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黃芪為常用中藥，素有“補藥之長”之稱，具有益氣固表，利尿托毒等功效.黃芪藥用價值很高，臨床上常用來治療非特異性免疫功能低下、乙肝和心血管系統(tǒng)疾病.黃芪甲苷作為黃芪成分之一，它具有降壓、抗炎、穩(wěn)定紅細胞膜、提高血漿CAMP含量，促進小鼠再生肝DNA合成和增強免疫功能等多種作用.因此在研究黃芪過程中，我們對其成分黃芪甲苷進行了含量測定方法研究，本文用HPLC法測定黃芪甲苷的含量，其樣品濃度的范圍在0.01～0.2mg/ml之間與峰面積呈線性，該法靈敏度高，重現(xiàn)性好，可準確地測定黃芪甲苷的含量。

1儀器與試劑

Waters高效液相色譜儀：包括510型泵，991光電二極管陣列型檢測器，U6K型進樣器；NECPowerMate型計算機，黃芪甲苷標準品購自遼寧省藥品檢驗所。甲醇、正丁醇為分析純，乙腈為色譜純、水為去離子水。試驗用黃芪葉6月份采自沈陽醫(yī)學院草藥園。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱為NucleosilC18柱(4.6mm×250mm，5μm);流動相為乙腈-水＝1∶2；流速為0.8ml/min；檢測波長為205nm；速度為0.4mm/min。

2.2標準曲線制作精密稱取黃芪甲苷標準品2.128mg，加流動相定容至2ml，配制成1.064mg/ml的標準品溶液，分別以10、20、30、40、50μl進樣測定，以峰面積對進樣量作線性回歸，得回歸方程為Y＝－5.6×10-5＋6.9365×10-4X(Y為峰面積，X為黃芪甲苷量)，r＝0.9994，黃芪甲苷標準品在10.64～53.20μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.3提取方法的選擇用3種不同提取方法(索氏提取器提取1h；80℃溫浸提取1h和超聲波提取1h)提取樣品，后2種提取方法測得黃氏甲苷含量略低，故選索氏提取器提取方法。

2.4流動相的選擇實驗試用多種溶劑系統(tǒng)，最后確定以乙腈-水＝1∶2為流動相，黃芪甲苷分離效果最好，保留時間也較適宜。色譜圖見上圖2(ABC)。

2.5樣品液制備將黃芪葉陰干后研成粉過40目篩，然后精密稱取5.00g，放置索氏提取器中，用100ml80%甲醇加熱提取2h，提取液減壓蒸去甲醇，用20ml正丁醇分別萃取3次，合并正丁醇萃取部分，減壓蒸干，殘渣用重蒸甲醇定容至2ml，用0.45μ微孔濾膜過濾，濾液用于HPLC分析，每次進樣10μl。.6加樣回收率試驗稱取黃芪葉粉5.00g5份，分別精密加入黃芪甲苷標準品2.00mg，按樣品制備方法提取樣品并進行定量分析，將測定結(jié)果扣除樣品中黃芪甲苷含量，與加入標準品的比為加樣回收率。結(jié)果為96.1%(n＝5),RSD%=2.15(n=5)。

2.7精密度試驗取同一樣品液，重復進樣5次，根據(jù)測得的樣品中黃芪甲苷的濃度(μg/ml)計算其相對標準偏差為2.40%。又取同一樣品5份，制備5份樣品液，分別進樣測出黃芪甲苷的濃度，計算其相對標準偏差為4.20%。

2.8穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液，每隔2h進樣1次，分別測定其色譜峰面積。RSD%=2.2(n=5)，結(jié)果表明，譜峰面積在8h內(nèi)基本無變化，表明本實驗條件下穩(wěn)定性良好。

2.9黃芪葉中黃芪甲苷的定量分析：依法測定黃芪葉中黃芪甲苷的含量

3討論

黃芪甲苷是黃芪的主要有效成分之一，根上部分幾乎全部落入地面，成為肥料，為了有效的利用自然資源，我們?yōu)槎糠治鳇S芪葉黃芪甲苷的含量，本實驗建立了黃芪甲苷的HPLC測定法，測得黃芪葉中黃芪甲苷的含量為4.20%(干重)，與黃芪標準含量(1.50%)相差2.70%。實驗證明：黃芪葉中黃芪甲苷的含量非常高，人類應(yīng)該廣泛利用。本實驗建立的HPLC測定法加樣回收率高，精密度試驗相對標準偏差小，測試數(shù)據(jù)更可靠。

【摘要】目的建立一種準確、簡便測定黃芪甲苷含量的分析方法。方法色譜柱為NucleosilC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動相為乙腈-水＝1∶2；流速為0.8ml/min；檢測波長為205nm；速度為0.4mm/min。靈敏度為0.1AUFS,測定了黃芪甲苷的含量，平均回收率為96.1%，RSD為2.15%。結(jié)果樣品濃度在0.01～0.2mg/ml之間與峰面積成良好的線性關(guān)系。結(jié)論本方法的重復性好、精密度高、穩(wěn)定性強。

【關(guān)鍵詞】HPLC黃芪葉黃芪葉中黃芪甲苷

【Abstract】0bjective:Establishesonekindaccurately,easilytodetermineAstragalosidethecontenttheanalysismethod.Method:ThechromatographiccolumnisNucleosiltheC18column(4.6mm×250mm,5μm);Flowingformethylcyanide-water=1∶2;Thespeedofflowis0.8ml/min;Theexaminationwavelengthis205nm;Thespeedis0.4mm/min.Thesensitivityis0.1AUFS,hasdeterminedtheAstragalosidecontent.Theaveragereturns-ratiois96.1%,RSDis2.15%.Result:Sampledensityin0.01～0.2mg/mlbecomesthegoodlinearrelationshipwiththepeakarea.Conclusion:Thismethod''''sduplicationisgood,accuracyhigh,stable.

【Keywords】HPLCLeafoftheAstragalusAstragalosidea

參考文獻

[1]張宇,沈德鳳,楊波.黃芪葉中黃芪甲苷的含量測定[J]中國野生資源，2002，（05）020.

[2]王辰,侯連兵,劉嬋.HPLC-ELSD法測定黃芪注射液中黃芪甲苷的含量(2006)06-0618.

[3]肖佳尚,朱濤.HPLC-ELSD法測定芪紅膠囊中黃芪甲苷的含量[J]廣東藥學院學報,2007,(02).0138