導(dǎo)語：如何才能寫好一篇青春啊，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

各大論壇都流行著一句話，韓劇核心理念是閃閃發(fā)光的我在你眼里閃閃發(fā)光，日劇的理念是我平凡又渺小，好比一塊黑面包，可這樣的我，在你眼里依舊能夠閃閃發(fā)光。

這部《對不起，青春》也秉承著日劇一向的核心理念，關(guān)鍵詞是青春、熱血、有趣。男主角是近年有著超高人氣，并且和女神新桓結(jié)衣有過一段情的錦戶亮，帥氣的外表也為整部劇添色不少，被稱為耷拉眼版本的陳坤。

男主角戀上氣質(zhì)女神，卻不幸被好友撬了墻腳，一氣之下，怒放煙花，卻導(dǎo)致了隔壁女校的火災(zāi)。這場火災(zāi)導(dǎo)致兩所學(xué)校之人一直彼此憎惡著對方，十四年后，女高面臨破產(chǎn)，不得不嘗試與隔壁男高合并。

合并前的試點班級班主任，便是十四年前引發(fā)那場火災(zāi)的男主角。十四年前的火災(zāi)一直是男主角心中無法釋懷的原罪，他想要盡自己最大的努力彌補自己的過錯。

整部劇的人設(shè)就是：女主角是神經(jīng)病一樣的存在，氣場暴烈，能瞬間手撕雞；男主角軟萌可愛，每集耍一次嘴皮，愛說教；保守的大嫂以前拍過熱辣寫真集；神神道道的媽媽會常常扮成各種臥姿奇怪的佛像。

總有人呵斥國產(chǎn)青春劇不屬于我們這一代人，又窮又丑的人沒有青春，只有堆滿課桌的試卷和習(xí)題冊。其實青春里點點滴滴的快樂如同被海浪沖上沙灘的貝殼，繽紛且多彩，關(guān)鍵是看你是否有心采擷。

劇中每個人物都詮釋著自己在青春時面臨的種種問題，男主角為自己十四年前犯下的錯耿耿于懷，女主角不明白自己為什么會喜歡上完全不是理想型的男主角。有人因為壓力一直壓抑著自己，有人因為自卑一直不敢向喜歡的人表白心跡。

可身為男主角的班主任鼓勵他們勇敢去做――

“喜歡一個人，就應(yīng)該讓他（她）知道，否則不是白白喜歡了嗎？”

“青春只有一次，貪婪點有何不可？”

置身事外的人永遠(yuǎn)最輕松，停頓在原地的人永遠(yuǎn)不用擔(dān)心未來，可是不努力邁出一步，就永遠(yuǎn)不知道前面等待著自己的是什么，是他（她）的“我也喜歡你”抑或是“對不起”？無論答案是哪一個，只有邁出這一步的人才有權(quán)利知道。

青春不是一條一通到底的大道，它是一條有著無數(shù)岔道的小路，每一個岔路口，我們都要選擇往哪里走。偶爾走了錯誤的路，繞了遠(yuǎn)一點的路，又有什么關(guān)系呢？或許這條小路有更美麗的風(fēng)景，或許你在這條小路上能碰到志同道合的好朋友。

我們每個人都有權(quán)利犯錯誤，也都有權(quán)利說對不起，年輕的時候，要勇敢地去走那條自己向往的路。

我讀書的時候喜歡一個人，我覺得他有一點傻，像橫道世之介，也像堂吉訶德，勇敢到莽撞，善良到蠢笨?？赡贻p時的驕傲總是阻止我告訴他自己的心意。后來我跌跌撞撞長大了，我喜歡的那個人卻早已經(jīng)有了一個對他好、喜歡他的姑娘。

所以我一度認(rèn)為自己是一個很糟糕的人，年少時候的虛榮讓我不敢承認(rèn)自己的心思，后來又成了一個膽小鬼，總也不敢說自己那點忐忑的念想。

因著這點經(jīng)歷，我看這部劇時，幾乎哭成了淚人。

篇2

“女硬漢”VS“小嬌羞”

小時候堅信婦女能頂半邊天，長大了后才發(fā)現(xiàn)不對勁，但凡頂天立地的女子們都變成了一群會痛經(jīng)的“女硬漢”，有些甚至還引以為榮。這讓人挺傷感的，女人哪能是這樣的?

我們是該在超市掰碎袋裝泡面報復(fù)社會?還是該痛罵男人不夠爭氣?還是該詛咒那些不肯跟我們一起做一條真的漢子的“小嬌羞”呢?一切的一切都只能無解，“女硬漢”和“小嬌羞”的關(guān)系就好比劉三好與姚金鈴、聶寶言與小唐菜、四眼衰女與金發(fā)啦啦隊長、奧斯卡影后與杰西卡?阿爾芭。

如果你?？疵朗角啻盒@片，就會發(fā)現(xiàn)，片子里雷打不動會有啦啦隊長與橄欖球四分衛(wèi)或籃球隊長的“官配”組合，要是啦啦隊長恰好是不起眼女主角的死對頭，那么橄欖球四分衛(wèi)或籃球隊長在影片最后必定會被豬油蒙了心，發(fā)現(xiàn)外在美雖重要，四眼衰女的內(nèi)在美卻更好。

那些驕縱任性、美麗動人的拉拉隊長們，她們自小貌美優(yōu)秀、充滿自信、人見人愛，早上上學(xué)去，呼風(fēng)喚雨帶著小嘍，雙手叉腰貓步橫行于休息區(qū)，眾人如迎接公主駕臨。這樣的生活多么美好，直到被女主角使絆子、插足。然后，就沒有然后了，你用腳趾頭想都該知道，代表主流價值觀的女主角徹底贏了，美女的命運再無人關(guān)心。

筆者年輕的時候很喜歡看這類滅美女威風(fēng)的橋段，但是隨著年齡的漸長，卻越來越喜歡漂亮的人物，尤其是年輕的啦啦隊長們都酷似杰西卡?阿爾芭的翻版。她可是全民寶貝啊，是自從《風(fēng)度》雜志2000年開始設(shè)置“年度最性感100人”名單以來，唯一每年都榜上有名的女人。業(yè)界總有各種關(guān)于杰西卡的“神話”――《美國周刊》聲稱，杰西卡曾是湯姆?克魯斯與凱蒂?霍爾姆斯交好之前的首選目標(biāo)。而痞子阿姆則在歌曲《My Band》中念叨：“昨天Kuniva(說唱樂隊D12成員之一)拿刀威脅我，因為我告訴他，杰西卡?阿爾芭會成為我的老婆?！薄侗毯Ｗ粉櫋返膶?dǎo)演斯托克威爾則回憶道：“米高梅的主管們在后期監(jiān)制過程中，都被杰西卡的美貌所分神。我會時不時地受到質(zhì)問：‘為什么你把她游泳那段剪掉了?’”

少年記憶女主角

沒錯，能讓觀眾幾年來都忽略演技，只求一睹銀幕上芳容的女星，似乎也只有杰西卡?阿爾芭一人。其實杰西卡并不是一個囂張跋扈的姑娘，只是那樣一張陽光明媚如五月天的臉龐，和如蜜糖裹身般的身段，就該是一個顛倒眾生的校園尤物。

據(jù)美國IMDb電影網(wǎng)站的一項統(tǒng)計表明，杰西卡的美貌正好符合15-28歲常上電影院觀影的男青年的審美標(biāo)準(zhǔn)。在他們心里，杰西卡是青春的影像，當(dāng)歷史背景褪色、記憶渾濁的時候，只有她的笑容和美好還是清晰的，定格在16歲暑假的海邊假期里，鮮明在和死黨的中――少年始終不敢沖上前去和她說聲“嗨”，因為她身邊已經(jīng)有一個高大英俊的他，她是一個愛欺負(fù)人但本性不壞的17歲姑娘，并忠于愛情，即使他是一個人渣，少年也深知就算他和她分手了也沒自己的事兒。于是漫漫長夜里，為情所困的少年擼完一管又一管。

于是杰西卡成了所有少年心事中的女神，是他們儲藏柜深處的秘密，是從美國東海岸到西海岸天空上呼嘯而過的飛機，是返校舞會皇后評選時斬釘截鐵的選票，是再也回不去的高中時代里最后一絲憂郁。

如今已經(jīng)是兩個孩子媽媽的杰西卡，仍然保持著神奇的少女美態(tài)，仿佛從未走出過少年們的夢中。她一直站在原地，像個符號，指導(dǎo)大家完成青春必修課。雖然身邊除了高大英俊的外，還多了兩個小奶瓶，但這無損她愛情導(dǎo)師的形象。

齙牙妹都是潛力股

現(xiàn)實中的杰西卡并不是一路從美少女長成大美人的。小時候的她根本就不是學(xué)校里的風(fēng)云人物，她在接受采訪時表示：“我在學(xué)校時總是被欺負(fù)得很慘，爸爸不得不經(jīng)常護送我進學(xué)校以免受到襲擊。中午我要躲在護士的辦公室吃午餐，這樣就不必跟其他女孩坐在一起。總是蓬頭垢面的我，上課時則得時刻保持警醒。這些遭遇除了因為我是混血人種外，還因為我的爸媽沒錢。我既沒有漂亮衣服，也沒有酷酷的背包，你想，一個講話帶著濃厚得克薩斯州口音的齙牙妹，誰不想順帶欺負(fù)一下?”

杰西卡長到十五六歲的時候，才開始穿短裙和泳裝，蛻變由此開始。她一步步地突破自我，擺脫拘束，重拾自信。拍攝電影《罪惡之城》時，導(dǎo)演羅德里格斯覺得她應(yīng)該把頭發(fā)染成金色，于是人生中第一次杰西卡上沙龍換了發(fā)色。那段時間，當(dāng)她頂著金發(fā)出入比弗利山酒店或四季酒店的酒廊時，都不需要自己掏錢買酒?！熬频昀飻D滿了王子或富有的老男人，每次都會有人請我喝一杯，我對自己說：‘噢，天啊，難道就是因為我的金發(fā)?!’那是我最大限度地賣弄自己了，僅此而已。我一直遵循媽媽教給的道德標(biāo)準(zhǔn)，自我尊重和尊重他人。我希望我的孩子也能學(xué)到這點?！?/p>

看看今時今日的杰西卡，不曉得當(dāng)年欺負(fù)過她的男同學(xué)們作何感想。筆者不得不提醒大家，齙牙妹都是潛力股，好好珍惜吧。

表演自在街頭

在國內(nèi)即將上映的系列電影《非常小特工之時間大盜》中，杰西卡?阿爾巴飾演一個孩子的親媽，兩個孩子的后母，隱藏身份還是一個身手不凡的女特務(wù)。這是杰西卡第一次在大銀幕上扮演母親的角色，看似是個挑戰(zhàn)，實際上是她最拿手的――去年杰西卡生下了第二個女兒海文?加納?沃倫，辣媽春游的隊伍又壯大了。

說到好萊塢的辣媽街拍，就必須得提杰西卡?阿爾芭，雖然她沒有“精靈嫂”米蘭達(dá)?可兒的模特身材，沒有“貝嫂”維多利亞?貝克漢姆的大女人氣場，也沒有“阿湯嫂”凱蒂?霍爾姆斯的全身貴氣名牌，但是杰西卡勝在溫婉親切，家常可人。更重要的是，她隨身攜帶的最佳配飾――大女兒奧娜，實在是太古靈精怪了。被圍觀群眾親切稱為“圖娃”的奧娜，完全不是小蘇瑞那樣的小公主派頭，你永遠(yuǎn)都想不到頭戴各種莫名其妙、五彩斑斕發(fā)卡的娃，在面對狗仔鏡頭時的下一個表情和動作是什么，吐舌頭還是斗雞眼?猩猩步還是僵尸舞?萌得太刺激了。

比起演技時常被評論家詬病的媽媽來說，娃更有表演天分，這就叫上帝關(guān)上一扇門，又會為你打開一扇窗――輩子都可能無緣奧斯卡獎的杰西卡，收獲了一個小表演藝術(shù)家。

一個能把孩子捌飭成這樣的媽媽，也一定是個極天真和有趣的人。所以在街拍這件事情上，杰西卡也總給人一種“我很認(rèn)真地想知道，你們到底喜歡我穿什么”的敬業(yè)態(tài)度。她的出鏡率特別高，以至于街拍都快成了她的主業(yè)。在所有好萊塢辣媽中，杰西卡的穿著打扮有很高的學(xué)習(xí)價值。不拍戲時，她做的最多的事情就是把自己和孩子打扮得漂漂亮亮，挑一個光線最佳的時段出門，有意無意地配合著狗仔拍美照。

篇3

太陽是金梭，月亮是銀梭，織出生活的燦爛，織出歲月的壯美。這是青春的主旋律，也道出了生命之于時光的意蘊。

光陰荏苒，轉(zhuǎn)瞬離開共青團崗位已經(jīng)十多年了，也許日常工作的瑣屑漸次淡然，但青年工作朝氣蓬勃、昂揚奮發(fā)的氣息和精神，一直激勵著我在不同的工作中進取?；厥走^往，那是一段深刻而美好的記憶。之所以深刻，是因為共青團工作讓我感悟到，青年人敢作敢為的情懷只有與祖國和人民的念想緊緊擁抱在一起，才會顯得那樣的開闊和博大；之所以美好，是因為共青團工作讓我從一種職責(zé)、一種使命的角度去透視赤橙黃綠青藍(lán)紫，讓我認(rèn)識到青春是以奉獻印證出自己最靚麗的本色。故此，我多有感慨：人生能有在共青團工作的經(jīng)歷，端的是一種緣分，一種精神的財富，它能讓你跟隨時代的走向一往無前，終身受益。

由青年工作我想到青年人，由青年人我想到青春。青春不屬于某個年齡段的專利，青春是進取的標(biāo)志，是創(chuàng)新者的宣言。青春是一種精神，是書山勤為徑、學(xué)?？嘧髦鄣淖穼ぃ锹仿湫捱h(yuǎn)兮的求索，是苦其心志勞其筋骨的磨礪，是百尺竿頭更進一步的跋涉。青春是一種使命，是成就偉業(yè)舍我其誰的氣魄，是天下興亡匹夫有責(zé)的胸襟，是我以我血薦軒轅的赤誠，是只問耕耘不問收獲的超脫。

人生短暫，平凡而偉大；青春不朽，純粹而燦爛。生命因奮斗而壯美，青春因追求而風(fēng)流。朋友們，該是我們寫下傳說的時候了。

謹(jǐn)以此感言向《時代青年》創(chuàng)刊60周年暨復(fù)刊30周年表示熱烈的祝賀。

(作者王新強系河南省西平縣人民政府縣長。曾任河南省直機關(guān)團委書記)

精彩的驛站，無悔的青春――寫在《時代青年》創(chuàng)刊60周年復(fù)刊30周年之際

朱良才

六十甲子，歲月輪回，滄海桑田，流逝的是歲月，孕育的是希望；

三十而立，時光荏苒，崢嶸年華，留下的是足跡，收獲的是輝煌。

《時代青年》，譜盡青春風(fēng)華；《時代青年》，指引青春航向。

“聚是一團火，散作滿天星?！闭沁@種生生不息的共青精神，感召我們奮斗在鮮艷的團旗下。有緣投身團的工作，是組織的信任，更是個人的光榮。

我從鄉(xiāng)鎮(zhèn)最基層的崗位上一步步走進共青團的大家庭，既經(jīng)歷了戰(zhàn)天斗地的豪情、面朝黃土背朝天的艱辛，也感受了泥土芳香中播撒希望、歡慶收獲的喜悅。回首美好難忘的流金歲月，五彩斑斕的廣闊天地，浸潤這片沃土的滋養(yǎng)，沐浴共青團工作洗禮，砥礪了自己的品性，堅定了自己的意志，陶冶了自己的情操，真正領(lǐng)會了“春夏秋冬共青路，東南西北共青情”的內(nèi)涵。

我摯愛共青團工作，并榮幸能成為共青團大家庭的一員，先后兩次團的工作經(jīng)歷，四年難忘的共青歲月，讓我深切感受到共青團火一樣的生命力和青年的熱情、無畏、朝氣與潛能。與青年志愿者一起支援四川災(zāi)區(qū)，和小朋友共值“紅領(lǐng)巾交通崗”，為留守兒童送去發(fā)自內(nèi)心的關(guān)愛，同周口青年英模傾情交流，幫外出務(wù)工青年撐起一片晴空……我正是在朝氣蓬勃、實事求是的追求與挑戰(zhàn)中感受著青春的魅力與永恒。

篇4

中國內(nèi)地新生代85后男演員，人稱“廣告小天王”。畢業(yè)于上海戲劇學(xué)院表演系的鄭愷，曾任上海話劇藝術(shù)中心演員，現(xiàn)為華誼兄弟文化經(jīng)紀(jì)有限公司旗下藝人。主演電視劇有《離婚前規(guī)則》、《我的青春在延安》、《夢回唐朝》等，2013年在電影《致我們終將逝去的青春》中飾演許開陽，《非常幸運》中飾演阿寶。

MJ X 鄭愷

MJ：最近在忙些什么？

鄭愷 最近在拍馮導(dǎo)的《私人定制》，這是部爆笑喜劇賀歲片，由馮小剛導(dǎo)演、王朔編劇，與葛優(yōu)、李小璐等演員合作演出，預(yù)計在年底12月份上映。

MJ：說一說你在電影《非常幸運》中的角色是怎樣的？

鄭愷 是一個特工的角色，這是一部美國喜劇商業(yè)大片，導(dǎo)演是來自好萊塢的鄧尼?戈登，所有的幕后團隊幾乎都來自好萊塢，這使我們的電影有了一個很高的起點。和《非常完美》一樣，《非常幸運》講述的依然是關(guān)于愛畫漫畫的女孩“蘇菲”的故事。傻頭傻腦的蘇菲被卷入一場商業(yè)大案，在破案過程中發(fā)生了一系列好笑的事。我與王力宏出演兩個特工搭檔，新劇情也加入更多幻想元素，蘇菲不同于上次只是和情敵周旋，而經(jīng)歷了仿佛漫畫中真正驚險刺激的場景。

MJ：這次拍戲過程中，經(jīng)歷的印象最深刻的事是什么？

鄭愷 這次拍戲規(guī)模非常龐大，我們到全球眾多旅游勝地取景。在新加坡、澳門、香港等地，可以看到各種好看的風(fēng)景。包括在擁有世界最高的空中游泳池的金沙酒店進行拍攝，在拍戲的同時豐富自己的閱歷并且開拓自己的眼界，這是尤為特別的一點。

MJ：跟章子怡合作下來，對她本人有什么印象？

鄭愷 子怡是一個很認(rèn)真的人，作為演員她在演戲時非常投入，將自己的角色琢磨很透，同時她還擔(dān)任制片人的角色，會時不時跳出來，以一個制片人的身份來指揮現(xiàn)場的工作。但平時她私底下還是比較小女生的，包括她演的角色也是傻傻樂樂的小女孩，我覺得這也是她本身就帶著的一種感覺，而有時候她又可以很國際范兒，她可以很自如地在幾個身份之間轉(zhuǎn)換。

MJ：這次拍攝以度假風(fēng)格為主，基本上都是藍(lán)色，你個人有沒有比較喜歡的顏色？

鄭愷 其實我最喜歡的就是藍(lán)色！說起對藍(lán)色的感覺，就要提起小時候了。有一次我躺在草地上看天空，突然發(fā)現(xiàn)天空特別藍(lán)，給人感覺特別舒服和放松。然后，我就愛上了天空的顏色。

篇5

作者：梁英民　蔣姍姍　孫強　吳絨麗　陳萍　李榮　周鵬　王鍵　韓驊

【關(guān)鍵詞】 基因表達(dá)

關(guān)鍵詞: bcr/abl;基因表達(dá);融合蛋白;抗血清

摘 要:目的 克隆并表達(dá)bcr/abl融合基因片段，并制備其抗血清. 方法 PCR擴增包含蛋白融合點的bcr/abl癌基因片段，序列測定后克隆入帶有His標(biāo)簽的原核表達(dá)載體pET-16b，轉(zhuǎn)化宿主菌BL21，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，SDS-PAGE分析表達(dá)結(jié)果，Ni-NTA樹脂親和純化，皮下多點注射免疫小鼠，ELISA確認(rèn)抗血清的滴度. 結(jié)果 PCR擴增得到大小約523bp的目的片段，序列測定表明與發(fā)表序列完全一致;得到了一種新的癌基因bcr/abl片段的原核表達(dá)載體pET-16b-bcr/abl，在BL21中表達(dá)可見于Mr21×103 處有一蛋白新生帶，表達(dá)的BCR/ABL蛋白免疫小鼠后，ELESA確認(rèn)抗血清的滴度>1∶2000. 結(jié)論 成功的克隆、表達(dá)了bcr/abl融合基因片段，并制備了相應(yīng)的抗血清.

Keywords:bcr/abl;gene expression;fusion protein;immune serum

Abstract:AIM To clone and to express bcr/abl fusion gene fragment and to produce immune serum against the expressed fusion protein.METHODS PCR-amplified bcr/abl gene fragment was inserted into plasmid pET-16b with His tag　to form a new plasmid pET-16-bcr/abl（pEb）.The BCR/ABL fusion protein was expressed in E.coli BL21trans-formed with pEb and induced with IPTG.The expressed pro-tein was purified by affinity resin-Ni-NTA and analyzed by SDS-PAGE.In order to produce anti-serum，Mice were im-munized by subcutaneously multi-site injection with BCR/ABL protein.The anti-serum was assayed by ELISA.RESULTS Molecular weight of the PCR-aimplified bcr/abl gene fragment which was consistent with the published se-quence was about523bp.Plasmid pEb was constructed.The molecular size of BCR/ABL protein expression was about Mr21×103 .The titer of the BCR/ABL protein anti-serum was more than1∶2000.CONCLUSION Fragment of bcr/abl fu-sion gene is successfully cloned and expressed.The antiserum of BCR/ABL protein fragment has been produced.

0 引言

慢性粒細(xì)胞白血病（Chronic myelogenous leukemia，CML）是起源于骨髓造血干細(xì)胞的惡性腫瘤.絕大多數(shù)CML患者的腫瘤細(xì)胞帶有染色體異常，即9∶22號染色體易位，形成特征性的費城染色體（Pheladophia，ph染色體）［1，2］ .在分子水平，這一染色體易位造成bcr基因和abl基因的融合，表達(dá)的BCR/ABL融合蛋白具有持續(xù)性的激酶活性，引起細(xì)胞的轉(zhuǎn)化［2］ .Bcr/abl融合蛋白被認(rèn)為是CML特異性腫瘤抗原，可作為CML診斷和治療的指標(biāo)［3-6］ .我們用PCR擴增了BCR/ABL融合蛋白的基因片段，并在大腸桿菌中進行了表達(dá).表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)純化復(fù)性后，用于免疫小鼠，得到可識別該抗原的小鼠抗血清.

1 材料和方法

1.1 細(xì)菌和質(zhì)粒 大腸桿菌XL-10gold由本室保存.質(zhì)粒pET-16b及大腸桿菌BL21均來自Nav-agene公司.帶有人bcr/abl（b3a2）融合基因的質(zhì)粒pGD210由本校附屬唐都醫(yī)院血液科劉立博士提供.

1.2 引物設(shè)計與bcr/abl融合基因表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建 DNA重組所用試劑來自Promega、寶生物工程公司及華美生物工程公司.以質(zhì)粒pGD210為模板，用PCR擴增了bcr/abl基因跨越融合點的523bp基因片段（93aa-265aa）.PCR引物的序列為:上游引物:5’-CTCGAGACGTTCCTGATCTCCTCT;下游引物:5’-GGATCCTTAGTAGTTGCTTGGGACC-CA.PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳回收純化后插入pGEM-T載體（Promega），進行DNA序列分析.從正確克隆的載體中，用Xho I和BamH I雙酶切下含有bcr/abl融合基因插入片段，插入質(zhì)粒pET-16b，得到表達(dá)BCR/ABL融合蛋白的質(zhì)粒pET-bcr/abl（Fig1），以下簡稱pEb.

1.3 重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)和純化 用表達(dá)質(zhì)粒pEb轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21，加入IPTG至終濃度1mmol?L-1 ，誘導(dǎo)不同時間后，收集菌體.懸浮于PBS，超聲裂菌，離心棄去上清.向沉淀中加入2mol?L-1 尿素，離心除去雜蛋白.再用8mol?L-1 尿素溶解沉淀的蛋白，在Ni-NTA-agarose柱（Vector公司）上進行親和層析.用250mmol?L

-1 咪唑洗脫.收集洗脫的蛋白，透析后凍干保存.

圖1 略

1.4 抗血清的制備 BALB/c小鼠由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供，用50μg基因重組的BCR/ABL融合蛋白與等量的福氏佐劑混后皮下多點注射，每周一次，第四周腹腔注射加強一次，加強免疫后14天取血，分離血清備用.

1.5 酶聯(lián)免疫試驗（ELISA） 向96孔板中加入純化的BCR/ABL融合蛋白（5μg/μL）100μL，4℃包被過夜.加入稀釋的經(jīng)免疫小鼠的血清與未經(jīng)免疫小鼠的血清，血清稀釋度均為1∶500，1∶1000，1∶2000，1∶4000，1∶8000，1∶16000，設(shè)一陰性對照孔， 37℃水浴1h，加入酶標(biāo)抗體，37℃1h，TMB顯色15～30min，酶聯(lián)免疫檢測儀測定，測定波長為492nm.

1.6 DNA序列分析 按說明書用PE公司的熒光DNA序列測定試劑盒（Big-dye）進行序列測定反應(yīng)，用310型DNA序列測定儀進行電泳及結(jié)果分析.

2 結(jié)果

2.1 bcr/abl基因的亞克隆 為表達(dá)BCR/ABL融合蛋白融合點兩側(cè)約200個氨基酸的片段.以全長bcr/abl基因為模板，用PCR擴增了這一片段的cD-NA.Fig2顯示523bp的目的片段被擴增出來.將這一片段插入T載體后，進行DNA序列分析，但在5’和3’端分別插入了設(shè)計的Xho I和BamH I酶切位點.

圖2 略

2.2 BCR/ABL融合蛋白的誘導(dǎo)表達(dá) 用bcr/abl表達(dá)質(zhì)粒pEb轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21，培養(yǎng)后用IPTG進行誘導(dǎo).SDS-PAGE分析結(jié)果表明，與用pET-16b轉(zhuǎn)化的BL21及未轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的BL21裂解產(chǎn)物相比，在21kd處有一新生蛋白帶，與預(yù)期的融合蛋白分子大小相同.灰度掃描顯示IPTG誘導(dǎo)3h后融合蛋白的表達(dá)約占細(xì)菌總蛋白的20%.

2.3 BCR/ABL融合蛋白的純化 用Ni-NTA-a-garose親和層析柱進行BCR/ABL融合蛋白的純化.收集蛋白峰，PBS透析后，進行SDS-PAGE分析（Fig3）.表達(dá)的融合蛋白被純化為單一條帶.

2.4 BCR/ABL融合蛋白在小鼠中的抗體應(yīng)答 收集免疫小鼠的抗血清，ELISA檢測結(jié)果見圖4，與正常對照比較，接受融合蛋白免疫的小鼠產(chǎn)生了較高滴度的血清，說明基因重組的BCR/ABL融合蛋白對小鼠具有免疫原性.

圖3 － 圖4 略

3 討論

bcr/abl融合基因是CML的分子標(biāo)記，bcr/abl融合基因編碼一個分子量為Mr21×104 的融合蛋白.由于融合蛋白連接區(qū)的氨基酸序列是其他任何正常蛋白質(zhì)不具有的，被認(rèn)為是CML細(xì)胞所特有的.BCR/ABL融合蛋白是一種胞漿內(nèi)蛋白，研究bcr/abl融合蛋白在細(xì)胞表面的表達(dá)的類型和該融合蛋白的免疫學(xué)特點對開展CML的免疫治療有重要意義［3-6］ .然而，由于融合蛋白很難從患者體內(nèi)獲得，而且在細(xì)胞內(nèi)加工和提呈的效率也難以檢測，為此，本文用體外基因重組的方法獲得了bcr/abl融合蛋白的原核表達(dá)產(chǎn)物，經(jīng)純化復(fù)性后，用于免疫小鼠，得到了可識別該抗原的小鼠抗血清，為隨后的單克隆抗體制備及免疫治療的研究奠定了基礎(chǔ).

參考文獻

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篇6

[關(guān)鍵詞] 阿法骨化醇；IgA腎??；腫瘤壞死因子-α；白細(xì)胞介素-6；轉(zhuǎn)化生長因子-β1

[中圖分類號] R692.6 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2016）03（b）-0150-04

[Abstract] Objective To explore the effect of different doses of Alfacalcidol on serum levels of tumor necrosis factor alpha （TNF-α）， interleukin 6 （IL-6） and transforming growth factor beta 1 （TGF-β1） in patients with IgA nephropathy （IgAN）. Methods 52 patients with IgAN admitted to Three Gorges University People's Hospital from October 2012 to February 2015 were selected and randomly divided into group A and group B， with 26 cases in each group. While 30 healthy adults were selected as normal group. On the basis of routine RAS therapy plan， group B was treated with Alfacalcidol （0.5 μg， once a day） for 12 weeks， while group A was treated with Alfacalcidol （0.25 μg， once a day）. The changes of serum TNF-α， IL-6， TGF-β1， cystainCm（Cys-C）， blood urea nitrogen （BUN）， serum creatinine （Scr） and 24 hours urinary total protein （UTP） in two groups were compared before and after treatment. Results Compared with normal group， serum TNF-α， IL-6 and TGF-β1 levels were significantly higher than those in IgAN group （P < 0.01）. After 12 weeks of treatment， the level of TNF-α， IL-6， TGF-β1， Cys-C and 24 h UTP had obviously declined （P < 0.05）， compared with that before treatment in two groups， and the reduction of group B was higher than group A （P < 0.05）. There was no significant difference in BUN and Scr between the two groups before and after treatment （P > 0.05）. Conclusion Inflammation reaction exists in IgAN， Alfacalcidol can significantly reduce TNT-α， IL-6， TGF-β1 level in serum of IgAN patients， reduce albuminuria， improve renal function， and the dose of 0.5 μg/d is better than 0.25 μg/d.

[Key words] Alfacalcidol； IgA nephropathy； Tumor necrosis factor-α； Interleukin-6； Transforming growth factor-β1

IgA腎?。↖gA nephropathy，IgAN）是導(dǎo)致我國終末期腎病的主要原因之一。盡管其病因與發(fā)病機制尚未完全闡明，但IgAN發(fā)病機制的中心環(huán)節(jié)與細(xì)胞炎性因子的分泌異常有關(guān)，且被認(rèn)為是導(dǎo)致各種腎小球腎炎腎臟損傷的重要物質(zhì)。既往已有研究報道在IgAN患者血清中炎性因子表達(dá)升高[1]，且臨床研究證實活性維生素D能降低IgAN患者的蛋白尿，已作為IgAN治療新的嘗試[2-3]，但目前尚不清楚在不同的病理生理狀態(tài)下，活性維生素D作用于維生素D受體，進而能產(chǎn)生抗炎性反應(yīng)作用所需的合理劑量[4]。本研究旨在觀察已應(yīng)用雙倍劑量腎素血管緊張素系統(tǒng)（RAS）阻斷劑治療3個月以上、但蛋白尿未降至0.5 g/24 h以下的IgAN患者血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）水平的變化及探討不同劑量阿法骨化醇對其的影響，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2012年10月～2015年2月在三峽大學(xué)人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）隨訪的IgAN患者52例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①Lee分級Ⅱ級或Ⅲ級；②雙倍劑量的RAS阻斷劑治療時間3個月以上，血壓控制在130/80 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）以內(nèi)；③24 h尿蛋白定量0.5～3.0 g伴或不伴血尿，估算腎小球濾過率（MDRD計算公式）>50 mL/（min?1.73 m2）。排除標(biāo)準(zhǔn)：①繼發(fā)性IgAN患者；②阿法骨化醇過敏者；③計劃妊娠者；④使用糖皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑者；⑤合并嚴(yán)重心、腦、肝等慢性疾病者；⑥高鈣血癥者；⑦2周內(nèi)應(yīng)用過維生素、阿司匹林、調(diào)脂藥及抗氧化劑藥物者；⑧依從性差不能完成隨訪者。符合入選標(biāo)準(zhǔn)的IgAN患者52例，其中男29例，女23例，平均年齡（35.1±13.2）歲。按隨機數(shù)字表法分為A組和B組，每組26例，兩組患者在性別、年齡、病程、血壓、腎臟病理及RAS阻斷劑藥物治療方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。見表1。同期選取性別和年齡與患者相匹配的健康成年人30例為正常組，其中男16例，女14例，平均年齡（34.9±13.1）歲，均來源于我院健康體檢者。本研究方案經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會通過，所有患者均簽署了知情同意書。

1.2 方法

所有IgAN患者均維持原有雙倍劑量RAS阻斷劑等常規(guī)治療，在此基礎(chǔ)上，A組患者口服阿法骨化醇膠丸（中美合資昆明貝克諾頓制藥公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字J20130162）0.25 μg，1粒/d，B組口服阿法骨化醇膠丸0.5 μg，1粒/d。兩組療程均為12周。

1.3 檢測指標(biāo)及方法

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測外周血中TNF-α、IL-6和TGF-β1含量。日立7600型全自動生化分析儀檢測血胱抑素-C（Cys-c）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）水平。雙縮脲法測定24 h尿蛋白總量（UTP）。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件對本研究所得數(shù)據(jù)進行分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，同組內(nèi)治療前后比較采用配對t檢驗，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IgAN組和正常組血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平比較

與正常組比較，IgAN組患者血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明顯升高，差異均有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.01）。見表2。

2.2 A組和B組Cys-c、BUN、Scr、24 h UTP比較

治療前，A組和B組Cys-c、BUN、Scr、24 h UTP差異比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。12周后，A和B組患者Cys-c、24 h UTP均較本組治療前顯著下降（P < 0.05），且治療B組患者Cys-c、24 h UTP均低于治療A組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。兩組患者BUN、Scr水平比較以及與本組治療前相應(yīng)指標(biāo)水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。見表3。

2.3 A組和B組血清TNF-α、IL-6和TGF-β1比較

治療前，A組和B組患者血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。12周后，A組患者血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）；B組血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平較本組治療前及治療A組治療后明顯下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表4。

3 討論

IgAN是多因素參與的免疫相關(guān)性腎小球腎炎，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究認(rèn)為，免疫介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在IgAN發(fā)生、發(fā)展中起關(guān)鍵作用[5]，免疫反應(yīng)為始動因素，IgAN患者體內(nèi)的異常多聚IgA1沉積于腎系膜細(xì)胞（glomerular mesangial cells，GMC）后釋放了多種炎性因子而致病，其中炎性因子TNF-α、IL-6、TGF-β1 在IgAN進程中的作用逐漸引起人們的廣泛關(guān)注[6]。

TNF-α主要由活化的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，但腎臟固有細(xì)胞如GMC、上皮細(xì)胞均可分泌TNF-α。研究表明[7]，TNF-α可影響腎小球GMC功能，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞骨架的改變，刺激GMC增殖及表達(dá)黏附分子，并能刺激成纖維細(xì)胞增生，促進腎臟纖維化。有報道顯示[8]，IgAN患者血、尿及腎組織中TNF-α的濃度均明顯增高，其升高程度與病情成正相關(guān)，隨著病情的好轉(zhuǎn)，TNF-α含量明顯下降。IL-6既可作為各種腎臟病急性期反應(yīng)的調(diào)節(jié)因子，又可通過自分泌或旁分泌方式與多種細(xì)胞炎性因子如TNF-α、TGF-β1等相互作用，參與免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)。目前有研究顯示IgAN患者血清IL-6水平明顯增高，IL-6可促進內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的促凝血活性、增加系膜細(xì)胞蛋白激酶的活性，加重腎臟損害[9]。馬云霞等[10]研究表明，在系膜增殖性腎炎病變中，免疫復(fù)合物沉積刺激GMC分泌IL-6，IL-6又可以進一步刺激細(xì)胞外基質(zhì)的增生，形成惡性循環(huán)，導(dǎo)致腎小球纖維化。有學(xué)者應(yīng)用抗IL-6抗體，既可抑制GMC分泌IL-6，又可抑制系膜增殖[11]，進一步表明IL-6在IgAN的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中的重要意義。TGF-β1在IgAN進展過程中起重要作用，其過度表達(dá)可通過多種途徑促進GMC增殖及細(xì)胞外基質(zhì)聚積[12]。多項對TGF-β1/Smad通路的研究發(fā)現(xiàn)，拮抗該通路的活化，可以抑制腎間質(zhì)纖維化[13]。有學(xué)者報道中國華北地區(qū)IgAN患者的腎小球和血清中TGF-β1水平明顯升高，且與病理級別、尿蛋白呈正相關(guān)[14]，提示可以通過抑制TGF-β1生成來防治IgAN的發(fā)生、發(fā)展。

阿法骨化醇主要成分是1α-羥基維生素D3，臨床主要用于骨質(zhì)疏松、甲狀旁腺功能亢進、維生素D缺乏癥和腎性骨病等。近期的動物實驗發(fā)現(xiàn)活性維生素D具有抑制腎素活性、調(diào)節(jié)免疫功能，可以通過核因子κB信號通路及Toll樣受體4路徑抑制腎臟局部炎癥反應(yīng)[15-16]。Fishbane等[17]發(fā)現(xiàn)活性維生素D 治療CKD患者，可抑制T淋巴細(xì)胞的增殖與活化，減少細(xì)胞因子及TGF-β1的產(chǎn)生，抑制粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子及樹突狀細(xì)胞的生長。Andress等[18]在CKD中的研究表明，活性維生素 D 可抑制炎癥因子IL-1B、IL-6合成，促進IL-10、IL-4分泌，抑制巨噬細(xì)胞活性。以上研究提示，活性維生素D可以減輕CKD患者的免疫炎癥，但在不同的病理生理狀態(tài)下所需要的最佳劑量尚不明確。

本研究嘗試在已使用雙倍劑量RAS阻斷劑治療3個月以上、但尿蛋白水平未降至0.5 g/24 h以下的IgAN患者中，采用不同劑量阿法骨化醇探討其對IgAN患者血清TNF-α、IL-6 、TGF-β1水平的影響，結(jié)果顯示：與正常組比較，IgAN患者治療前血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，提示IgAN患者存在炎性反應(yīng)，疾病處于進展?fàn)顟B(tài)。經(jīng)12周治療后，兩組患者Cys-C及24 h UTP自身前后對照均明顯降低（P < 0.05），組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），說明兩種治療方法均有效，但是B組優(yōu)于A組。有研究表明[19]，雙倍劑量活性維生素D治療糖尿病腎病，其降低尿蛋白程度與單倍劑量相比，有明顯的增加，與本研究結(jié)果類似。表4結(jié)果顯示：兩組患者血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平較治療前均明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

綜上所述，阿法骨化醇對IgAN患者具有減輕炎癥反應(yīng)、減少蛋白尿及保護腎功能的作用，本研究初步結(jié)果顯示阿法骨化醇0.5 μg/d劑量效果優(yōu)于0.25 μg/d劑量。當(dāng)然，由于本研究納入的樣本量偏少、時間較短，阿法骨化醇對IgAN腎臟保護作用與劑量依賴性是否相關(guān)有待進一步探討。

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篇7

早上，奶奶晨練回來，我趕忙給奶奶問好，可奶奶卻好像沒聽見似的，徑直走向廚房忙她的去了，我便去問媽媽：“媽媽，為什么我向奶奶打招呼，奶奶卻像沒聽到似的，不理我??？”媽媽說：“奶奶年紀(jì)大了，聽力下降了，有些不太大的聲音聽得不是很清楚，

等到你像奶奶這么大年紀(jì)了，你也會這樣的?！?/p>

哦，原來年紀(jì)大了，人的聽力就會下降啊。啊，青春真好！

中午，爺爺拿著一個放大鏡看報紙，我從旁邊走過，便問爺爺：“爺爺，您為什么要用放大鏡看報紙?。侩y道不用放大鏡就看不到嗎？為什么我不需要放大鏡呢？”爺爺笑著說道：“老嘍，眼睛不好使嘍，你還是個孩子，

當(dāng)然不需要用放大鏡啦。”

哦，原來人老了之后，人的眼睛就會不好使啊。啊，青春真好！

晚飯后，我一邊嚼著豌豆，一邊看著《駱駝祥子》，爸爸從廚房走出來，我說：“爸爸，來點嗎？”爸爸說：“不了，你吃吧，我還有事呢?！?我疑惑的問：“多好吃啊，為什么不吃點呢？”爸爸回答道： “牙齒不行了，咬不動了，太硬的東西咬起來疼。”

哦，原來人到中年，人的牙齒就會不行啊。啊，青春真好！

篇8

－－－－－－題記

當(dāng)飛揚的群裾，旋轉(zhuǎn)過彼此的笑臉時，我們還會知道，有一種表情叫

青春．

16歲的花季里，我們的張望，曾映出一張張哀傷的臉．如百年創(chuàng)傷．

丹麥的海，天邊的象牙塔，曾被我們的眼淚，洇成蔚藍(lán)．16歲的天空，

最美的天空，將是無悔青春的美麗回憶......

可不可以沒有悲傷？可不可以只有微笑的弧度？可不可以永遠(yuǎn)停留在

那個洋娃娃的時代？

如果可以，我寧愿一直呆在自己的那個城堡，沒有悲傷的問號？沒有糖果的苦澀？只有沿著蜿蜒的路攀爬．但是，別無抉折，炎熱仍在牽掛著夏天的衣群時，絲絲的涼爽已走進秋天，蕭瑟還蕩漾在冬天腳邊，她，卻邁著輕盈的腳伐降臨了。

紅色的是草莓，甜甜的，略帶點酸；花季里的青春可愛從中益出；黃色的是香蕉，永遠(yuǎn)那么甜蜜，是那無數(shù)個無憂的日子里笑聲在陽光下閃耀；檸檬酸酸甜甜，但也清香縷縷．正如釋懷著一段青澀的花季雨季......

歲月的琴弦，斷了還可以接上，只是當(dāng)年的調(diào)已改變．

青春若是一場天真的固執(zhí)，夢則是我最在乎的堅持．曾為你笑過，為你哭過，為你害怕錯過，憂郁也變成了主調(diào)．

什么是憂郁？不過是一種調(diào)調(diào)．眼說，是見到你后的模糊；耳說，是聽到你后的寂寞；鼻說，是聞到你后的回味；唇說，是吻到你后的苦澀......心顫顫總結(jié)說，憂郁是你有意無意的一笑而過．的確，換位思考，秋天的落葉不是敗給了蒼老，而是敗給了清風(fēng)啊！

青春無敵，青春的時光如一塊塊磚石，壘起了人生的一堵堵墻；你的健康是一堵墻，這是青春給你的力量，是你生存于世間寶貴的財富；你的年齡是一堵墻，這是青春給你的優(yōu)勢啊，也是你寶貴的資本?。唷?/p>

篇9

今天做客的嘉賓是河南信陽的何樂澈、湖北石首的汪雨晴、天津的張珺，讓我們用熱烈的掌聲歡迎三位美友！

小雨：歡迎三位的到來，先給大家打個招呼吧！

何樂澈：親愛的美友們，我是喜歡結(jié)交筆友的何樂澈，如果哪位美友也有同樣的愛好，我會留下我的聯(lián)系方式，隨時等待著大家的信從四面八方來?。?/p>

雨晴：大家好，我是開朗活潑的汪雨晴，非常喜歡《青春美文》，同樣也喜歡熱愛《青春美文》的你們。

張珺：親們，你們好，我是善良溫柔、細(xì)心體貼的張珺，很高興我的青春能有《青春美文》的陪伴。

小雨：哇！三位美友可真不是蓋的哦，連自我介紹都別具一格。好了，言歸正傳，我們就來聊聊各自與《青春美文》有什么樣的故事吧。

何樂澈：要說與《青春美文》的故事，那可是多了去了，自從我認(rèn)識《青春美文》那一刻起，我們之間的故事每天都在上演。話說有一次吧，上自習(xí)課，我做完了數(shù)學(xué)卷子沒事干，就把《青春美文》拿出來藏在數(shù)學(xué)卷子下面偷偷地看。你們這時一定會說：小心，別被老師抓到了。呵呵，放心吧，我是不用擔(dān)心這個問題滴，因為我們老師也被《青春美文》迷住了，她那時也正在看《青春美文》呢！

小雨：哈哈，難怪你不怕被老師抓！我要爆你一個料，你之前和我聊天時說你買了新一期的《青春美文》，但是你讓我保密，說是怕被你們班同學(xué)搶……

何樂澈：是是是，我承認(rèn)。因為我們班同學(xué)都很愛看《青春美文》，可是我們這都是“供不應(yīng)求”的，好多人買不到，所以當(dāng)同學(xué)們發(fā)現(xiàn)誰有新一期的雜志就會瘋搶。

小雨：原來是這樣啊，看來大家真的都很喜歡《青春美文》，那么我們就想辦法讓《青春美文》在你們那里發(fā)行得再多一點。

何樂澈：嗯，這樣就好了，我的書就不會被搶了。

雨晴：我們班同學(xué)也是超愛《青春美文》的，我經(jīng)常在雜志上看到我們班同學(xué)的名字，因為他們都喜歡寫信與小編互動，很是積極呢。而且我自己也是“美文控”，《青春美文》上有很多我喜歡的文章，我會一遍又一遍地閱讀，然后認(rèn)真地抄在筆記本上，我是不是很瘋狂啊，哈哈！

小雨：真的很瘋狂啊，在現(xiàn)在這個多媒體的時代，你還能一遍一遍地做摘抄，真的讓小編很感動！

篇10

現(xiàn)在大多數(shù)人都認(rèn)為，早步入社會，就多一點機會，可是你們知道么？這么早的步入社會之中，被社會大染缸所渲染，你已經(jīng)不是那個如青春朝陽一般的少年了，在社會上爾虞我詐，讓你比你同齡在學(xué)校上學(xué)的人要更加的圓滑，當(dāng)你想回到他們身邊的時候，你已經(jīng)回不去了，正因為你在社會上的一圓滑，讓你在他們之中格格不入。

白駒過隙，18年的時光流過，當(dāng)你回頭看一看你小時候的樣子你是否還記憶猶新？當(dāng)你回想現(xiàn)在的生活，你是否還會選擇回到過去？我想，你一定會想到回到過去吧，因為正是小的時候，讓你充滿回憶，那種無憂無慮的日子讓你無法自拔，

但是，一切都是回憶，青春的印記在你身邊已經(jīng)慢慢的消散，還有幾年，我們也會進入社會，在社會之中摸爬滾打，為了自己的家、為了自己的房子、乃至為了自己心愛的她，去努力奮斗，而那時，青春已經(jīng)離你而去，正如一首歌：‘啊~青春再見，啊~青春再見，啊~青春再見吧，再見把，再見吧’唱的，生活也不是如此？總是離開了都是好的，但你為什么不珍惜一下現(xiàn)在呢？現(xiàn)在青春還有尾巴在你的身邊，如果你連最后一絲尾巴都要拋棄的時候，那么你真的就離青春而去了。

也許，你懷念青春，也許，你祭奠青春，但是有一點你要記住，你的青春已將離你而去，你現(xiàn)在是一無所有，你現(xiàn)在是成年，青春將逝去，但是你記得一點，青春雖然離你而去，但是你有他的回憶，那將永垂不朽，因為它已經(jīng)深深的進入到你的腦海里了，那是永遠(yuǎn)都不會離你而去的東西，只有你丟棄它，他才會離你而去，總是一味的丟棄，總是要得到什么吧，所以，珍惜現(xiàn)在，回憶過去。