1器材

1.1原料現(xiàn)蕾期紫花苜?！财贩N為WL323〕采自于河北省保定市河北農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)基地。將苜蓿洗凈，40℃下烘干，用粉碎機(jī)在40目下粉碎成粉末。

1.2試劑與儀器乙醇、石油醚、蘆丁、實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。VIS-7220型紫外分光光度計(jì)，F(xiàn)2102微型植物粉碎機(jī)，SHB-IIIA循環(huán)水式多用真空泵，KQ2200DE型數(shù)控超聲波清洗器，756PC型紫外可見分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司），索氏提取器等。

2方法

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制準(zhǔn)確配置100ml濃度為0.168mg/ml的蘆丁儲備液。準(zhǔn)確吸取蘆丁儲備液0.00，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00ml放入7個(gè)25ml的容量瓶中，用30%的乙醇定容到刻度，在266nm下測定吸光度并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程為Y=0.18222×C+0.05853（C:mg/ml），線性相關(guān)系數(shù)r=0.9988。

2.2單因素及正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。表1正交實(shí)驗(yàn)因素水平

【摘要】目的利用麻竹葉黃酮進(jìn)行了小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)和致突變實(shí)驗(yàn)。方法采用急性毒性實(shí)驗(yàn)、小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體實(shí)驗(yàn)。結(jié)果小鼠經(jīng)口LD50>25g·（kg·bw）-1，腹腔注射LD50>10g·（kg·bw）-1；竹葉黃酮各劑量組不能使鼠傷寒沙門氏菌移碼突變株和堿基置換突變株發(fā)生回復(fù)突變；沒有對小鼠骨髓細(xì)胞染色體的斷裂效應(yīng)及紡錘體毒效應(yīng)；也對小鼠精子的畸形無影響。結(jié)論竹葉黃酮是一種安全的保健食品功能因子。但對人體有無毒副作用還需作臨床實(shí)驗(yàn)。

【關(guān)鍵詞】竹葉黃酮半數(shù)致死量Amees實(shí)驗(yàn)微核致突變作用毒理學(xué)

ToxicologicalTestonFlavonoidsfromLeavesofDendrocalamusLatiflorus

Abstract:ObjectiveAcutetoxicityexperimentsandmutationexperimentswereconductedonmicewiththeflavonoidsfromtheleavesofDendrocalamuslatiflorus.MethodsBymeansofacutetoxicitytest,malformationtestofmicesperm,micronucleustestofbonemarrowcellandAmestest.ResultsLD50（ig）formicewasmorethan25g·（kg·bw）-1andinLD50（ip）formicewasmorethan10g·（kg·bw）-1.MutagenicactionofflavonoidfrombambooleavesonTA97，TA98，TA100andTA102，andtoxiceffectonmicemarrowmicronucleusaswellaseffectonmalformationofmicespermwereallnegative.ConclusionTheflavonoidsfromleavesofDendrocalamuslatifloruswasatypeofsecurefunctionfactorofhealthyfood，butwhetherithastoxicornegativeeffectonhumanornotitneedfurtherobservationinclinicalapplication.

Keywords:Flavonoidsfrombambooleaves（FBL）；LD50；Amesexperiment；Micronucleus；Mutationexperiments；Toxicology

麻竹Dendrocalamuslatiflorus又名甜竹、八月麻（福建），屬禾本科牡竹屬，是廣泛分布于我國福建、臺灣、廣東、廣西、云南、貴州和四川等南亞熱帶和熱帶地區(qū)的大型叢生竹種［1］。麻竹葉大，寬4～7cm以上，內(nèi)含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，很值得開發(fā)利用。竹葉在我國具有悠久的食用和藥用歷史［2～4］。竹葉提取物具有優(yōu)良的抗自由基、抗氧化、抗衰老、調(diào)節(jié)血脂、阻斷亞硝化反應(yīng)、增強(qiáng)免疫和抗菌抑菌的作用［2～4］。竹葉中所含的功能因子主要是黃酮糖苷和香豆素類內(nèi)酯等［3,4］。

1儀器與試藥

1.1儀器精密天平BS224S（德國塞多利斯）；UV-4501S紫外分光光度計(jì)(天津市港東科技發(fā)展有限公司)；超聲清洗機(jī)SK8210LHC（上?？茖?dǎo)超聲有限公司）。

1.2試藥知母（產(chǎn)地河北，河南，安徽）；芒果苷為對照品（中國生物制品檢驗(yàn)所，批號111607－200301）；乙醇、甲醇均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1實(shí)驗(yàn)條件與方法的建立

2.1.1對照品的選擇很多文獻(xiàn)報(bào)道中藥制劑中總黃酮的含量測定多數(shù)采用蘆丁作為對照品。采用蘆丁作為對照品，解決了部分中藥或中藥制劑中本身缺少黃酮對照品的問題，在沒有合適的對照品情況下，也不失一種測量總黃酮的可行的方法。芒果苷是知母中含量較高的黃酮類化合物，是其清熱作用的有效成分，同時(shí)還具有抗炎、抗病毒、抗氧化、免疫抑制、利尿、預(yù)防肥胖等作用。因此，用知母中含量較高且具有抗病毒作用的專屬性活性成分作為對照品來測定知母總黃酮的含量更加有意義。

甘草為豆科（Leguminosae）甘草屬（GlycyrrhizaLinn.），是多種植物的根和根莖。根據(jù)2000年版《中華人民共和國藥典》中記載，甘草的原植物有3種，即烏拉爾甘草（G.uralensisFisch）、脹果甘草（G.inflateBat）和光果甘草（G.glabraL.）三種。隨著藥學(xué)及相關(guān)學(xué)科的發(fā)展，人們對甘草的認(rèn)識也越來越豐富。甘草中主要含有甘草酸、甘草次酸、生物堿、氨基酸和黃酮等化學(xué)成分，具有廣泛的生理活性。隨著人們對甘草研究的不斷深入，甘草中黃酮類成分的生物活性已成為新的研究熱點(diǎn)。近年來，人們發(fā)現(xiàn)其中黃酮類成分——甘草黃酮在抗?jié)兎矫孀饔蔑@著，尤其是在治療十二指腸潰瘍方面有較好的療效。有研究顯示，甘草黃酮對離體腸管的痙攣有一定的抑制作用。本文對甘草黃酮對離體小腸的作用做一簡要研究，為進(jìn)一步研究甘草黃酮類成分提供參考。

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料：濃度為0.1mg/ml的甘草黃酮溶液、濃度為0.5mg/ml的甘草黃酮溶液、濃度為1mg/ml的甘草黃酮溶液、濃度為2mg/ml的甘草黃酮溶液、二甲基亞砜溶液（由二甲基亞砜溶解，二甲基亞砜的最終濃度為1%）和豚鼠1只。

1.2實(shí)驗(yàn)器材麥?zhǔn)皆〔?，溫度?jì)，張力換能系統(tǒng)，恒溫水浴裝置，供氧裝置，鐵架臺，彈簧夾，注射器，手術(shù)剪，棉線。

1.3實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：①取制腸段標(biāo)本。取空腹豚鼠一只，迅速將其致死。然后剖開豚鼠的腹部，剪取其空腸和回腸的上半段。②在腸段的兩端各穿一根線，將腸段的一端系在固定片上，另一端系在張力換能器的小勾上。然后開動記錄儀，待腸管收縮平穩(wěn)后，記錄一段正常的腸管收縮曲線。③依次在腸段上使用不同濃度的甘草黃酮溶液，并觀察不同濃度的甘草黃酮溶液對離體小腸自發(fā)活動的影響。

2結(jié)果

1器材

島津LC-10A高效液相色譜儀(LC-10ATVP泵，SCL-10AVP控制器，SPD-10AVP紫外檢測器，CTO-10AVP柱溫箱)；紫外分光光度計(jì)(島津UV3101PC)；分析天平（Mettler,AE240）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申越科學(xué)儀器公司）；四用紫外分析儀（上海顧村科學(xué)器材廠）。芹菜素和木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品購于天津尖峰植物提取物公司，甲醇為色譜純（TEDIACompanyInc.USA），提取及精制用乙醇、氯仿、醋酸乙酯均為分析純（廣州大華試劑公司），其他化學(xué)試劑均為分析純。半邊旗植物采收于廣東湛江郊區(qū)，經(jīng)廣東海洋大學(xué)楊燕君副教授鑒定為半邊旗。

2方法與結(jié)果

2.1半邊旗總黃酮的測定

2.1.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制參照文獻(xiàn)［5］，采用紫外分光光度計(jì)法并適當(dāng)調(diào)整。精密稱定干燥至恒重的蘆丁對照品2mg，加適量甲醇溶解，定容到10ml即得對照品儲備液。精密吸取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml對照品儲備液于50ml容量瓶中，加甲醇至20ml，加入5%亞硝酸鈉溶液2ml，搖勻，放置5min，加入10%硝酸鋁溶液2ml，搖勻，放置6min，加入新配制的5%氫氧化鈉溶液20ml，用甲醇定容至50ml，用分光光度計(jì)于500nm處測定吸光度。以濃度(C)與相應(yīng)的吸光度(A)進(jìn)行回歸分析，得回歸方程A=0.1632C+0.0564，r=0.9976。

2.1.2樣品總黃酮的測定稱取干燥半邊旗粗粉10g，加入含溶劑的圓底燒瓶中，按表1的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行回流提取，過濾，取濾液揮干溶劑，殘留物用甲醇溶解，定容到50ml，即得樣品溶液，用分光光度計(jì)測定500nm處的吸光度值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品總黃酮溶出量。

【摘要】目的研究草珊瑚總黃酮的提取工藝。方法以草珊瑚為原料，用乙醇為溶劑，利用超聲波輔助提取和水浴法提取草珊瑚總黃酮，利用L9（33）正交實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)化總黃酮提取工藝，采用單因素實(shí)驗(yàn)，測定了乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間、提取溫度等單因素實(shí)驗(yàn)，考察總黃酮提取率與各因素的關(guān)系。根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)得出的顯著條件進(jìn)行正交設(shè)計(jì)，確定最佳工藝條件。結(jié)果超聲波法的最佳工藝條件為乙醇濃度50%、料液比1∶15、提取時(shí)間45min，根據(jù)確定的最佳工藝條件，按實(shí)驗(yàn)中的測定方法測得提取的總黃酮含量為69.25mg/g。水浴法的最佳工藝條件為乙醇濃度50%、料液比1∶20、提取溫度80℃、提取時(shí)間2h，按實(shí)驗(yàn)中的測定方法測得提取的總黃酮含量49.60mg/g。結(jié)論超聲波提取不僅在時(shí)間上比水浴提取大大縮短，而且實(shí)驗(yàn)過程易于控制，黃酮提取率也比水浴提取提高28.38%。

【關(guān)鍵詞】草珊瑚；總黃酮；提取工藝；含量

［Abstract］ObjectiveTooptimizetheextractionprocessoftheflavonoidsfromsarcandraglaber.MethodsUsedsarcandraglaberasrawmaterials，tookethanolextractionmethodsandusedultrasonicwaterbathtoextracttheflavonoids，thenusedL9（33）orthogonalexperimenttooptimizetheextractionprocessofflavonoids.Oneoftheexperimentsisthesinglefactorexperiment.Accordingtothegivenconditionsandmeasuredflavones，whatwewilldoistohavesinglefactorexperimentsaboutdifferentconcentrationsofethanol，feedratio，extractiontimeandtemperature.Accordingtotheremarkableconditionsfromsinglefactorexperiments，wewillhaveanorthogonaldesignandthenselectthebestconditions.ResultsTheoptimumconditionsofultrasonicmethodsarefortheconcentrationof50percentethanol，feedrate1∶15，theextractedtime45minutes，theflavonesin69.25mg/g.Theoptimumconditionsofwaterbathforethanolmethodsareforconcentrationof50percent，feedrate1∶20，theextractedtemperature80℃andtheflavonesin49.60mg/g.ConclusionThetimeusedinultrasonicextractionisgreatlyshorterthanthatofwaterbathandtheexperimentiseasiertocontrolthanthatofwaterbath，andtheextractionrateofflavonoidsalsoraise28.38%thanthatofwaterbath.

［Keywords］sarcandraglaber；flavonoids；extractionprocess；content

隨著草珊瑚在醫(yī)藥、獸藥、保健食品及保健用品領(lǐng)域中的應(yīng)用越來越廣泛，對其有效成分的提取分離顯得越來越重要。黃酮類化合物是草珊瑚中含量最多、最主要的活性成分之一。目前，對草珊瑚總黃酮的提取分離工藝技術(shù)研究尚未見有詳細(xì)報(bào)道，本學(xué)位論文擬對草珊瑚總黃酮提取分離工藝技術(shù)進(jìn)行較系統(tǒng)的研究并篩選最佳新技術(shù)新工藝。采用正交實(shí)驗(yàn)方法考察沸水提取法及乙醇提取法對草珊瑚總黃酮提取效果的影響；采用中藥高新工程技術(shù)大孔吸附樹脂對草珊瑚總黃酮進(jìn)行分離純化研究，以確定草珊瑚總黃酮最佳提取分離工藝條件及方法。以確定的草珊瑚總黃酮最佳提取工藝對不同季節(jié)采收的草珊瑚中總黃酮含量的動態(tài)變化，草珊瑚自然存放時(shí)間不同對總黃酮含量的影響，貴州草珊瑚根、莖、葉中總黃酮的不同含量進(jìn)行動態(tài)變化研究，以確

定草珊瑚原料的最佳利用時(shí)機(jī)。從而為生產(chǎn)中最有效的開發(fā)利用草珊瑚，獲得草珊瑚總黃酮的最大提取率，發(fā)揮草珊瑚的最大經(jīng)濟(jì)效益提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)及指導(dǎo)，以達(dá)到提升草珊瑚藥、食用產(chǎn)品的質(zhì)量檔次，使其更具三效（高效、速效、長效），三?。▌┝啃?、毒性小、不良反應(yīng)?。?，三便（便于貯藏，便于攜帶，便于服用）的特點(diǎn)，使其產(chǎn)品能走出國門、出口創(chuàng)匯，有著重要的經(jīng)濟(jì)和社會意義［1］。

1儀器與試藥

1．1儀器UV－2201紫外可見分光光度計(jì)（Shimadzu）；傾斜式高速萬能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）；PB203－N電子精密天平（MettlerToledo儀器上海有限公司）；AJ150L電子精密天平（MettlerinSwitzerland）。

1．2試藥實(shí)驗(yàn)用藥材采自北京市昌平區(qū)，落葉晾干，經(jīng)鑒定為柿樹科柿屬柿DiospyrosKakiL．f．；蘆丁對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：080－9303）；AlCl3·6H2O等均為分析純。

2方法與結(jié)果

2．1因素水平表乙醇作為提取溶劑，對乙醇濃度、溶劑量及提取次數(shù)和時(shí)間3種因素進(jìn)行考察，每種因素分為3個(gè)水平，結(jié)果見表1。

2.2供試品溶液的制備精密稱取柿葉最粗粉（10～22目之間）1g共9份，按照表2L9（34）正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，用對應(yīng)濃度和體積的乙醇回流提取相應(yīng)次數(shù)和時(shí)間?；亓鹘Y(jié)束后合并提取液，放冷，抽濾，濾液轉(zhuǎn)移至100ml或200ml量瓶中，分別以其相應(yīng)的提取溶劑定容，過微孔濾膜（0．45μm），作為供試品溶液。

【摘要】目的為充分利用芹菜食物資源，避免資源的浪費(fèi)，探討芹菜總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用超聲波乙醇浸提法從芹菜中提取黃酮類物質(zhì)，對所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證，并用分光光度法測定含量。結(jié)果測得樣品中總黃酮的含量C=0.2126mg/ml，回收率為100.3%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過程，無任何污染，是提取芹菜黃酮類物質(zhì)的有效途徑。

【關(guān)鍵詞】超聲波提取芹菜總黃酮鑒別

TheTotalFlavanoneofCeleryExtractionandtheIdentificationbyUltrasonicWave

Abstract：ObjectiveTomakeuseoftheresourcesofcelery，avoidwastingandapproachtheextractionoftotalflavanoneofcelery.MethodsTheflavonoidswereextractedbyethanolasthesolventfromcelerywithultrasonicwaveandethanolextraction.Usingspectrophotometrytoextractandchecktheflavanoneofcelery.ResultsThedensityofthetotalflavanoneofcelerywasC=0.2126mg/mlandtherateofrecoverywas100.3%.Theoutcomeandthepurityoftheflavanonewereallveryhigh.ConclusionThismethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealwaytoextracttheflavanoneofcelery.

Keywords：Ultrasonicwavetreatment;Celery;Totalflavanone;Identification

芹菜ApiumgraveolensL．屬傘形花科一年生或二年生草本植物，異名藥芹、旱芹。芹菜味辛、甘，性涼，營養(yǎng)豐富。已有研究證實(shí)，芹菜含有豐富的黃酮類化合物、多不飽和脂肪酸、礦物元素、丁基苯酞類、萜類、香豆素衍生物、葉綠素、氨基酸與維生素、膳食纖維等［1］，其中，黃酮類化合物主要成分為水蓼素及7-甲基水蓼素,醫(yī)學(xué)證明，這2種黃酮類化合物是治療高血壓的有效成分［2］。在藥理上，芹菜還具有降壓、安神、降血糖、血脂、軟化血管、增強(qiáng)免疫力、增進(jìn)食欲和健胃等藥理作用［2］。還可作為神經(jīng)衰弱、小便熱澀不利、月經(jīng)不調(diào)等癥的食療。芹菜中含有大量膳食纖維素，經(jīng)常食用有促進(jìn)腸蠕動、防治便秘以及預(yù)防大腸癌等［3］。

烏蕨［Stenolomachusanum(L.)Ching］為鱗始蕨科植物烏蕨的全草，又名野雞尾、金花草、中華金粉蕨，具有清熱、解毒、利濕、止血的功效［1］。本文就烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位的總黃酮和微量元素含量進(jìn)行比較分析，為烏蕨的進(jìn)一步研究和資源開發(fā)提供依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器

WND200A型高速中藥粉碎機(jī)（上海微型電機(jī)廠），BS224S精密電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，TU1900雙光束紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限公司），IRIS/AP型電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(美國TJA公司)，全自動回流消化儀(重慶南岸玻璃儀器廠)。

1.2試藥

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所，批號為0080-9705)；硝酸、高氯酸均為優(yōu)級純，其他試劑均為分析純，測微量元素用水為雙蒸水。烏蕨藥材于2008年10月采于杭州九溪，經(jīng)熊耀康教授鑒定為烏蕨Stenolomachusanum(L.)Ching的地上部分，陰干，粉碎，備用。

【摘要】目的為了研究復(fù)方生物黃酮（圣安泰牌百力康片）的潛在致突變性。方法我們對該產(chǎn)品進(jìn)行了Ames實(shí)驗(yàn)、小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)。結(jié)果Ames實(shí)驗(yàn)，小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)，小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)等結(jié)果均為陰性，均未見毒性改變。結(jié)論復(fù)方生物黃酮在服用劑量內(nèi)未見致突變性。

【關(guān)鍵詞】復(fù)方生物黃酮；Ames實(shí)驗(yàn)；小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)；小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)

【Abstract】Inordertostudythepotentialmutationgenesisofcompoundflavine，wehaveperformedAmestests，ratmarrowosteocytemicronucleartestsandratspermdeformationtests.Theresultsareallnegative，notoxicchangeshavebeenobserved.Itisconcludedthatnomutationgenesiseffectsofcompoundbio-flavinehavebeendiscoveredinfeedingdosage.

【Keywords】compoundbio-flavine；Amestests；ratmarrowosteocytemicronucleartests；ratspermdeformationtests

隨著生命科學(xué)的不斷發(fā)展，人們對生物黃酮有了廣泛的研究，發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有良好的抗氧化性能［1］和清除自由基的能力［2］；具有抗腫瘤作用［3］；植物雌激素樣作用；減少體內(nèi)膽固醇的合成，降糖作用［4］和降低血清膽固醇濃度和對心腦血管的保護(hù)作用［5］；對細(xì)胞免疫功能和非特異性免疫功能均有提高作用。生物黃酮的種類眾多，其來源不同，所發(fā)揮的生物活性也不同。根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)理論以枸杞、黃芪、銀杏葉為主要原料，輔以其他輔料制成的復(fù)方生物黃酮，可以更好的發(fā)揮黃酮的提高免疫作用，盡管這些主要原料均來源于“既食又藥”的物質(zhì)，但是關(guān)于復(fù)方成分的致突變性研究較少。為了研究復(fù)方生物黃酮（圣安泰牌百力康片）可能對人體造成的潛在致突變性，我們對該產(chǎn)品進(jìn)行了Ames實(shí)驗(yàn)、小鼠骨髓微核實(shí)驗(yàn)和小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)，以期為今后開發(fā)利用我國“既食又藥”的醫(yī)藥寶庫提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法