導(dǎo)語(yǔ)：防風(fēng)多糖含量分析論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1儀器與藥品

1.1儀器756紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)（上海分析儀器總廠）；真空干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；MP1100B型電子天平（上海精科天平廠）；分析天平（日本）。

1.2藥品無(wú)水葡萄糖（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；硫酸（天津化學(xué)試劑有限公司）；苯酚（分析純）；無(wú)水乙醇（天津化學(xué)試劑有限公司）；三蒸水（實(shí)驗(yàn)室自制）；防風(fēng)藥材購(gòu)自張家口、昌平、安國(guó)和圍場(chǎng)，經(jīng)本院中醫(yī)系馬淑蘭教授鑒定；防風(fēng)對(duì)照藥材購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

2方法

2.1防風(fēng)多糖的提取精密稱(chēng)取不同產(chǎn)地已粉碎、真空干燥的防風(fēng)藥材450.0g，加入1000ml無(wú)水乙醇回流提取2h，以除去單糖及其它醇溶性成分，過(guò)濾，濾渣干燥，加入1000ml三蒸水回流提取2h，趁熱過(guò)濾，濾渣再加入1000ml三蒸水回流提取2h，合并兩次濾液，減壓濃縮，12000r/min離心20min，上清四倍體積無(wú)水乙醇沉淀靜置過(guò)夜，抽濾，沉淀物依次用無(wú)水乙醇、丙酮、石油醚洗滌，真空干燥即得防風(fēng)多糖。

2.25.0%苯酚標(biāo)準(zhǔn)液的制備取苯酚100g，加鋁片0.1g和碳酸氫鈉0.05g，常壓蒸餾，收集180～182℃餾分稱(chēng)取該餾分5g，置100ml容量瓶中，加三蒸水稀釋至刻度，搖勻后濾過(guò)至棕色試劑瓶中，得5%苯酚溶液，置4℃冰箱備用。

2.3葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的制備精密稱(chēng)取105℃真空干燥的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品50mg，置50ml容量瓶中，加三蒸水定容至刻度，即得1.00mg/ml的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液。

2.4樣品溶液的制備精密稱(chēng)取不同產(chǎn)地已粉碎、真空干燥的防風(fēng)藥材0.50g，加入100ml無(wú)水乙醇回流提取2h，過(guò)濾，濾渣干燥，加入100ml三蒸水回流提取2h，趁熱過(guò)濾，濾渣再加入100ml三蒸水回流提取2h，合并兩次濾液，減壓濃縮，12000r/min離心20min，上清四倍體積無(wú)水乙醇沉淀靜置過(guò)夜，抽濾，沉淀物依次用無(wú)水乙醇、丙酮、石油醚洗滌，真空干燥后在100ml量瓶中以蒸餾水定容，作為樣品溶液。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精確移取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液10，15，20，25，30，35μl，分別加入990，985，980，975，970，965μl三蒸水，加入5%苯酚溶液500μl，迅速加入濃硫酸2.5ml，靜置20min，以試劑空白為參比，在490nm波長(zhǎng)下測(cè)D值，得回歸方程：A=0.061C-0.000，r=0.997。

2.6換算因素測(cè)定精密稱(chēng)取真空干燥至恒重的防風(fēng)多糖10mg，置于250ml容量瓶，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，作貯備液。精密吸取貯備液0.3ml按“2.5”項(xiàng)下的方法測(cè)定吸光度。另精取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液0.3ml同法操作，求出防風(fēng)多糖中的葡萄糖含量。按下式計(jì)算換算因素f結(jié)果。f=2.47（f=多糖含量/多糖溶液中的葡萄糖含量×稀釋倍數(shù)）。

2.7精密度實(shí)驗(yàn)取同一樣品溶液，重復(fù)測(cè)定吸光度6次，RSD為1.06%。結(jié)果表明精密度良好。

2.8重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)取同一批樣品溶液6份，平行測(cè)定吸光度，RSD為1.43%，表明重現(xiàn)性良好。

2.9穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取樣品溶液，照樣品測(cè)定方法操作，每隔1h測(cè)定吸光度值，連續(xù)8h，結(jié)果吸光度基本無(wú)變化，表明樣品在8h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.10加樣回收率實(shí)驗(yàn)分別精密吸取對(duì)照品溶液10，15，20，25，30μl，各加入樣品溶液10μl，按照樣品測(cè)定方法測(cè)定吸光度，代入回歸方程計(jì)算，結(jié)果平均回收率為98.65%。RSD=1.47%。

2.11樣品含量測(cè)定精取防風(fēng)多糖樣品液1.5ml按“2.5”項(xiàng)下操作，測(cè)定吸光度，按下列公式計(jì)算樣品中的多糖含量，重復(fù)5次，取平均值。

多糖含量（%）=C×D×f×V/W×100%

C：供試品中葡萄糖濃度(μg/ml)；D：供試品的稀釋因素；f：換算因素；V：供試品體積（ml）；W：供試品的重量（μg）。

3結(jié)果

不同產(chǎn)地的防風(fēng)藥材按“2.4”項(xiàng)下制備樣品溶液，按“2.11”項(xiàng)下測(cè)定含量。結(jié)果見(jiàn)表1。表1不同產(chǎn)地防風(fēng)中多糖的含量

4討論

不同產(chǎn)地防風(fēng)藥材中均含有多糖，對(duì)照藥材防風(fēng)多糖含量為2.61%，安國(guó)的防風(fēng)多糖含量最高為2.53%，圍場(chǎng)的防風(fēng)多糖含量最少為1.57%，可能與藥材的產(chǎn)地、采摘時(shí)間有關(guān)。

研究表明中藥多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗輻射、降血糖、降血脂、保肝等多種功能［6～9］，其中中藥多糖的免疫調(diào)節(jié)活性及抗腫瘤作用備受關(guān)注，是中藥多糖研究的中心課題。本實(shí)驗(yàn)用苯酚-硫酸法測(cè)定了防風(fēng)中的多糖含量，為防風(fēng)的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。

【參考文獻(xiàn)】

［1］黃泰康.常用中藥成分與藥理手冊(cè)［M］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,1994:905.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典,一部［S］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:102.

［3］張寶娣,萬(wàn)山紅.防風(fēng)的化學(xué)成分與藥理研究近況［J］.中醫(yī)藥信息，2003，20(4):23.

［4］周勇,馬學(xué)清,張麗,等.防風(fēng)多糖JBO-6體內(nèi)對(duì)小鼠免疫功能的影響及抗腫瘤作用［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，19(4):25.

［5］李莉,周勇,張麗,等.防風(fēng)多糖增強(qiáng)巨噬細(xì)胞抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，22(3):38.

［6］鄭應(yīng)馨,徐恒衛(wèi).具有抗腫瘤活性的多糖及其作用機(jī)理研究［J］.中國(guó)藥師,2003,6(6):368.

［7］陶喆,程建明.中藥多糖抗腫瘤機(jī)制探討［J］.江蘇中醫(yī)藥,2003,24(6):47.

［8］劉景田,黨小軍,王惠萍,等.中藥多糖對(duì)紅細(xì)胞膜相CD35免疫活性調(diào)節(jié)作用［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2002,12(1):7.

［9］鄭敏,工亞平.中藥多糖抗腫瘤的藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)·中醫(yī)中藥分冊(cè),2000,22(5):259.

【摘要】目的比較不同產(chǎn)地防風(fēng)多糖的含量。方法利用苯酚-硫酸法測(cè)定防風(fēng)多糖的含量。結(jié)果安國(guó)的防風(fēng)多糖含量最高為2.53%，圍場(chǎng)的防風(fēng)多糖含量最低為1.57%。結(jié)論不同產(chǎn)地防風(fēng)藥材中多糖的含量不同，可能與產(chǎn)地、采摘時(shí)間有關(guān)，此可供防風(fēng)的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用參考。

【關(guān)鍵詞】防風(fēng)；多糖；苯酚-硫酸顯色法