟件,包括了所有圖形的基本處理,對圖形進行加工.也是一個圖片瀏覽器.支持多達幾十種圖片格式,可以把同類圖片合并成一個圖片集,加上背景音樂作成屏幕保護或壁紙等等,還支持圖形旋轉?轉換基本圖形處理功能(具有photoshop的一些插件功能),也支持數(shù)碼相機?掃描儀?體視顯微鏡直接捕獲圖象.這里利用的就是他能支持體視顯微鏡直接捕獲圖象的功能

3.3操作步驟

3.3.打開軟件將體視顯微鏡通過電子目鏡和數(shù)據(jù)線接到電腦上。再打開Uleadphotoexplorer軟件,點左上角的[文件]菜單,選擇其子菜單[TWAIN獲取],會彈出下級子菜單,選擇[選取來源]項,會出現(xiàn)一個窗口列舉了可供選擇的視頻來源,點擊USBPCCamera選項,就把該軟件調到了合適的狀態(tài)。再點擊工具欄中的[TWAIN獲取]項,視頻窗口就可出現(xiàn)。該窗口有五個單選按扭,分別為DeviceFormatPreferenceSnapshotExit.選擇Device按扭,單擊USBPCCamera項,即可進入可以拍照狀態(tài)。

3.3.實物拍照將需鑒別藥材放入體視顯微鏡物鏡下進行觀察,調整顯微鏡使得藥材的表面特征能被最清楚地顯示出來。這時電腦視頻窗口也會顯示顯微鏡下可觀察的圖象。如覺得圖象還不夠理想,可選擇Preference項進行調整。雙擊Preference按扭會出現(xiàn)圖象調整對話框。該對話框可分為ImagecontrolIn/OutdoorDisplay等若干區(qū)域。Imagecontrol區(qū)域較常用,可通過調節(jié)Brightness(亮度)Contrast(對比度)hue(色度)等來使得圖象最清楚。In/Outdoor區(qū)僅有Indoor(門內)和Outdoor(門外)兩個單選按扭,經(jīng)我們初步實驗摸索可知這兩個按扭是用于調節(jié)光線強弱的。Display區(qū)有LCD和CRT兩個單選按扭,LCD是LiquidCrystalDisplay(液晶顯示)的縮寫,CRT是CathodeRayTube(使用陰極射線管)的縮寫。一般情況只需調節(jié)這幾項,其它選項隨系統(tǒng)自己而定即可.當圖象效果很好時點擊確定按扭即完成對圖象的調整.這時單擊Snapshot即可以拍攝圖象。

3.3.3保存文件拍攝圖象的同時軟件本身已將其保存在地址欄顯示的文件夾內.,單擊工具欄中[打開查看器]工具就可以查看圖象文件,這時圖象會出現(xiàn)在一個只保存有圖象的查看器窗口里面,通過這個窗口可再次對照片進行調整和保存等處理。調整操作和前面相同,對圖象另保存的操作如下:單擊查看器窗口工具欄中的[另存為]工具,就會彈出一個文件另存為對話框,在這個對話框內的地址欄鍵入你希望文件保存地址,然后點擊保存,圖象文件就會復制一份保存入你選擇的地址。在這個查看器窗口內你還可以對圖象進行剪切?懸轉?放大?縮小等一系列的操作。

3.3.4再次拍照當你想從查看器窗口返回到視頻窗口時,使用窗口工具欄最左端的返回工具就可以完成.然后在視頻窗口又可以像第一次拍照一樣對同一藥材進行再次拍照或對其他的藥材進行拍照.后面的調整?保存等操作也相同。

現(xiàn)已被廣泛應用的鑒定方法可用于絕大多數(shù)藥材的鑒定,且能從不同角度鑒別同一藥材,但這些鑒別方法也有其難以克服的不足。例如性狀鑒別對包括形狀?大小?顏色?表面特征?質地?折斷面?氣?味?水試?火試等方面的鑒別。藥材的大小是指長短?粗細?厚薄。而對于藥材上的一些細微特征的觀察,特別是有些很小的種子類藥材,如葶藶子?芥子?車前子?菟絲子等時,肉眼不好區(qū)分其形狀如何,藥材表面是光滑還是粗糙,有無皺紋?皮孔或毛茸等。又如雙子葉植物的根類藥材頂部有的帶有根莖;單子葉植物根莖有的具膜質鱗葉;蕨類植物的根莖常帶有葉柄殘基和鱗片。但很多藥材的表面特征通過肉眼也是觀察不到的,必須借助于一定的儀器來觀察。顯微鑒定是利用顯微技術對中藥進行顯微分析,以確定其品種和質量的一種鑒定方法。顯微鑒定主要包括組織鑒定和粉末鑒定。組織鑒定是通過觀察藥材的切片鑒別其組織構造特征,適合于完整的藥材或粉末特征相似的同屬藥材的鑒別;粉末鑒定是通過觀察藥材的粉末制片鑒別其細胞分子及內含物的特征,適合于破碎?粉末狀藥材或中成藥的鑒別。進行顯微鑒定,鑒定者必須具有植(動)物解剖的基本知識,掌握制片的基本技術。由于鑒定材料的不同(完整?破碎?粉末)和藥用種類及藥用部位的不同,選擇顯微鑒定的方法也不同。鑒定時,首先要根據(jù)觀察的對象和目的,選擇具有代表性的藥材,制備不同的顯微制片,然后依法進行鑒別[1]。這些都局限了顯微鑒定這種方法的廣泛性?普遍性。

基于上面兩種方法的優(yōu)點和不足,我們就半顯微性狀鑒別方法進行了研究探索。從以上的實驗結果看來,這種方法利用了低倍的顯微儀器來觀察藥材以求結果的準確性及區(qū)分藥物的廣泛性,而不用像一般顯微鑒定那樣對藥材進行復雜的解剖,并根據(jù)鑒定材料的不同和藥用種類及藥用部位的不同而使用不同的制片方法,選擇不同的顯微鑒定方法,這就使得這種方法保留了一般顯微鑒定的準確的特點而不用操作那么復雜。另外它仍是對鑒別材料的表面特征進行鑒別而無法觀察到藥材組織構造特征?細胞分子及內含物的特征,因此我們仍將這種方法歸為性狀鑒定的范圍內,但這是種特殊的性狀鑒定方法,既具有一般性狀鑒定的簡單?易行?迅速的特點,又比其觀察的更為細致:而且可以避免一般顯微鑒定操作復雜的弊端。綜合這種半顯微性狀鑒定法的各方面特征,可知它是種介于性狀鑒定和顯微鑒定中間的方法,有其獨特的優(yōu)點,是對現(xiàn)有的四大鑒別方法的重要補充。

參考文獻

[1]康廷國主編.中藥鑒定學[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2003:34-39