導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫(xiě)好一篇基因工程疫苗，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

[關(guān)鍵詞]基因工程疫苗 核酸疫苗 免疫

[中圖分類(lèi)號(hào)]Q789-01 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1009-5349（2014）11-0081-01

自Edward Jenne醫(yī)生發(fā)明天花疫苗開(kāi)始，已有幾千種疫苗被開(kāi)發(fā)出來(lái)，疫苗逐漸成為人類(lèi)與疾病做斗爭(zhēng)的重要武器之一。傳統(tǒng)疫苗具有生產(chǎn)的成本高、疫苗中含強(qiáng)毒性致病物質(zhì)、減毒株突變及部分疾病用傳統(tǒng)的疫苗防治收效甚微等缺點(diǎn)。所以，研制更安全、更高效的疫苗十分必要。

DNA重組技術(shù)為新一代疫苗――基因工程疫苗的研制提供了全新的方法。基因工程疫苗是指應(yīng)用DNA重組技術(shù)，通過(guò)基因組改造，降低病原微生物的致病性，提高免疫原性，進(jìn)而達(dá)到防治傳染病的目的。迄今為止，基因工程疫苗是最先進(jìn)的疫苗，相比傳統(tǒng)疫苗而言它有巨大的優(yōu)勢(shì)。

一、基因工程疫苗種類(lèi)

應(yīng)用基因工程技術(shù)開(kāi)發(fā)的已經(jīng)使用和正在研制的新型疫苗種類(lèi)主要有基因工程亞單位疫苗、基因工程活載體疫苗、核酸疫苗、合成肽疫苗、轉(zhuǎn)基因植物可食疫苗等。

（一）基因工程亞單位疫苗

該類(lèi)疫苗僅包含病原體的抗原，不包含病原體的其他遺傳信息?；蚬こ虂唵挝灰呙缤ㄟ^(guò)表達(dá)病毒的主要保護(hù)性抗原蛋白獲得免疫原性，具有安全、便于規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。該類(lèi)疫苗的制備步驟如下：①了解編碼具有免疫原活性的抗原蛋白對(duì)應(yīng)的基因信息。②從大腸埃希氏菌、酵母、轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物等表達(dá)系統(tǒng)中選擇最適表達(dá)載體。如：酵母表達(dá)系統(tǒng)已經(jīng)大規(guī)模生產(chǎn)人用重組肝炎疫苗?；蚬こ虂唵挝灰呙缈杉?xì)分為：細(xì)菌性疾病、病毒性疾病和激素亞單位疫苗。

1.細(xì)菌性疾病亞單位疫苗

分離和鑒定致病菌主要免疫原和毒力因子是研究細(xì)菌性亞單位疫苗的基礎(chǔ)，目前已研制出與炭疽、大腸桿菌病、牛布魯氏菌病等對(duì)應(yīng)的亞單位疫苗，均能對(duì)相應(yīng)的疾病產(chǎn)生有效的保護(hù)作用。史百芬等發(fā)現(xiàn)RSVF蛋白亞單位疫苗（PFP-1）注射接種后接種者無(wú)呼吸道疾病加劇作用。

2.病毒性疾病亞單位疫苗

大多數(shù)病毒基因組已經(jīng)被克隆和完全測(cè)序，因此病毒性亞單位疫苗的研制相對(duì)簡(jiǎn)單。現(xiàn)在病毒性疾病亞單位疫苗主要有口蹄疫、狂犬病、乙肝疫苗等。中國(guó)臺(tái)灣省科學(xué)家研制的禽流感亞單位疫苗效力遠(yuǎn)比滅活疫苗高。祁賢等應(yīng)用酵母系統(tǒng)表達(dá)生產(chǎn)雞傳染性腔上囊病病毒VP2亞單位疫苗，發(fā)現(xiàn)其可完全取代傳統(tǒng)滅活疫苗。

3.激素亞單位疫苗

該疫苗是以生長(zhǎng)抑制素為免疫原的一類(lèi)疫苗。杜念興等將大腸埃希氏菌中表達(dá)的生長(zhǎng)抑制素基因與HbsAg基因融合，通過(guò)Vero細(xì)胞表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)表達(dá)產(chǎn)物具有良好的免疫原性。杜念興等用SS基因疫苗免疫小鼠，發(fā)現(xiàn)口服型SS基因疫苗免疫小鼠后可在小腸表達(dá)HBsAg/SS融合蛋白，推測(cè)該基因疫苗刺激機(jī)體表達(dá)蛋白后能產(chǎn)生SS抗體。

（二）基因工程活載體疫苗

此類(lèi)疫苗生產(chǎn)主要有兩種方法，一是使非致病性微生物表達(dá)某種特定病原物的抗原決定簇基因，進(jìn)而產(chǎn)生免疫原性，另一種是致病性微生物被修飾或去掉毒性基因，但仍保持免疫原性?；钶d體疫苗結(jié)合了活疫苗和死疫苗的共同優(yōu)點(diǎn)，在免疫力上具有很大的優(yōu)勢(shì)，分復(fù)制性和基因突變活載體疫苗。

（三）核酸疫苗

核酸疫苗接種后，抗原合成、增加與病原自然感染十分相似;還具有免疫原性單一;易構(gòu)建和制備，穩(wěn)定性好，成本低廉，適于規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。

二、展望

疫苗開(kāi)發(fā)具有安全性、有效性、價(jià)廉性、易推廣性等特點(diǎn)?；蚬こ桃呙缇哂袀鹘y(tǒng)疫苗無(wú)可比擬的優(yōu)點(diǎn)，是疫苗產(chǎn)品開(kāi)發(fā)的主要方向。研制多聯(lián)或多價(jià)疫苗是基因工程疫苗的主要發(fā)展方向。

【參考文獻(xiàn)】

[1]李媛，金紅，于康震，程浩.基因工程疫苗的研究進(jìn)展[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2000（S1）.

[2]姜健，楊寶靈，李春斌.植物基因工程疫苗研究進(jìn)展[J].大連民族學(xué)院學(xué)報(bào)，2004（1）.

[3]王恩秀，陳偉華，杜念興.生長(zhǎng)抑素基因工程疫苗對(duì)大鼠生長(zhǎng)及免疫的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2002（5）.

[4]李軼女，胡英考，沈桂芳.轉(zhuǎn)基因植物基因工程疫苗[J].生物技術(shù)通報(bào)，2002（2）.

[5]史百芬.對(duì)RSV F蛋白亞單位疫苗（PFP-1）接種者的第二年監(jiān)測(cè)：評(píng)價(jià)抗體持久性和可能的疾病加劇作用[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)?預(yù)防?診斷?治療用生物制品分冊(cè)，1995（1）.

[6]劉學(xué)東，包振民，王志亮.禽流感病毒H5N1亞型基因工程疫苗設(shè)計(jì)、表達(dá)制備及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J].同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2011（6）.

[7]祁賢，湯奮揚(yáng)，李亮等.新甲型H1N1（2009）流感病毒的早期分子特征[J].微生物學(xué)報(bào)，2010（4）.

[8]劉永慶，劉文波，潘杰彥，杜念興，陳溥言，趙國(guó)屏.生長(zhǎng)抑素（SS）基因在pET-32表達(dá)系統(tǒng)中的高效表達(dá)[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003（1）.

篇2

我國(guó)基因工程制藥實(shí)施產(chǎn)業(yè)化始于上世紀(jì)80年代末期。隨著我國(guó)第一個(gè)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的基因重組藥物a－lb型干擾素，1989年在深圳科技園實(shí)施產(chǎn)業(yè)化，國(guó)內(nèi)基因藥物產(chǎn)業(yè)化大發(fā)展的序幕也由此拉開(kāi)。

截至2003年，我國(guó)批準(zhǔn)上市的基因工程藥物和疫苗主要有重組人a－lb干擾素、重組人表皮因子（外用）、重組人紅細(xì)胞生成素、重組鏈激素、重組人胰島素、重組人生長(zhǎng)激素、重組乙肝疫苗等。目前，全球最暢銷(xiāo)的十幾種基因藥物在我國(guó)都能生產(chǎn)。

基因藥物成為人類(lèi)對(duì)付疾病的新銳，一般來(lái)說(shuō)基因藥物，都應(yīng)有自己特有的作用靶點(diǎn)，或是人體組織、或是細(xì)胞膜、或是細(xì)胞漿中的某蛋白質(zhì)和酶。通過(guò)這些作用點(diǎn)，藥物能發(fā)揮最佳療效。而現(xiàn)有的藥物除了作用于治療的目標(biāo)點(diǎn)之外，還常常作用于其他部位，因此常常會(huì)帶來(lái)很多的副作用。

基因工程制藥將具有藥物作用效果明確、作用機(jī)理清楚或作用專(zhuān)一、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)。這些藥物會(huì)使醫(yī)生能像發(fā)射激光制導(dǎo)“導(dǎo)彈”那樣使用藥物，而不是盲目對(duì)疾病“開(kāi)火”。

而且，基因工程制藥不僅解決傳統(tǒng)藥物“頭痛醫(yī)頭腳痛醫(yī)腳”的治標(biāo)問(wèn)題，還將從基因的個(gè)性化角度配制藥物，使疾病得到徹底根治，并同時(shí)帶來(lái)制藥產(chǎn)業(yè)的革命。

從提高人類(lèi)生存質(zhì)量角度看，基因工程制藥目前主要瞄準(zhǔn)一些重大的常見(jiàn)疾病，如艾滋病、癌癥、糖尿病、抑郁癥、心臟病、老年性癡呆癥、中風(fēng)、骨質(zhì)疏松癥等嚴(yán)重危害人類(lèi)健康并流行范圍較廣的病癥。

尋找新的藥物作用靶點(diǎn)是今后新藥研制開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵。而人類(lèi)基因組學(xué)研究將為尋找新的藥物作用點(diǎn)開(kāi)辟?gòu)V闊的前景，它最終揭示的人類(lèi)基因中至少有幾千個(gè)基因可作為藥物的作用點(diǎn)。

基因工程制藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，得益于我國(guó)舉世矚目的基因技術(shù)研究實(shí)力。我國(guó)是唯一參與人類(lèi)基因組研究的發(fā)展中國(guó)家，在參與人類(lèi)基因組計(jì)劃的美、英、日、中、法、德6個(gè)國(guó)家中，我國(guó)基因組測(cè)序能力已經(jīng)超過(guò)法國(guó)和德國(guó)，名列第四。在6國(guó)16個(gè)基因組測(cè)序中心里，我國(guó)位居前十強(qiáng)。2000年完成了1％的人類(lèi)基因組測(cè)序任務(wù)，2002年又獨(dú)立完成了水稻基因組研究。如今又領(lǐng)銜國(guó)際人類(lèi)肝臟蛋白質(zhì)組研究，這些都是舉世矚目的成就。尤其近年來(lái)，在醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)的幾大最前沿的領(lǐng)域，如組織器官工程、生物芯片、干細(xì)胞技術(shù)、克隆技術(shù)等方面也均處于世界先進(jìn)水平。加上基因重組技術(shù)、DNA技術(shù)、基因化學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和發(fā)展等，這些都將為我國(guó)基因工程藥物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展奠定堅(jiān)實(shí)的科學(xué)技術(shù)基礎(chǔ)，將給基因工程藥物產(chǎn)業(yè)帶來(lái)深刻的變化和前所未有的發(fā)展機(jī)遇。

盡管?chē)?guó)內(nèi)基因工程制藥企業(yè)現(xiàn)狀不容樂(lè)觀，我國(guó)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)與歐美發(fā)達(dá)國(guó)家相比雖有一定距離，但并非不可逾越，這個(gè)市場(chǎng)依然被業(yè)內(nèi)人士十分看好。比如我國(guó)干擾素的實(shí)際消費(fèi)量不足1億，但市場(chǎng)潛力相當(dāng)大，專(zhuān)家們估計(jì)能達(dá)到4億―5億支。尤其經(jīng)過(guò)近10年的努力，我國(guó)已造就了若干個(gè)具有國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力，甚至能躋身世界基因工程藥物產(chǎn)業(yè)前列的中國(guó)本土上的龍頭企業(yè)。所以盡管基因工程制藥發(fā)展道路艱辛，但前景依然十分誘人。

1基因工程與基因板塊前景分析

1.基因工程技術(shù)的發(fā)展與前瞻性，2000年6月26日，“人類(lèi)基因組計(jì)劃”成功繪制了人類(lèi)生命的“天書(shū)”，人類(lèi)的遺傳密碼基本被破譯，標(biāo)志著生物技術(shù)，特別是生命科學(xué)技術(shù)發(fā)展進(jìn)入到一個(gè)新的階段。人類(lèi)基因組計(jì)劃（HGP）與曼哈頓原子彈計(jì)劃和阿波羅登月計(jì)劃一起被稱(chēng)為二十世紀(jì)三大科學(xué)工程，它同時(shí)將貫穿于整個(gè)21世紀(jì)，被認(rèn)為是21世紀(jì)最偉大的科學(xué)工程。早在20世紀(jì)上半葉，遺傳學(xué)家就提出了“基因”概念，即基因是決定生物性狀的遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)。特別是1953年沃森和克里克DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型創(chuàng)立后，進(jìn)一步從本質(zhì)上證實(shí)基因是決定人類(lèi)生、老、病、死和一切生命現(xiàn)象的物質(zhì)基礎(chǔ)。至70年代，DNA重組技術(shù)（也稱(chēng)基因工程或遺傳工程技術(shù)）終獲成功并付之應(yīng)用，分離、克隆基因變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)，不少遺傳病的致病基因及其他一些疾病的相關(guān)基因和病毒致病基因陸陸續(xù)續(xù)被確定。所有這一切使人們似乎看到了攻克頑癥的曙光，研究基因的熱情空前高漲。

諾貝爾獎(jiǎng)獲得者杜伯克進(jìn)一步提出了基因組研究模式，美國(guó)國(guó)會(huì)于1990年10月1日批準(zhǔn)正式啟動(dòng)HGP，為期15年，政府投資30億美元。人類(lèi)基因組計(jì)劃的目的是要破譯出基因密碼并將其序列化制成研究藍(lán)本，從而對(duì)診斷病癥和研究治療提供巨大幫助。不久的將來(lái)我們不僅可以看到癌癥、艾滋病等絕癥被攻克；人類(lèi)可以通過(guò)基因克隆復(fù)制器官和無(wú)性繁殖；基因診斷和改動(dòng)技術(shù)可以使人類(lèi)后代不再受遺傳病的困擾；而且人類(lèi)將進(jìn)入藥物個(gè)性化時(shí)代，人類(lèi)的生命也將延長(zhǎng)。正是由于這些新技術(shù)和新領(lǐng)域的不斷出現(xiàn)和日新月異，人類(lèi)在新世紀(jì)的生存和生活方式將發(fā)生重大變化。

其一、基因制藥。在過(guò)去發(fā)現(xiàn)新藥物作用靶點(diǎn)和受體是非常昂貴和漫長(zhǎng)的，科學(xué)家只是依賴(lài)試錯(cuò)法來(lái)實(shí)現(xiàn)其藥物研究和開(kāi)發(fā)的目標(biāo)。人類(lèi)基因組研究計(jì)劃完成后，科學(xué)家可以直接根據(jù)基因組研究成果確定靶位和受體設(shè)計(jì)藥物。這將大大縮短藥物研制時(shí)間和大大降低藥物研制費(fèi)用。

其二、基因診斷。人類(lèi)基因組研究計(jì)劃最直接和最容易產(chǎn)生效益的地方就是基因診斷。通過(guò)基因診斷可以解決遺傳性疾病的黑洞，基因診斷能夠在遺傳病患者還未發(fā)現(xiàn)出任何癥狀之前，甚至還未出生的嬰兒就能確診。

其三、基因治療?；蛑委煴环Q(chēng)為人類(lèi)醫(yī)療史上的第四次革命，遺傳學(xué)表明人類(lèi)有6500種遺傳性疾病是由單個(gè)基因缺陷引起的，而通過(guò)基因治療置入相關(guān)基因?qū)⑹谷祟?lèi)的許多不治之癥得以克服。

其四、基因克隆。是指把一個(gè)生物體中的遺傳信息（DNA）轉(zhuǎn)入另一個(gè)生物體內(nèi)。利用基因克隆技術(shù)不僅可以培育出自然界不可能產(chǎn)生的新物種，而且可以培養(yǎng)帶有人體基因的動(dòng)植物作為“生物反應(yīng)器”生產(chǎn)基因工程產(chǎn)品，還可制造用于人體臟器移植的器官，從而解決異體器官的排斥和供移植的人體器官來(lái)源不足的問(wèn)題?，F(xiàn)在動(dòng)植物克隆已成為現(xiàn)代科技進(jìn)步中最具有沖擊力和爭(zhēng)議性的事件，克隆羊和克隆豬的出現(xiàn)引發(fā)人類(lèi)克隆自身的擔(dān)憂(yōu)，而植物克隆和大量轉(zhuǎn)基因食物大規(guī)模出現(xiàn)引發(fā)了人們對(duì)于生物物種混亂和污染的擔(dān)憂(yōu)。但不可否認(rèn)的是，植物克隆可以為人類(lèi)食品來(lái)源開(kāi)啟廣闊的空間，而動(dòng)物克隆可以利用動(dòng)物生產(chǎn)大量人類(lèi)需要的基因藥物和器官。

其五、基因芯片。由此可見(jiàn)，在21世紀(jì)誰(shuí)能掌握人類(lèi)自身，誰(shuí)擁有基因?qū)＠蕉?，誰(shuí)就在某種基因的商業(yè)運(yùn)用和新藥開(kāi)發(fā)中居于領(lǐng)導(dǎo)地位，基因技術(shù)具有巨大商業(yè)價(jià)值和社會(huì)意義。

2中國(guó)基因工程產(chǎn)業(yè)的發(fā)展態(tài)勢(shì)

1999年7月，我國(guó)在國(guó)際人類(lèi)基因組注冊(cè)，承擔(dān)了其中1％的測(cè)序任務(wù)。我國(guó)人類(lèi)基因組研究除完成3號(hào)染色體3000萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)即1％的測(cè)序任務(wù)外，主要著重于疾病相關(guān)基因以及重要生物功能基因的結(jié)構(gòu)和功能研究。我國(guó)近兩年又在上海和北京相繼成立了國(guó)家人類(lèi)基因組南、北兩個(gè)中心，這為大規(guī)模進(jìn)行基因功能研究提供了可靠的保證。

基因技術(shù)革命是繼工業(yè)革命、信息革命之后對(duì)人類(lèi)社會(huì)產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響的一場(chǎng)革命。它在基因制藥、基因診斷、基因治療等技術(shù)方面所取得的革命性成果，將極大地改變?nèi)祟?lèi)生命和生活的面貌。同時(shí)，基因技術(shù)所帶來(lái)的商業(yè)價(jià)值無(wú)可估量，從事此類(lèi)技術(shù)研究和開(kāi)發(fā)企業(yè)的發(fā)展前景無(wú)疑十分廣闊?；蚬こ坍a(chǎn)業(yè)除了眾所周知的高投入、高回報(bào)、高技術(shù)、高風(fēng)險(xiǎn)外，還具有其它一些十分重要和鮮明的特點(diǎn)?；蚬こ坍a(chǎn)品的技術(shù)含量非常高，因此，基因工程產(chǎn)品的前期研究和開(kāi)發(fā)投入非常高，國(guó)外新藥的研究開(kāi)發(fā)費(fèi)用基本上占銷(xiāo)售額的15％左右。而基因工程產(chǎn)品的直接生產(chǎn)成本卻非常低，而且對(duì)生產(chǎn)的設(shè)備要求也不是很高，基因產(chǎn)品的這一特點(diǎn)意味著基因工程領(lǐng)域的進(jìn)入壁壘并不存在于生產(chǎn)領(lǐng)域，而存在于該產(chǎn)業(yè)的上游，即研究開(kāi)發(fā)這一環(huán)節(jié)，因此只有具備相當(dāng)資金與技術(shù)實(shí)力的企業(yè)才能問(wèn)津?；蚬こ坍a(chǎn)業(yè)不僅在投入上具有非常明顯的階段性，而且基因工程產(chǎn)品的創(chuàng)新期非常長(zhǎng)，因?yàn)椴粌H產(chǎn)品的研究開(kāi)發(fā)需要花費(fèi)大量的時(shí)間和精力，而且對(duì)產(chǎn)品的審批也相當(dāng)嚴(yán)格，所以一種基因工程產(chǎn)品完成創(chuàng)新階段，從實(shí)驗(yàn)室到消費(fèi)者手中要經(jīng)過(guò)好幾年時(shí)間。

由于基因工程產(chǎn)業(yè)的發(fā)展前景十分看好，因此一大批國(guó)內(nèi)企業(yè)包括許多上市公司近年來(lái)紛紛涉足這一行業(yè)。自九十年代中期以來(lái)，我國(guó)已有300多家生物工程研究單位，200多家現(xiàn)代生物醫(yī)藥企業(yè)，50多家生物工程技術(shù)開(kāi)發(fā)公司，上市公司中有30多家企業(yè)涉及生物制藥。目前，基因工程藥物、生物疫苗、生物診斷試劑三大類(lèi)的基因產(chǎn)品均有國(guó)內(nèi)企業(yè)參與生產(chǎn)。在這些產(chǎn)品的市場(chǎng)上，國(guó)內(nèi)企業(yè)依靠低廉的價(jià)格和廣闊的營(yíng)銷(xiāo)網(wǎng)絡(luò)，已在與國(guó)外廠商的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中取得了優(yōu)勢(shì)地位。從行業(yè)分布上來(lái)看，國(guó)內(nèi)上述幾類(lèi)基因工程產(chǎn)品的市場(chǎng)格局大致呈現(xiàn)如下的狀況：

細(xì)胞因子類(lèi)產(chǎn)品目前市場(chǎng)已處于飽和狀態(tài)。受超額利潤(rùn)的誘惑，前兩年已有太多的廠家介入該市場(chǎng)，僅EPO一項(xiàng)，光上市公司在生產(chǎn)的就有復(fù)星實(shí)業(yè)（600196）、哈醫(yī)藥（600664）、張江高科（600895）、等好幾家，再加上國(guó)內(nèi)非上市公司，目前共有十幾家公司在生產(chǎn)EPO，年生產(chǎn)能力過(guò)剩超過(guò)了500萬(wàn)支。而血小板生長(zhǎng)因子（TPO），由于國(guó)外的知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)而未能為國(guó)內(nèi)廠商所仿制，從而導(dǎo)致該產(chǎn)品被進(jìn)口品所壟斷。因此，如果不能形成新細(xì)胞因子的自主開(kāi)發(fā)能力，對(duì)企業(yè)來(lái)說(shuō)，該市場(chǎng)的拓展空間將非常有限。

重組類(lèi)藥物目前還處于實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)階段。目前市場(chǎng)上的水蛭素、降鈣素等產(chǎn)品是通過(guò)提取或化學(xué)合成，而不是利用基因工程技術(shù)的方法獲得的。有許多院校和研究機(jī)構(gòu)已在這方面取得了一定的進(jìn)展，拿到了目的基因并在實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了表達(dá)載體，但在表達(dá)量及分離純化方面還有待突破。可見(jiàn)部分重組類(lèi)藥物的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)已不再遙遠(yuǎn)，國(guó)內(nèi)在這方面與國(guó)外的差距還不算大，是一個(gè)大有可為的新領(lǐng)域。

生物疫苗市場(chǎng)目前呈現(xiàn)出不平衡的局面。一些疫苗如破傷風(fēng)疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗，市場(chǎng)上已相當(dāng)普及，另外一些疫苗如肝炎疫苗，目前的普及還不廣，還有很大的市場(chǎng)空間可以擴(kuò)展，許多疾病，甚至是常見(jiàn)病，如流感等還沒(méi)有找到相應(yīng)的疫苗。從目前的市場(chǎng)情況來(lái)看，國(guó)內(nèi)企業(yè)處于相對(duì)劣勢(shì)，國(guó)產(chǎn)疫苗與進(jìn)口的同類(lèi)產(chǎn)品相比，雖然價(jià)格只有對(duì)方的2/3，但質(zhì)量不穩(wěn)定，而且操作起來(lái)非常不方便，因此在這個(gè)市場(chǎng)上，舶來(lái)品占據(jù)了相當(dāng)?shù)氖袌?chǎng)份額。

篇3

一、種類(lèi)

根據(jù)抗原性質(zhì)可分為滅活疫苗、弱毒活疫苗、亞單位疫苗、工程疫苗、核酸疫苗和轉(zhuǎn)基因植物可飼疫苗；根據(jù)疫苗功效則可分為預(yù)防性疫苗和治療性疫苗。

1. 滅活疫苗。將分類(lèi)離培養(yǎng)的病原微生物（多數(shù)為強(qiáng)毒株）用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)試劑將其滅活但保留其免疫原性，與不同的佐劑混合后乳化制成滅活疫苗。目前，用于制備滅活疫苗的佐劑有礦物油佐劑和氫氧化鋁佐劑。前者多用于病毒性疫苗，如當(dāng)前使用的豬圓環(huán)病毒滅活疫苗、偽狂犬病毒滅活疫苗；用氫氧化鋁作為佐劑制備疫苗靜置后，會(huì)出現(xiàn)分層，疫苗在使用前搖勻即可，該佐劑多用于細(xì)菌疫苗。蜂膠佐劑多用于細(xì)菌苗和亞單位疫苗。

滅活疫苗的用途：①新分離的病原，短期內(nèi)難以致弱。如高致病性豬藍(lán)耳病滅活疫苗、豬圓環(huán)病毒滅活疫苗和兔瘟滅活疫苗。②血清型較多的病原，疫苗的保護(hù)力呈現(xiàn)血清型特異性，如豬胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌（15 個(gè)血清型）、副豬嗜血桿菌（15 個(gè)血清型）、豬鏈球菌（35 個(gè)血清型）等。③變異頻率高的病原，如新分離的口蹄疫M(jìn)ya-98 株。

豬用滅活疫苗中，有豬偽狂犬病滅活疫苗、豬口蹄疫0 型（單價(jià)/ 二價(jià)/ 三價(jià)）滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗、豬圓環(huán)病毒滅活疫苗、豬細(xì)小病毒滅活疫苗、豬乙腦滅活疫苗、豬鏈球菌病單價(jià)( 二價(jià)/ 三價(jià)) 滅活疫苗、副豬嗜血桿菌三價(jià)滅活疫苗和豬傳染性胸膜肺炎三價(jià)滅活疫苗等。

滅活疫苗的優(yōu)點(diǎn)是安全性強(qiáng)，疫苗毒株無(wú)毒力返強(qiáng)的危險(xiǎn)；多數(shù)疫苗的免疫接種效果不受仔豬母源抗體水平高低的干擾；貯存條件方面，一般需冷藏保存，不能冷凍。其缺點(diǎn)是需要免疫次數(shù)多，接種后局部反應(yīng)略大，甚至出現(xiàn)接種部位污染，可引起局部炎癥膿腫，影響接種效果，也降低局部的肉品質(zhì)量。

2．弱毒活疫苗。

疫苗種類(lèi)指將毒力下降或毒力完全喪失的病原微生物，與牛奶、明膠等佐劑混合后經(jīng)過(guò)低溫凍干后形成的疏松狀制劑。嚴(yán)格意義上，此類(lèi)疫苗不包含采用基因工程方法對(duì)基因組改變后引起致病性改變的微生物制備的弱毒疫苗。根據(jù)所含的疫苗毒株分類(lèi)不同，可以分為以下幾種：（1）細(xì)菌活疫苗：如仔豬副傷寒疫苗，豬丹毒- 肺疫活疫苗。（2）病毒活疫苗：豬瘟活疫苗、偽狂犬病活疫苗和豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗。（3）豬支原體肺炎活疫苗。預(yù)防豬寄生蟲(chóng)的活疫苗尚未問(wèn)世。

我國(guó)常用的弱毒活疫苗較多，如豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗、豬乙肝疫苗、豬丹毒活疫苗、豬肺疫活疫苗、仔豬副傷寒疫苗、豬馬腺疫鏈球菌活疫苗等。

活疫苗的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是：（1）免疫途徑多樣：可通過(guò)肌肉注射、滴鼻、口服等途徑免疫。（2）刺激產(chǎn)生黏膜免疫：除肌肉注射外，滴鼻和口服途徑免疫后可刺激機(jī)體產(chǎn)生局部分泌型IgA, 形成黏膜免疫，在預(yù)防呼吸道感染和消化道感染中具有獨(dú)特的作用，這是滅活疫苗無(wú)法比擬的，如沙門(mén)氏菌口服可以刺激機(jī)體腸道局部黏膜免疫。（3）免疫后可剌激產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫，免疫效果較為確實(shí)。（4）免疫次數(shù)少于滅活疫苗。（5）接種后局部反應(yīng)低。缺點(diǎn)：受母源抗體的影響如豬瘟活疫苗、偽狂犬病活疫苗等；受抗菌藥物的影響如仔豬副傷寒弱毒疫苗、豬丹毒- 肺疫二聯(lián)弱毒疫苗和豬支原體弱毒疫苗等；活疫苗運(yùn)輸保存條件嚴(yán)格，需冷凍條件。

3. 基因工程疫苗。

利用分子生物學(xué)手段改造病原微生物的基因，獲得毒力下降、喪失的突變株或構(gòu)建以弱毒株為載體、表達(dá)外源基因的重組毒（菌）株，并利用它們作為疫苗毒株制備疫苗，包括基因缺失活疫苗和基因工程活載體疫苗。該疫苗與常規(guī)弱毒疫苗相比，主要區(qū)別在于后者采用常規(guī)技術(shù)，而非分子生物學(xué)技術(shù)，來(lái)致弱病原微生物，不確定其毒力致弱的分子機(jī)制。

作為基因工程疫苗載體的病毒或細(xì)菌，其主要特性是：致病力下降或缺失、對(duì)靶動(dòng)物和非靶動(dòng)物是安全的，基因組龐大、可容納外源基因，并高效表達(dá)。常用的活載體有：偽狂犬病毒弱毒株、腺病毒、沙門(mén)氏菌弱毒菌株、乳酸桿菌、胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌弱毒株。我國(guó)在“十一五”期間，在“863”課題資助下，開(kāi)展了以偽狂犬病毒為載體，表達(dá)豬細(xì)小病毒、乙腦病毒、口蹄疫病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒主要免疫原性基因的研究。鑒于對(duì)其安全性的憂(yōu)慮，我國(guó)規(guī)定轉(zhuǎn)基因生物（包含基因工程 疫苗）必須經(jīng)歷實(shí)驗(yàn)室和野外安全性觀察測(cè)試，獲得安全證書(shū)后，方能進(jìn)行疫苗學(xué)研宄，以申報(bào)獸用生物制品新獸藥證書(shū)。目前，我國(guó)己經(jīng)批準(zhǔn)上市的基因工程疫苗有：豬偽狂犬病基因缺失疫苗、口蹄疫基因工程疫苗、豬大腸桿菌K88-K99 基因工程疫苗。重組載體疫苗尚未正式上市。

4．核酸疫苗。

核酸疫苗產(chǎn)生于20 世紀(jì)80 年代。將病原微生物或寄生蟲(chóng)基因組中編碼免疫原性蛋白的基因克隆到真核表達(dá)載體中制備重組質(zhì)粒，這種質(zhì)粒直接導(dǎo)入動(dòng)物體內(nèi)，利用宿主體內(nèi)的轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)，合成該蛋白，剌激機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)相應(yīng)的細(xì)胞免疫和體液抗體，因而稱(chēng)之為DNA 疫苗。DNA 疫苗可以用大腸桿菌大量制備，成本較低。針對(duì)細(xì)菌病、病毒病和寄生蟲(chóng)病的DNA 疫苗報(bào)道較多。但基于是否整合到宿主染色體等安全性考慮，核酸疫苗多處于實(shí)驗(yàn)研宄階段，尚未大量應(yīng)用。RNA 疫苗是近幾年才出現(xiàn)的一種核酸疫苗，主要在人類(lèi)醫(yī)學(xué)中，作為RNA 類(lèi)藥物，用于抗腫瘤研宄。在動(dòng)物疫苗領(lǐng)域尚未見(jiàn)RNA 疫苗的應(yīng)用報(bào)道。

5. 亞單位疫苗與合成肽疫苗。

利用物理化學(xué)方法提純病原微生物中具免疫原性的組份，或者利用基因工程表達(dá)該組分，純化后加入佐劑而制成。豬傳染性胸膜肺炎的亞單位疫苗中含有毒素I, 毒素II,毒素III 和外膜蛋白等， 能提供對(duì)所有15 個(gè)血清型的交叉保護(hù)力。我國(guó)使用的口蹄疫合成肽疫苗，是利用人工方法合成口蹄疫病毒VP1 蛋白中具有較強(qiáng)免疫原性的抗原片段，加入佐劑制成。該疫苗的優(yōu)點(diǎn)是抗原組分單一，純度高，免疫反應(yīng)強(qiáng)，副作用低；能迅速針對(duì)新出現(xiàn)變異毒株研制其合成肽疫苗。但是，其成本較高。

6．轉(zhuǎn)基因植物可飼疫苗。

將病原微生物中編碼免疫蛋白的基因插入植物基因組中，獲得表達(dá)病原微生物免疫原性的植物，再?gòu)闹参镏刑峒兊鞍子糜谧⑸鋭?dòng)物或?qū)⒅参镏苯语曃箘?dòng)物，產(chǎn)生免疫力。用于表達(dá)免疫原性基因的植物主要是馬鈴薯、玉米、蔬菜、番茄、煙草和香蕉等，稱(chēng)為轉(zhuǎn)基因可飼疫苗（ediable vaccine)。此類(lèi)疫苗在口蹄疫（擬南芥、苜蓿和馬鈴薯為受體)、豬傳染性胃腸炎（馬鈴薯、花椰菜和土豆為受體)、腹瀉（煙草為受體）和輪狀病毒感染（番茄和馬鈴薯為受體）等疾病防控中有研究的報(bào)道,但未見(jiàn)臨床應(yīng)用。目前的技術(shù)難題是：選擇直接生食和貯藏方便的植物作為表達(dá)植株（煙草不適用于動(dòng)物基因的篩選和優(yōu)化其密碼子和使用合適啟動(dòng)子，使其表達(dá)量滿(mǎn)足疫苗免疫劑量的要求；免疫劑量免疫程序的確定；并設(shè)法提高口服后黏膜免疫效果。轉(zhuǎn)基因植物可飼疫苗主要應(yīng)用在胃腸道疾病中。

二、疫苗使用的注意事項(xiàng)

1． 建立在正確的流行病學(xué)調(diào)查基礎(chǔ)上，有針對(duì)性選擇所需疫苗，不可盲從。對(duì)于多血清型菌株感染，應(yīng)選擇與當(dāng)?shù)亓餍芯暄逍鸵恢碌囊呙?，免疫效果要確實(shí)。

2．確保疫苗運(yùn)輸和使用過(guò)程中的冷鏈保障。如疫苗的物理性狀己經(jīng)改變，如分層現(xiàn)象，不可用手工混勻后再使用，應(yīng)丟棄。

3．細(xì)菌活疫苗使用前后不可同時(shí)使用抗生素或有抗菌活性的中草藥。

4．建議使用于健康豬群；正在發(fā)病豬群使用緊急接種，可能會(huì)加快處于疾病晚期豬只死亡，但是會(huì)縮短豬群的病程，因此要有心理準(zhǔn)備。

5．制定合理的免疫程序，避免母源抗體干擾。不同疫苗接種之間至少間隔1 周。不同疫苗的同時(shí)混合使用，要先做小范圍的觀察，如無(wú)副反應(yīng)，再大群使用。

篇4

關(guān)鍵詞新城疫；病毒；疫苗；研究進(jìn)展

中圖分類(lèi)號(hào)　S851　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼　A　文章編號(hào)　1007-5739(2012)02-0325-03

新城疫病毒屬于副粘病毒科副粘病毒屬，為有囊膜的單股負(fù)鏈RNA病毒。其基因組編碼6個(gè)蛋白：RNA依賴(lài)的RNA聚合酶(L基因)、血凝素神經(jīng)氨酸酶(HN)、融合蛋白(F基因)、基質(zhì)蛋白(M基因)、磷蛋白(P基因)、白(NP基因)。其中F蛋白有使病毒囊膜與宿主細(xì)胞融合進(jìn)而導(dǎo)致病毒傳人宿主細(xì)胞膜的作用，是決定病毒毒力的關(guān)鍵因子。而HN蛋白是NDV的另一種重要的致病因子，它的主要作用是參與病毒粒子與細(xì)胞受體的最初吸附以及破壞這種吸附作用。此外，HN蛋白還可使F蛋白充分接近受體而發(fā)生病毒與細(xì)胞膜的融合而致病。因此，NDV表面的HN-F糖蛋白在病毒的傳染性和治病性上起到至關(guān)重要的作用，許多新城疫基因工程疫苗的研制都依賴(lài)于F、HN蛋白。

新城疫(ND)是一種侵害禽類(lèi)的急性高度接觸性傳染病，由新城疫病毒引起。自1926年首次在印度尼西亞的爪哇島和英國(guó)的新城暴發(fā)以來(lái)，至今已有4次世界范圍內(nèi)的大流行，給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。NDV基因型已經(jīng)發(fā)生了很大的差異(I-Ⅺ)。雖然現(xiàn)有的滅活苗和弱毒苗能獲得較好的免疫效果，但是近年來(lái)由強(qiáng)毒引起的非典型ND在免疫雞群中時(shí)有發(fā)生，因而研究出安全、高效的新型疫苗一直備受有關(guān)學(xué)者的關(guān)注。目前，亞單位疫苗、活載體疫苗、新城疫病毒載體疫苗、DNA疫苗等都被廣泛研究。

1　常規(guī)疫苗

1.1　滅活苗

滅活苗一般是由滅活的感染性尿囊液與載體佐劑混合后制得，能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，使抗體以較高的水平在體內(nèi)持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間，且易于儲(chǔ)存。目前，廣泛使用的滅活苗為油乳劑滅活苗，多用Ulster2e、B1、LaSota及Rokin等作毒種來(lái)生產(chǎn)，這些毒株在雞胚中均能大量增殖，多用于二聯(lián)苗或多聯(lián)疫苗的制造，使用多聯(lián)苗可以節(jié)省勞動(dòng)力，免疫效力受母源抗體影響較小，免疫后副作用小。但由于注射劑量和疫苗對(duì)免疫效果有很大的影響。且滅活疫苗中需要添加Avridine、ISCOMS弗氏完全佐劑、礦物油、動(dòng)植物油、脂質(zhì)體等佐劑，導(dǎo)致免疫成本大大提高。同時(shí)，接種滅活苗的機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)病毒的特異性抗體，干擾臨床檢測(cè)檢疫以及流行病學(xué)調(diào)查，這是以滅活苗防治ND的最大障礙。

1.2　活疫苗

活疫苗一般由感染胚尿囊液凍干而成，通過(guò)飲水、進(jìn)食、噴霧、氣霧等途徑大規(guī)模免疫雞群。通常NDV活疫苗分為緩發(fā)型和中發(fā)型。B1株和Lasota株是天然弱毒株，幾乎無(wú)致病性，可作為緩發(fā)型疫苗，經(jīng)滴鼻、點(diǎn)眼、飲水、氣霧等途徑接種免疫，保護(hù)效果較好。而H株、Roakin株等屬中發(fā)型的疫苗，由于毒力較強(qiáng)，只能用于二次免疫。也有用CS2株、V4株等作活疫苗的，也能達(dá)到良好的免疫效果?；畈《靖腥灸艽碳C(jī)體產(chǎn)生局部免疫，免疫后可較快得到保護(hù)，一般接種后3-5d就能產(chǎn)生抗體，抗體一般可維持20-30d。主要產(chǎn)生黏膜抗體(IgA)，對(duì)機(jī)體呼吸道、消化道等局部黏膜免疫具有重要作用，是阻止外界病毒入侵的屏障?；钜呙缫子诖笠?guī)模使用，較便宜，且疫苗毒還可以使免疫雞傳給未免疫雞，但由于環(huán)境條件及并發(fā)感染，可能引發(fā)疾病，母源抗體對(duì)初次免疫影響較大。此外，若在生產(chǎn)過(guò)程中控制不當(dāng)，活疫苗易被滅活、污染，有毒力返強(qiáng)的危險(xiǎn)。因此，為了使NDV得到更好的控制，人們又開(kāi)發(fā)了其他類(lèi)型的疫苗。

2　基因工程疫苗

2.1　亞單位疫苗

利用重組DNA技術(shù)輔以佐劑將NDV保護(hù)性抗原基因在高效的表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)而制成亞單位疫苗。目前，桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是研究ND亞單位疫苗的主要常用工具。Nagyetal分別利用昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)了NDV的F及HN蛋白，對(duì)雛雞進(jìn)行免疫。結(jié)果表明，表達(dá)的F和HN蛋白能夠產(chǎn)生很好的免疫保護(hù)作用。丁壯等應(yīng)用該系統(tǒng)表達(dá)NDV四平和長(zhǎng)春2個(gè)分離株的HN，用NDV強(qiáng)毒攻毒后，分別達(dá)到65％(四平株)和100％(長(zhǎng)春株)的保護(hù)率。聞曉波等構(gòu)建含有NDV的M、NP、F、HN 4個(gè)基因的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體，并得到了共表達(dá)的NDV的M、NP、F、HN4個(gè)蛋白，為進(jìn)一步研究亞單位疫苗及NDV結(jié)構(gòu)蛋白之間的相互作用奠定了基礎(chǔ)。Kapczynski et al用處理NDV的不具感染性的病毒HN和F蛋白免疫雞，經(jīng)驗(yàn)證這些病毒亞單位成分具有良好的免疫保護(hù)效果。亞單位疫苗具有安全性高、穩(wěn)定性好、運(yùn)輸方便、批量生產(chǎn)容易的優(yōu)點(diǎn)。是ND疫苗未來(lái)發(fā)展的一個(gè)重要方向，但是由于生產(chǎn)成本高，價(jià)格受限，很難真正用于疫苗生產(chǎn)，除非改進(jìn)表達(dá)技術(shù)，顯著降低成本。

2.2　新城疫病毒重組活載體疫苗

近年來(lái)，采用以病毒或細(xì)菌為載體研究新城疫活疫苗的技術(shù)路線(xiàn)被多數(shù)學(xué)者主張。將NDV F和HN基因在動(dòng)物病毒弱毒或無(wú)毒株(如腺病毒、痘苗病毒、反轉(zhuǎn)錄病毒等)等載體上進(jìn)行表達(dá)，均已獲得成功。目前，痘病毒、腺病毒和孢疹病毒等都是較為理想的病毒載體。1990年Taylor et al將新城疫病毒Texas株F基因插入禽痘病毒中，在培養(yǎng)細(xì)胞中得以表達(dá)，經(jīng)糖基化修飾后切割成F1和F2，通過(guò)點(diǎn)眼或口服重組病毒可獲得部分攻毒保護(hù)，而通過(guò)肌肉注射或翅下刺種，免疫1次就可獲得完全攻毒保護(hù)。Morgan et al將NDV的F、HN基因分別克隆人火雞孢疹病毒的復(fù)制非，必需區(qū)(US2)，利用Rous肉瘤病毒LTR的強(qiáng)啟動(dòng)子構(gòu)建重組病毒，用其腹腔接種SPF白來(lái)航雞，第28天后肌肉注射攻毒，表達(dá)F蛋白的重組病毒的保護(hù)率高達(dá)90％。曹殿軍等將NDV HN基因在重組雞痘病毒中表達(dá)，以NDV強(qiáng)毒株F48E9攻毒發(fā)現(xiàn)，接種重組病毒106pfu／只時(shí)，保護(hù)力可達(dá)80％，而104pfu／只時(shí)，保護(hù)力可達(dá)60％。說(shuō)明該重組病毒對(duì)雛雞具有一定的保護(hù)作用，且該保護(hù)作用與接種劑量有一定的相關(guān)性。梁雪芽等將含NDV F48E9株融合蛋白(F)基因的真核表達(dá)質(zhì)粒PCDNA3-F的減毒鼠傷寒沙門(mén)氏菌ZJIll株(Z]111／PCDNA3-F)口服接種小鼠和雛雞，表明利用該減毒株作為載體傳遞DNA疫苗具有相對(duì)安全性。用ZJlll／PEDNA3-F以108cfu／只免疫雛雞，2周后二免，二免后4周攻擊致死劑量的強(qiáng)毒株F48E9。結(jié)果表明：重組zJlll／PCDNA3-F菌株不僅能誘導(dǎo)法氏囊B淋巴細(xì)胞和胸腺T淋巴細(xì)胞的增值反應(yīng)，而且能誘導(dǎo)雛雞產(chǎn)生NDV抗體，對(duì)強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)率高于PCDNA3-F裸質(zhì)粒DNA疫苗注射免疫組(50.00％)，達(dá)66.7％?；钶d體疫苗是當(dāng)今及未來(lái)疫苗開(kāi)發(fā)與研制的主要方向之一，其不僅具有傳統(tǒng)疫苗的許多優(yōu)點(diǎn)，而且還為多價(jià)苗及聯(lián)苗的生產(chǎn)開(kāi)辟了新道路。

2.3　新城疫病毒載體疫苗

隨著反向遺傳學(xué)的發(fā)展，重組NDV載體已成為當(dāng)今病毒載體系統(tǒng)研究的熱點(diǎn)之一?；贜DV可以誘導(dǎo)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫能在體內(nèi)增值，并長(zhǎng)期表達(dá)抗原基因，使機(jī)體得到較強(qiáng)且較持久的免疫保護(hù)，且是一種RNA病毒，不會(huì)與宿主基因組整合，安全性較高，被學(xué)者們認(rèn)為是很好的疫苗載體。Zhao et al。吩別在NDV強(qiáng)毒株和弱毒株的4個(gè)不同基因間區(qū)域插入外源基因，結(jié)果表明：NDV作為疫苗載體是完全可行的，因?yàn)椴《镜膹?fù)制效率和滴度并沒(méi)有受到影響。Peeters et al以含禽副粘病毒4型基因的雜合體HN基因取代NDV HN基因，構(gòu)建的嵌合體病毒作為活疫苗可以產(chǎn)生對(duì)NDV的免疫保護(hù)以及對(duì)F蛋白的中和抗體，不僅能夠抵制致死劑量NDV的攻擊，而且根據(jù)其對(duì)HN所產(chǎn)生的抗體及血清分析即可區(qū)別于野生毒感染。

2.4　核酸疫苗

核酸疫苗最早是由Wolffet al于1990年發(fā)現(xiàn)。他們注意到給小鼠直接肌肉注射質(zhì)粒DNA，質(zhì)粒及純化的DNA或RNA重組表達(dá)載體，可使載體上的基因在局部肌肉細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，這種表達(dá)可持續(xù)數(shù)日甚至終身，且沒(méi)有檢出注射的外源核酸與宿主染色體的混合，之后William，Tang et al也證實(shí)了這一點(diǎn)。1994年其被世界衛(wèi)生組織(WHO)正式統(tǒng)一命名為核酸疫苗(nuclmc acid vaccine)。它是指把外源基因克隆到真核質(zhì)粒表達(dá)載體上，然后將重組的質(zhì)粒DNA直接注射到動(dòng)物體內(nèi)，使外源基因通過(guò)宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)合成抗原蛋白，刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)，使機(jī)體產(chǎn)生特異性的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答。

NDV DNA疫苗是將病毒的HN或F基因通過(guò)表達(dá)質(zhì)粒DNA導(dǎo)入機(jī)體，產(chǎn)生針對(duì)這些抗原的特異性免疫反應(yīng)。對(duì)于DNA疫苗來(lái)說(shuō)，載體質(zhì)粒要能在大腸桿菌中高拷貝地?cái)U(kuò)增，且在動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)能高效表達(dá)，但不能復(fù)制，也不能含有向宿主細(xì)胞基因組內(nèi)整合的序列。目前，常用的是含有巨噬細(xì)胞病毒(cMV)早期啟動(dòng)子的載體質(zhì)粒。Sakaguchim et al于1996年用小雞作模型進(jìn)行包含新城疫F基因的質(zhì)粒DNA免疫雞試驗(yàn)，結(jié)果表明：2／5用線(xiàn)性的F基因質(zhì)粒免疫雞產(chǎn)生了特異抗體，新城疫病毒DNA疫苗研究由此開(kāi)始。陳吉祥等用表面活性劑CATB／DOPE脂質(zhì)體包裹DNV HN基因的真核表達(dá)質(zhì)粒PcHNM免疫5周齡雛雞，免疫1周后。即可在雞血清中測(cè)出特異性HI抗體，但裸DNA免疫HI抗體水平比脂質(zhì)體DNA免疫組要低。最后用強(qiáng)毒攻擊后，CTAB脂質(zhì)體DNA免疫組保護(hù)率能達(dá)到100％，而裸DNA只有81.82％，表明該質(zhì)粒DNA被脂質(zhì)體包裹后，提高了特異性抗體產(chǎn)生能力，加強(qiáng)了對(duì)強(qiáng)毒的抵抗力。Yin et al研究表明，利用r-干擾素和左旋咪唑2種佐劑協(xié)同作用制備的DNA疫苗，比單用DNA疫苗免疫效果更好，對(duì)試驗(yàn)雞抵抗致死劑量NDV的保護(hù)率達(dá)80％。新城疫DNA疫苗具有免疫效果好，不存在散毒和毒力返強(qiáng)的危險(xiǎn)；免疫應(yīng)答持久：方法簡(jiǎn)便，價(jià)格低廉；可加工成干燥的小粒，便于貯藏和運(yùn)輸。但是目前核酸疫苗的安全性、作用機(jī)理及如何提高免疫水平仍需進(jìn)一步研究。

篇5

【關(guān)鍵詞】生物制藥 技術(shù) 研究

中圖分類(lèi)號(hào)：R9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1005-0515（2011）3-249-02

Pharmaceutical Biotechnology Progress

【Abstract】Biotechnology drugs are the current and future important areas of drug development, including biotechnology, genetic engineering, application of drugs is a very important area. Biotechnology will be biotech drugs pharmaceutical technology innovation and development have an important influence and role. Snatch scientific high ground that gave birth to science growing point, the strategic focus shifted to achieve pharmaceutical research, will be the way of the development of the pharmaceutical industry.

【Keywords】Biopharmaceutical technology study

生物制藥是指借助生物工程來(lái)合成制備有藥物活性的蛋白質(zhì)產(chǎn)品并應(yīng)用于制藥工業(yè)部分的技術(shù)和過(guò)程。目前,生物制藥產(chǎn)業(yè)已經(jīng)成為世紀(jì)最具前途的產(chǎn)業(yè)之一, 是生物工程應(yīng)用研發(fā)中最活躍和進(jìn)展最快的領(lǐng)域。世界上許多國(guó)家都把生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)作為優(yōu)先發(fā)展的戰(zhàn)略性產(chǎn)業(yè)之一,不斷加大對(duì)生物制藥產(chǎn)業(yè)的政策扶持與資金投入。

1 全球新藥研發(fā)現(xiàn)狀

1.1 科技發(fā)展成為強(qiáng)大動(dòng)力

科技發(fā)展是醫(yī)藥行業(yè)快速成長(zhǎng)的強(qiáng)大動(dòng)力。隨著現(xiàn)代生活方式和疾病發(fā)生情況的改變, 研發(fā)工作有了相應(yīng)調(diào)整,生物技術(shù)、納米技術(shù)和計(jì)算機(jī)技術(shù)等在醫(yī)藥產(chǎn)品研發(fā)和醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用日益顯著, 以高通量篩選技術(shù)為基礎(chǔ), 綜合采用計(jì)算機(jī)處理、新型分析手段、先進(jìn)設(shè)備和快捷的信息技術(shù)己經(jīng)使新藥先導(dǎo)物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)時(shí)間大大縮短。研發(fā)和技術(shù)創(chuàng)新日趨全球化, 傳統(tǒng)的研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售模式仍將繼續(xù), 但電子商務(wù)、企業(yè)客戶(hù)管理和信息技術(shù)的交流融通持續(xù)帶來(lái)醫(yī)療市場(chǎng)的革命, 對(duì)醫(yī)藥營(yíng)銷(xiāo)模式影響深遠(yuǎn)。

1.2 藥品消費(fèi)變化使新藥研發(fā)更具挑戰(zhàn)性

全球經(jīng)濟(jì)發(fā)展不均衡導(dǎo)致藥品消費(fèi)不均衡, 目前全球藥品消費(fèi)有85％以上集中于美、歐、日等幾個(gè)發(fā)達(dá)國(guó)家和地區(qū)。隨著發(fā)展中國(guó)家經(jīng)濟(jì)的發(fā)展, 其用藥水平將隨之提高, 這為藥品市場(chǎng)日后增長(zhǎng)提供了機(jī)會(huì), 但各國(guó)政府為增進(jìn)人民健康福利, 勢(shì)必大力推廣價(jià)格相對(duì)便宜的非專(zhuān)利藥物, 或者對(duì)于專(zhuān)利藥物采取不甚嚴(yán)格的專(zhuān)利保護(hù)手段, 這對(duì)制藥企業(yè)的研發(fā)來(lái)說(shuō)將是一大挑戰(zhàn)。

2 生物工程制藥研究進(jìn)展

生物醫(yī)藥領(lǐng)域涵蓋化學(xué)制藥、生物工程制藥、生物技術(shù)制藥、生物醫(yī)藥工程、醫(yī)療儀器等方面。近年來(lái), 美、英、法、日等國(guó)一些生物技術(shù)公司和制藥公司在基因工程、重組疫苗、單克隆抗體、診斷試劑、生物芯片、人造器官、新型給藥系統(tǒng)、新型醫(yī)療器械等領(lǐng)域進(jìn)行了大量積極的研究, 已取得顯著進(jìn)展。天然植物藥的研究越來(lái)越受到重視, 新的用藥選擇極大地推動(dòng)著植物藥的發(fā)展。

2.1 基因工程

基因工程又稱(chēng)遺傳工程, 即重組DNA 技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用。它是把在體外重新組合的DNA 引入到適當(dāng)?shù)募?xì)胞中進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)。利用基因工程細(xì)菌等表達(dá)人類(lèi)一些重要基因片段, 可產(chǎn)生具有生理活性的肽類(lèi)和蛋白質(zhì)類(lèi)藥物。這一技術(shù)可以大量廉價(jià)生產(chǎn)以前不敢想象的醫(yī)藥產(chǎn)品[1]。應(yīng)用基因工程技術(shù)改造產(chǎn)生新的雜合抗生素, 為微生物藥物提供了一個(gè)新的來(lái)源。

現(xiàn)代重組DNA 技術(shù)特別是基因顯微注射技術(shù)的發(fā)展,奠定了轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物發(fā)展的基礎(chǔ)。轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物將發(fā)展成為生物藥品的新一代藥廠, 具有光明的前景和廣闊的市場(chǎng)。

此外，1990 年以來(lái)利用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)基因工程疫苗的研究得到了迅速發(fā)展。利用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)基因工程疫苗, 是將抗原基因?qū)胫参? 讓其在植物中表達(dá), 人或動(dòng)物攝入該植物或其中的抗原蛋白質(zhì), 以產(chǎn)生對(duì)某抗原的免疫應(yīng)答。轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)疫苗的研究主要集中在煙草、馬鈴薯、蕃茄、香蕉等植物。

2.2 細(xì)胞工程

細(xì)胞工程是在細(xì)胞水平上的生物工程。細(xì)胞工程是在對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的深入認(rèn)識(shí)和細(xì)胞遺傳學(xué)的研究基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。DNA 分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)弄清了許多遺傳學(xué)原理, 還是從分子水平上揭示結(jié)構(gòu)同機(jī)能關(guān)系的一個(gè)極好例證。這奠定了細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)的理論基礎(chǔ)[2]。人們認(rèn)識(shí)到培養(yǎng)的動(dòng)、植物細(xì)胞可以通過(guò)無(wú)性繁殖擴(kuò)大群體數(shù)量同時(shí)保持本身遺傳性狀一致; 融合細(xì)胞通過(guò)容納2 種親本細(xì)胞的基因載體-染色體而具有親本雙方的優(yōu)良性狀。通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來(lái)的單克隆抗體技術(shù)取得了重大成就, 該技術(shù)被譽(yù)為免疫學(xué)中的“革命”。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)亦取得了豐碩成果。細(xì)胞工程同基因工程結(jié)合, 前景尤為廣闊?，F(xiàn)在應(yīng)用較廣泛的有單克隆抗體技術(shù)、植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。另外, 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也是基因工程中利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物生產(chǎn)蛋白質(zhì)類(lèi)藥物的基礎(chǔ)技術(shù)之一。

2.3 微生物工程

微生物工程也稱(chēng)發(fā)酵工程, 它在原有發(fā)酵技術(shù)的基礎(chǔ)上又采用了新技術(shù)使工藝水平大大提高。所采用的新技術(shù)主要應(yīng)用于3 個(gè)方面[3]: 工藝改進(jìn)、新藥研制和菌種改造。工藝改進(jìn)主要依賴(lài)于計(jì)算機(jī)理論及技術(shù)的發(fā)展。新藥研制則得益于醫(yī)學(xué)研究中對(duì)疾病機(jī)理的深入了解。菌種改造主要利用基因工程原理及技術(shù)。正是由于采用其它學(xué)科的理論和新技術(shù)成果, 使得微生物工程成為一高新技術(shù)。

現(xiàn)酵工程不但生產(chǎn)酒精類(lèi)飲料、醋酸和面包, 而且生產(chǎn)胰島素、干擾素、生長(zhǎng)激素、抗生素和疫苗等多種醫(yī)療保健藥物, 生產(chǎn)天然殺蟲(chóng)劑、細(xì)菌肥料和微生物除草劑等農(nóng)用生產(chǎn)資料, 在化學(xué)工業(yè)上生產(chǎn)氨基酸、香料、生物高分子、酶、維生素和單細(xì)胞蛋白等。

近年來(lái), 隨著基礎(chǔ)生命科學(xué)的發(fā)展和各種新生物技術(shù)的應(yīng)用, 由微生物產(chǎn)生的具有除抗感染、抗腫瘤作用以外的其它活性物質(zhì)的報(bào)道越來(lái)越多, 如酶抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、受體頡頏劑和抗氧化劑等, 其生物活性超過(guò)了傳統(tǒng)抗生素所包括的范圍。

2.4 酶工程

酶工程就是利用酶的催化作用進(jìn)行物質(zhì)轉(zhuǎn)化,生產(chǎn)人們所需產(chǎn)品的技術(shù), 是將酶學(xué)理論與化工技術(shù)結(jié)合起來(lái)的一項(xiàng)高新技術(shù)。酶工程技術(shù)的應(yīng)用范圍大致有[4]：對(duì)生物寶庫(kù)中存在天然酶的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)；自然酶的分離純化及鑒定技術(shù)；酶的固定化技術(shù)；固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)；酶反應(yīng)器的研制和應(yīng)用；與其它生物技術(shù)領(lǐng)域的交叉和滲透。

酶工程對(duì)醫(yī)藥、醫(yī)療方面貢獻(xiàn)巨大?，F(xiàn)在, 菠蘿蛋白酶、纖維素酶、淀粉酶、胃蛋白酶等十幾種可以進(jìn)行食物轉(zhuǎn)化的酶都已進(jìn)入食品和藥物中, 以解除許多有胃分泌功能障礙患者的痛苦, 此外還有抗腫瘤的L-天冬酰胺酶、白喉毒素, 用于治療炎癥的胰凝乳蛋白酶, 降血壓的激肽釋放酶, 溶解血凝塊的尿激酶等。另外, 新型青霉素產(chǎn)品及青霉素酶抑制劑等也都是酶工程在醫(yī)藥醫(yī)療領(lǐng)域的成功應(yīng)用實(shí)例。

2.5 蛋白質(zhì)工程

蛋白質(zhì)工程也稱(chēng)“第二代基因工程”。蛋白質(zhì)工程主要包括通過(guò)基因工程技術(shù)了解蛋白質(zhì)的DNA編碼序列、蛋白質(zhì)的分離純化、蛋白質(zhì)的序列分析和結(jié)構(gòu)功能分析、蛋白質(zhì)結(jié)晶和蛋白質(zhì)的力學(xué)分析、蛋白質(zhì)的DNA 突變改造等過(guò)程[5]。蛋白質(zhì)工程為改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能找到了新途徑, 推動(dòng)了蛋白質(zhì)和酶的研究, 為工業(yè)和醫(yī)藥用蛋白質(zhì)(包括酶) 的實(shí)用化開(kāi)拓了美妙前景。

第二代基因工程藥物是根據(jù)內(nèi)源性多肽蛋白的生理活性, 應(yīng)用基因工程技術(shù)大量生產(chǎn)這些極為稀有的物質(zhì), 以超正常濃度劑量供給人體, 以激發(fā)它們的天然活性作為其治療疾病的藥理基礎(chǔ), 生物制藥作為生物工程研究開(kāi)發(fā)和應(yīng)用中最活躍、進(jìn)展最快的領(lǐng)域, 被公認(rèn)為是21 世紀(jì)最有前途的產(chǎn)業(yè)之一。生物技術(shù)是令人矚目的高新技術(shù), 為人類(lèi)解決疾病防治、人口膨脹等一系列問(wèn)題帶來(lái)了希望。目前生物新技術(shù)的研究取得重大突破, 產(chǎn)生大量有益于人類(lèi)健康的生物醫(yī)藥產(chǎn)品。可以預(yù)測(cè), 申報(bào)、臨床試驗(yàn)、使用的生物技術(shù)新藥將會(huì)越來(lái)越多, 生物工程制藥產(chǎn)業(yè)不僅將成為利潤(rùn)豐富的支柱產(chǎn)業(yè), 也將為人類(lèi)健康提供更多更好的保障。

參考文獻(xiàn)

[1] 唐玲；邱家學(xué)；談我國(guó)制藥企業(yè)的藥品研發(fā)問(wèn)題[J]. 國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào) 2005年13期.

[2] 慕金超；曹可；淺談現(xiàn)代生物制藥技術(shù)的現(xiàn)狀和發(fā)展[J]. 科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào) 2007年31期.

[3] 李充璧；王利平；生物技術(shù)制藥現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(shì)[J]. 肇慶學(xué)院學(xué)報(bào) 2008年05期.

篇6

【關(guān)鍵詞】生物醫(yī)藥 新興產(chǎn)業(yè) 必要性

世界上任何一個(gè)國(guó)家，無(wú)論貧富，其政府對(duì)醫(yī)藥行業(yè)在嚴(yán)格監(jiān)管的同時(shí)都采取了積極扶植的政策。

生老病死是不以人們意志為轉(zhuǎn)移的，所以在醫(yī)藥市場(chǎng)上，需求是剛性的，其發(fā)展較少受經(jīng)濟(jì)周期的影響，在經(jīng)濟(jì)危機(jī)中仍能保持一定的增長(zhǎng)。2008年金融危機(jī)爆發(fā)以來(lái)，醫(yī)藥行業(yè)受到的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于金融業(yè)和其它制造業(yè)。受宏觀經(jīng)濟(jì)影響，醫(yī)藥主流市場(chǎng)從傳統(tǒng)的美國(guó)、日本等發(fā)達(dá)國(guó)家向以中國(guó)、印度為代表的新興市場(chǎng)國(guó)家快速轉(zhuǎn)移，加之中國(guó)龐大的人口基數(shù)和人口老齡化進(jìn)程的加快，中國(guó)的藥品市場(chǎng)增長(zhǎng)速度已排在世界前列，這也使得中國(guó)的醫(yī)藥市場(chǎng)成為全球競(jìng)爭(zhēng)最激烈的市場(chǎng)。

醫(yī)藥市場(chǎng)是我國(guó)最早全面開(kāi)放的市場(chǎng)之一，從80年代開(kāi)始世界上知名的跨國(guó)公司紛紛涌入中國(guó)市場(chǎng)，2009年以來(lái)，跨國(guó)公司又掀起的第二次進(jìn)軍中國(guó)熱潮，給中國(guó)的醫(yī)藥企業(yè)帶來(lái)前所未有的挑戰(zhàn)。

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人民生活水平的不斷提高，醫(yī)藥衛(wèi)生體制改革的不斷深入，以及社會(huì)保險(xiǎn)體系的不斷完善，全社會(huì)對(duì)醫(yī)療、醫(yī)藥、公共衛(wèi)生服務(wù)要求不斷提高；加之全球化帶來(lái)的國(guó)際間日趨激烈的競(jìng)爭(zhēng)，中國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展必然迎來(lái)結(jié)構(gòu)性的調(diào)整。內(nèi)外部競(jìng)爭(zhēng)形勢(shì)迫切要求中國(guó)醫(yī)藥企業(yè)迅速做大做強(qiáng)，以具備與跨國(guó)公司巨頭同臺(tái)競(jìng)技的能力。

國(guó)務(wù)院2010年10月的《關(guān)于加快培育和發(fā)展戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)的決定》，將生物醫(yī)藥列為七大戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)。2011年中央經(jīng)濟(jì)工作會(huì)議進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了把發(fā)展生物醫(yī)藥等戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)作為產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)升級(jí)的重要工作。張德江副總理在2011年12月19日中央企業(yè)負(fù)責(zé)人會(huì)議上發(fā)表講話(huà)要求中央企業(yè)“大力推動(dòng)產(chǎn)業(yè)升級(jí)，在結(jié)構(gòu)調(diào)整中發(fā)揮帶頭作用”，強(qiáng)調(diào)“要大力培育發(fā)展戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)?！?/p>

2011年10月26日，國(guó)務(wù)院常務(wù)會(huì)議討論通過(guò)了《疫苗供應(yīng)體系建設(shè)規(guī)劃》，充分體現(xiàn)了國(guó)家醫(yī)改政策以預(yù)防為主、高度重視生物疫苗產(chǎn)業(yè)發(fā)展的思路。《規(guī)劃》中明確了國(guó)家疫苗供應(yīng)體系建設(shè)的重點(diǎn)項(xiàng)目：一是培育重要急需新產(chǎn)品，盡快完成手足口病疫苗等6種新疫苗的研制及產(chǎn)業(yè)化，加快研制和研發(fā)一批新的疫苗品種；二是建設(shè)關(guān)鍵研發(fā)設(shè)施，重點(diǎn)支持新型疫苗國(guó)家研究中心等能力建設(shè)；三是擴(kuò)增急需產(chǎn)能和實(shí)物儲(chǔ)備；四是提高疫苗行業(yè)裝備水平；五是建立疫苗質(zhì)量檢驗(yàn)體系。

中國(guó)醫(yī)藥市場(chǎng)的巨大潛力，吸引著跨國(guó)生物醫(yī)藥生產(chǎn)巨頭通過(guò)投資設(shè)廠、兼并收購(gòu)民營(yíng)生產(chǎn)企業(yè)等方式加快進(jìn)軍中國(guó)。2007年11月，法國(guó)賽諾菲安萬(wàn)特公司宣布投資9400萬(wàn)美元在深圳修建流感疫苗生產(chǎn)基地；2009年10月，英國(guó)葛蘭素史克公司宣布與云南沃森生物技術(shù)有限公司公司成立合資企業(yè)并擁有合資企業(yè)65%股權(quán)；2009年11月，瑞士諾華公司宣布以1.25億美元收購(gòu)杭州天元生物藥業(yè)有限公司85%的股權(quán)?？鐕?guó)公司在中國(guó)快速發(fā)展生物制藥業(yè)，使中國(guó)醫(yī)藥企業(yè)受到了嚴(yán)峻的威脅和挑戰(zhàn)。

但是，國(guó)家產(chǎn)業(yè)政策（特別是國(guó)家“863”高技術(shù)計(jì)劃）的大力支持下，近年來(lái)我國(guó)生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，技術(shù)水平和創(chuàng)新能力明顯提高，形成了比較完整的產(chǎn)業(yè)體系，與國(guó)際先進(jìn)水平差距逐年縮小。目前已有15種基因工程藥物和若干種疫苗批準(zhǔn)上市，另有十幾種基因工程藥物正在進(jìn)行臨床驗(yàn)證，還在研制中的約有數(shù)十種。國(guó)產(chǎn)基因工程藥物的不斷開(kāi)發(fā)生產(chǎn)和上市，打破了國(guó)外生物制品長(zhǎng)期壟斷中國(guó)臨床用藥的局面。目前，國(guó)產(chǎn)干擾素α的銷(xiāo)售市場(chǎng)占有率已經(jīng)超過(guò)了進(jìn)口產(chǎn)品。因此，加大對(duì)生物制藥產(chǎn)業(yè)，特別是疫苗產(chǎn)業(yè)的投入，并以此作為趕超國(guó)際先進(jìn)水平的突破口，有助于促使我國(guó)整個(gè)醫(yī)藥行業(yè)的發(fā)展。

國(guó)家藥監(jiān)局2011年2月頒布的《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（簡(jiǎn)稱(chēng)新版gmp）已經(jīng)于當(dāng)年3月1日正式實(shí)施。去年3月，我國(guó)疫苗監(jiān)管體系通過(guò)了who的評(píng)估，這意味著中國(guó)的生物疫苗產(chǎn)業(yè)產(chǎn)品走出國(guó)門(mén)、走向世界。目前我國(guó)生物醫(yī)藥研發(fā)和生產(chǎn)水平居發(fā)展中國(guó)家的前列，生物疫苗產(chǎn)業(yè)有附加值高、能源消耗少、污染排量低的特點(diǎn)。中國(guó)疫苗銷(xiāo)售占藥品比例不到1%，遠(yuǎn)低于全球2.7%的水平，產(chǎn)業(yè)發(fā)展仍然有很大的市場(chǎng)空間。

大力發(fā)展生物醫(yī)藥戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)，要保障國(guó)家防控重大傳染病、流行病及特種儲(chǔ)備所需的生物制品供應(yīng)；在重大新藥項(xiàng)目研發(fā)方面取得突成果，在重大工藝技術(shù)研發(fā)方面取得突破；加快

發(fā)展抗體和診斷試劑產(chǎn)業(yè)；努力開(kāi)拓動(dòng)物疫苗、生物治療等健康保健領(lǐng)域等。“十二五”時(shí)期生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)有兩大任務(wù)：一是產(chǎn)業(yè)升級(jí)，包括產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)升級(jí)和質(zhì)量保障體系的升級(jí)；二是占領(lǐng)生物醫(yī)藥制高點(diǎn)，順應(yīng)世界醫(yī)藥發(fā)展趨勢(shì)，追蹤前沿技術(shù)，大力發(fā)展基因工程藥物、抗體藥物和疫苗。建議市場(chǎng)個(gè)體通過(guò)生物制品新產(chǎn)品的研究開(kāi)發(fā)、生物制品關(guān)鍵技術(shù)的開(kāi)發(fā)、新生產(chǎn)基地的建設(shè)等作為發(fā)展生物醫(yī)藥戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)的突破口。特別是：

1.關(guān)鍵技術(shù)平臺(tái)建設(shè)項(xiàng)目

建立“國(guó)家疫苗工程中心”、“國(guó)家生物疫苗重點(diǎn)試驗(yàn)室”等具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的疫苗關(guān)鍵技術(shù)平臺(tái)，研究開(kāi)發(fā)創(chuàng)新疫苗產(chǎn)品，為我國(guó)生物技術(shù)藥物產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供源頭技術(shù)支撐。包括多糖-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗關(guān)鍵技術(shù)；多聯(lián)多價(jià)聯(lián)合疫苗與更新?lián)Q代疫苗技術(shù)；高效表達(dá)系統(tǒng)基因工程技術(shù)；大規(guī)模培養(yǎng)/發(fā)酵技術(shù)平臺(tái)等關(guān)鍵技術(shù)；并依托于上述技術(shù)平臺(tái)體系，針對(duì)嚴(yán)重危害我國(guó)人民健康、臨床急需的重大疾病，研制新的預(yù)防性疫苗，包括：ev71病毒滅活疫苗、多價(jià)輪狀病毒疫苗、脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗、帶狀皰疹疫苗、13價(jià)肺炎結(jié)合疫苗、4價(jià)流腦結(jié)合疫苗、甲型副傷寒桿菌疫苗、mmrv聯(lián)合疫苗、麻疹乙型腦炎聯(lián)合減毒活疫苗、無(wú)細(xì)胞百白破聯(lián)合疫苗-hib聯(lián)合疫苗、人瘤病毒（hpv）疫苗、戊肝病毒疫苗、增強(qiáng)型重組卡介苗和前s乙肝疫苗等。

2.符合who預(yù)認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)的疫苗生產(chǎn)基地

篇7

【摘 要】通過(guò)收集和交流有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物資料的活動(dòng)，使學(xué)生們認(rèn)識(shí)到：轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品是科技進(jìn)步的結(jié)晶，與我們的現(xiàn)實(shí)生活息息相關(guān)，只有科學(xué)合理的運(yùn)用才能造福人類(lèi)。

關(guān)鍵詞 轉(zhuǎn)基因；生物；調(diào)查

21世紀(jì)生物科學(xué)是自然科學(xué)中最活躍的學(xué)科之一。以基因工程、細(xì)胞工程等為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)正廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、食品、能源、環(huán)保、材料與環(huán)境等領(lǐng)域，與此相適應(yīng)的是，在中華人民共和國(guó)義務(wù)教育生物學(xué)課程標(biāo)準(zhǔn)中，“現(xiàn)代生物技術(shù)”被列為必修的課程內(nèi)容。為加深學(xué)生對(duì)現(xiàn)代生物技術(shù)的了解與關(guān)注，在這部分學(xué)習(xí)的活動(dòng)建議中，課程標(biāo)準(zhǔn)特地明確要求“收集和交流有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物資料，有條件的地方進(jìn)行實(shí)地調(diào)查”。下面結(jié)合我校多年的教學(xué)實(shí)踐，談?wù)勥@一活動(dòng)的教學(xué)實(shí)施。

1.學(xué)生知識(shí)背景與情感體驗(yàn)的分析

1．1知識(shí)背景分析：通過(guò)八年級(jí)上學(xué)期生物學(xué)遺傳和變異的學(xué)習(xí)，學(xué)生已經(jīng)知道絕大多數(shù)生物體的遺傳物質(zhì)是DNA，其分子上決定性狀的基本單位是基因?；虻倪z傳是有一定的規(guī)律的。通過(guò)八年級(jí)下學(xué)期現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的理論學(xué)習(xí)，也知道科學(xué)家們常說(shuō)的基因工程，就是按照人的意愿，運(yùn)用人工方法，對(duì)生物的基因進(jìn)行“移花接木”式改造的重組技術(shù)。所謂轉(zhuǎn)基因生物，就是指利用基因工程技術(shù)導(dǎo)入外源基因培育出的、能夠?qū)⑿滦誀罘€(wěn)定地遺傳給后代的基因工程生物，涉及到多種微生物、植物、動(dòng)物。運(yùn)用轉(zhuǎn)基因生物改良動(dòng)植物品種，最特出的優(yōu)點(diǎn)是能打破常規(guī)育種難以突破的物種之間的界限。

1．2情感體驗(yàn)分析：僅僅通過(guò)生物課堂的理論學(xué)習(xí)，學(xué)生對(duì)轉(zhuǎn)基因生物往往有種霧里看花的感覺(jué)，覺(jué)得現(xiàn)代生物技術(shù)是高科技的產(chǎn)物，什么轉(zhuǎn)基因鼠、轉(zhuǎn)基因牛、轉(zhuǎn)基因羊、轉(zhuǎn)基因水稻、玉米、大豆等，離初中生現(xiàn)實(shí)生活相距甚遠(yuǎn)，難以達(dá)到課程標(biāo)準(zhǔn)中的“關(guān)注現(xiàn)生物學(xué)相關(guān)的社會(huì)學(xué)問(wèn)題，初步形成主動(dòng)參與社會(huì)決策的意識(shí)”的情感、態(tài)度和價(jià)值觀的目標(biāo)要求。

2.“收集和交流有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物資料”活動(dòng)實(shí)施的教學(xué)理念

轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品已經(jīng)影響到我們生活的方方面面。如果僅僅是教師在網(wǎng)上搜集大量的圖片、資料，通過(guò)PPT等，向?qū)W生展示，雖然用心良苦，但往往收效甚微。當(dāng)今學(xué)習(xí)的方式、學(xué)習(xí)的手段、學(xué)習(xí)的情景等呈現(xiàn)多元化，因此有必要根據(jù)學(xué)校現(xiàn)有的條件，通過(guò)多種形式，組織學(xué)生收集轉(zhuǎn)基因生物的資料，交流討論，從而喚醒學(xué)生關(guān)注轉(zhuǎn)基因生物對(duì)人類(lèi)社會(huì)現(xiàn)代和未來(lái)的影響。

3.收集與交流活動(dòng)的具體組織與實(shí)施

將全班學(xué)生分為四組，每組十人左右。第一組：網(wǎng)絡(luò)媒體調(diào)查小組。通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)，查閱有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物的法律法規(guī)資料；第二組：市場(chǎng)調(diào)查組。調(diào)查本地超市、商場(chǎng)、連鎖店，調(diào)查所售商品有哪些是轉(zhuǎn)基因生物制作而成的。轉(zhuǎn)基因食品或用品有哪些標(biāo)識(shí)；第三組：醫(yī)院藥店調(diào)查組。調(diào)查有哪些疫苗、藥品是通過(guò)轉(zhuǎn)基因生物研制的；第四組：農(nóng)林牧副漁業(yè)調(diào)查組。調(diào)查目前在當(dāng)?shù)赜心男┢毡榉N植、養(yǎng)殖的轉(zhuǎn)基因生物。

4.交流調(diào)查結(jié)果

第一組在收集后得知中國(guó)農(nóng)業(yè)部已經(jīng)批準(zhǔn)種植的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物有：甜椒、西紅柿、土豆；主糧作物有玉米、水稻。今后可能陸續(xù)批準(zhǔn)的農(nóng)作物有小麥、甘薯、谷子、花生等。我國(guó)為應(yīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品，制定了《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》。條例中規(guī)定：農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物，是指利用基因工程技術(shù)改變基因組構(gòu)成，用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)或者農(nóng)產(chǎn)品加工的動(dòng)植物、微生物及其產(chǎn)品，主要包括：a.轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物（含種子、種畜禽、水產(chǎn)苗種）和微生物；b.轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物、微生物產(chǎn)品；c.轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的直接加工品；d.含有轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物、微生物或者其產(chǎn)品成份的種子、種畜禽、水產(chǎn)苗種、農(nóng)藥、獸藥、肥料和添加劑等產(chǎn)品。該項(xiàng)條例在農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的研究與試驗(yàn)、生產(chǎn)與加工、經(jīng)營(yíng)、進(jìn)口與出口、監(jiān)督檢查、罰則等方面都作出了明確的規(guī)定。其中，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第1943號(hào)就是針對(duì)轉(zhuǎn)基因棉花而專(zhuān)門(mén)制定的。

第二組調(diào)查結(jié)果表明進(jìn)口的轉(zhuǎn)基因食品有大豆油、菜子油、大豆等。目前只有花生油不是轉(zhuǎn)基因的。麥當(dāng)勞、肯德基的食品基本全部是轉(zhuǎn)基因的。

第三組調(diào)查結(jié)果表明：我國(guó)自行生產(chǎn)、擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的醫(yī)藥藥品或疫苗有：治療糖尿病的單體速效胰島素、防治多種腫瘤及病毒感染的干擾素a-2b（安達(dá)芬）、用于血液病治療的人造血液、用于治療艾滋病等的白細(xì)胞介素、預(yù)防乙型肝炎的乙肝疫苗。

第四組調(diào)查結(jié)果表明：豬、牛、雞飼料是轉(zhuǎn)基因玉米、轉(zhuǎn)基因大豆。轉(zhuǎn)基因大豆油是用6號(hào)輕汽油浸出提取的。在我國(guó)農(nóng)村，種植面積較大的作物包括抗蟲(chóng)的棉花、抗病毒的油菜、抗蟲(chóng)玉米、抗除草劑大豆等。

5.討論與總結(jié)

轉(zhuǎn)基因生物的優(yōu)點(diǎn)：①轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以把不同植物、動(dòng)物的優(yōu)良基因進(jìn)行組合；②通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)可培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病毒、抗蟲(chóng)、抗寒、抗旱、抗?jié)?、抗鹽堿、抗除草劑等特性的作物新品種，以減少對(duì)農(nóng)藥化肥和水的依賴(lài)，降低農(nóng)業(yè)成本，大幅度地提高單位面積的產(chǎn)量，改善食品的質(zhì)量，緩解世界糧食短缺的矛盾。③利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)有利于健康和抗疾病的食品；④轉(zhuǎn)基因食品可以擺脫季節(jié)、氣候的影響，讓人們一年四季都可吃到新鮮的瓜菜；⑤利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，把生長(zhǎng)激素基因、高泌乳量基因、瘦肉型基因、抗病毒基因等外源基因?qū)雱?dòng)物的受精卵，可培育出生長(zhǎng)周期短、泌乳量高，品質(zhì)優(yōu)良的動(dòng)物。

轉(zhuǎn)基因生物的潛在危險(xiǎn)主要有：轉(zhuǎn)基因逃逸、轉(zhuǎn)基因?qū)е滦虏《竞图膊‘a(chǎn)生、加速昆蟲(chóng)抗性的進(jìn)化。

篇8

免費(fèi)疫苗是國(guó)家免費(fèi)提供、必須接種的疫苗，有口蹄疫疫苗、豬瘟疫苗和高致病性豬藍(lán)耳病疫苗。免費(fèi)疫苗主要特點(diǎn)是使用時(shí)間長(zhǎng)、免疫效果好，一般是我國(guó)自行研制生產(chǎn)的，價(jià)格便宜。這類(lèi)疫苗的選擇和使用，國(guó)家每年都出臺(tái)具體的指導(dǎo)意見(jiàn)。

自費(fèi)疫苗是養(yǎng)豬者自費(fèi)、自愿接種的疫苗，其中病毒類(lèi)疫苗包括豬偽狂犬病疫苗、圓環(huán)病毒病疫苗、豬細(xì)小病毒病疫苗、病毒性腹瀉疫苗、日本乙型腦炎疫苗；細(xì)菌類(lèi)疫苗包括豬傳染性胸膜肺炎疫苗、仔豬大腸桿菌病疫苗、豬氣喘病疫苗、副豬嗜血桿菌病疫苗、豬鏈球菌病疫苗、豬肺疫疫苗、豬丹毒疫苗、仔豬副傷寒疫苗等。自費(fèi)疫苗的特點(diǎn)是免疫效果好，副作用小，部分疫苗由國(guó)外進(jìn)口，制作工藝優(yōu)良，但使用時(shí)間較短，價(jià)格較貴。目前，國(guó)家對(duì)自費(fèi)疫苗選擇與使用尚無(wú)明確的指導(dǎo)意見(jiàn)，那么，如何科學(xué)地選擇和使用自費(fèi)疫苗呢？

1. 自費(fèi)疫苗的選擇

自費(fèi)疫苗應(yīng)根據(jù)本地區(qū)以及本場(chǎng)傳染病的流行情況，有針對(duì)性選用，宜少不宜多。病毒性疫病如豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病、豬乙型腦炎、豬細(xì)小病毒病的疫苗可優(yōu)先選用，但對(duì)細(xì)菌性疫病如豬肺疫、豬丹毒、仔豬副傷寒、鏈球菌病的疫苗，只有在本地區(qū)或本場(chǎng)發(fā)過(guò)病后才要考慮選擇使用。此外，要選擇與當(dāng)?shù)亓餍幸卟〔≡嗤逍偷囊呙纭ＴS多病原有多種血清型或基因型（如豬胸膜性肺炎放線(xiàn)桿菌生物Ⅰ型共有13個(gè)血清型、生物Ⅱ型有2個(gè)血清型，豬副嗜血桿菌血清型達(dá)15個(gè)以上，大腸桿菌的菌體抗原有100多個(gè)血清型），疫苗不對(duì)型，免疫得再多也不能使豬群產(chǎn)生均勻有效的抗體，不能抵御疾病的攻擊。

自費(fèi)疫苗種類(lèi)主要有弱毒活疫苗、滅活疫苗、基因缺失疫苗、多價(jià)疫苗、聯(lián)合疫苗等。目前普遍應(yīng)用且效果較好的自費(fèi)疫苗主要有：豬偽狂犬病病毒gE基因缺失苗，豬圓環(huán)病毒Ⅱ型滅活疫苗，豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗，豬傳染性胃腸炎和輪狀病毒二聯(lián)活疫苗，豬細(xì)小病毒病滅活疫苗，日本乙型腦炎活疫苗，豬大腸桿菌基因工程四價(jià)滅活疫苗，豬大腸桿菌基因工程三價(jià)滅活疫苗，豬大腸桿菌基因工程二價(jià)滅活疫苗，副豬嗜血桿菌病油乳劑滅活苗，豬喘氣病滅活疫苗，豬傳染性胸膜肺炎多價(jià)血清滅活疫苗，豬敗血性鏈球菌病活疫苗和豬鏈球菌多價(jià)滅活疫苗。

對(duì)疫病監(jiān)測(cè)陰性場(chǎng)最好用滅活疫苗，疫病監(jiān)測(cè)陽(yáng)性場(chǎng)最好用活疫苗，慎用有爭(zhēng)議的活疫苗。針對(duì)某一疾病，豬場(chǎng)僅能使用某一廠家的1種活疫苗，避免使用兩個(gè)和兩個(gè)以上廠家的活疫苗。不同廠家基因缺失苗也不能在同一個(gè)豬場(chǎng)使用。慎用飼料經(jīng)營(yíng)企業(yè)免費(fèi)贈(zèng)送的疫苗。不用非法生產(chǎn)、非法進(jìn)口等來(lái)源不明的疫苗，嚴(yán)禁使用無(wú)批準(zhǔn)文號(hào)的疫苗。

2. 自費(fèi)疫苗的使用

疫苗保管與使用前必須認(rèn)真閱讀說(shuō)明書(shū)，掌握疫苗特點(diǎn)、用途、瓶裝量、稀釋液、稀釋液的使用量、使用劑量、接種方法、注意事項(xiàng)等?；钜呙缫鋬鲞\(yùn)輸和儲(chǔ)存，滅活苗要求在2～8℃保存，切忌冷凍。

首次使用某種疫苗時(shí)，應(yīng)選擇一定數(shù)量的豬進(jìn)行小范圍試用，觀察3～5天，確認(rèn)無(wú)明顯副作用或有確切效果時(shí)再全群接種。

接種疫苗前，要確保豬只健康、疫苗合格。被免疫豬只必須健康無(wú)病，對(duì)于發(fā)熱、患病（包括恢復(fù)期）、過(guò)度瘦弱、食欲不振以及剛?cè)?shì)的豬不宜接種疫苗，否則會(huì)加重病情或造成死亡。為確保疫苗合格，凡未按要求保存、過(guò)期、無(wú)標(biāo)簽、疫苗瓶有裂紋、瓶塞松動(dòng)、失真空（稀釋疫苗時(shí)不自動(dòng)吸水）、出現(xiàn)分層的，一律禁用。

使用疫苗時(shí)，要規(guī)范免疫操作。①選好接種方法和部位。接種疫苗通?？刹捎闷は禄蚣?nèi)注射，皮下注射部位在耳部與頭部連接部位皮下，采用較短的針頭（15～20毫米）；肌內(nèi)注射時(shí)采用耳根后部肌肉深層接種，根據(jù)豬的體重選擇不同長(zhǎng)度的針頭（仔豬用l5毫米，母豬用40毫米）。但要注意的是，豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗或滅活苗，必須后海穴注射，進(jìn)針深度3日齡仔豬為0.5厘米、成年豬為4厘米，肌內(nèi)注射無(wú)效；偽狂犬病基因缺失活疫苗對(duì)仔豬采用滴鼻接種，免疫效果更好。②做好免疫接種操作。注射器、針頭逐一沖洗后煮沸消毒10分鐘，而不能用化學(xué)消毒劑處理，否則殘留的消毒劑會(huì)使弱毒苗失活。抽取疫苗時(shí)，可用一滅菌針頭插在瓶塞上不拔出，對(duì)準(zhǔn)針管直接抽藥，絕不能用已給豬注射過(guò)的針頭吸取疫苗，以防污染整瓶疫苗。疫苗稀釋后，15℃以下4小時(shí)、15～25℃時(shí)2小時(shí)、25℃以上1小時(shí)內(nèi)必須用完。

篇9

關(guān)鍵詞：基因工程；教學(xué)改革；探索

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.41 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2015）03-0119-02

基因工程又稱(chēng)為基因拼接或者DNA重組技術(shù)，是將一種生物體（供體）的基因與載體在體外進(jìn)行拼接重組，然后轉(zhuǎn)入另一種生物體（受體）內(nèi)，使之按照人們的意愿穩(wěn)定遺傳并表達(dá)出新產(chǎn)物或新性狀的DNA體外操作程序。1972年美國(guó)人Berg在基因工程基礎(chǔ)研究方面做出了突出貢獻(xiàn)，被公認(rèn)為“基因工程之父”。1973年美國(guó)人Cohen等用核酸限制性?xún)?nèi)切酶EcoRI，首次基因重組成功。近些年來(lái)，基因工程的新概念、新理論及新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，內(nèi)容也在不斷豐富與充實(shí)，已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域[1，2]。21世紀(jì)以來(lái)，基因組學(xué)已進(jìn)入功能基因組學(xué)時(shí)代，對(duì)基因功能的研究是生物技術(shù)發(fā)展的新方向，體現(xiàn)了基因工程的重要價(jià)值所在?；蚬こ虒W(xué)作為當(dāng)代生命科學(xué)研究領(lǐng)域最具生命力、最引人關(guān)注的前沿學(xué)科之一，已經(jīng)發(fā)展成為現(xiàn)代分子生物學(xué)、技術(shù)學(xué)的核心內(nèi)容，其課程質(zhì)量的好壞直接關(guān)系學(xué)生的專(zhuān)業(yè)素質(zhì)和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。作者所在學(xué)院（浙江海洋學(xué)院海洋科學(xué)與技術(shù)學(xué)院）于2007年新增了生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)，同時(shí)開(kāi)設(shè)了基因工程課程。為了不斷提高該課程的教學(xué)水平，筆者結(jié)合這幾年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)以及兄弟院校相關(guān)課程的授課經(jīng)驗(yàn)，努力充實(shí)教學(xué)內(nèi)容，不斷更新教學(xué)手段，對(duì)基因工程課程的教學(xué)體系進(jìn)行了探索式改革。

一、教學(xué)內(nèi)容

1.不斷更新教學(xué)內(nèi)容，突出實(shí)用性?；蚬こ汤碚撟鳛橐环N專(zhuān)業(yè)性很強(qiáng)的課程，需在學(xué)生有一定生物學(xué)知識(shí)的基礎(chǔ)上教學(xué)。在浙江海洋學(xué)院本課程于大三下學(xué)期開(kāi)課，在此之前學(xué)生已修完細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)等生物學(xué)基礎(chǔ)課程，具備了較完整的理論知識(shí)體系，在此基礎(chǔ)上開(kāi)展教學(xué)，有利于學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解和掌握?；蚬こ套鳛橐环N技術(shù)性很強(qiáng)的課程，與上述生物學(xué)基礎(chǔ)課程關(guān)系密切，同時(shí)與酶工程、蛋白質(zhì)工程、細(xì)胞工程等學(xué)科緊密聯(lián)系，存在一定的內(nèi)容重復(fù)。在教學(xué)過(guò)程中，對(duì)于此類(lèi)重復(fù)，或一筆帶過(guò)，點(diǎn)到為主，或采用實(shí)例對(duì)重要知識(shí)加以鞏固，盡量避免重復(fù)，突出課程特色。教材是提高教學(xué)質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，浙江海洋學(xué)院第一次即2010年選用的《基因工程》教材由高等教育出版社出版，孫明教授主編。該教材內(nèi)容全面翔實(shí)、章節(jié)清晰，對(duì)基因工程的原理、策略和技術(shù)方法均有系統(tǒng)介紹，具有很強(qiáng)的理論性和前瞻性。但是其內(nèi)容較多，很多內(nèi)容對(duì)于二本院校本科生來(lái)講過(guò)于深?yuàn)W、難以理解，學(xué)生也反映該教材較難，建議選其他較易理解的教材。結(jié)合該院校是二本院校的實(shí)際，筆者從2011年開(kāi)始使用袁鶩洲主編，化學(xué)工業(yè)出版社出版的《基因工程》，屬普通高等教育規(guī)劃教材。本教材為國(guó)家精品課程教材，主要介紹了基因工程的基本概念、基本原理、常用基因工程操作技術(shù)以及基因工程與功能基因組學(xué)相結(jié)合的技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展。主要內(nèi)容包括三大塊。一是基因工程的基本原理與基本技術(shù)，包括工具酶和克隆載體。表達(dá)載體及常用的基因表達(dá)系統(tǒng)，目的基因獲取、制備、擴(kuò)增、導(dǎo)入與鑒定的各種方法。二是基因工程在功能基因組學(xué)研究中的應(yīng)用，包括基因表達(dá)譜的研究技術(shù)，全基因組化學(xué)誘變、轉(zhuǎn)座子飽和誘變的技術(shù)，基因敲除與基因敲減的技術(shù)，GAL4/UAS過(guò)表達(dá)系統(tǒng)，酵母雙雜交及免疫共沉淀等蛋白質(zhì)相互作用研究的技術(shù)等。三是基因工程在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用，包括轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備與應(yīng)用，基因治療的原理與策略以及基因工程藥物的研制與現(xiàn)狀等。該教材內(nèi)容清晰易懂，實(shí)例舉證充分，且涉及基因工程在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用，在一定程度上可以提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。使用該教材3年來(lái)，目前感覺(jué)學(xué)生反映較好，適合該校學(xué)生使用。

2.引領(lǐng)學(xué)生了解前沿動(dòng)態(tài)?；蚬こ套鳛橐婚T(mén)前沿學(xué)科，發(fā)展速度快，內(nèi)容日新月異。我們常用教材多側(cè)重原理、基礎(chǔ)等理論知識(shí)，且更新速度始終落后于基因工程技術(shù)本身的發(fā)展速度。現(xiàn)代學(xué)生思維活躍，求知欲強(qiáng)。為了充分滿(mǎn)足學(xué)生的求知欲和好奇心，在基因工程教學(xué)過(guò)程中，盡可能地添加一些新成果、新理論和新技術(shù)[3]，如：生物能源，基因工程疫苗的開(kāi)發(fā)，基因治療等，并結(jié)合自己在國(guó)外實(shí)驗(yàn)室所學(xué)向同學(xué)們展示最新技術(shù)與相關(guān)研究進(jìn)展。基因工程的新技術(shù)多發(fā)表于Science、Nature、Cell等頂尖雜志，在教學(xué)過(guò)程中，對(duì)于發(fā)表的經(jīng)典新成果，嘗試讓學(xué)生自己閱讀、分段翻譯、小組討論，增加對(duì)新知識(shí)的了解[3]。一些重要的生命科學(xué)論壇，如：生物谷、丁香園、小木蟲(chóng)等是生命科學(xué)領(lǐng)域研究人員交流學(xué)習(xí)的地方，而知識(shí)的碰撞最容易產(chǎn)生科學(xué)的火花。因此，鼓勵(lì)學(xué)生瀏覽這些論壇，并參與討論，增強(qiáng)學(xué)習(xí)興趣。另外，也鼓勵(lì)他們加入相關(guān)的QQ群，比如轉(zhuǎn)基因群、生物信息群，增加同業(yè)交流，為自己拓寬理論知識(shí)和解決實(shí)際技術(shù)問(wèn)題，同時(shí)也為今后從事的相關(guān)工作打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

二、教學(xué)手段和教學(xué)方法多元化

不像動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)可以直觀地看到實(shí)物，基因工程內(nèi)容抽象，多涉及細(xì)胞、分子等微觀內(nèi)容，且高新技術(shù)多，操作流程長(zhǎng)，如果僅僅采用文字和語(yǔ)言表述，難以講授明白，學(xué)生學(xué)起來(lái)也比較晦澀難懂[4]。因此，需要運(yùn)用多種教學(xué)方法，使概念、原理講得通俗易懂，學(xué)生理解起來(lái)就更容易。

1.多媒體教學(xué)的應(yīng)用。目前，大部分高校已廣泛采用多媒體教學(xué)。在基因工程多媒體教學(xué)過(guò)程中，改變?cè)瓉?lái)單純的文字、圖片等內(nèi)容，不斷嘗試加入一些聲音、錄像、動(dòng)畫(huà)等信息，使課堂圖文并茂、有聲有色、栩栩如生，便于學(xué)生理解并強(qiáng)化記憶。如在講解“PCR反應(yīng)”一節(jié)中，自己錄取了PCR的準(zhǔn)備、操作以及電泳檢測(cè)等全套過(guò)程，老師講得省心，同學(xué)們聽(tīng)得舒心，極大提高了基因工程課程的教學(xué)效果。

2.小組討論式教學(xué)。有價(jià)值的討論是促進(jìn)學(xué)生開(kāi)動(dòng)腦筋、舉一反三、加深認(rèn)識(shí)的有效手段。在遇到抽象內(nèi)容時(shí)，講解完畢后，鼓勵(lì)學(xué)生分組討論，并選出一名組長(zhǎng)上講臺(tái)以PPT的形式匯報(bào)本小組的學(xué)習(xí)心得，組長(zhǎng)實(shí)行輪換制。下面的同學(xué)給匯報(bào)的小組分別從以下幾方面打分：匯報(bào)PPT的表現(xiàn)，制作PPT的質(zhì)量，所講內(nèi)容的條理性、創(chuàng)新性以及講解能力。通過(guò)此手段，極大調(diào)動(dòng)了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。例如，可引導(dǎo)學(xué)生討論以下專(zhuān)題：①轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；②中國(guó)的轉(zhuǎn)基因水稻；③基因工程產(chǎn)品的安全性；④基因治療。

三、改革實(shí)驗(yàn)教學(xué)、科研項(xiàng)目與課程教學(xué)相結(jié)合

本?；蚬こ虒?shí)驗(yàn)是在大三結(jié)束后的暑假短學(xué)期開(kāi)展的，共16學(xué)時(shí)，這時(shí)學(xué)生已上完基因工程理論課，具備了實(shí)驗(yàn)操作的相關(guān)理論知識(shí)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容至關(guān)重要，是理論知識(shí)的綜合運(yùn)用。那么如何選擇實(shí)驗(yàn)內(nèi)容呢？這一點(diǎn)比較關(guān)鍵。授課教師多具有博士學(xué)位，承擔(dān)著較高水平的科學(xué)研究工作。在基因工程教學(xué)過(guò)程中，嘗試將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和教師的科研項(xiàng)目相結(jié)合，讓學(xué)生自主參與到科研項(xiàng)目的研究中。學(xué)生可根據(jù)教師的科研項(xiàng)目自主確定實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容，從實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的選擇，到實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)、試劑的購(gòu)置、實(shí)驗(yàn)步驟的進(jìn)行等都由學(xué)生自主完成，老師在此過(guò)程中起指導(dǎo)作用。筆者將課題“曼氏無(wú)針烏賊微衛(wèi)星富集文庫(kù)的構(gòu)建”分解成幾個(gè)小實(shí)驗(yàn)，包括PCR擴(kuò)增、瓊脂糖凝膠電泳、限制性?xún)?nèi)切酶酶切反應(yīng)、載體連接、感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化、藍(lán)白斑篩選與鑒定、測(cè)序、序列分析和引物設(shè)計(jì)等，指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行整個(gè)流程實(shí)驗(yàn)，使其知識(shí)更具有系統(tǒng)性、完整性。此外，還可鼓勵(lì)學(xué)生申報(bào)省級(jí)或校級(jí)的大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目，由筆者指導(dǎo)的“轉(zhuǎn)基因綠色熒光觀賞魚(yú)開(kāi)發(fā)技術(shù)探索”以及“青魚(yú)β-actin基因的啟動(dòng)子功能初步檢驗(yàn)”分別獲得省級(jí)可喜獎(jiǎng)項(xiàng)，這個(gè)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新能力及今后獨(dú)立從事科研的能力。

四、試探采用雙語(yǔ)教學(xué)

現(xiàn)代高素質(zhì)專(zhuān)業(yè)人才不僅要具備高水平的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，還應(yīng)具備高水平的專(zhuān)業(yè)外語(yǔ)閱讀與寫(xiě)作能力。為適應(yīng)學(xué)科發(fā)展趨勢(shì)，并擴(kuò)充學(xué)生的英語(yǔ)專(zhuān)業(yè)詞匯，培養(yǎng)英語(yǔ)思維模式，在基因工程教學(xué)過(guò)程匯總嘗試進(jìn)行雙語(yǔ)教學(xué)[5]。在教學(xué)上，以中文課件為主，主要的專(zhuān)業(yè)詞匯用英文標(biāo)注，時(shí)而用英文講解，盡量創(chuàng)造雙語(yǔ)教學(xué)環(huán)境。并且鼓勵(lì)學(xué)生借閱相關(guān)的英文教材，例如，在國(guó)際上使用廣泛，權(quán)威性和時(shí)代感強(qiáng)的英文教材《Principles of gene manipulation and genomics》（7th ed）作為教學(xué)參考書(shū)。

簡(jiǎn)而言之，經(jīng)過(guò)幾年的努力工作，浙江海洋學(xué)院在基因工程課程的教學(xué)內(nèi)容方面進(jìn)行了優(yōu)化，改進(jìn)了教學(xué)方法與手段，培養(yǎng)了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力和創(chuàng)新意識(shí)，拓展了他們的知識(shí)面，取得了不錯(cuò)的效果。然而，課程教學(xué)改革是一項(xiàng)系統(tǒng)工程，目前還處于探索和實(shí)踐階段，必須堅(jiān)持不斷地探索、實(shí)踐、總結(jié)，最好建立一支教學(xué)團(tuán)隊(duì)，希望把基因工程課程教學(xué)改革工作開(kāi)展得更有效果，為國(guó)家輸送更多高素質(zhì)的專(zhuān)業(yè)人才。

參考文獻(xiàn)：

[1]孫明.基因工程[M].北京：高等教育出版社，2006：1-6.

[2]李立家，肖庚富.基因工程[M].北京：科學(xué)出版社，2004：1-8.

[3]張傳博，李莉，耿紅衛(wèi).基因工程課程教學(xué)改進(jìn)與實(shí)踐[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，（04）.

篇10

［摘要］豬瘟是由豬瘟病毒引起的危害極大的一種傳染病，具有高度的傳染性和致死性，利用疫苗控制該病的流行是世界各國(guó)使用的廣泛策略。E2亞單位疫苗具有安全性好、穩(wěn)定性強(qiáng)的特點(diǎn)，且具有自然感染和接種疫苗的抗體差異，是未來(lái)新型疫苗研究的方向之一。本文綜述了E2亞單位疫苗的保護(hù)效力、影響因素及未來(lái)發(fā)展方向。

［關(guān)鍵詞］豬瘟；E2糖蛋白；亞單位

疫苗豬瘟（Classical swine fever，CSF），也稱(chēng)“爛腸瘟”，是一種由豬瘟病毒引起的傳染性極強(qiáng)的病毒性疾病，臨床上表現(xiàn)為急性、亞急性、慢性或溫和型等形式，也可以呈現(xiàn)亞臨床形式感染，是危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要傳染病之一。控制CSF流行的主要策略是系統(tǒng)化的預(yù)防接種和非疫苗的防控措施如消毒、檢疫、隔離、無(wú)害化處理等，其中疫苗的使用一直受到世界各國(guó)的廣泛重視。弱毒疫苗如我國(guó)科學(xué)家研制的豬瘟兔化弱毒疫苗，對(duì)該病的控制起到了很大的積極作用。日本由于改良活疫苗的使用，在1993和2003年之間沒(méi)有爆發(fā)CSF［1］。然而，單純依賴(lài)MLV疫苗接種來(lái)消除豬瘟面臨一定的困難，因?yàn)閯?dòng)物在自然感染和接種疫苗（MLV）產(chǎn)生的抗體差異即血清學(xué)DIVA是很難區(qū)分的，這就影響臨床工作中的快速篩查和國(guó)際貿(mào)易。為了克服這個(gè)問(wèn)題，歐盟在1999年開(kāi)始大規(guī)模試驗(yàn)研究E2蛋白亞單位疫苗，并且成功誘導(dǎo)免疫豬產(chǎn)生抗CSF的免疫保護(hù)［2］。

1CSFV的致病機(jī)理

豬瘟最常見(jiàn)的感染途徑是經(jīng)呼吸道感染，當(dāng)動(dòng)物口鼻接觸CSFV后，病毒在扁桃體開(kāi)始復(fù)制，感染上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，然后擴(kuò)散到其他淋巴結(jié)。高致病性病毒可迅速分布整個(gè)身體，病毒組織中含量更高，可誘導(dǎo)更嚴(yán)重的病理變化［3］。在急性病例中，CSF可引起全身出血和免疫抑制，其作用機(jī)制是通過(guò)下調(diào)細(xì)胞因子和免疫細(xì)胞，包括內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核／巨噬細(xì)胞和骨髓造血干細(xì)胞（骨髓）等來(lái)實(shí)現(xiàn)的。豬瘟病毒可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞壞死，引起血管炎和出血，并伴有嚴(yán)重的貧血、血小板減少及干擾纖維蛋白原的合成，從而引起全身性出血。骨髓和B淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞的減少和壞死可引起免疫抑制。豬瘟病毒通過(guò)線(xiàn)粒體跨膜電位和Erns蛋白直接或間接誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞凋亡。此外，豬瘟病毒可以誘導(dǎo)TNF－α的產(chǎn)生，促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的凋亡。

2E2亞單位疫苗的保護(hù)效力

E2包膜糖蛋白是豬瘟病毒的主要保護(hù)性抗原，在CSFV感染時(shí)誘導(dǎo)中和抗體的產(chǎn)生，E2蛋白已被證明是一個(gè)最有效的免疫原［4］。經(jīng)過(guò)深入的研究，重組E2蛋白亞單位疫苗已經(jīng)商業(yè)化，比如BAYO－VACR和PorcilisR。從接種后14d到13個(gè)月，該疫苗足以提供有力的免疫保護(hù)［5－6］。然而，單劑量疫苗在免疫接種第7天不能提供保護(hù)，在第10天有部分保護(hù)作用［5］。在第21d，疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體，持續(xù)6個(gè)月［6］。有報(bào)道稱(chēng)，在疫苗接種后14d，可以完全阻止病毒傳播［7］。病毒疫苗株因基因同源或異源存在免疫效力的差異，單次疫苗接種后可以在10d、14d防止病毒水平傳播并維持6個(gè)月的保護(hù)力，也有報(bào)道稱(chēng)疫苗接種后21d防止病毒水平傳播［5－6，8］。E2亞單位疫苗可以減少垂直傳播，但不能完全預(yù)防垂直傳播。在疫苗首次免疫之后可以發(fā)生母嬰傳播，即使二免之后仍可以發(fā)生母嬰傳播［9］。E2亞單位疫苗接種后，存在感染和接種差異，即DIVA，這種優(yōu)勢(shì)有利于快速篩查受感染的豬，幫助控制和消除CSF［4］。

3影響保護(hù)效力的因素

3．1E2糖蛋白抗原結(jié)構(gòu)和抗原表位研究

E2抗原結(jié)構(gòu)和抗原表位具有重要意義，可以為疫苗的改進(jìn)提供科學(xué)依據(jù)。研究者基于E2蛋白抗原表位的預(yù)測(cè)人工合成了多肽Pep1和Pep2，進(jìn)一步的研究表明Pep1具有很好的反應(yīng)原性和免疫原性［10］?？茖W(xué)研究表明E2糖蛋白具有四個(gè)抗原結(jié)構(gòu)域即B／C／D／A，所有結(jié)構(gòu)域位于E2糖蛋白N－末端的一半［11］。結(jié)構(gòu)域A又被分為A1、A2和A3，E2的非保守表位位于B／C。其中，A1抗原亞區(qū)位于E2蛋白791～858位氨基酸區(qū)域?？茖W(xué)研究揭示了E2抗原結(jié)構(gòu)模型，結(jié)構(gòu)域B／C是由C693和C737之間的二硫鍵固定，A／D域由兩個(gè)二硫鍵形成：一個(gè)是在C792和C856之間；另一個(gè)在C818和C828之間。在結(jié)構(gòu)域B／C中，753RYLASLHKKALPT765和771LLFD774對(duì)維持構(gòu)象表位的結(jié)構(gòu)完整性是必不可少的［12］。

在B／C中，E713和D729決定基因型2和3型毒株的抗原特異性；D705和K761決定基因1型LPC疫苗株的抗原特異性［13］。在D／A結(jié)構(gòu)域中，R845決定基因型1和3的抗原特異性［11］。具有抗原決定作用的構(gòu)象表位E902，決定基因型1和2的抗原特異性，存在于C－末端區(qū)［11］。E2糖蛋白具有幾個(gè)重要的線(xiàn)性表位抗原，比如在772LFDGTNP778中的線(xiàn)性表位抗原。在結(jié)構(gòu)域A中，一個(gè)高度保守的中和線(xiàn)性表位抗原829TAVSPTTLR837通過(guò)使用單克隆抗體（mAb）WH303進(jìn)行了鑒定，已被用于基于表位的疫苗開(kāi)發(fā)［14－17］。該單克隆抗體WH303已使用廣泛的免疫組化標(biāo)記，但WH303具有MLV病毒標(biāo)志抗原，因此不能用于DIVA，不能進(jìn)行快速篩查。在E2C端區(qū)域，研究發(fā)現(xiàn)具有一個(gè)病毒線(xiàn)性表位995yyep998之間高度保守的結(jié)構(gòu)［11］。亞單位疫苗表現(xiàn)為非復(fù)制單抗原，以單體或二聚物的形式存在，不是錨釘在病毒包膜。像其他蛋白質(zhì)一樣，注射E2抗原的量在接種后將隨時(shí)間而發(fā)生衰減，所以在臨床實(shí)踐中，都需要二次疫苗接種。

3．2母源抗體的影響

研究發(fā)現(xiàn)，3周齡的仔豬母源抗體含量最高；在5或7周齡第一劑量亞單位疫苗，4周后加強(qiáng)亞單位疫苗免疫接種的仔豬具有很高的中和抗體［18］。在2周齡（即仍具有母源抗體時(shí)）接種疫苗，機(jī)體產(chǎn)生的抗體效價(jià)顯著低于3、6個(gè)月后仔豬抗體的滴度［19］。

3．3抗原性差異的影響

兩種商業(yè)化的豬瘟病毒E2亞單位疫苗來(lái)源于布雷西亞毒株基因型1．2和AlfortTübingen基因型1．1。但是，有研究表明，在大多數(shù)歐洲和亞洲國(guó)家，自然分離獲得的CSFVs已經(jīng)從原來(lái)的基因型1或3變異成基因型2［20］。在我國(guó)，疫苗病毒的基因型與目前流行的病毒基因型也存在一定的差異［21］。豬瘟病毒的基因型特異性血清，與外源E2蛋白結(jié)合的有效性比同源的E2蛋白低，表明在CSFVs中E2的差異對(duì)交叉中和作用至關(guān)重要［22－23］。基因序列的改變可能導(dǎo)致E2糖蛋白結(jié)構(gòu)的變化，因此弄清楚亞單位疫苗和豬瘟流行病毒株之間的交叉保護(hù)問(wèn)題至關(guān)重要。然而，目前生產(chǎn)的兩個(gè)商業(yè)化CS－FVE2亞單位疫苗（基因型1．1和1．2）對(duì)異源菌株如帕德博恩（Paderborn）基因型2．1不能提供完全保護(hù)。不同基因型的病毒的抗原性變異可以通過(guò)交叉中和試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，同源毒株之間的NT抗體顯著高于異源毒株。

總之，這些研究表明，不同基因型的毒株之間間存在抗原差異，從而影響免疫保護(hù)效果。活病毒或重組E2蛋白可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體，這種抗體中對(duì)基因同源毒株的作用優(yōu)于對(duì)異源毒株的作用，由活病毒引起的抗體滴度比重組蛋白高。血清交叉中和顯示基因同源株比異源株高，這種差異與單克隆抗體的氨基酸差異有關(guān)。豬瘟病毒不同基因型間的抗原變異通過(guò)豬瘟病毒特異性單克隆抗體的不同反應(yīng)模式被證實(shí)［22－23］。E2特異單克隆抗體對(duì)同源菌株具有很好的結(jié)合和中和作用［22－23］。研究表明，B／C結(jié)構(gòu)域中H710，H724，N725，D729，K734，M738的單點(diǎn)突變和D／A結(jié)構(gòu)域中T823，P833，T834，R837的單點(diǎn)突變可以導(dǎo)致中和單克隆抗體結(jié)合性質(zhì)的喪失。在710位置的氨基酸殘基可以影響單克隆抗體的結(jié)合和中和［24］。在B／C結(jié)構(gòu)域的D705，E713，D729和K761殘基、在A結(jié)構(gòu)域的R845殘基，以及在C－末端區(qū)域的E902殘基是基因型1，2或3的抗原特異性的關(guān)鍵因素［11，13］。最近研究表明，基因型2的E2蛋白抗原區(qū)變異可以影響血清反應(yīng)性，其中E37N和V45Q兩個(gè)位點(diǎn)置換具有顯著影響，其可能與E2蛋白的構(gòu)象變化密切相關(guān)［25］。

4小結(jié)

4．1E2亞單位疫苗的優(yōu)勢(shì)

E2亞單位疫苗僅含病毒的保護(hù)性抗原，不含病毒的其他組成成分，不包含遺傳信息，因此與活疫苗相比具有安全性好、穩(wěn)定性強(qiáng)的特點(diǎn)，在生產(chǎn)工藝上無(wú)需進(jìn)行滅活處理。在臨床應(yīng)用時(shí)存在一個(gè)很大的優(yōu)勢(shì)，接種后具有感染和接種的差異性，即DIVA，是典型的DIVA疫苗，從而有利于臨床實(shí)踐中的快速篩查。Erns和NS3ELISAs可以用于檢測(cè)E2亞單位疫苗，chekitR比priocheckR豬瘟病毒的敏感性較高［4］。4．2面臨的挑戰(zhàn)E2亞單位疫苗保護(hù)效果差，低于MLV，研究表明，中國(guó)株疫苗比E2疫苗能提前1～2周建立有效的群體免疫。除此之外，E2亞單位疫苗不能完全預(yù)防垂直傳播，有報(bào)道稱(chēng)，在疫苗首次免疫之后可以發(fā)生母嬰傳播，即使二免之后仍可以發(fā)生母嬰傳播［9］。在免疫反應(yīng)方面，E2亞單位疫苗只能誘導(dǎo)抗體反應(yīng)，免疫原性比較低，通常需要采用相應(yīng)的方法如佐劑或載體等。而且E2亞單位疫苗的生產(chǎn)成本比常規(guī)疫苗高，這也給該疫苗大規(guī)模的商業(yè)化生產(chǎn)和推廣應(yīng)用帶來(lái)一個(gè)難題。另外，豬瘟病毒變異毒株的產(chǎn)生是豬瘟控制面臨的難題之一，E2亞單位疫苗如何應(yīng)對(duì)豬瘟病毒基因型變異也是不得不面臨的一個(gè)挑戰(zhàn)。

4．3未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)