導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫(xiě)好一篇成人謎語(yǔ)，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

大有人在，漢語(yǔ)成語(yǔ)，拼音是dà yǒu rénzài，指某類(lèi)人數(shù)量很多。兼語(yǔ)式;作謂語(yǔ);同“不乏其人”。這里給大家分享一些關(guān)于成語(yǔ)大有人在的謎語(yǔ)，供大家參考。

一、大有人在成語(yǔ)謎語(yǔ)矢 …… 打一成語(yǔ)

二、大有人在成語(yǔ)解析形容某一種人為數(shù)不少?！顿Y治通鑒·隋紀(jì)煬帝大業(yè)十一年》：“帝至東都，顧眄街衢，謂侍臣曰：‘猶大有人在?！庵^向日平楊玄感，殺人尚少故也?！?/p>

三、大有人在成語(yǔ)造句1.只要你肯學(xué),師傅大有人在。

2.我們這個(gè)時(shí)代,風(fēng)流倜儻的青年大有人在。

3.這些人攬轡澄清、志在治國(guó)安邦的,也是大有人在。

4.像他這樣的貪污犯現(xiàn)在大有人在。

5.在解放軍戰(zhàn)士中，能百步穿楊的大有人在。

6.像他這樣愛(ài)占便宜的人大有人在。

7.舊社會(huì)，煙館賭局到處都是，在這些伐性之斧下喪生的大有人在。

8.在中青年教師隊(duì)伍中殫見(jiàn)洽聞之士是大有人在的。

9.至今，不相信自己，只按教條辦事，像鄭人買(mǎi)履的人還大有人在。

10.不怕你笑，我們團(tuán)裡濫竽充數(shù)者大有人在。

11.穿著奇裝異服招搖過(guò)市的大有人在。

12.即便是今天,小富即安、不思進(jìn)取的仍大有人在,就是很好的證明。

13.一邊呵佛罵祖,一邊割肉飼鷹者大有人在。

14.但,修煉界之中,忌才的人也大有人在,如若無(wú)法拉攏,那就出手毀去,也不愿這樣的人投入到別的勢(shì)力之中。

15.但是因?yàn)榉植紖^(qū)域狹窄,所以野生數(shù)量奇缺,捕捉出售大有人在,價(jià)格比起三棱閉殼龜,也就是俗稱(chēng)的金錢(qián)龜還要高昂的多。

16.武藝高強(qiáng)者被拜將封侯者,也大有人在。

17.再看某些知名專(zhuān)家學(xué)者和教授，一切向錢(qián)看，在其位不謀其政者不乏其人，滔滔不絕卻不著邊際者大有人在，能解決實(shí)際問(wèn)題者顯得彌足珍貴。

18.盡管對(duì)她那行云流水般富有表現(xiàn)力的動(dòng)作持嘲笑態(tài)度的批評(píng)家大有人在，但伊莎多拉卻為死板的古典舞蹈界帶來(lái)了靈動(dòng)性和自我表現(xiàn)力。

19.另外一家銀行沈河支行的信貸員告訴記者，現(xiàn)在等了三四個(gè)月的大有人在，年前獲得貸款的希望很渺茫。

20.早期移民到加利福尼亞的錫克教信徒與墨西哥裔美國(guó)婦女通婚甚為普遍，而第二、第三代日裔與外族通婚也大有人在。

21.可事實(shí)上世人多半受寂寞所致,著急開(kāi)始,然后不了了之的人大有人在,感情猶如泛濫之河水,分文不值也。

22.麥克納斯伯爵是紫荊花帝國(guó)名將,威名赫赫,麾下能征慣戰(zhàn)者大有人在,武技高明的騎士多如牛毛,杜昂要學(xué)武技很方便,根本就不用到外面另請(qǐng)老師。

23.佩服佩服,要知道,當(dāng)今天下,能做出‘百尺竿頭’詩(shī)句者,大有人在,但是能做出‘百尺竿頭’戰(zhàn)詩(shī)者,少之又少。

24.齊風(fēng)興奮的說(shuō)道,這三天里他們經(jīng)常聽(tīng)到有人在不遠(yuǎn)處廝殺,一言不和便殺個(gè)你死我活的大有人在,更有甚者只是剛碰面便直接打起來(lái)的。

25.準(zhǔn)提是善人,那和準(zhǔn)提作對(duì)的白云就是大大的惡人了,其中中長(zhǎng)舌男女大有人在,好事不出門(mén),惡事傳千里,一時(shí)之間牛豪惡名傳遍洪荒。

26.我可是提醒過(guò)你的,交完錢(qián)跟進(jìn)不進(jìn)得來(lái)可是兩碼事,每年因?yàn)椴荒芡ㄟ^(guò)入學(xué)測(cè)驗(yàn)而給學(xué)院白送錢(qián)的冤大頭可是大有人在。

27.藩鎮(zhèn)將領(lǐng)一心保唐的在少,保存實(shí)力懷不臣之心的在多,又深懼我軍之威,堅(jiān)守不出的必大有人在,剩下不聽(tīng)勸告的,可遣大將痛擊,如此一來(lái),聯(lián)軍之?？山狻?/p>

28.袁紹只覺(jué)得自己都快被所氣爆了,這幫諸候真是成事不足,敗事有余,聞功則喜,聞過(guò)則責(zé),出謀劃策未見(jiàn)有人,落井下石更是大有人在。

29.知道緣由后,更似已經(jīng)有人開(kāi)始在楚墨的背后指指點(diǎn)點(diǎn),甚至有的破口大罵楚墨的惡劣行徑了,而為徐陽(yáng)抱打不平的更大有人在,局面朝著楚墨不利的情形發(fā)展著。

30.那些人倒了,但是,在他們的鼓噪聲中,火中取栗者、投機(jī)取巧者、陰謀家野心家、各色殘?jiān)嗄醯鹊?在臺(tái)上的仍然大有人在。

31.陰天樂(lè)突然問(wèn)道,現(xiàn)在田中財(cái)團(tuán)內(nèi)部為了繼承權(quán)打得一塌胡涂,身為首位繼承人的田中麗奈自然成為了多方的眼中釘、肉中刺,想必妄想要她命的大有人在。

32.還有就是到現(xiàn)在人們也沒(méi)有形成一個(gè)統(tǒng)一的意見(jiàn),支持兩種意見(jiàn)的人都是大有人在,雙方各抒已見(jiàn)爭(zhēng)論不休。

33.民間的球迷愛(ài)屋及烏的認(rèn)為蔡智的教練水平也到了國(guó)際級(jí),希望朱廣滬讓出國(guó)家隊(duì)主教練位置的大有人在。

篇2

釋義：舊時(shí)神怪故事中形容兇神惡鬼的面貌，現(xiàn)形容人面貌極其兇惡。

出處：許仲琳《 封神演義》第六十三回：子牙見(jiàn)對(duì)營(yíng)門(mén)一人， 三首六臂青面獠牙。

示例：魯迅《 吶喊·狂人日記》：那青面獠牙的一伙人，便都哄笑起來(lái)。

近義詞：呲牙咧嘴、 橫眉豎眼。

篇3

1、 針?shù)h：針尖。針尖對(duì)針尖。比喻雙方在策略、論點(diǎn)及行動(dòng)方式等方面尖銳對(duì)立。

2、雙方爭(zhēng)執(zhí)，寸步不讓 。

出處： 宋·釋道原《景德傳燈錄》卷二：“夫一切回答，如針?shù)h相投，無(wú)纖毫參差?！?/p>

篇4

在信息技術(shù)飛速發(fā)展和世界全球化的趨勢(shì)下，創(chuàng)造能力和創(chuàng)新意識(shí)是知識(shí)經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展的需要。高校是傳承文化和培養(yǎng)人才的重要陣地，擔(dān)負(fù)著為國(guó)家培養(yǎng)德才兼?zhèn)洹?guó)際一流、適應(yīng)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展需要的創(chuàng)新型人才的重任。如何使大學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)和創(chuàng)新能力得到良好的培養(yǎng)和訓(xùn)練，從而適應(yīng)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的需要，成為創(chuàng)新型人才，成為世界范圍內(nèi)高等教育研究的重要課題[1]。 

現(xiàn)代密碼學(xué)課程實(shí)踐性要求很高，不僅需要掌握理論知識(shí)和前沿知識(shí)，還需要把所學(xué)的知識(shí)用到實(shí)踐中去，并在應(yīng)用中不斷地發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，思考問(wèn)題，解決問(wèn)題[2]。傳統(tǒng)的教學(xué)過(guò)程中，學(xué)生自始至終處于被灌輸?shù)牡匚唬狈χ鲃?dòng)探索、主動(dòng)發(fā)現(xiàn)的學(xué)習(xí)環(huán)境與空間，無(wú)法滿(mǎn)足現(xiàn)代信息社會(huì)對(duì)人才的需求[3]?！叭蝿?wù)驅(qū)動(dòng)式”教學(xué)模式，即引導(dǎo)學(xué)生在特定的任務(wù)驅(qū)動(dòng)下進(jìn)行自主地探究，建構(gòu)起屬于自己的知識(shí)與能力。借助現(xiàn)代信息技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)和多媒體技術(shù)所具有的超文本特性和網(wǎng)絡(luò)特性，基于任務(wù)驅(qū)動(dòng)的教學(xué)模式改革有利于實(shí)現(xiàn)探究性和發(fā)現(xiàn)式學(xué)習(xí)，為學(xué)生發(fā)散性思維、創(chuàng)造性思維的發(fā)展和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)提供了廣闊的空間和便利的條件。 

1 現(xiàn)代密碼學(xué)課程特點(diǎn)分析 

⑴ 學(xué)科面廣，知識(shí)點(diǎn)多 

現(xiàn)代密碼學(xué)是一門(mén)交叉學(xué)科，涵蓋內(nèi)容廣泛，涉及到數(shù)學(xué)、情報(bào)學(xué)、圖象學(xué)、計(jì)算機(jī)、通信、物理、生物等多個(gè)學(xué)科[4-5]?，F(xiàn)代密碼學(xué)的理論基礎(chǔ)是計(jì)算數(shù)論、抽象代數(shù)、概率論等基礎(chǔ)學(xué)科，是數(shù)學(xué)理論知識(shí)在信息學(xué)科中的應(yīng)用。同時(shí)，現(xiàn)代密碼學(xué)又與計(jì)算機(jī)和通信學(xué)科緊密相聯(lián)，用于保證信息在計(jì)算機(jī)和通信中的安全性。另外，現(xiàn)代密碼學(xué)領(lǐng)域的一些新興技術(shù)又與圖形學(xué)、生物學(xué)等學(xué)科密切相關(guān)，比如數(shù)字水印是對(duì)圖象、視頻等載體信息的數(shù)據(jù)格式進(jìn)行處理，DNA密碼利用生物技術(shù)對(duì)DNA分子進(jìn)行計(jì)算研究。如何恰當(dāng)?shù)鼐幣艑W(xué)科知識(shí)內(nèi)容學(xué)習(xí)，又能合理地貫穿這些知識(shí)點(diǎn)是現(xiàn)代密碼學(xué)課程需要考慮的問(wèn)題之一。 

⑵ 教材內(nèi)容陳舊，教學(xué)內(nèi)容不夠前沿 

目前大多數(shù)現(xiàn)代密碼學(xué)教材理論知識(shí)都采用經(jīng)典算法，如DES、AES、RSA、MD5等比較有代表性的算法。雖然這些算法對(duì)學(xué)生了解相關(guān)密碼體制有著巨大的幫助，但無(wú)法使學(xué)生了解到最新的研究成果。比如公鑰密碼體制，通常書(shū)中對(duì)RSA、ELGamal、橢圓曲線(xiàn)、背包密碼等經(jīng)典算法有詳細(xì)的算法描述和安全性分析，而對(duì)于基于身份的密碼體制、基于屬性的密碼體制這些新的研究熱點(diǎn)，卻很少有教材介紹，即使有，也是簡(jiǎn)單介紹其概念和原理，缺少具體對(duì)算法的研究。學(xué)生無(wú)法從書(shū)中了解到前沿知識(shí)，學(xué)到的知識(shí)永遠(yuǎn)落后于實(shí)際應(yīng)用中的技術(shù)，容易產(chǎn)生所學(xué)知識(shí)無(wú)用的想法。 

⑶ 實(shí)踐性強(qiáng)，教學(xué)模式單一 

現(xiàn)代密碼學(xué)是一門(mén)實(shí)踐性很強(qiáng)的課程，但是大多數(shù)院校安排課時(shí)是以理論課時(shí)為主，實(shí)踐課時(shí)較少。以本校為例，現(xiàn)代密碼學(xué)理論課時(shí)40個(gè)學(xué)時(shí)，實(shí)踐課程僅有8學(xué)時(shí)。學(xué)生缺乏自己動(dòng)手實(shí)踐的機(jī)會(huì)，普遍反映學(xué)習(xí)算法時(shí)比較吃力，比如RSA，DES，AES，ELGamal等算法原理在課堂上都能聽(tīng)懂，但真正上機(jī)編寫(xiě)卻無(wú)從下手，在實(shí)際中不知如何應(yīng)用。 

因此，針對(duì)現(xiàn)代密碼學(xué)的課程特點(diǎn)，以任務(wù)驅(qū)動(dòng)引導(dǎo)學(xué)生自主探究學(xué)習(xí)，強(qiáng)調(diào)學(xué)生的主體作用，有助于提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。把理論與實(shí)踐課程相結(jié)合，注重實(shí)踐環(huán)節(jié)，加強(qiáng)學(xué)生實(shí)踐能力的培養(yǎng)，可以讓學(xué)生更好地了解所學(xué)內(nèi)容的實(shí)用價(jià)值。培養(yǎng)學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)、獨(dú)立思考以及團(tuán)隊(duì)合作的能力，從而提高教學(xué)質(zhì)量。

   2 教學(xué)內(nèi)容任務(wù)設(shè)計(jì) 

現(xiàn)代密碼學(xué)包括古典密碼、序列密碼、分組密碼、公鑰密碼、雜湊函數(shù)、數(shù)字簽名及密鑰管理等基礎(chǔ)內(nèi)容，涉及內(nèi)容比較多。將現(xiàn)代密碼學(xué)整個(gè)知識(shí)結(jié)構(gòu)理清，認(rèn)清各個(gè)章節(jié)的內(nèi)在聯(lián)系，將大大提高效率。整體上以理論教學(xué)為引導(dǎo)，注重任務(wù)和實(shí)踐，將知識(shí)設(shè)計(jì)在一個(gè)或幾個(gè)任務(wù)之中，并且各個(gè)任務(wù)之間能有一定的聯(lián)系，幫助學(xué)生理清整體知識(shí)結(jié)構(gòu)。基于任務(wù)驅(qū)動(dòng)的教學(xué)模式目標(biāo)在于充分體現(xiàn)“教師主導(dǎo)作用，學(xué)生主體作用”的教學(xué)理念，引導(dǎo)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題。 

任務(wù)設(shè)計(jì)是實(shí)踐性教學(xué)關(guān)鍵的一步，每一節(jié)課都應(yīng)該提前思考并設(shè)計(jì)好教什么、怎么教，通過(guò)什么樣的方式調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，設(shè)計(jì)什么樣的任務(wù)培養(yǎng)學(xué)生的邏輯思維能力等等。任務(wù)設(shè)計(jì)難度不能過(guò)大，使學(xué)生無(wú)法完成，也不能設(shè)計(jì)過(guò)于簡(jiǎn)單，無(wú)法達(dá)到教學(xué)目標(biāo)。因此，任務(wù)設(shè)計(jì)時(shí)不但要依據(jù)教學(xué)目標(biāo)，還需要滿(mǎn)足學(xué)生的層次需求，更重要的是，任務(wù)要具有趣味性、知識(shí)性、實(shí)用性、挑戰(zhàn)性。①趣味性。該特性主要是借助Flash、視頻、PPT等多媒體引發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，如任務(wù)一通過(guò)網(wǎng)購(gòu)安全、手機(jī)隱私安全等問(wèn)題作為切入點(diǎn)，使學(xué)生了解現(xiàn)代密碼學(xué)與信息安全的關(guān)系，掌握現(xiàn)代密碼學(xué)課程的內(nèi)容，突出學(xué)習(xí)密碼學(xué)知識(shí)的必要性和重要性。②知識(shí)性。任務(wù)設(shè)計(jì)時(shí)要符合教學(xué)目標(biāo)要求，能夠?qū)⑿枰獙W(xué)生掌握的知識(shí)涵蓋在任務(wù)中。通過(guò)任務(wù)，學(xué)生不但加深了對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解，而且更加清楚不同算法的優(yōu)缺點(diǎn)及其之間的聯(lián)系。③實(shí)用性。通過(guò)將任務(wù)與理論相結(jié)合，通過(guò)將理論知識(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)榻鉀Q實(shí)際應(yīng)用中的問(wèn)題，使學(xué)生能夠運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)和自己的經(jīng)驗(yàn)提出解決方案，激發(fā)學(xué)生積極的學(xué)習(xí)態(tài)度，培養(yǎng)學(xué)生解決問(wèn)題的能力。④挑戰(zhàn)性。每個(gè)班級(jí)中的學(xué)生學(xué)習(xí)程度都是有層次的，設(shè)計(jì)任務(wù)時(shí)應(yīng)該考慮不同程度的學(xué)生，給每個(gè)學(xué)生多種選擇。對(duì)一些學(xué)有余力的學(xué)生，可設(shè)計(jì)具有挑戰(zhàn)性的任務(wù)，充分挖掘此類(lèi)學(xué)生的潛力。 

3 基于任務(wù)驅(qū)動(dòng)的教學(xué)方法實(shí)施 

教學(xué)內(nèi)容實(shí)施過(guò)程中，重在發(fā)揮學(xué)生的主體作用，通過(guò)啟發(fā)引導(dǎo)、自主探究、協(xié)作交流、總結(jié)提高等具體的實(shí)施，提高學(xué)生自主學(xué)習(xí)能力。 

啟發(fā)引導(dǎo)。課堂內(nèi)容與任務(wù)確定后，需要教師對(duì)任務(wù)場(chǎng)景進(jìn)行分析，向?qū)W生提出若干啟發(fā)性的問(wèn)題，引導(dǎo)學(xué)生深入思考，使學(xué)生快速找到問(wèn)題的切入點(diǎn)，對(duì)問(wèn)題進(jìn)行分解、自主分析，提出解決方案。這個(gè)環(huán)節(jié)，教師的角色由傳統(tǒng)的“授”轉(zhuǎn)變?yōu)椤耙保枰處熥骱贸浞值臏?zhǔn)備工作，摸清楚學(xué)生的學(xué)習(xí)狀態(tài)、認(rèn)知能力、興趣愛(ài)好等基本特點(diǎn)，以學(xué)生積極接受的方式引導(dǎo)學(xué)生。 

自主探究。該環(huán)節(jié)是基于任務(wù)驅(qū)動(dòng)教學(xué)模式的重要環(huán)節(jié)，教師僅僅負(fù)責(zé)提供資料，由學(xué)生自主探討、解決訪問(wèn)的方法，學(xué)生可以利用網(wǎng)絡(luò)獲取最新、最豐富的教育資源，結(jié)合Sakai網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)中教學(xué)內(nèi)容、多媒體教學(xué)課件、圖片集、教學(xué)視頻、學(xué)生作品等教學(xué)資源，將收集到的資料整理、消化、吸收、轉(zhuǎn)化為自己的東西，找出完成任務(wù)的最佳解決方案。該環(huán)節(jié)有助于增強(qiáng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)意識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生的主動(dòng)創(chuàng)新精神，挖掘?qū)W生的挑戰(zhàn)能力。 

協(xié)作交流。經(jīng)過(guò)自主探究學(xué)習(xí)后，協(xié)作交流可以作為學(xué)生思路交流、成果分享、觀點(diǎn)碰撞的平臺(tái)，學(xué)生之間相互交流自己的解決方案，通過(guò)互相補(bǔ)充與優(yōu)化，進(jìn)一步促進(jìn)學(xué)習(xí)與合作。教師在此環(huán)節(jié)要做好組織引導(dǎo)工作，避免學(xué)生因爭(zhēng)論激烈而偏離主體，對(duì)一些疑難問(wèn)題，適當(dāng)?shù)慕o予引導(dǎo)，以免學(xué)生進(jìn)入死胡同。該環(huán)節(jié)重點(diǎn)在于培養(yǎng)學(xué)生溝通交流、思維發(fā)散、團(tuán)隊(duì)合作能力，提升學(xué)生全面素質(zhì)。 

總結(jié)提高。任務(wù)驅(qū)動(dòng)的教學(xué)模式最后一個(gè)環(huán)節(jié)就是總結(jié)提高。首先，教師需要引導(dǎo)學(xué)生對(duì)任務(wù)進(jìn)行總結(jié)，對(duì)學(xué)習(xí)過(guò)程中遇到的問(wèn)題與解決方法進(jìn)行總結(jié)，對(duì)學(xué)習(xí)成果進(jìn)行歸納，完成學(xué)習(xí)研究報(bào)告。其次，以小組或個(gè)人的形式讓學(xué)生對(duì)學(xué)習(xí)報(bào)告進(jìn)行陳述，引導(dǎo)學(xué)生分享自己的成果，欣賞他人的成果，學(xué)會(huì)反思與總結(jié)自己成果的優(yōu)點(diǎn)與不足。最后，教師需要對(duì)所有學(xué)生的任務(wù)完成情況進(jìn)行總結(jié)，對(duì)一些共性的問(wèn)題給予指導(dǎo)和點(diǎn)評(píng)。此環(huán)節(jié)重點(diǎn)在于激發(fā)學(xué)生獲得進(jìn)一步探究的興趣與愿望，獲取更深層次的學(xué)習(xí)體驗(yàn)。 

4 課程考核方式改革 

傳統(tǒng)的課程考核方式通常是試卷，忽視了學(xué)生學(xué)習(xí)的過(guò)程。基于任務(wù)驅(qū)動(dòng)的考核方式可以多元化，通過(guò)理論考試、實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)、過(guò)程考核等方式，考察學(xué)生對(duì)整門(mén)課程的掌握程度。這種多元化的評(píng)價(jià)模式，避免了片面的以學(xué)習(xí)結(jié)果評(píng)價(jià)學(xué)生的能力，全方位的考察學(xué)生整體水平，促進(jìn)學(xué)生整體素質(zhì)的提高。 

理論考試，重點(diǎn)考察學(xué)生對(duì)課堂上的理論知識(shí)點(diǎn)掌握情況，包括密碼算法的基本原理、應(yīng)用等。實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)，是對(duì)學(xué)生完成任務(wù)的情況進(jìn)行評(píng)價(jià)，考慮是否按規(guī)定獨(dú)立完成或者團(tuán)隊(duì)合作完成、是否提交研究報(bào)告等因素進(jìn)行評(píng)價(jià)。過(guò)程考核，是對(duì)學(xué)生在整個(gè)教學(xué)活動(dòng)各個(gè)環(huán)節(jié)的表現(xiàn)給予評(píng)價(jià)，比如能否積極的思考并提出問(wèn)題，能否自主地搜索資料，能否創(chuàng)新的解決問(wèn)題，團(tuán)隊(duì)合作中所表現(xiàn)出來(lái)的協(xié)作能力，表達(dá)能力，執(zhí)行能力等等。 

5 總結(jié) 

現(xiàn)代密碼學(xué)是一門(mén)理論與實(shí)踐并重的多學(xué)科交叉的課程，其實(shí)踐教學(xué)涉及領(lǐng)域較廣，要求也相對(duì)較高?，F(xiàn)代密碼學(xué)課程教學(xué)模式的改革，將對(duì)信息安全發(fā)展、課程建設(shè)及人才培養(yǎng)產(chǎn)生積極意義。本文主要從教學(xué)內(nèi)容設(shè)計(jì)、教學(xué)方法實(shí)施和考核評(píng)價(jià)三部分著手，結(jié)合現(xiàn)代密碼學(xué)的課程特點(diǎn)，探索基于任務(wù)驅(qū)動(dòng)的教學(xué)模式?；谌蝿?wù)驅(qū)動(dòng)的教學(xué)模式在密碼學(xué)課程實(shí)踐中取得了良好的效果，提高了學(xué)生自主探究學(xué)習(xí)的能力，拓寬了學(xué)生的專(zhuān)業(yè)視野，提升了學(xué)生的創(chuàng)新能力。希望這一教學(xué)模式的改革能對(duì)同行有借鑒作用。 

參考文獻(xiàn)（References）： 

[1] 杜紅樂(lè)，張燕，辛建軍.計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)實(shí)踐課研究性教學(xué)的探討 

與實(shí)踐[J].微型電腦應(yīng)用，2014.30（10）：32-34 

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教學(xué)改革[J].計(jì)算機(jī)教育，2014.13：39-43 

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探討[J].計(jì)算機(jī)教育，2013.15：57-60 

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氣電子教學(xué)學(xué)報(bào)，2013.35（6）：63-65 

篇5

【 關(guān)鍵詞 】 口令；對(duì)稱(chēng)密鑰；雙向；身份認(rèn)證

【 中圖分類(lèi)號(hào) 】 TN

【 Abstract 】 This paper proposes a two-way identity authentication scheme based on the password and symmetric key system.Under the assumption that communication on both sides for electronic wallet client and electronic wallet server application environment，using symmetric key algorithm implements mutual authentication between the two sides of communication、the session key exchange and user anonymity.Finally， the solution of the security and performance were analyzed.

【 Keywords 】 password；symmetric key；two-way；the identity authentication

1 引言

由于移動(dòng)網(wǎng)絡(luò)的快速發(fā)展，越來(lái)越多的人們開(kāi)始使用手機(jī)等移動(dòng)終端設(shè)備上網(wǎng)，各種電子服務(wù)與電子交易發(fā)展也十分迅速。而遠(yuǎn)程用戶(hù)要獲得遠(yuǎn)程服務(wù)器的服務(wù)或者進(jìn)行電子交易，用戶(hù)與服務(wù)器之間在開(kāi)放的網(wǎng)絡(luò)中確認(rèn)雙方的身份是十分重要的。為了讓人們更加安全地在網(wǎng)絡(luò)上進(jìn)行交易，基于網(wǎng)絡(luò)的安全問(wèn)題已經(jīng)成為信息社會(huì)急需解決的問(wèn)題之一。項(xiàng)金萍提出的基于口令的兩方認(rèn)證和密鑰交換協(xié)議的研究，實(shí)現(xiàn)了用戶(hù)和遠(yuǎn)程系統(tǒng)的相互認(rèn)證，但是因?yàn)椴捎昧酥悄芸ê妥x卡器，并不適合應(yīng)用于手機(jī)等移動(dòng)設(shè)備。楊a涵提出的可證安全的口令認(rèn)證密鑰交換協(xié)議研究，因?yàn)椴捎昧斯€算法，對(duì)移動(dòng)終端的資源需求較大。萬(wàn)泓伶提出的基于口令的認(rèn)證系統(tǒng)設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)，運(yùn)用了計(jì)算量較大的模運(yùn)算。林遠(yuǎn)輝提出的基于口令的三方認(rèn)證密鑰交換協(xié)議研究，采用了開(kāi)銷(xiāo)較大的公鑰算法。由徐會(huì)艷提出的基于口令的身份認(rèn)證方案的研究，運(yùn)用了開(kāi)銷(xiāo)較大的簽名運(yùn)算。李曉偉提出的可證明安全的認(rèn)證與密鑰協(xié)商協(xié)議研究，也采用了開(kāi)銷(xiāo)較大的公鑰算法。本文提出的身份認(rèn)證方案，因?yàn)椴捎昧藢?duì)稱(chēng)密鑰算法，對(duì)系統(tǒng)資源需求較低，適合應(yīng)用于手機(jī)設(shè)備等移動(dòng)終端環(huán)境。

2 方案設(shè)計(jì)

2.1 用戶(hù)注冊(cè)

用戶(hù)A設(shè)定使用電子錢(qián)包的賬戶(hù)名IDA和口令pwA。服務(wù)器將一個(gè)共享的對(duì)稱(chēng)密鑰kA和對(duì)應(yīng)IDA的匿名標(biāo)識(shí)snA存入到客戶(hù)A的電子錢(qián)包客戶(hù)端中，服務(wù)器保存了snA與IDA及h（pwA）的映射關(guān)系，用戶(hù)A下載并安裝電子錢(qián)包客戶(hù)端，用戶(hù)不能訪問(wèn)存儲(chǔ)kA和snA的區(qū)域。

2.2 認(rèn)證流程

方案的具體認(rèn)證流程如圖1所示。

（1）用戶(hù)輸入用戶(hù)名IDA和口令pwA登陸電子錢(qián)包客戶(hù)端。

（2）客戶(hù)端選取隨機(jī)數(shù)r1并作存儲(chǔ)，用對(duì)稱(chēng)密鑰kA加密r1 || IDA為E（r1 || IDA），把E（r1 || IDA），snA打包為MA發(fā)送至服務(wù)器。

（3）服務(wù)器收到MA后，檢測(cè)snA是否存在于數(shù)據(jù)庫(kù)，若存在則查找對(duì)應(yīng)的IDA，否則拒絕認(rèn)證。通過(guò)snA查找到對(duì)應(yīng)IDA的共享對(duì)稱(chēng)密鑰kA，用對(duì)稱(chēng)密鑰kA解密E（r1 || IDA）得到r1 || IDA，存儲(chǔ)r1。服務(wù)器選取隨機(jī)數(shù)r2、會(huì)話(huà)密鑰k'并作存儲(chǔ)，用對(duì)稱(chēng)密鑰kA加密IDS || k' || r1 為E（IDS || k' || r1），把E（IDS || k' || r1），r2打包為MS發(fā)送至客戶(hù)端。

（4）客戶(hù)端收到MS后，用對(duì)稱(chēng)密鑰kA解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，比較解密得到的隨機(jī)數(shù)r1'與客戶(hù)端已存儲(chǔ)的r1是否相同，相同則存儲(chǔ)會(huì)話(huà)密鑰k'和隨機(jī)數(shù)r2，否則拒絕認(rèn)證?？蛻?hù)端用會(huì)話(huà)密鑰k'加密r2 || h（pwA）為M0，然后發(fā)送M0至服務(wù)器。

（5）服務(wù)器收到M0后，用會(huì)話(huà)密鑰k'解密M0得到r2 || h（pwA），比較解密得到的隨機(jī)數(shù)r2'、h（pwA）'與服務(wù)器端已存儲(chǔ)的r2、h（pwA）是否相同，相同則認(rèn)證成功，否則拒絕認(rèn)證。認(rèn)證成功后，服務(wù)器更新snA為sn'A。用會(huì)話(huà)密鑰k'加密IDS || sn'A為M1，然后發(fā)送M1至客戶(hù)端。

（6）客戶(hù)端收到M1后，用會(huì)話(huà)密鑰k'解密M1得到IDS || sn'A，存儲(chǔ)匿名標(biāo)識(shí)sn'A，用作下一次用戶(hù)的登錄認(rèn)證。

3 安全性和性能分析

3.1 方案的安全性

性質(zhì)1：認(rèn)證方案可以實(shí)現(xiàn)會(huì)話(huà)密鑰的安全交換。

證明：步驟（3）中服務(wù)器通過(guò)匿名標(biāo)識(shí)snA查找到對(duì)應(yīng)IDA的共享對(duì)稱(chēng)密鑰KA，從而解密了E（r1 || IDA），確認(rèn)了消息MA的真實(shí)性以及用戶(hù)的真實(shí)身份IDA。服務(wù)器選取會(huì)話(huà)密鑰k'，用對(duì)稱(chēng)密鑰KA加密IDS || k' || r1為E（IDS || k' || r1）傳輸至客戶(hù)端，保證了會(huì)話(huà)密鑰k'的安全傳輸。步驟（4）中客戶(hù)端用對(duì)稱(chēng)密鑰KA解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，通過(guò)比較解密得到的隨機(jī)數(shù)r'1與客戶(hù)端已存儲(chǔ)的r1是否相同，從而確認(rèn)了消息MS以及隨機(jī)數(shù)r1的真實(shí)性，客戶(hù)端存儲(chǔ)會(huì)話(huà)密鑰k'，因此會(huì)話(huà)密鑰的安全交換得以實(shí)現(xiàn)。

性質(zhì)2：認(rèn)證方案可以保證用戶(hù)與服務(wù)器之間的可認(rèn)證性。

證明：步驟（3）中服務(wù)器通過(guò)匿名標(biāo)識(shí)snA查找到對(duì)應(yīng)的IDA共享對(duì)稱(chēng)密鑰kA，解密E（r1 || IDA）得到r1 || IDA，通過(guò)比較解密得到的ID'A與服務(wù)器已存儲(chǔ)的IDA是否相同，從而確認(rèn)了用戶(hù)身份的真實(shí)性，用戶(hù)身份得以認(rèn)證。步驟（4）中客戶(hù)端用對(duì)稱(chēng)密鑰kA解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，通過(guò)比較解密得到的隨機(jī)數(shù)r'1與客戶(hù)端已存儲(chǔ)的r1是否相同，從而確認(rèn)了消息MS以及隨機(jī)數(shù)r1的真實(shí)性，服務(wù)器身份得以認(rèn)證。步驟（5）中服務(wù)器用會(huì)話(huà)密鑰k'解密M0得到r2 || h（pwA），通過(guò)比較解密得到的隨機(jī)數(shù)r'2 、h（pwA）'與服務(wù)器端已存儲(chǔ)的r2 、h（pwA）是否相同，實(shí)現(xiàn)了用戶(hù)口令的認(rèn)證，因此用戶(hù)與服務(wù)器之間的可認(rèn)證性得以保證。

性質(zhì)3：認(rèn)證方案可以保證用戶(hù)的匿名性。

證明：步驟（2）中客戶(hù)端通過(guò)匿名標(biāo)識(shí)snA隱藏用戶(hù)的真實(shí)身份IDA，snA僅在用戶(hù)向服務(wù)器發(fā)起認(rèn)證的消息MA中。步驟（3）中服務(wù)器發(fā)給用戶(hù)的應(yīng)答是含有隨機(jī)數(shù)r1的消息MS，除用戶(hù)本人外，任何人都不知道該報(bào)文是發(fā)給誰(shuí)的，保證了用戶(hù)身份的機(jī)密性。步驟（5）中用戶(hù)與服務(wù)器認(rèn)證成功后，服務(wù)器更新snA為sn'A，因此有效地保證了用戶(hù)的匿名性。

3.2 性能分析

3.2.1 客戶(hù)端

計(jì)算開(kāi)銷(xiāo)：用H代表一次hash計(jì)算，E代表一次對(duì)稱(chēng)加密計(jì)算，D代表一次對(duì)稱(chēng)解密計(jì)算，用λ代表hash函數(shù)輸出的位長(zhǎng)。

步驟（2）中客戶(hù)端用對(duì)稱(chēng)密鑰kΑ加密r1 || IDA為E（r1 || IDA），需要一次對(duì)稱(chēng)加密計(jì)算，步驟（4）中客戶(hù)端用對(duì)稱(chēng)密鑰kΑ解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，需要一次對(duì)稱(chēng)解密計(jì)算，用會(huì)話(huà)密鑰k'加密r2 || h（pwA）為M0，需要一次對(duì)稱(chēng)加密計(jì)算和一次hash計(jì)算，步驟（6）中客戶(hù)端用會(huì)話(huà)密鑰k'解密M1得到IDS || sn'A，需要一次對(duì)稱(chēng)解密計(jì)算，客戶(hù)端的計(jì)算開(kāi)銷(xiāo)總計(jì)為H+2E+2D。

步驟（2）中客戶(hù)端發(fā)送消息MΑ至服務(wù)器、步驟（4）中客戶(hù)端收到消息MS、發(fā)送消息M0至服務(wù)器、步驟（6）中客戶(hù)端收到消息M1需要的通信開(kāi)銷(xiāo)大致為2| r1 | + | IDA | + | snA | + 2| IDS | + | k' | + 2| r2 | + | λ | + | sn'A | 。

| r1 | 、 | IDA | 、 | snA |、| IDS | 、 | k' |、| r2 |、 | sn'A |分別代表 r1 、 IDA 、 snA 、IDS 、 k' 、 r2 、sn'A 的標(biāo)準(zhǔn)位長(zhǎng)。

3.2.2 服務(wù)器

步驟（3）中服務(wù)器用對(duì)稱(chēng)密鑰kΑ解密E（r1 || IDA）得到r1 || IDA，需要一次對(duì)稱(chēng)解密計(jì)算，用對(duì)稱(chēng)密鑰kΑ加密IDS || k' || r1為E（IDS || k' || r1），需要一次對(duì)稱(chēng)加密計(jì)算，步驟（5）中服務(wù)器用會(huì)話(huà)密鑰k'解密M0得到r2 || h（pwA），需要一次對(duì)稱(chēng)解密計(jì)算，用會(huì)話(huà)密鑰k'加密IDS || sn'A為M1，需要一次對(duì)稱(chēng)加密計(jì)算，服務(wù)器的計(jì)算開(kāi)銷(xiāo)總計(jì)為2E+2D。

步驟（3）中服務(wù)器收到消息MA、發(fā)送消息MS至客戶(hù)端、步驟（5）中服務(wù)器收到消息M0、發(fā)送消息M1至客戶(hù)端需要的通信開(kāi)銷(xiāo)大致為2| r1 | + | IDA | + | snA | + 2| IDS | + | k' | + 2| r2 | + | λ | + | sn'A |。

4 結(jié)束語(yǔ)

本文通過(guò)運(yùn)用口令和對(duì)稱(chēng)密鑰算法，實(shí)現(xiàn)了客戶(hù)端和服務(wù)器的雙向身份認(rèn)證，不僅完成了會(huì)話(huà)密鑰的安全交換，而且也保證了用戶(hù)的匿名性，用戶(hù)的隱私得到了有效保護(hù)。在安全性得到保障的同時(shí)，也獲得了較好的性能。

參考文獻(xiàn)

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[6] 李曉偉.可證明安全的認(rèn)證與密鑰協(xié)商協(xié)議研究[D].西安電子科技大學(xué)，2013.

基金項(xiàng)目：

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（61472343）。

作者簡(jiǎn)介：

李純（1992-），男，漢族，江蘇徐州人，揚(yáng)州大學(xué)信息工程學(xué)院，碩士，研究生；主要研究方向和關(guān)注領(lǐng)域：信息安全。

篇6

1國(guó)內(nèi)文秘專(zhuān)業(yè)建設(shè)現(xiàn)狀分析與規(guī)律探索

1.1國(guó)內(nèi)文秘專(zhuān)業(yè)建設(shè)現(xiàn)狀分析

從總體來(lái)說(shuō)，目前國(guó)內(nèi)的文秘專(zhuān)業(yè)特色不明顯。這主要表現(xiàn)在下列幾個(gè)方面：

第一、培養(yǎng)目標(biāo)雷同。目前，國(guó)內(nèi)有上百所院校開(kāi)辦了文秘專(zhuān)業(yè)，大多是將文秘專(zhuān)業(yè)人才的培養(yǎng)目標(biāo)定位于從事辦公室事務(wù)、為領(lǐng)導(dǎo)決策服務(wù)的人才。若說(shuō)有不同，有的秘書(shū)專(zhuān)業(yè)強(qiáng)化了英語(yǔ)教學(xué)，注重涉外秘書(shū)人才的培養(yǎng)。

第二，崗位定位相似。大多數(shù)秘書(shū)專(zhuān)業(yè)定位于各種行業(yè)從事行政秘書(shū)、涉外商務(wù)秘書(shū)、文書(shū)處理員、接待員、資料管理員、檔案管理員等崗位的工作。

第三，課程體系差別不太。由于培養(yǎng)目標(biāo)和崗位定位的相似，導(dǎo)致課程體系趨同。專(zhuān)業(yè)技能課程主要為秘書(shū)技能模塊，計(jì)算機(jī)操作模塊和商務(wù)模塊，涉外秘書(shū)專(zhuān)業(yè)會(huì)有英語(yǔ)技能模塊。

由于上述關(guān)鍵因素沒(méi)有明顯的秘書(shū)專(zhuān)業(yè)特色，文秘專(zhuān)業(yè)至今沒(méi)有國(guó)家示范建設(shè)專(zhuān)業(yè)，省級(jí)示范建設(shè)專(zhuān)業(yè)也屈指可數(shù)。同時(shí)由于缺乏特色，在許多地區(qū)秘書(shū)專(zhuān)業(yè)學(xué)生就業(yè)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)性困難。

為什么文秘專(zhuān)業(yè)難以辦出應(yīng)有特色呢?通過(guò)分析主要有下列幾方面的原因：

第一，對(duì)文秘專(zhuān)業(yè)的研究不夠深入。從78年南開(kāi)大學(xué)首次開(kāi)辦秘書(shū)專(zhuān)業(yè)以來(lái)，在相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)文秘專(zhuān)業(yè)主要培養(yǎng)行政單位寫(xiě)作型秘書(shū)，后來(lái)隨著我國(guó)政治經(jīng)濟(jì)改革的深入，行政機(jī)關(guān)對(duì)秘書(shū)人員的需求不斷減少，而企業(yè)、團(tuán)體對(duì)文秘人才的需求不斷增加，為了適應(yīng)這種變法，許多院校的文秘專(zhuān)業(yè)進(jìn)行了自我改造，即從培養(yǎng)以寫(xiě)作能力為核心的體系，轉(zhuǎn)到培養(yǎng)以會(huì)議組織、接待等實(shí)務(wù)和辦公自動(dòng)化能力為核心的體系上，當(dāng)新體系建立后，文秘專(zhuān)業(yè)如何繼續(xù)適應(yīng)社會(huì)經(jīng)濟(jì)對(duì)文秘人才的變化，沒(méi)有作進(jìn)一步的探索。這就導(dǎo)致了文秘專(zhuān)業(yè)定位和課程體系相似。

第二，文秘職業(yè)的需求特點(diǎn)導(dǎo)致形成自己特色比較困難。文秘職業(yè)需求具有分散性，一個(gè)單位即使需要也往往只是一兩個(gè)，不像有些專(zhuān)業(yè)的職業(yè)需求是批量的。職業(yè)的分散性導(dǎo)致文秘專(zhuān)業(yè)在人才培養(yǎng)規(guī)格上求全求大，就業(yè)崗位定位于所有行業(yè)的秘書(shū)崗位，課程體系以訓(xùn)練秘書(shū)崗位共性的能力為主，因此專(zhuān)業(yè)特色很難形成。

第三，文秘教師的現(xiàn)狀在一定程度影響文秘專(zhuān)業(yè)特色的形成。目前從事文秘教學(xué)的教師多是由原來(lái)教語(yǔ)文或中文的教師轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)的，大多數(shù)教師沒(méi)有實(shí)際秘書(shū)工作經(jīng)驗(yàn)，對(duì)秘書(shū)崗位要求不熟悉，加上目前對(duì)秘書(shū)教師的培訓(xùn)機(jī)會(huì)很少，秘書(shū)專(zhuān)業(yè)的不“專(zhuān)業(yè)”，在一定程度上導(dǎo)致文秘專(zhuān)業(yè)難出彩。

1.2專(zhuān)業(yè)特色形成規(guī)律探索

專(zhuān)業(yè)沒(méi)有特色就沒(méi)有生存空間，沒(méi)有生存空間的專(zhuān)業(yè)就沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)的優(yōu)勢(shì)，而沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的專(zhuān)業(yè)就不能得到發(fā)展。促進(jìn)專(zhuān)業(yè)特色的形成，已經(jīng)成為許多高職院校專(zhuān)業(yè)獲得生存和發(fā)展的重要戰(zhàn)略手段。

通過(guò)研究那些專(zhuān)業(yè)特色明顯的案例，我們發(fā)現(xiàn)，一個(gè)專(zhuān)業(yè)的特色形成應(yīng)遵循下列規(guī)律：

①專(zhuān)業(yè)建設(shè)與地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展趨勢(shì)相一致。

專(zhuān)業(yè)建設(shè)方向首先要面向地方經(jīng)濟(jì)，為地方經(jīng)濟(jì)服務(wù)。因此，一個(gè)特色專(zhuān)業(yè)的建設(shè)必須與當(dāng)?shù)氐纳鐣?huì)背景、產(chǎn)業(yè)背景、職業(yè)崗位背景及其發(fā)展趨勢(shì)密切聯(lián)系在一起，專(zhuān)業(yè)建設(shè)只有把握住這種需求特點(diǎn)和變化趨勢(shì)，有針對(duì)性地培養(yǎng)人才，才能實(shí)現(xiàn)專(zhuān)業(yè)和社會(huì)發(fā)展的雙贏。落實(shí)在專(zhuān)業(yè)建設(shè)具體實(shí)施過(guò)程中，就是要對(duì)專(zhuān)業(yè)的培養(yǎng)方向、培養(yǎng)目標(biāo)和培養(yǎng)模式靈活把握，隨著社會(huì)需求的狀況和變化確定自己的專(zhuān)業(yè)方向、特色和定位。比如深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院，由于深圳的物業(yè)管理一直走在全國(guó)前面，該學(xué)院隨之設(shè)立了樓宇設(shè)備與智能化技術(shù)、制冷空調(diào)、建筑工程、城市環(huán)境工程、城市園林等物業(yè)管理專(zhuān)業(yè)群。再比如，伴隨著深圳建設(shè)花園城市的步伐和深圳花卉園林業(yè)的發(fā)展，該學(xué)院開(kāi)設(shè)了城市園林專(zhuān)業(yè)，等等。這些專(zhuān)業(yè)(群)之所以能形成特色，無(wú)不是圍繞深圳的社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展來(lái)建設(shè)的。

②專(zhuān)業(yè)建設(shè)與學(xué)院專(zhuān)業(yè)的整體發(fā)展規(guī)劃與布局相一致。

一個(gè)專(zhuān)業(yè)要辦出特色，需要整合院內(nèi)資源，在一個(gè)學(xué)院總資源有限的情況下，如果專(zhuān)業(yè)建設(shè)不與學(xué)院專(zhuān)業(yè)的整體發(fā)展規(guī)劃和布局相一致，不與本校的辦學(xué)方向和學(xué)院特色相適應(yīng)，就很爭(zhēng)取到更多資源。因此，專(zhuān)業(yè)建設(shè)的執(zhí)行者要研究本院辦學(xué)特色，把握本院特色專(zhuān)業(yè)建設(shè)的戰(zhàn)略方針、總體目標(biāo)，然后結(jié)合自身特點(diǎn)將專(zhuān)業(yè)辦出特色。比如北大方正軟件技術(shù)學(xué)院，本身是一所主要培養(yǎng)IT人才的學(xué)院，它的文秘專(zhuān)業(yè)也圍繞學(xué)院特色進(jìn)行專(zhuān)業(yè)建設(shè)，目前已經(jīng)成功地形成了信息化商務(wù)文秘的特色。

③專(zhuān)業(yè)特色的形成需要相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境和時(shí)間的沉淀

“冰凍三尺，非一日之寒”。一個(gè)專(zhuān)業(yè)要形成自己的特色，需要相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境，需要一定的時(shí)間進(jìn)行科學(xué)研究，進(jìn)行教學(xué)經(jīng)驗(yàn)交流與總結(jié)。同時(shí)，保持專(zhuān)業(yè)相對(duì)穩(wěn)定性，也有助于師資隊(duì)伍建設(shè)和教學(xué)資源的積累。比如湖南城建職業(yè)技術(shù)學(xué)院有11個(gè)特色專(zhuān)業(yè)、湖南民政職業(yè)學(xué)院的文秘專(zhuān)業(yè)殯儀專(zhuān)業(yè)都是經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間積累與建設(shè)而成的。

④專(zhuān)業(yè)特色的形成要充分發(fā)揮自身的優(yōu)勢(shì)

一個(gè)特色專(zhuān)業(yè)的形成是專(zhuān)業(yè)長(zhǎng)期發(fā)揮自身優(yōu)勢(shì)的結(jié)果。比如廣東科學(xué)技術(shù)職業(yè)學(xué)院文秘專(zhuān)業(yè)之所以能建出特色，與它長(zhǎng)期重視發(fā)揮自身優(yōu)勢(shì)密切聯(lián)系。該院文秘專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)帶頭人楊文豐是一位作家，同時(shí)擔(dān)任該學(xué)院人文分院的領(lǐng)導(dǎo)，因此文秘專(zhuān)業(yè)中應(yīng)用寫(xiě)作課程得到很好的發(fā)展，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的積累與建設(shè)，該院的文秘專(zhuān)業(yè)寫(xiě)作教學(xué)獲得了多項(xiàng)國(guó)家與省級(jí)的教學(xué)獎(jiǎng)，同時(shí)也促成了專(zhuān)業(yè)特色的形成。

1.3關(guān)于我院文秘專(zhuān)業(yè)形成特色思考

品牌就是特色，如何將我院文秘專(zhuān)業(yè)建設(shè)成特色專(zhuān)業(yè)，我們認(rèn)為，文秘專(zhuān)業(yè)要辦出特色必須抓住深港合作機(jī)遇，結(jié)合我院的信息特點(diǎn)，通過(guò)提升現(xiàn)有的優(yōu)勢(shì)讓本院文秘專(zhuān)業(yè)形成自身特點(diǎn)。

1.3.1關(guān)于我院文秘專(zhuān)業(yè)人才培養(yǎng)規(guī)格的定位

專(zhuān)業(yè)定位是專(zhuān)業(yè)建設(shè)的核心問(wèn)題，也是專(zhuān)業(yè)形成特色的關(guān)鍵。依據(jù)專(zhuān)業(yè)形成特色的規(guī)律，專(zhuān)業(yè)定位必須立足于地方經(jīng)濟(jì)，為地方經(jīng)濟(jì)服務(wù)，同時(shí)注重專(zhuān)業(yè)的前瞻性。因此我們課題組認(rèn)為，我院文秘專(zhuān)業(yè)應(yīng)立足于為深圳經(jīng)濟(jì)發(fā)展服務(wù)。

1.3.2為培養(yǎng)熟悉深港企業(yè)業(yè)務(wù)運(yùn)作的秘書(shū)人才所具有的條件和優(yōu)勢(shì)

篇7

【關(guān)鍵詞】 黑色素瘤抗原；發(fā)酵；大腸桿菌

【Abstract】 AIM: To realize high celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 engineered E.coli，and to evaluate the antitumor immunity of MAGE3/HSP70 fusion protein in vivo. METHODS: High celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 enginered E. coli was carried out with constant soluble oxygen and continuous cultivation in selfcontrol fermentor. The mouse was immunized by purified MAGE3/HSP70 fusion protein in E.coli， and the antitumor immunity was detected by ELISPOT and LDH release assay. RESULTS: High celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 engineered E.coli was successful， and the expression of MAGE3/HSP70 in fermented bacterial was the same as the flask culture. The results of ELISPOT and LDH release assay showed that MAGE3/HSP70 generated tumor specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) to damage tumor cel1. CONCLUSION: High celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 engineered E.coli was realized and MAGE3/HSP70 fusion protein can generate specific CTL to kill tumor cel1.

【Keywords】 Melanoma antigen; fermentation; E.coli

【摘要】 目的：實(shí)現(xiàn)重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌的高密度發(fā)酵，并測(cè)定MAGE3/HSP70融合蛋白在體內(nèi)的抗腫瘤免疫效應(yīng). 方法：利用自控發(fā)酵罐發(fā)酵，采用溶氧反饋，分批補(bǔ)料的方法對(duì)MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌進(jìn)行了高密度發(fā)酵，從菌體中純化MAGE3/HSP70融合蛋白，并用所純化的MAGE3/HSP70融合蛋白免疫小鼠，運(yùn)用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法(ELISPOT)和細(xì)胞毒性殺傷實(shí)驗(yàn)(LDH)檢測(cè)了融合蛋白激活機(jī)體細(xì)胞免疫反應(yīng)的狀況. 結(jié)果：高密度發(fā)酵取得成功，發(fā)酵菌中MAGE3/HSP70融合蛋白的表達(dá)量與搖瓶中的相當(dāng)，摸索出發(fā)酵水平純化MAGE3/HSP70融合蛋白工藝，ELISPOT和LDH顯示MAGE3/HSP70可以激活機(jī)體免疫反應(yīng)，并產(chǎn)生針對(duì)MAGE3的CTL，特異性殺傷表達(dá)MAGE3的腫瘤細(xì)胞. 結(jié)論：MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌成功實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)酵，MAGE3/HSP70融合蛋白可以有效激活機(jī)體免疫反應(yīng)，產(chǎn)生針對(duì)特異性抗原MAGE3的CTL，免疫學(xué)活性良好，為新型抗腫瘤疫苗臨床前研究奠定了良好基礎(chǔ).

【關(guān)鍵詞】 黑色素瘤抗原；發(fā)酵；大腸桿菌

0引言

黑色素瘤抗原（melanoma antigenassosiated gene，MAGE）是第一類(lèi)被發(fā)現(xiàn)的腫瘤排斥抗原［1-2］，MAGE3是MAGE家族成員之一，不僅在黑色素瘤表達(dá)，同時(shí)在其它多種腫瘤中均有不同程度的表達(dá)，能夠誘導(dǎo)機(jī)體特異性的CTL反應(yīng)，更重要的是在除和胎盤(pán)外的正常組織中均不表達(dá)，人們認(rèn)為它是腫瘤特異性免疫治療理想的靶分子之一［3-4］. 重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺篫L03134626.X)是我室研制和開(kāi)發(fā)的一種新型腫瘤疫苗［5］，它對(duì)肝癌、胃癌、乳腺癌等常見(jiàn)惡性腫瘤具有良好的治療效果和預(yù)防效果，在腫瘤的治療方面具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值［6］. 本研究目的是實(shí)現(xiàn)重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌的高密度發(fā)酵，并用從發(fā)酵菌中純化的目的蛋白，測(cè)定其在體內(nèi)的抗腫瘤免疫效應(yīng)，為通過(guò)動(dòng)物腫瘤模型研究MAGE3/HSP70融合蛋白在腫瘤免疫治療中的作用奠定基礎(chǔ).

1材料和方法

1.1材料含MAGE3/HSP70基因的重組表達(dá)質(zhì)粒pET28a／MAGE3HSP70由本室構(gòu)建，宿主菌BL21（DE3）本室保存. NBS Bioflo Ⅳ20L自動(dòng)發(fā)酵罐(NBS公司)；J6B型大容量冷凍離心機(jī)(Beckman公司)；微量蛋白電泳儀(BioRad公司)；KTA explorer 100層析系統(tǒng)(Amersham Pharmacia Biotech公司);實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心引進(jìn)繁殖的4～6 wk齡二級(jí)C57BL/6小鼠40只，體質(zhì)量18～20 g，均為雌性，在SPF級(jí)飼養(yǎng)條件下進(jìn)行試驗(yàn). 轉(zhuǎn)MAGE3基因的小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16MAGE3由本實(shí)驗(yàn)室馬家海博士構(gòu)建，MAGE3蛋白和HSP70蛋白由本實(shí)驗(yàn)室馬家海博士提取并鑒定. 小鼠IFNγ ELISPOT系統(tǒng)(法國(guó)Diaclone公司); Cytotox96檢測(cè)試劑盒(Promega公司); Ficoll淋巴細(xì)胞分離液(Sigma公司); 蛋白胨、酵母抽提物(Oxoid公司); SOURCE 30Q及Sephacryl S200HR (Pharmacia公司); IPTG (Sigma公司); 抗MAGE3多克隆抗體(R&D公司);其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?

主要溶液的配制①種子液：1000 mL種子液中含蛋白胨16 g，酵母提取物10 g，甘油20 mL，NaCl 5 g，用5 mol／L NaOH將pH值調(diào)至7.0；②發(fā)酵液：每升發(fā)酵液中含有蛋白胨20 g，酵母抽提物9 g，甘油5 mL，十二水磷酸氫二鈉6 g，磷酸二氫鉀1.5 g，硫酸銨1.5 g，氯化銨1 g，七水合硫酸鎂0.25 g，氯化鈣0.02 g，硫酸亞鐵0.04 g，甘氨酸0.5 g. 每升補(bǔ)料基質(zhì)含有：甘油120 mL，蛋白胨80 g，酵母抽提物40 g，七水合硫酸鎂5 g.

1.2方法

1.2.1種子培養(yǎng)取-70℃，100 g/L甘油保存的pETHM/BL21(DE3)菌種1支，從中挑取1環(huán)，劃含卡那霉素(Kan)的LB平板，37℃培養(yǎng)過(guò)夜，次日挑取一個(gè)邊緣整齊、生長(zhǎng)良好的單菌落接種到10 mL LB培養(yǎng)基中(含35 mg/L Kan)，37℃振蕩培養(yǎng)12 h，以50 g/L接種量轉(zhuǎn)接1次，37℃繼續(xù)培養(yǎng)4 h左右，使其生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，以1%接種量轉(zhuǎn)接至200 mL種子液中，37℃振蕩培養(yǎng)過(guò)夜.

1.2.2發(fā)酵采用20 L NBS Bioflo IV自控發(fā)酵罐，發(fā)酵總體積12 L (0.6 L種子液，0.74 L發(fā)酵液，1.2 L緩沖液，9.48 L H2O)，含Kan (35 mg／L). 以AFSBioCommand Bioprocessing Software(Version 2.61)軟件對(duì)其進(jìn)行數(shù)據(jù)采集(每30 s采集數(shù)據(jù)1次)，實(shí)現(xiàn)計(jì)算機(jī)在線(xiàn)控制，全過(guò)程共10 h. 控制參數(shù)為：①空氣流量設(shè)定為12 L/min，溶氧控制在40%，達(dá)到最大轉(zhuǎn)速后，通入純氧；②溫度控制為37℃；③pH值設(shè)定為7.0，自動(dòng)流加濃氨水以保持恒定；④攪拌速度：設(shè)定攪拌速度下限為200 r/mim，上限為1200 r/min. 生長(zhǎng)過(guò)程中當(dāng)溶氧低于設(shè)定值時(shí)通過(guò)計(jì)算機(jī)由AFSBioCom mand Bioprocessing Software(Version 2.61)軟件控制每分鐘增長(zhǎng)5轉(zhuǎn). 誘導(dǎo)過(guò)后，攪拌速度改為由NBS Bioflo IV發(fā)酵罐自動(dòng)溶氧反饋控制. ⑤補(bǔ)料流加：在生長(zhǎng)階段，當(dāng)溶氧率在3 min內(nèi)持續(xù)高于60％時(shí)補(bǔ)料泵以5％的速率進(jìn)行補(bǔ)加營(yíng)養(yǎng). 誘導(dǎo)階段當(dāng)溶氧值在3 min內(nèi)持續(xù)高于50％時(shí)補(bǔ)料泵以100％的速率進(jìn)行補(bǔ)加營(yíng)養(yǎng)1 min. 每1 h取樣測(cè)定A600 nm值，當(dāng)培養(yǎng)至A600 nm=12時(shí)IPTG誘導(dǎo)目的蛋白表達(dá)，誘導(dǎo)4 h后收集菌體，取小量進(jìn)行SDSPAGE檢測(cè)蛋白表達(dá)水平，其余菌體保存于-70℃用于純化目的蛋白.

1.2.3目的蛋白的純化4℃離心收菌，3 mL/g菌體重懸于Lysis Buffer（50 mmol／L NaH2PO4，300 mmol／L NaCl，10 mmol／L imidazole，pH 8.0)；加入溶菌酶至終濃度為10 g/L，冰浴30 min；超聲裂解，功率2 kW，超聲10 s，間隔10 s，共30 min；12 000 g，4℃離心15 min，取上清，0.45 μm針頭濾器過(guò)濾；上NiNTA Superflow柱， Wash Buffer(50 mmol／L NaH2PO4， 300 mmol／L NaCl， 20 mmol／L imidazole， pH 8.0)沖洗后Elution Buffer(50 mmol／L NaH2PO4， 300 mmol／L NaCl， 250 mmol／L imidazole， pH 8.0)；洗脫，收集洗脫峰；SDSPAGE分析；以50倍體積的A液(20 mmol／L Tris?HCl， pH 8.0)透析24 h，中間換3次透析外液，透析后上清過(guò)用A液充分平衡的SOURCE 30Q柱，用B液(20 mmol／L Tris?HCl， 0.5 mol／L NaCl， pH 9.0)連續(xù)梯度洗脫4～5個(gè)柱床體積，收集洗脫峰，SDSPAGE分析；收集目的蛋白峰，以50倍體積的C液(20 mmol／L Tris?HCl， pH 7.4)透析24 h，中間換3次透析外液，透析后上清過(guò)用D液（137 mmol／L NaCl， 1.4 mmol／L KH2PO4， 1.7 mmol／L KCl， 4.3 mmol／L Na2HPO4?12H2O，pH 7.4）液充分平衡的Sephacryl S200HR柱，收集洗脫峰；SDSPAGE及Western Blot鑒定. Bradford法測(cè)定蛋白的含量，凍干，-70℃保存.

1.2.4動(dòng)物免疫和小鼠脾淋巴細(xì)胞的分離與活化C57BL/6小鼠30只，隨機(jī)分為5組，每組6只，各組分別于第1，10，20日腹腔注射蛋白免疫，MAGE3組注射MAGE3蛋白3.2 μg（200 pmol）；HSP70組注射HSP70蛋白15.8 μg（200 pmol）；MAGE3/HSP70組注射融合蛋白18.6 μg（200 pmol）；HSP70＋MAGE3組注射HSP70蛋白7.9 μg（100 pmol）和MAGE3蛋白1.6 μg（100 pmol），對(duì)照組注射PBS，100 μL/(只?次). 末次免疫后10 d，小鼠球后動(dòng)脈取血，斷頸處死，無(wú)菌取脾臟，毛玻璃片輕輕捻碎脾臟，10號(hào)針頭輕輕吹吸數(shù)次，用Ficoll淋巴細(xì)胞分離液分離淋巴細(xì)胞. 計(jì)數(shù)后，用AIMV培養(yǎng)液培養(yǎng)1 d后用于后續(xù)試驗(yàn).

1.2.5MAGE3特異性T細(xì)胞的檢測(cè)采用IFNγ ELISPOT方法： 依照法國(guó)DIACLONE公司ELISPOT檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明，用稀釋好的捕獲抗體（Capture Antibody）100 μL/孔包被PVDF板， 4℃靜置16 h. 20 g/L脫脂乳PBS室溫封閉2 h，加入PBS，MAGE3，HSP70，MAGE3/HSP70和MAGE3＋HSP70免疫小鼠得到的脾細(xì)胞細(xì)胞1×104個(gè)/孔，同時(shí)加入轉(zhuǎn)MAGE3基因的小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16MAGE3細(xì)胞5×104個(gè)/孔，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，50 mL/L CO2納胞培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)20 h. 用PBS充分沖洗后加入檢測(cè)抗體（Detection Antibody），于37℃孵育2 h，洗板，再加入堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉親和素，同上孵育洗板，加入底物顯色液. 避光顯色20 min，1200 dpi掃描讀取斑數(shù)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析.

1.2.6LDH釋放法測(cè)定細(xì)胞殺傷效率方法參照文獻(xiàn)［5］，主要步驟如下：以PBS，MAGE3，HSP70，MAGE3/HSP70和MAGE3＋HSP70免疫小鼠得到的脾細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞，以MAGE3基因的小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16MAGE3細(xì)胞為靶細(xì)胞，以小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16為對(duì)照，進(jìn)行體外殺傷實(shí)驗(yàn). 靶細(xì)胞濃度為1×104個(gè)/孔，效靶比分別為5∶1，10∶1和50∶1，37℃共育4 h，離心后，每孔吸取50 μL上清液進(jìn)行LDH檢測(cè). 實(shí)驗(yàn)同時(shí)設(shè)立效應(yīng)細(xì)胞自發(fā)釋放孔，靶細(xì)胞自發(fā)釋放孔，靶細(xì)胞最大釋放孔和培養(yǎng)液背景孔. 每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，用AIMV無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌重懸細(xì)胞，所有檢測(cè)孔所測(cè)得吸光度值減去培養(yǎng)液背景即為實(shí)際值. 按下公式計(jì)算：殺傷率=(實(shí)驗(yàn)組A-效應(yīng)細(xì)胞自發(fā)A-靶細(xì)胞自發(fā)A)/ (靶細(xì)胞最大A-靶細(xì)胞自發(fā)A)×100％.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：統(tǒng)計(jì)資料均采用x±s表示，分析采用JMP統(tǒng)計(jì)軟件（V5.0.1.2SAS Institute Inc.）進(jìn)行，組間比較采用方差分析處理，P

2結(jié)果

2.1工程菌的發(fā)酵為了獲取足量的菌體進(jìn)行研究，我們對(duì)工程菌進(jìn)行了高密度發(fā)酵. 用溶氧反饋、分批補(bǔ)料的方法，采用20 L NBS Bioflo IV發(fā)酵罐進(jìn)行高密度發(fā)酵. 接入種子液時(shí)菌體密度為A600 nm=0.01，6 h后達(dá)A600 nm=12.8. 200 μmoL/L IPTG誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白， 于誘導(dǎo)后4 h終止發(fā)酵， 發(fā)酵結(jié)束時(shí)A600 nm=48.2， 每升發(fā)酵液收濕菌70 g， 發(fā)酵曲線(xiàn)如圖1.

圖1pETMH/BL21(DE3)工程菌的發(fā)酵曲線(xiàn)（略）

2.2MAGE3/HSP70融合蛋白的表達(dá)及純化結(jié)果顯示，在誘導(dǎo)4 h后，發(fā)酵菌體的重組蛋白表達(dá)量同搖瓶培養(yǎng)表達(dá)水平相當(dāng)(圖2A). 發(fā)酵菌體裂解后取上清，經(jīng)過(guò)NiNTA Superflow，SOURCE 30Q及Sephacryl S200HR純化后，純度可達(dá)90％以上(圖2A). Western Blot結(jié)果顯示，純化后的目的蛋白能夠與抗人MAGE3多克隆抗體特異性結(jié)合(圖2B).

AM: 低分子質(zhì)量蛋白標(biāo)準(zhǔn);

1: 未誘導(dǎo)pETMH/BL21(DE3);

2: 搖瓶IPTG誘導(dǎo)pETMH/BL21(DE3);

3: 發(fā)酵罐IPTG誘導(dǎo)pETMH/BL21(DE3);

4: 純化MAGE3/HSP70融合蛋白. B1: 低分子質(zhì)量蛋白標(biāo)準(zhǔn);

2: 未誘導(dǎo)pETMH/BL21(DE3);

3: 純化MAGE3/HSP70融合蛋白;

4: 發(fā)酵罐IPTG誘導(dǎo)pETMH/BL21(DE3).

圖2MAGE3/HSP70的原核表達(dá)與分離純化（A）及Western Blot（B）結(jié)果（略）

2.3體外腫瘤免疫學(xué)試驗(yàn)

2.3.1ELISPOT檢測(cè)分泌IFNγ的MAGE3特異性T細(xì)胞數(shù)量與PBS組比較，HSP70組、MAGE3+HSP70組小鼠脾淋巴細(xì)胞中分泌IFNγ的T淋巴細(xì)胞頻數(shù)沒(méi)有明顯變化，MAGE3組和MAGE3/HSP70組頻數(shù)顯著增加（P

2.3.2細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)采用LDH釋放實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，效靶比為5∶1，10∶1和50∶1時(shí)，HSP70組及PBS組誘導(dǎo)的CTL對(duì)B16MAGE3細(xì)胞無(wú)特異性殺傷作用；MAGE3組、MAGE3+HSP70 和MAGE3/HSP70組特異性殺傷作用顯著增強(qiáng)，而且MAGE3/HSP70組特異性殺傷作用顯著大于MAGE3組、MAGE3＋HSP70組（P

bP

圖3ELISPOT檢測(cè)蛋白疫苗免疫小鼠分泌IFNγ的T淋巴細(xì)胞頻數(shù)（n=5， x±s）（略）

bP

圖4蛋白疫苗免疫的小鼠脾淋巴細(xì)胞對(duì)B16MAGE3細(xì)胞的特異性殺傷（n=5， x±s）（略）

3討論

腫瘤免疫治療在預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及治療微小殘留腫瘤病灶等方面有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，是腫瘤綜合治療的重要組成部分. 腫瘤免疫治療的分子基礎(chǔ)是腫瘤抗原可以激活機(jī)體特異性CTL殺傷腫瘤細(xì)胞. 黑色素瘤抗原(MAGE)是一種腫瘤特異性抗原，是腫瘤特異性免疫治療理想的靶分子［1-2］. 其中MAGE3可以激活機(jī)體的細(xì)胞免疫系統(tǒng)，活化CTL特異性地識(shí)別并殺傷表達(dá)MAGE3的腫瘤細(xì)胞［3-4］. 重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白是我室研制和開(kāi)發(fā)的一種新型腫瘤疫苗［5］，實(shí)驗(yàn)表明，它對(duì)肝癌、胃癌、乳腺癌等常見(jiàn)惡性腫瘤具有良好的治療效果和預(yù)防效果，在腫瘤的治療方面具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值［6］. 作為廣譜抗腫瘤藥物的研究，其用量較大，為了得到大量的重組MAGE3/HSP70蛋白，就需要大量的誘導(dǎo)表達(dá)MAGE3/HSP70蛋白的基因重組菌體，而高密度發(fā)酵是獲取大量基因重組菌體重要策略之一［7］.

基因工程菌的兩階段培養(yǎng)法是基因工程的一大進(jìn)步，它是通過(guò)合適的誘導(dǎo)條件將工程菌的發(fā)酵過(guò)程分為菌體生長(zhǎng)與產(chǎn)物表達(dá)兩階段，為了增加基因產(chǎn)品的時(shí)控產(chǎn)率，不僅需要提高工程菌的表達(dá)水平，同時(shí)必需增高菌體增殖密度［8-9］. 對(duì)于通過(guò)化學(xué)誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白的工程菌，誘導(dǎo)時(shí)機(jī)和誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)菌體的生長(zhǎng)密度和比生產(chǎn)率有較大影響. 在細(xì)菌的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期誘導(dǎo)比早期和后期誘導(dǎo)產(chǎn)率高，而且只有工程菌處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)時(shí)期，目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平才最高，一旦工程菌進(jìn)入穩(wěn)定生長(zhǎng)期，目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平迅速下降，可能與菌體內(nèi)的酶體系有關(guān). 在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期菌體內(nèi)的各種酶體系代謝旺盛，尤其是轉(zhuǎn)錄、翻譯酶體系很活躍，而進(jìn)入穩(wěn)定生長(zhǎng)期后，該酶體系活性減弱或代謝速度減慢，只能勉強(qiáng)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而引起細(xì)菌生長(zhǎng)狀態(tài)下降，表達(dá)外源基因的能力也隨之降低［10-11］， 所以應(yīng)在對(duì)數(shù)中期進(jìn)行誘導(dǎo). MAGE3/HSP70工程菌活化6 h，A600 nm為12.3時(shí)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中，此時(shí)進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)，收菌量與目標(biāo)蛋白的表達(dá)量都達(dá)到較高水平. 研究雖然對(duì)MAGE3/HSP70工程菌進(jìn)行成功的發(fā)酵，但是收菌量還有待進(jìn)一步提高，發(fā)酵條件還要進(jìn)一步優(yōu)化，以達(dá)到中試生產(chǎn)的要求. 在下步純化過(guò)程工作中我們一方面要提高M(jìn)AGE3/HSP70蛋白的可溶性表達(dá)，另外還要摸索包涵體的復(fù)性條件，以期提高蛋白的最后得率.

為了進(jìn)一步明確發(fā)酵表達(dá)并純化的MAGE3/HSP70在體內(nèi)的抗腫瘤免疫活性，我們利用檢測(cè)細(xì)胞免疫反應(yīng)的通用方法，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法(ELISPOT)和細(xì)胞毒性殺傷實(shí)驗(yàn)(LDH)檢測(cè)了MAGE3/HSP70激活機(jī)體免疫反應(yīng)的情況. 結(jié)果發(fā)現(xiàn)用MAGE3/HSP70免疫小鼠，刺激機(jī)體產(chǎn)生分泌IFNγ的T淋巴細(xì)胞頻數(shù)顯著高于PBS組，HSP70組，MAGE3+HSP70組以及MAGE3組. 同時(shí)LDH殺傷實(shí)驗(yàn)表明MAGE3/HSP70可以激活機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性CTL殺傷表達(dá)MAGE3的腫瘤細(xì)胞，且顯著高于其他各組，而對(duì)不表達(dá)特異性抗原的細(xì)胞沒(méi)有殺傷作用. 說(shuō)明MAGE3/HSP70在制備過(guò)程中保持了藥物的性能. 本實(shí)驗(yàn)為MAGE3/HSP70的進(jìn)一步應(yīng)用奠定了基礎(chǔ).

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篇8

對(duì)于一流高校理科專(zhuān)業(yè)的學(xué)生來(lái)說(shuō)，在本專(zhuān)業(yè)繼續(xù)深造是比較保險(xiǎn)的出路，也是大多數(shù)人的選擇，除此之外的舉動(dòng)，例如工作、轉(zhuǎn)系等等，都被視為冒險(xiǎn)項(xiàng)目。

與李杰的清閑相比，在上海，4歲孩子的父母?jìng)兠β灯饋?lái)，5月和6月是幼兒園報(bào)名的高峰期，一些名牌幼兒園的名額早早就會(huì)被一搶而空，為了能在9月開(kāi)學(xué)時(shí)給孩子尋找一條“金色起跑線(xiàn)”，家長(zhǎng)必須提前數(shù)月打聽(tīng)情報(bào)、盡早在網(wǎng)上登記，“通路子”、找關(guān)系，有的家庭一家六口悉數(shù)出馬，清早起床分赴不同幼兒園拿號(hào)排隊(duì)，以便能讓孩子在多家幼兒園得到“面試”機(jī)會(huì)。“和高考填志愿一樣。”有家長(zhǎng)在幼兒論壇的擇園版抱怨，他們心力交瘁，同時(shí)也暗自擔(dān)憂(yōu)，如果從4歲起就如此疲于奔命。那未來(lái)的十幾年學(xué)習(xí)生涯，甚至畢業(yè)后孩子的工作出路，都像是一副枷鎖，牢牢束縛住他們的生活和希望。

“名牌大學(xué)”VS“理想的大學(xué)”

威爾?肖茨是世界上唯一一個(gè)擁有“謎語(yǔ)學(xué)’學(xué)位的人，1974年，他進(jìn)入印第安納大學(xué)學(xué)習(xí)，該大學(xué)有一條規(guī)定――本科生可以自行設(shè)計(jì)學(xué)位課程，專(zhuān)業(yè)方向不限，只需要滿(mǎn)足基礎(chǔ)課及學(xué)分要求。這在很多高校是想都不敢想的規(guī)定，可是給了威爾一個(gè)機(jī)會(huì)，這個(gè)喜歡猜謎的年輕學(xué)生試著提交了一份謎語(yǔ)學(xué)學(xué)位課程計(jì)劃。教授們雖然吃驚，最終還是批準(zhǔn)了，于是他讀完自己設(shè)計(jì)的謎語(yǔ)學(xué)課程，提交西方謎語(yǔ)史論文，隨后考取弗吉尼亞大學(xué)法學(xué)院，三年后放棄考律師(美國(guó)律師的吃香程度相當(dāng)于如今中國(guó)的公務(wù)員)，進(jìn)了一家雜志社編寫(xiě)字謎。

如今，威爾的“成功業(yè)績(jī)”包括《紐約時(shí)報(bào)》的縱橫填空字謎和NPR周日字謎節(jié)目；家藏兩萬(wàn)種古今謎語(yǔ)文獻(xiàn)，包括十六世紀(jì)珍本；還創(chuàng)辦了全美字謎大賽和萬(wàn)國(guó)謎語(yǔ)錦標(biāo)賽，擔(dān)任世界各地的謎語(yǔ)賽事的主席、評(píng)委或特邀顧問(wèn)。

作家馮象在《理想的大學(xué)》一文中寫(xiě)道：“我在威爾身上看到了理想的大學(xué)，那里，學(xué)生可以自由發(fā)展個(gè)性與才智，而不必套進(jìn)同樣的模子，試圖長(zhǎng)成或裝扮同樣的人材。千人一面，一個(gè)腦袋?！?/p>

李杰談?wù)撍麄儼嗄莻€(gè)“唯一去找工作的同學(xué)”時(shí)說(shuō)：“他是一個(gè)比較有想法的人。已經(jīng)直接保博了，可是想到未來(lái)5年都待在高校研究所里，而研究的項(xiàng)目又不一定是自己想做的，與其浪費(fèi)青春，不如干脆進(jìn)入社會(huì)鍛煉?！?/p>

1986年12月出生的李杰是江蘇前黃高級(jí)中學(xué)保送至清華的學(xué)生。當(dāng)年在那個(gè)省重點(diǎn)學(xué)校，他排名年級(jí)前五，父母對(duì)他報(bào)考化學(xué)系有意見(jiàn)，希望他讀一個(gè)例如計(jì)算機(jī)那樣的專(zhuān)業(yè)。“社會(huì)上所謂熱門(mén)專(zhuān)業(yè)，好找工作，都是錯(cuò)誤的。10年前計(jì)算機(jī)那么火，都去讀，現(xiàn)在畢業(yè)的學(xué)生不過(guò)也就是當(dāng)個(gè)底層IT人士罷了?！崩罱苜M(fèi)了一番口舌說(shuō)服文化程度不高的父母，他的父親后來(lái)覺(jué)得“學(xué)化學(xué)可以做藥，做化肥，人沒(méi)有計(jì)算機(jī)也能活，但生病了不吃藥不行”，便想通了。李杰認(rèn)為自己也算是對(duì)出路想得比較明白的人――這是他的愛(ài)好，他愿意在這條路上一直走下去，而他的很多同學(xué)是“隨大流”，既然大家都走這條路，也很保險(xiǎn)，那么就這樣吧。

去年從北大生物系畢業(yè)的吳玫選擇了一條截然不同的道路，她不盡然同意“保研―出國(guó)―直博”這一高校理科生的單一模式，畢業(yè)后當(dāng)了一年古琴老師。“我的同學(xué)都覺(jué)得我很奇怪?！彼┲鴣喡椴嫉囊路谇兖^過(guò)著彈琴、上課、喝茶這樣相對(duì)悠閑的日子，她的父母也希望她能夠繼續(xù)深造，或者回西安去找一份穩(wěn)定的工作，她現(xiàn)在需要給父母一個(gè)留在北京的理由，因此也考慮如何重新規(guī)劃人生。跳出現(xiàn)有體制總要經(jīng)歷陣痛，吳玫不否認(rèn)壓力很大，雖然覺(jué)得在琴館或許是一種逃避面對(duì)“模式化人生”的方式，可是她的眼神看上去頗為堅(jiān)定，并不為自己的決定感到后悔。

“成人”VS“成功人士”

過(guò)了22歲這個(gè)坎，李杰和吳玫結(jié)束必要的學(xué)業(yè)，做出了自己對(duì)人生的選擇，完成了沒(méi)有儀式的成人禮，進(jìn)入真正“成人’’階段，“自己對(duì)自己的決定負(fù)責(zé)”，他們都提到了同樣的一句話(huà)，然而卻離目前社會(huì)價(jià)值觀中“成人”的光環(huán)還很遠(yuǎn)。

李杰算了一筆賬，如果去國(guó)外讀博士，那么一年獎(jiǎng)學(xué)金就有2萬(wàn)2千美元至2萬(wàn)5千美元不等，通常開(kāi)銷(xiāo)1萬(wàn)至1萬(wàn)5肯定夠了，剩下的1萬(wàn)美元是“凈賺”，5年下來(lái)也有5萬(wàn)美元的積蓄，按照現(xiàn)在的匯率計(jì)算，相當(dāng)于30萬(wàn)人民幣左右，“等拿到博士學(xué)位回來(lái)，買(mǎi)一套房子的首付算是有了?！?/p>

那些指望孩子將來(lái)上名牌大學(xué)，賺大錢(qián)的父母恐怕要失望了，“成人”與“成功人士”之間不劃等號(hào)，22歲出國(guó)，讀完博士已經(jīng)29歲，該談婚論嫁了，“沒(méi)房沒(méi)車(chē)誰(shuí)要你々”李杰說(shuō)。而如今家長(zhǎng)的投入，光是屬于非義務(wù)制教育的學(xué)前教育，費(fèi)用已經(jīng)不成比例的高。根據(jù)上海市的一項(xiàng)統(tǒng)計(jì)，幼兒園有“六大費(fèi)用”是逃不了的：公辦幼兒園伙食費(fèi)4元／天；托管費(fèi)在公辦的示范幼兒園收費(fèi)1200元左右／月，一般中等私立幼兒園的托班管理費(fèi)是每月800多元，而收費(fèi)高的則在1200元以上，有臺(tái)、港地區(qū)投資背景的幼兒園一般是每月2000元，更有以美元收費(fèi)的，折合人民幣每月上萬(wàn)元；代辦費(fèi)用于幼兒園訂閱幼兒教育類(lèi)書(shū)籍、購(gòu)買(mǎi)文具用品和衛(wèi)生用品的支出，一般每學(xué)期收100至120元；中午睡覺(jué)要購(gòu)買(mǎi)的被褥費(fèi)80至400元左右，有些幼兒園還會(huì)要求購(gòu)買(mǎi)校服，置裝費(fèi)大多在200元以上；休閑活動(dòng)費(fèi)，根據(jù)活動(dòng)成本計(jì)算；特長(zhǎng)興趣班，這個(gè)收費(fèi)過(guò)雜，無(wú)法計(jì)算。此外不包括贊助費(fèi)。

問(wèn)題在于，李杰的同學(xué)中，他很少聽(tīng)說(shuō)有人上過(guò)課外補(bǔ)習(xí)班的，吳玫也如此。李杰的一個(gè)室友，初中二年級(jí)幾乎沒(méi)上過(guò)學(xué)，因?yàn)椤八铣跻粫r(shí)把初二和初三的教材都看了，說(shuō)很簡(jiǎn)單嘛，沒(méi)什么難的，他媽媽也管不了他，差點(diǎn)退學(xué)了?！笔聦?shí)上這名室友照樣輕松考上了清華。巧立名目的補(bǔ)習(xí)班，頓時(shí)成了一種悖論。

“好好學(xué)習(xí)”VS“好好做人”

2009年6月2日，教育部學(xué)生司副司長(zhǎng)姜鋼透露，今年高考報(bào)名人數(shù)約為1020萬(wàn)名，比去年約減少40萬(wàn)，將有84萬(wàn)應(yīng)屆畢業(yè)生不參考。幼教熱與高考“遇冷”形成可笑的反差。從4歲到22歲的成長(zhǎng)期，中國(guó)人承受著冰火兩重天的考驗(yàn)，這段時(shí)間里教育成為一個(gè)家庭唯一的重頭戲，中國(guó)青少年研究中心的調(diào)查顯示，54.7％的父母要求孩子讀到博士，83.6％要求孩子考試考前15名，2005年全國(guó)婦聯(lián)的一項(xiàng)調(diào)查顯示，母親對(duì)孩子說(shuō)得最多的一句話(huà)是，“好好學(xué)習(xí)”，排在其后的是“功課做了沒(méi)有”。中國(guó)青少年研究中心副主任孫云曉認(rèn)為，這樣容易造成“情感荒漠化”，即只將注意力集中在知識(shí)和技術(shù)等狹窄的領(lǐng)域，為實(shí)現(xiàn)個(gè)人目標(biāo)而很少考慮可能帶來(lái)的惡劣后果等。

篇9

摘要：實(shí)踐證明，只要學(xué)生有興趣識(shí)字，并且掌握一定的識(shí)字方法，再通過(guò)少寫(xiě)多認(rèn)多復(fù)現(xiàn)進(jìn)行鞏固，他們就可以輕松完成新《課標(biāo)》提出的識(shí)字要求，為閱讀奠定良好基礎(chǔ)。本文結(jié)合自己的教學(xué)實(shí)際，介紹了一些識(shí)字教學(xué)的方法，僅供參考。

關(guān)鍵詞：識(shí)字教學(xué)；拓寬渠道；激發(fā)興趣

《語(yǔ)文課程標(biāo)準(zhǔn)》指出：“語(yǔ)文是一門(mén)實(shí)踐性很強(qiáng)的課程，應(yīng)著重培養(yǎng)學(xué)生的語(yǔ)文實(shí)踐能力，而培養(yǎng)這種能力的主要途徑也應(yīng)是語(yǔ)文實(shí)踐?！弊R(shí)字寫(xiě)字是第一學(xué)段語(yǔ)文教學(xué)的重點(diǎn)，而要提高識(shí)字教學(xué)的效率，關(guān)鍵的因素還是培養(yǎng)學(xué)生的自主識(shí)字能力，這種能力的培養(yǎng)不是一蹴而就的，需要老師花很大的功夫，想很多的辦法。

一、幼兒園要努力為幼兒創(chuàng)設(shè)一個(gè)認(rèn)讀漢字的環(huán)境

首先，幼兒在一日活動(dòng)中，同樣也會(huì)碰到、看到各種東西。比如門(mén)窗、墻壁、桌椅、鋼琴、玩具……凡是能用漢字標(biāo)明的實(shí)物上都盡可能與漢字掛鉤，讓孩子們識(shí)物的同時(shí)就能見(jiàn)到與之對(duì)應(yīng)的漢字。讓幼兒在不知不覺(jué)中，自然而然地把圖像、聲音、語(yǔ)義、符號(hào)整合在一起，從而認(rèn)識(shí)漢字。其次，教師在與幼兒交往中，也要注意營(yíng)造一個(gè)認(rèn)讀漢字的環(huán)境?，F(xiàn)在，不少幼兒園實(shí)行了在胸前佩帶標(biāo)志的制度。這不但能標(biāo)明每個(gè)人的身份，而且具有教兒童識(shí)字的功能。我們只要把人名寫(xiě)入標(biāo)志，在幼兒與教師和小朋友的交往中，他們就能認(rèn)讀其上面的漢字。最后，教師通過(guò)組織幼兒開(kāi)展多種多樣的活動(dòng)，充分拓展他們識(shí)字的空間。也可以在區(qū)域活動(dòng)中，向幼兒提供字典、圖文并茂的圖書(shū)，各類(lèi)看圖識(shí)字卡片等，供幼兒自己去查找感興趣的文字。

二、拓寬識(shí)字渠道，鼓勵(lì)學(xué)生生活識(shí)字

生活是語(yǔ)文學(xué)習(xí)的最好資源，識(shí)字也不例外，學(xué)生學(xué)習(xí)漢語(yǔ)有別于學(xué)習(xí)其他語(yǔ)言，它具有母語(yǔ)學(xué)習(xí)的優(yōu)勢(shì)，因此我們必須充分發(fā)揮這一優(yōu)勢(shì)，鼓勵(lì)學(xué)生在生活中識(shí)字。放開(kāi)手，讓學(xué)生自主識(shí)字。孩子有孩子的年齡和心理特點(diǎn)，他們最知道自己喜歡什么樣的學(xué)習(xí)方式，最會(huì)尋找符合自己個(gè)性的學(xué)習(xí)識(shí)字的方法，而這些學(xué)習(xí)方式一旦被鼓勵(lì)和激發(fā)，就會(huì)變成孩子寶貴的學(xué)習(xí)資源，成為方法性的資源，而且這些資源不僅不會(huì)遺忘，而且會(huì)隨著時(shí)間的積累而越來(lái)越熟練和提高。

三、制作生字卡片是一種很好的學(xué)習(xí)識(shí)字的方式

學(xué)生自做的卡片雖然沒(méi)有買(mǎi)來(lái)的好看規(guī)范，但正是這些各具特色的卡片才體現(xiàn)了學(xué)生的個(gè)性，培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)造能力。它至少可以起到這樣一些作用：1、可以讓學(xué)生在預(yù)習(xí)課文時(shí)提前與生字見(jiàn)面，在課后做卡片則可以起到鞏固生字的作用，增加學(xué)生與生字見(jiàn)面的機(jī)會(huì)；2、在做卡片的過(guò)程中，可以抄寫(xiě)，可以剪貼，也可以配插圖，勾花邊，學(xué)生的動(dòng)手操作能力得到了很好的培養(yǎng)；3、好動(dòng)是孩子的天性，多樣化的活動(dòng)既符合孩子喜愛(ài)動(dòng)手的特點(diǎn)，又避免了單純抄寫(xiě)生字的枯燥和無(wú)聊，讓學(xué)生真實(shí)地感受到學(xué)習(xí)生字是一項(xiàng)愉悅的活動(dòng)，可以想象，這樣的家庭作業(yè)是受孩子喜愛(ài)的。4、人手一套的生字卡片便于學(xué)生在小組學(xué)習(xí)中合作學(xué)習(xí)。孩子們拿著自己的小卡片，可以自己拼讀，可以讓同伴欣賞，也可以當(dāng)小老師拿卡片來(lái)考考小組內(nèi)的同學(xué)?？梢?jiàn)，這小小的識(shí)字卡片真是為學(xué)生獨(dú)立識(shí)字能力的培養(yǎng)插上了翅膀。

四、從課中遵循規(guī)律識(shí)字

低年級(jí)學(xué)生的注意力保持時(shí)間短，每節(jié)課所學(xué)的字不多，指導(dǎo)學(xué)生小組合作學(xué)習(xí)生字，并在全班舊了交流識(shí)字方法，再當(dāng)堂采取多種方法復(fù)現(xiàn)，及時(shí)鞏固要求認(rèn)識(shí)的字。根據(jù)兒童“先快后慢”的遺忘規(guī)律，在識(shí)字教學(xué)課后兩三天內(nèi)進(jìn)行復(fù)習(xí)、鞏固尤為重要。我利用學(xué)生在合作中、游戲中、活動(dòng)中鞏固識(shí)字。我在生字教學(xué)中利用摘蘋(píng)果、走迷宮、找朋友、巧配對(duì)等游戲的方式在興趣盎然中加深印象。我鼓勵(lì)兒童自編句子、兒歌、謎語(yǔ)，鼓勵(lì)學(xué)生從身邊，從書(shū)報(bào)上找到剛識(shí)的字，在語(yǔ)言環(huán)境中及時(shí)鞏固識(shí)字，并和學(xué)生一起參與。例如，我教學(xué)“叢”字，順口說(shuō)了一個(gè)謎語(yǔ)：“兩人橋上走”，馬上就有學(xué)生說(shuō)出了“江”“照”“日”“田”等字的謎語(yǔ)，學(xué)生們根據(jù)謎語(yǔ)很快就記住了生字。我還鼓勵(lì)學(xué)生“異想天開(kāi)”，找一些不相關(guān)的字詞連成自認(rèn)為覺(jué)得有趣的一句話(huà)或一段話(huà)，這樣既鞏固了生字，同時(shí)又訓(xùn)練了學(xué)生的想象能力、思維能力和表達(dá)能力，學(xué)生們都很樂(lè)意做這樣的“發(fā)明創(chuàng)造”。每一課識(shí)字完畢，我還讓學(xué)生總結(jié)自己喜歡的識(shí)字方法，如：記部件、熟字加偏旁部首、熟字換偏旁部首、找形近字、找同音字、找相關(guān)字等等，學(xué)生們總會(huì)找到適合自己的識(shí)字方法。

五、引導(dǎo)學(xué)生發(fā)揮想象，激發(fā)識(shí)字興趣

開(kāi)始識(shí)字時(shí)，為了提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，我告訴小朋友：我們中國(guó)的漢字很奇妙，一個(gè)漢字可以是一首詩(shī)、一幅畫(huà)、一首兒歌、一個(gè)故事。小朋友聽(tīng)了便十分有興趣。開(kāi)始教生字時(shí)我有意識(shí)地把一些生字編成謎語(yǔ)，故事講給他們聽(tīng)。小朋友聽(tīng)了之后很感興趣，一下子就把生字記往了，之后，我便鼓勵(lì)他們自己來(lái)給生字編編謎語(yǔ)，講講故事。小朋友的情緒很高漲，有的小朋友編得謎語(yǔ)相當(dāng)出色，連老師都不曾想到，如“底”字，小朋友說(shuō)：“有個(gè)小不點(diǎn)來(lái)到廣場(chǎng)下買(mǎi)了一瓶樂(lè)百氏奶，‘底’字下面的一點(diǎn)代表小不點(diǎn)，不能漏掉?！钡诮虒W(xué)時(shí)應(yīng)適時(shí)點(diǎn)撥，引導(dǎo)，避免學(xué)生為了編個(gè)謎語(yǔ)，講個(gè)故事就硬性把字拆開(kāi)，強(qiáng)行把各部件編成沒(méi)有任何聯(lián)系的故事、謎語(yǔ)。

六、周期復(fù)現(xiàn)鞏固識(shí)字

篇10

“定位”這個(gè)詞是我們電視工作者經(jīng)常掛在嘴邊的一個(gè)詞?！岸ㄎ弧钡囊饬x在于以明確的方向、目標(biāo)給自己以與眾不同的個(gè)性形象，從而受到社會(huì)的承認(rèn)與關(guān)注。歸納起來(lái)，節(jié)目定位的依據(jù)大體有三個(gè)：一是根據(jù)受眾對(duì)象定位；二是根據(jù)節(jié)目?jī)?nèi)容定位；三是根據(jù)節(jié)目形式定位。任何一個(gè)電視節(jié)目要想辦出特色，受觀眾歡迎，定位的準(zhǔn)確與否是關(guān)鍵，兒童節(jié)目也不例外。

一、兒童節(jié)目定位的依據(jù)

電視節(jié)目的準(zhǔn)確定位取決于節(jié)目的基本屬性，兒童節(jié)目顧名思義是做給兒童看的節(jié)目。兒童節(jié)目定位的依據(jù)主要就是它的受眾對(duì)象即觀眾，在電視事業(yè)日益發(fā)展的今天，兒童電視節(jié)目應(yīng)該成為孩子們課余的伙伴，家庭的課堂，這一點(diǎn)已成為人們的共識(shí)。

二、兒童節(jié)目的定位與節(jié)目?jī)?nèi)容、形式的統(tǒng)一

對(duì)于兒童節(jié)目來(lái)說(shuō)，定位容易，但具體操作起來(lái)卻難，容易出現(xiàn)節(jié)目?jī)?nèi)容、形式與定位不相符的錯(cuò)位情況。兒童節(jié)目是做給孩子們看的，但做節(jié)目的卻多是成年人，制作者往往帶著成人的視角來(lái)想象兒童的喜怒哀樂(lè)和興趣點(diǎn)，把成年人的主觀思想強(qiáng)加給孩子。

為此，作為成年人的編導(dǎo)應(yīng)該做到：

1.學(xué)會(huì)尊重。這里的尊重包括兩方面內(nèi)容：一是指要尊重兒童成長(zhǎng)發(fā)展的客觀規(guī)律。兒童的年齡特點(diǎn)決定了他們心理發(fā)展的特征，所以?xún)和娨暪?jié)目制作者必須要根據(jù)兒童的心理特征和年齡特點(diǎn)來(lái)策劃節(jié)目；二是指要尊重兒童本身。兒童有自己獨(dú)特的情感世界，對(duì)外部世界有著獨(dú)特的感知能力，觀察問(wèn)題、思考問(wèn)題也有其獨(dú)特的視角和方法，我們要平等地對(duì)待他們，把他們當(dāng)做完整的、獨(dú)立的一個(gè)人，深入地感受他們真實(shí)而豐富的心靈。

2.學(xué)會(huì)溝通。學(xué)會(huì)溝通，就是要以它們的視角觀察世界，以它們的思維方式去思考問(wèn)題。要走進(jìn)他們的世界里，了解他們喜歡什么、討厭什么、關(guān)心什么、害怕什么，這樣他們才能接納你，把你當(dāng)成他們的朋友。在尊重兒童的基礎(chǔ)上，與他們進(jìn)行很好的溝通，孩子們就會(huì)很愿意把他們的心里話(huà)，把他們的喜好告訴我們，我們做出的節(jié)目也就能更加受到兒童的歡迎。