導(dǎo)語：青刺果多糖提取分析論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1器材

1.1材料

青刺果，苯酚，3,5－二硝基水楊酸，亞硫酸，氫氧化鈉，酒石酸鈉正丁醇，三氯甲烷，95%乙醇，無水乙醇，考馬斯亮藍(lán)G-250。

1.2儀器數(shù)顯恒溫水浴鍋HH-2型(國(guó)華電器有限公司)，電子天平MODELJD200-3（沈陽龍滕電子有限公司），800B型離心沉淀器（上海安亭科學(xué)儀器廠），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（鞏義市英峪高科儀器廠），unicoUV-2102PC型紫外可見分光亮度計(jì)（尤尼柯上海儀器有限公司）。

2方法

2.1青刺果多糖的提取稱定青刺果50g，按比例加入蒸餾水，于恒溫水浴鍋中回流提取，布氏漏斗過濾，將濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行濃縮，濃縮至約80ml時(shí)，再將濃縮液用Savage法除蛋白，即是向濃縮液中加其1/4體積的三氯甲烷，隨之再加入三氯甲烷體積1/4的正丁醇，劇烈振搖5～10min，混勻，以1500r/min離心20min，分去水層與有機(jī)層交界處的變性蛋白質(zhì)，水層仍按照此方法反復(fù)除蛋白5次。然后在上清液中加入一定量無水乙醇，使乙醇的終濃度達(dá)一定比例，沉淀過夜。沉淀用布氏漏斗抽濾，然后用無水乙醇和丙酮反復(fù)多次抽洗，直至沉淀呈粉末狀時(shí)將其置于表面皿中。將表面皿于60℃干燥至恒重即得青刺果多糖粗品，計(jì)算粗多糖得率。

2.2正交實(shí)驗(yàn)根據(jù)有關(guān)資料報(bào)道，選取溫度(A)，提取時(shí)間(B)，料液比(C)，乙醇終濃度(D)4個(gè)因素，每個(gè)因素3個(gè)水平，選用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)方案提取青刺果多糖，以多糖得率為指標(biāo)確定最佳提取工藝。因素水平見表1，實(shí)驗(yàn)安排方法見表2。表1青刺果多糖提取實(shí)驗(yàn)因素水平（略）表2青刺果多糖提取實(shí)驗(yàn)方案（略）

2.3含量測(cè)定采用硫酸-苯酚比色法測(cè)定粗多糖中川牛膝總糖含量［4］，DNS法測(cè)定粗多糖中還原糖的含量［5］，考馬斯亮藍(lán)G-250比色法測(cè)定粗多糖中蛋白質(zhì)含量［6］。

2.4多糖含量計(jì)算

多糖含量(%)=總糖含量-還原糖含量

多糖得率(%)=多糖含量×干燥提取物質(zhì)量原藥材粉末質(zhì)量×100%

3結(jié)果

3.1多糖含量從表3中可以看出，影響多糖得率的因素主次順序?yàn)锳>B>C>D，溫度對(duì)多糖得率的影響最大，其次為時(shí)間，料液比和乙醇終濃度。根據(jù)正交表分析，青刺果多糖的最優(yōu)提取工藝應(yīng)為A3B3C3D2，即溫度100℃，提取時(shí)間8h，料液比1：20，乙醇終濃度85%。表3正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）

3.2測(cè)定青刺果中蛋白質(zhì)含量經(jīng)計(jì)算得回歸方程為Y=0.0163X-0.0539，相關(guān)系數(shù)r=0.9925，樣品蛋白質(zhì)含量見表4，由表4可知，含量最大的為樣品1，含量為19.58%。表4青刺果蛋白質(zhì)含量（略）

4討論

多糖遇濃硫酸脫水生成糖醛或其衍生物與苯酚試劑發(fā)生縮合反應(yīng)，生成橙黃色化合物。此化合物在490nm處有最大吸收波長(zhǎng)，其顏色深度與粗多糖中總糖的含量成正比，可用比色法測(cè)定其含量，以此計(jì)算粗多糖中總糖含量。苯酚極易氧化，因此在測(cè)定時(shí)要避光和操作迅速。本法簡(jiǎn)單，顯色穩(wěn)定，靈敏度高。用乙醇沉淀所獲得的多糖，?；煊休^多的蛋白質(zhì)，降低了多糖的純度，必須予以去除。Savage法是從多糖中去除蛋白質(zhì)最緩和的方法，但要達(dá)到除盡蛋白質(zhì)的目的需進(jìn)行反復(fù)多次的處理，如能配合加入蛋白質(zhì)水解酶（膜蛋白酶、胃蛋白酶、鏈蛋白酶等），使蛋白質(zhì)大分子先進(jìn)行一定程度的降解，再用Savage法處理，效果更好。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用水提法提取青刺果多糖，工藝簡(jiǎn)單，是一種理想的提取多糖類物質(zhì)的方法。此外青刺果多糖含量較高，以青刺果為原料開發(fā)以其多糖為主要成分的藥物、保健品等具有極為良好的應(yīng)用前景。

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【摘要】目的研究青刺果多糖的提取工藝并測(cè)定多糖的含量。方法采用正交實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行水提醇沉法的優(yōu)選；以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用苯酚-硫酸，紫外分光光度法于490nm波長(zhǎng)處測(cè)定青刺果多糖的含量。結(jié)果多糖的最佳提取條件為100℃，料液比為1:20，提取時(shí)間8h，乙醇終濃度為85%。測(cè)定青刺果多糖含量最高達(dá)36.44%。結(jié)論最佳提取條件得率高，測(cè)定方法準(zhǔn)確，對(duì)青刺果多糖含量的測(cè)定獲得較滿意結(jié)果。

【關(guān)鍵詞】青刺果；多糖；紫外分光光度法