炎痛舒搽劑抗炎鎮(zhèn)痛分析論文

時(shí)間:2022-02-28 04:58:00

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炎痛舒搽劑抗炎鎮(zhèn)痛分析論文

1器材

1.1動(dòng)物昆明種小鼠、Wistar大鼠(醫(yī)動(dòng)字0001348,001349),雌雄兼用,均購自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2藥物炎痛舒搽劑(河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院提供,批號(hào)060710);酞丁安搽劑(北京四環(huán)醫(yī)藥科技股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)20040603);二甲苯(北京52952化工廠,批號(hào)20010828);伊文思藍(lán)(德國(guó),批號(hào)20291)。

1.3儀器722分光光度計(jì)(上??茖W(xué)儀器廠);RB-200智能熱板儀;YT-100電子壓痛儀(成都泰盟科技有限公司)。

2方法

2.1抗炎作用

2.1.1對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響雄性昆明種小鼠60只,體重25~30g,隨機(jī)分為6組:模型組(0.5%CMC),賦形劑組(30%乙醇),陽性對(duì)照組(酞丁安搽劑),炎痛舒低劑量組18.7%,中劑量組37.4%,高劑量組56.1%,每組10只。均按0.1ml/耳×3次,涂搽。實(shí)驗(yàn)前2,1h和30min按組分別給小鼠左耳廓涂搽相應(yīng)受試物,于末次給藥后30min,用移液器將二甲苯滴到各組小鼠的左耳廓內(nèi)外兩面,涂抹致炎(20μl/只),致炎后1h拉脫頸椎處死小鼠,剪下左右耳廓,用直徑8mm的打孔器分別在兩耳同一部位打下圓耳片。用分析天平稱重,計(jì)算各組動(dòng)物耳腫脹度和腫脹抑制率[1,2]。

腫脹度(%)=左耳重-右耳重右耳重×100%

抑制率(%)=對(duì)照組腫脹率-給藥組腫脹率對(duì)照組腫脹率×100%

2.1.2對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹的影響取雄性Wistar大鼠60只,體重(180±20)g,隨機(jī)分為6組(同“2.1.1”項(xiàng))。實(shí)驗(yàn)前先測(cè)量大鼠右后足容積作為致炎前的數(shù)值。于實(shí)驗(yàn)前2,1h和30min按組別給各動(dòng)物的右后足跖涂搽相應(yīng)受試物。1h后于各鼠該處足跖皮下注射10%蛋清溶液0.1ml致炎,并分別于致炎后5,30min,1,2,4,6h測(cè)右后足容積,計(jì)算大鼠足腫脹度和炎癥抑制率[3]。

2.1.3對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響雄性昆明種小鼠60只,體重(20±2)g,隨機(jī)分為6組(同“2.1.1”項(xiàng)),每組10只。各小鼠背部剪毛,面積2cm×2cm,次日實(shí)驗(yàn)前1h和30min按組別涂搽相應(yīng)受試物約0.8ml/4cm2×2次。末次用藥后0.5h,在各小鼠背部脫毛處皮內(nèi)注射1μg/ml的組胺0.1ml/10g,同時(shí)立即尾靜脈注射2%伊文思藍(lán)生理鹽水0.1ml/10g,20min后拉脫頸椎處死動(dòng)物,剪下藍(lán)染皮膚,測(cè)定面積后剪碎浸入6ml生理鹽水丙酮溶液內(nèi)24h,3000r/min離心15min,取上清液于分光光度計(jì)590nm處比色,以吸光度OD值判斷小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性[4]。

2.2鎮(zhèn)痛作用

2.2.1熱板實(shí)驗(yàn)取體重(20±2)g的雌性小鼠若干,實(shí)驗(yàn)前將小鼠逐只置于(55±0.2)℃熱板儀上,測(cè)定記錄小鼠的痛閾值(以出現(xiàn)舔后足反應(yīng)為觀察指標(biāo)),挑選痛閾值在5~30s內(nèi)的小鼠60只。隨機(jī)分為6組(同前),每組10只。而后逐只置于熱板儀上測(cè)試給藥前的痛閾值2次,取其平均值作為藥前痛閾值。

實(shí)驗(yàn)前2,1h和30min按組別涂搽相應(yīng)受試藥,于末次給藥后的即刻30,60,90,120,150min測(cè)定記錄小鼠的痛閾值。

2.2.2壓尾實(shí)驗(yàn)采用雄性小鼠尾根壓痛法,在離尾根1cm處作為壓痛點(diǎn),用YT-100電子壓痛儀測(cè)定痛閾值(g),以小鼠尾部受壓疼痛嘶叫為準(zhǔn),篩選合格小鼠60只,隨機(jī)分為6組(同熱板實(shí)驗(yàn)),測(cè)定痛閾兩次,以均值作為藥前痛閾值(g)[5,6]。

實(shí)驗(yàn)前2,1h和30min按組別給小鼠局部涂搽相應(yīng)受試藥(同熱板實(shí)驗(yàn)),于末次給藥后30,60min將小鼠尾根部置于壓痛儀上,開動(dòng)儀器,逐漸加壓,當(dāng)小鼠劇烈掙扎或嘶叫時(shí),停止加壓,讀取壓力值作為痛閾值(g)。并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

3結(jié)果

見表1~5。表1炎痛舒搽劑對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響與模型對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01,n=10表2炎痛舒搽劑對(duì)大鼠蛋清足跖腫脹的影響(與模型對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01,n=10

炎痛舒搽劑中、高劑量組明顯抑制小鼠耳廓腫脹度,有效對(duì)抗二甲苯所致的小鼠耳廓急性炎癥。

中、高劑量藥物組給藥后足跖在腫脹度與模型組比較明顯降低(P<0.05,P<0.01),其作用時(shí)間,中劑量組、高劑量組作用持續(xù)在5min~1h,其后作用逐漸減弱消失。

中、高劑量組與模型組比較,吸光度明顯降低(P<0.05或P<0.01)。炎痛舒搽劑能明顯抑制組胺所致的腹腔毛細(xì)血管的滲出,且較對(duì)照組作用顯著。表3炎痛舒搽劑對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(表4炎痛舒搽劑對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(熱板法)與模型對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01;n=10

低劑量藥物組僅在用藥后即刻至30min內(nèi)有鎮(zhèn)痛作用,與模型對(duì)照組相比P<0.05;中劑量藥物組在用藥后即刻至90min內(nèi)均有鎮(zhèn)痛作用,其后作用減弱消失,作用高峰在30min左右(在即刻30,60,90min與模型組相比分別P<0.01,0.01,0.05,0.05);高劑量藥物組在用藥后即刻至120min內(nèi)均有鎮(zhèn)痛作用,其后作用減弱消失,作用高峰可持續(xù)90min左右,與模型對(duì)照組相比除120minP<0.05外,余均P<0.01;各劑量組之間呈量效關(guān)系。表5炎痛舒搽劑對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(壓尾法)與空白對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01;n=10

通過壓尾試驗(yàn),觀察不同劑量的受試藥物對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示陽性藥物組和中、高劑量組在給藥后30min壓痛測(cè)定值與模型組比較明顯延長(zhǎng)(P<0.05或P<0.01)。

4討論

本實(shí)驗(yàn)通過多種方法觀察炎痛舒搽劑對(duì)急性非特異性炎癥反應(yīng)的抗炎及鎮(zhèn)痛作用,采用二甲苯、蛋清作為致炎因子,觀察了炎痛舒搽劑對(duì)炎癥早期實(shí)驗(yàn)性滲出、腫脹的影響。組胺所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)主要在于H1受體的作用;而蛋清所致主要以組胺和5-HT為炎性介質(zhì)。從本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果看,中、高劑量的炎痛舒搽劑可有效緩解二甲苯所致的耳廓腫脹、蛋清所致的大鼠足跖腫脹,還可降低小鼠毛細(xì)血管的通透性。說明其對(duì)炎癥反應(yīng)早期的急性滲出性腫脹有明顯抑制作用,能有效對(duì)抗急性炎癥;其作用機(jī)理可能與該藥通絡(luò)止痛,益氣活血,改善局部血液循環(huán),減少炎性介質(zhì)釋放有關(guān)[7]。

此外,從各濃度水平的抗炎鎮(zhèn)痛效果看,高、中劑量藥物對(duì)急性炎癥模型的作用較低劑量顯著,隨濃度增高作用增強(qiáng);熱板實(shí)驗(yàn)、壓尾實(shí)驗(yàn)證明該藥有良好的鎮(zhèn)痛作用,二者作用強(qiáng)度均存在量效關(guān)系。因此,此研究為該藥外用緩解瘀血腫脹疼痛等提供了理論基礎(chǔ),但關(guān)于其藥理作用機(jī)制可能是多方面的,尚有待于進(jìn)一步探討。

【參考文獻(xiàn)】

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【摘要】目的為了觀察炎痛舒搽劑的抗炎鎮(zhèn)痛作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)、小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)觀察炎痛舒搽劑抗炎作用;通過熱板實(shí)驗(yàn)、壓痛實(shí)驗(yàn)觀察其鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的藥物中、高劑量組與模型組相比有明顯差異(P<0.01或P<0.05)。結(jié)論該藥有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用。

【關(guān)鍵詞】炎痛舒搽劑;抗炎鎮(zhèn)痛