1香菇多糖片

1.1香菇多糖片處方的確定

1.1.1填充劑的選擇

填充劑可以增加片劑的重量和體積。香菇菌多糖原料質(zhì)地疏松，可壓性差，篩選處方時(shí)，首先對填充劑進(jìn)行選擇。對常用的填充劑淀粉、糊精、微晶纖維素和甘露醇，以及無機(jī)鹽類填充劑磷酸氫鈣、碳酸鈣和硫酸鈣進(jìn)行比較。結(jié)果表明：淀粉、糊精、微晶纖維素和甘露醇對糖測定有干擾；磷酸氫鈣、碳酸鈣對糖測定雖無干擾但可壓性差；使用硫酸鈣作填充劑，對該片劑質(zhì)量指標(biāo)的測定無干擾，顆?？蓧盒院?，片劑表面光滑美觀，而且具有較好的硬度和崩解效果。

1.1.2粘合劑的選擇

粘合劑在制片中具有使固體粉末粘結(jié)成型的作用。以硫酸鈣為填充劑篩選4種粘合劑：羥丙甲基纖維素（HPMC）、淀粉漿、糊精、聚維酮（PVP），并與水作為潤濕劑進(jìn)行比較，結(jié)果表明前三者對糖測定有干擾，PVP對分子量測定有干擾，而水則無干擾，易被物料迅速吸收，且能滿足壓片要求。

1儀器與材料

1.1儀器WFH-207B三用紫外分析儀（上海精科實(shí)業(yè)有限公司）；SB-5200超聲波提取器（上海新芝生物技術(shù)研究所）；AB204-N電子分析天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）；TDA-8002型恒溫水浴箱（余姚工業(yè)儀器二廠）。

1.2試劑無水葡萄糖（批號：0403251，廣州新成化工廠，AR級），其余化學(xué)試劑均為國產(chǎn)AR級。

1.3樣品青絲線草產(chǎn)自廣東江門地區(qū)，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室周誠教授鑒定為爵床科槍刀藥屬植物槍刀藥Hypoestespurpurea(L.)Soland的全草。

2方法與結(jié)果

2.1青絲線草多糖的提取與精制稱取青絲線草粗粉50g，置圓底燒瓶中，加石油醚（60～90℃）400ml，浸泡2h，回流提取1h，濾過，濾渣揮干溶媒，以80%乙醇400ml回流提取2次，1h/次，濾過，濾渣置圓底燒瓶中，加蒸餾水600ml浸泡1h后回流提取1h，濾過，再加蒸餾水400ml回流提取1h，濾過，濾液合并，濃縮至200ml，Sevage法除蛋白后加95%乙醇使含醇80%，靜置過夜，抽濾，濾渣以無水乙醇、丙酮依次洗滌多次，得精制多糖，60℃烘干備用。

作者：吳林青,許偉群,張秋玉,胡海霞,祝先進(jìn),蘇東輝

【摘要】目的觀察鱟抗脂多糖因子(LALF)對小鼠巨噬細(xì)胞晚期炎癥因子高遷移率族蛋白1(HMGB1)功能的拮抗效應(yīng),探討LALF對晚期內(nèi)毒素血癥動物的保護(hù)機(jī)制。方法用HMGB1刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,加入或不加LALF,遷移實(shí)驗(yàn)檢測巨噬細(xì)胞趨化作用,ELISA檢測培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子(TNF)α濃度。結(jié)果巨噬細(xì)胞遷移指數(shù)的增加呈HMGB1劑量依賴性,HMGB1刺激后巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清液TNFα濃度顯著增高。LALF與HMGB1預(yù)混合顯著降低巨噬細(xì)胞的遷移指數(shù)和培養(yǎng)上清液TNFα濃度。結(jié)論LALF可能通過抑制HMGB1而發(fā)揮其對晚期膿毒癥動物的保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】高遷移率族蛋白;膿毒癥;鱟抗脂多糖因子；趨化作用

ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectsoflimulusantilipopolysaccharidefactor(LALF)onthelateproinflammatorycytokineofhighmobilitygroupbox1(HMGB1).MethodsTheprimarymousemacrophageswereculturedandstimulatedbyHMGB1.Macrophagemigrationwasdeterminedbytheuseofchemotaxischamber.ELISAquantitatedtheculturesupernatantsforTNFαproduction.LALFwasaddedtoexploretheeffectsofHMGBIandTNFαproductioninculture.ResultsThechemotacticindexofmacrophagesandtheconcentrationofTNFαintheculturesupernatantsevidentlyincreasedindosedependentmannerinHMGB1groupsandprominentlydecreasedbytheLALFcoincubated.ConclusionHMGB1wasfirstlyindicatedinthisstudytobedirectlyinhibitedbyLALFinlatecourseofendotoxemia.

KEYWORDS:highmobilitygroupproteins;sepsis;macrophage;horseshoecrabs;lipopolysaccharides;tumornecrosisfactoralpha;inflammation

膿毒癥是重癥監(jiān)護(hù)病房病人常見的死因。腫瘤壞死因子(TNF)α、白細(xì)胞介素(IL)1等促炎癥因子曾被普遍認(rèn)為是引起膿毒癥死亡的“核心因子”[1],以往認(rèn)為在這些促炎癥因子達(dá)峰以后再給予抗內(nèi)毒素的治療難以逆轉(zhuǎn)膿毒癥的病程。具有重要意義的是,Levin實(shí)驗(yàn)室給致死量細(xì)菌內(nèi)毒素即脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)攻擊后4，10h甚至24h的Swiss小鼠注射天然鱟抗脂多糖因子(limulusantilipopolysaccharidefactor,LALF)，實(shí)現(xiàn)了對動物晚期膿毒癥的有效保護(hù)[2],提示LALF可能對促炎癥因子消退后的某個(gè)或某些晚期介質(zhì)起拮抗作用。1999年,Wang等發(fā)現(xiàn)高遷移率族蛋白1(highmobilitygroupbox1,HMGB1或HMG1)是膿毒癥致死性全身反應(yīng)的一種重要的晚期促炎性因子[3]。本研究以體外培養(yǎng)的小鼠巨噬細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對象,觀察LALF對HMGB1部分生物學(xué)活性的影響,探討LALF對膿毒癥晚期的實(shí)驗(yàn)動物發(fā)揮保護(hù)作用的機(jī)制。

1器材

1.1材料

青刺果，苯酚，3,5－二硝基水楊酸，亞硫酸，氫氧化鈉，酒石酸鈉正丁醇，三氯甲烷，95%乙醇，無水乙醇，考馬斯亮藍(lán)G-250。

1.2儀器數(shù)顯恒溫水浴鍋HH-2型(國華電器有限公司)，電子天平MODELJD200-3（沈陽龍滕電子有限公司），800B型離心沉淀器（上海安亭科學(xué)儀器廠），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（鞏義市英峪高科儀器廠），unicoUV-2102PC型紫外可見分光亮度計(jì)（尤尼柯上海儀器有限公司）。

2方法

2.1青刺果多糖的提取稱定青刺果50g，按比例加入蒸餾水，于恒溫水浴鍋中回流提取，布氏漏斗過濾，將濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行濃縮，濃縮至約80ml時(shí)，再將濃縮液用Savage法除蛋白，即是向濃縮液中加其1/4體積的三氯甲烷，隨之再加入三氯甲烷體積1/4的正丁醇，劇烈振搖5～10min，混勻，以1500r/min離心20min，分去水層與有機(jī)層交界處的變性蛋白質(zhì)，水層仍按照此方法反復(fù)除蛋白5次。然后在上清液中加入一定量無水乙醇，使乙醇的終濃度達(dá)一定比例，沉淀過夜。沉淀用布氏漏斗抽濾，然后用無水乙醇和丙酮反復(fù)多次抽洗，直至沉淀呈粉末狀時(shí)將其置于表面皿中。將表面皿于60℃干燥至恒重即得青刺果多糖粗品，計(jì)算粗多糖得率。

摘要目的：得到擬類脂A的六肽。方法：用抗類脂A的單克隆抗體篩選噬菌體隨機(jī)六肽庫，經(jīng)四輪篩選后進(jìn)行ELISA檢測,用得到的15個(gè)陽性克隆分別免疫小鼠，并將使小鼠產(chǎn)生抗LPS抗體的10個(gè)克隆進(jìn)行測序，將保守序列進(jìn)行肽合成。結(jié)果：得到保守序列為Lys-Phe-Ser-Ser-Arg,即KFSSRX。固相合成此小肽可與其1B6抗體結(jié)合，且此結(jié)合可被LPS抑制。結(jié)論：此六肽可模擬脂多糖或類脂A表位。

關(guān)鍵詞脂多糖模擬短肽噬菌體肽庫

PreparationofpeptidesmimicringlipidAepitopeusingphagedisplaypeptidelibrary

BAOYong-Li,FUNing①,YANGGui-Zhenetal.

DepartmentofImmunology,NormanBethuneUniversityofMedicalSciences,Changchun130021.①DepartmentofImmunology,FirstMilitaryMedicalUniversity，Guangzhou510515

AbstractObjective:FindingmimicLipidA6-merpeptides.Methods:Usedanti-LipidAMcAbtofishoutphagedisplay6-merpeptiderandomlibrary.After4roundsselection,15positiveclonesweredetectedbyELISAandusedtoimmunizemice.TenofthemcouldgetantibodyforLPS.ToanalyzetheDNAsequencesandtosynthesizethepeptidefromconservativesequences.Results:TheconservativeaminoacidsequenceisLys-Phe-Ser-Ser-ArgorKFSSRX.Thesolidphasesynthesispeptidecanbindto1B6antibodyandthisbindingcanbeinhibitedbyLPS.Conclusion:Theseresultssuggestthat6-merpeptidecanmimicrytheepitopeofLPSorLipidA.

【摘要】目的建立一種穩(wěn)定、簡便的綠茶多糖含量測定方法。方法采用精制綠茶多糖測得綠茶多糖對葡萄糖的換算因子后,樣品經(jīng)除雜處理后,用苯酚－硫酸法測定綠茶中多糖的含量。結(jié)果用此方法測定多糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線,其相關(guān)系數(shù)為0.9997,平均回收率為99.62%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.94%。結(jié)論該方法所需儀器簡單，操作方便,顯色穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，適合于綠茶及其制品的多糖含量的常規(guī)檢測。

【關(guān)鍵詞】綠茶多糖提取苯酚－硫酸法

PreparationandDeterminationofPolysaccharidefromGreenTea

Abstract:ObjectiveTodevelopastableandsimplemethodtomeasurethepolysaccharideinGreenTea.MethodsAftertheconversioncoefficientofpolysaccharidefromGreenTeatoglucosewasobtained,thecontentofpolysaccharidewasmeasuredbyphenol-sulfuricacidmethod.ResultsThecorrelationcoefficientofstandardcurvewas0.9997,therecoveryratewas99.62%andRSDwas1.94%.ConclusionThemethodisconvenient,stableandaccurate,whichcanbeusedforcontentdeterminationofpolysaccharidefromGreenTeaaswellasit''''srelatedproducts.

Keywords:GreenTea;Polysaccharide;Extraction;Phenol-sulturicacidmethod

綠茶是歷史最早的茶類，又稱不發(fā)酵茶，以適宜茶樹新梢為原料，經(jīng)殺青、揉捻、干燥等典型工藝過程制成。其干茶色澤和沖泡后的茶湯、葉底以綠色為主調(diào)，綠茶也因此得名。最新科學(xué)研究結(jié)果表明，綠茶中主要化學(xué)組成為咖啡因、茶多酚、茶多糖等，咖啡因是一種興奮劑,具有較好的鎮(zhèn)痛作用，咖啡因也是一種和緩的利尿劑,藥用上的咖啡因是頭痛鎮(zhèn)痛的一個(gè)組分,它可與麥角胺的酒石酸鹽結(jié)合起來治療偏頭痛［1］；茶多酚是一種新型的天然食品抗氧化劑,與抗壞血酸配合時(shí),其抗氧化性能優(yōu)良，茶多酚也具有高效的抗癌、抗衰老、降血脂等一系列的藥理功能［2］；茶多糖具有降血糖、降血脂、降血壓及減慢心率、耐缺氧的作用，同時(shí)茶多糖在抗凝血、防血栓形成、保護(hù)血象和增強(qiáng)人體非特異性免疫功能方面均有明顯效果［3］，因此從綠茶中提取的多糖成分在開發(fā)降糖新藥和功能性食品方面有著廣闊的前景。

【摘要】目的測定辣木葉中多糖的含量。方法采用精制辣木葉多糖測得辣木葉多糖對葡萄糖的換算因子后，采用蒽酮-硫酸比色法測定，測定波長為620nm。結(jié)果韶關(guān)新豐引種栽培辣木中多糖含量為4.85%,供試液在4h內(nèi)顯色穩(wěn)定,平均回收率為98.72%,RSD＝1.88%(n=4)。結(jié)論此測定方法簡便可行,可作為辣木葉中多糖的含量測定方法。

【關(guān)鍵詞】辣木葉；多糖；蒽酮硫酸法

Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentsofpolysaccharideinleavesofMoringaoleifera.MethodsAftertheconversioncoefficientofMoringaoleiferapolysaccharidestoglucosewasobtained,contentsweredeterminedbyanthrone-H2SO4colorimetry.Wavelengthformeasurementwas620nm.ResultsThecontentsofPolysaccharideinleavesofMoringaoleiferaplantedinShaoguanCountyofGuangdongProvincewas4.85%,thecolorofthetreatedsamplewasstablein4handaveragevalueoftherecoveryforPolysaccharidemeasurementwas98.72%with1.88%ofRSD(n=4).ConclusionThemethodusedinthispaperissimple.ItcanbeusedfordeterminationofthepolysaccharideinleavesofMoringaoleifera.

Keywords：LeavesofMoringaoleifera；Polysaccharides;Anthrone-sulfuricacidmethod

辣木Moringaoleifera為辣木科辣木屬植物，原產(chǎn)于印度北部喜馬拉雅區(qū)域［1］，全株均可利用，葉、花、豆莢富含蛋白質(zhì)、維生素A、維生素B6、維生素C、維生素E、葉酸、泛酸及鈣、鉀、鐵等營養(yǎng)成分，不僅是發(fā)達(dá)國家素食者的理想食物，還是貧窮地區(qū)婦女和兒童的天然營養(yǎng)庫。印度傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，辣木葉有護(hù)肝、利尿、消炎、止痛、降壓、強(qiáng)心、催乳等功效。常用來預(yù)防和治療糖尿病、高血壓病、皮膚病、免疫力弱、貧血、壞血病、肥胖癥、關(guān)節(jié)炎、消化器官腫瘤等疾?。?］。

植物多糖是由許多相同或不同的單糖以α或β糖苷鍵所組成的化合物,普遍存在于自然界植物體中,大量研究表明多糖除了有調(diào)節(jié)免疫功能、抗腫瘤的生物學(xué)效應(yīng)外,還具有降血糖、降血脂和降膽固醇等生理功能。近年來，辣木在我國廣東、云南和海南等都有引種栽培，其活性成分研究和產(chǎn)品的開發(fā)成為熱點(diǎn)。本文用精制辣木葉多糖測得辣木葉多糖對葡萄糖的換算因子，然后將經(jīng)90%乙醇處理脫雜后的辣木葉用水提取多糖，蒽酮－硫酸法比色測定，該法準(zhǔn)確性好、簡便可行。為辣木的合理開發(fā)和利用提供了科學(xué)依據(jù)。

1儀器與藥品

1.1儀器756紫外可見光分光光度計(jì)（上海分析儀器總廠）；真空干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；MP1100B型電子天平（上海精科天平廠）；分析天平（日本）。

1.2藥品無水葡萄糖（中國藥品生物制品檢定所）；硫酸（天津化學(xué)試劑有限公司）；苯酚（分析純）；無水乙醇（天津化學(xué)試劑有限公司）；三蒸水（實(shí)驗(yàn)室自制）；防風(fēng)藥材購自張家口、昌平、安國和圍場，經(jīng)本院中醫(yī)系馬淑蘭教授鑒定；防風(fēng)對照藥材購自中國藥品生物制品檢定所。

2方法

2.1防風(fēng)多糖的提取精密稱取不同產(chǎn)地已粉碎、真空干燥的防風(fēng)藥材450.0g，加入1000ml無水乙醇回流提取2h，以除去單糖及其它醇溶性成分，過濾，濾渣干燥，加入1000ml三蒸水回流提取2h，趁熱過濾，濾渣再加入1000ml三蒸水回流提取2h，合并兩次濾液，減壓濃縮，12000r/min離心20min，上清四倍體積無水乙醇沉淀靜置過夜，抽濾，沉淀物依次用無水乙醇、丙酮、石油醚洗滌，真空干燥即得防風(fēng)多糖。

2.25.0%苯酚標(biāo)準(zhǔn)液的制備取苯酚100g，加鋁片0.1g和碳酸氫鈉0.05g，常壓蒸餾，收集180～182℃餾分稱取該餾分5g，置100ml容量瓶中，加三蒸水稀釋至刻度，搖勻后濾過至棕色試劑瓶中，得5%苯酚溶液，置4℃冰箱備用。

1材料與儀器

海帶采自青島沙子口，經(jīng)鑒定為Laminariajaponica；95％乙醇、濃硫酸、六水合氯化鎂、氫氧化鈉、三氟乙酸、鹽酸羥胺等均為國產(chǎn)分析純；5%苯酚（現(xiàn)配）；L－褐藻糖（Sigma公司）；D-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-木糖、D-甘露糖、L-鼠李糖、D-果糖、葡萄糖、蔗糖等均購自于上海試劑二廠；肌醇（無錫默克爾精細(xì)化學(xué)品有限公司）。高壓鍋（山東新華醫(yī)療器械股份有限公司）；FA1004電子天平（上海天平儀器廠）；722型分光光度計(jì)（上海菁華科技儀器有限公司）；瑞士BüCHIR－114型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；東京理化EYELAFD－5N型真空冷凍干燥機(jī)；電熱恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）；TDL－40B離心機(jī)（上海飛鴿系列離心機(jī)廠）；HP5890Ⅱ氣相色譜儀（美國惠普公司），氫火焰離子化檢測器（FID）。

【摘要】目的探索正確測定海帶多糖含量的方法。方法采用苯酚-硫酸法，按照不同糖溶液配制標(biāo)準(zhǔn)液在485nm處測定多糖含量。結(jié)果按照多糖中褐藻糖與半乳糖比例為標(biāo)準(zhǔn)測得多糖含量為60.42%，介于兩種組成單糖測定結(jié)果之間。結(jié)論按照多糖中單糖組成比例為標(biāo)準(zhǔn)測定多糖含量具有可比性，可用于海帶多糖含量測定。

【關(guān)鍵詞】海帶多糖苯酚硫酸法

Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentofpolysaccharidesinLaminariajaponica.MethodsWeusedthemethodofvitriliccolorimetry,anddetectionwavelengthwas485nm.ResultsThecontentofpolysaccharideswiththemethodwhichwasaccordingtothecomposingsugarswas60.42%.ConclusionThismethodcanbeusedtodeterminethecontentofpolysaccharidesinLaminariajaponica.

Keywords：Laminariajaponica;Polysaccharides;Phenol-vitrioliccolorimetry

摘要：香菇多糖是具有免疫調(diào)節(jié)活性、抗感染作用、抗腫瘤作用、降低膽固醇、抑制轉(zhuǎn)氨酶活性和血小板凝集等作用的功能性活性物質(zhì)，現(xiàn)已用于臨床作為抗腫瘤、抗病毒型肝炎、抗輻射、抗糖尿病等。其應(yīng)用主要是制成片劑、膠囊劑和口服液來使用。

關(guān)鍵詞：香菇多糖；制劑；片劑；膠囊劑；口服液

香菇多糖（lentinan，LNT）是從傘菌科真菌香菇（lentinasedodes）的子實(shí)體或經(jīng)香菇深層發(fā)酵菌絲體中分離得到的一種β-1，3-葡聚糖，20世紀(jì)60年代日本科學(xué)家首先證明其具有顯著的免疫調(diào)節(jié)活性和抗腫瘤活性，經(jīng)臨床驗(yàn)證，因而引起人們的廣泛重視，已在國際市場上推廣應(yīng)用。香菇多糖的生物活性主要表現(xiàn)在：免疫調(diào)節(jié)活性、抗感染作用、抗腫瘤作用、降低膽固醇、抑制轉(zhuǎn)氨酶活性和血小板凝集等的作用。香菇多糖的毒副作用與通常化療藥物比較，由于輕微可忽略不計(jì)。香菇多糖目前除了作為抗腫瘤藥物在臨床上應(yīng)用外，還有許多其他作用，如抗輻射、抗糖尿病等，還有報(bào)道香菇多糖的硫酸酯化衍生物具有良好的抗HIV活性，也是重要的功能性食品基料。

香菇多糖純品一般為白色粉末狀固體，對光和熱穩(wěn)定。在水中最大溶解度為3mg/ml；能溶解于0.5mol/lNaOH，溶解度可達(dá)50~100mg/ml；不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑中。香菇多糖具有吸濕性，在相對濕度為92.5%的25℃室溫環(huán)境中放置15天，吸水量可達(dá)40%。香菇多糖是極性大分子化合物，其特定的結(jié)構(gòu)與免疫活性有密切關(guān)系。因此香菇多糖的提取和制劑過程中大多采用不同溫度的水和稀堿液，并盡量避免過于酸性條件下操作，因?yàn)閺?qiáng)酸性能引起多糖苷鍵的斷裂。

隨著現(xiàn)代生活節(jié)律的加快，生活水平的提高，各種即食、方便、全營養(yǎng)高能組合食品以其實(shí)用和攜帶方便、快速補(bǔ)充能量和體力、消除疲勞、增強(qiáng)體質(zhì)、延年益壽、美容等而備受人們的青睞，香菇多糖就是能滿足人們這一需求的生物活性物質(zhì)。

1香菇多糖片