導(dǎo)語：紫丁香葉中總皂苷提取論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1儀器與材料

日本島津紫外分光光度計UV-2401PC（北京）；電子天平MettlerCE240(上海)；試劑均為分析純；齊墩果酸標準品（供含量測定用）購于中國藥品生物制品檢定所；紫丁香葉為200609采摘的新鮮葉(由長春中醫(yī)藥大學(xué)鄧明魯教授鑒定)，干燥備用。

2方法與結(jié)果

2.1紫丁香葉總皂苷的不同提取方法

2.1.1水煎法

取干燥的紫丁香葉100g，加水文火煎煮3次。第1次12倍量水煎2h，后2次加10倍量水，煎1.5h，合并3次提取液，過濾，濃縮，80℃減壓干燥，稱重。同法做3次平行實驗，計算平均得膏率。得膏率(%)=干膏重/生藥量×100%。

2.1.2醇提法

傳統(tǒng)的提取總皂苷的方法為乙醇提取，因此本實驗選用70%乙醇回流提取。取干燥的紫丁香葉100g，用70%乙醇回流提取3次，1.5h/次，加醇量分別為12，10，8倍量。合并提取液，過濾，濃縮80℃，減壓干燥，稱重。同做3次平行實驗，計算平均得膏率。

2.1.3超聲波法

取兩份干燥的紫丁香葉100g，分別加10倍量水和70%乙醇超聲3次，30～40min/次，合并提取液，過濾，濃縮，減壓干燥，稱重。同法做3次平行實驗，計算平均得膏率。

2.2紫丁香葉總皂苷含量測定方法

2.2.1對照品溶液的制備

以齊墩果酸作為標準品，精密稱取干燥至恒重的齊墩果酸對照品11.04mg置于25ml容量瓶中，加甲醇5ml超聲處理5min，用甲醇定容至刻度，搖勻得濃度為0.44mg/ml的對照品儲備液。

2.2.2測定波長的選擇

精密吸取齊墩果酸對照品溶液0.05ml及供試品溶液1ml于10ml具塞試管中，水浴揮干溶劑，精密加入新配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，加塞，搖勻，于60～65℃水浴中加熱15min，取出，流水冷卻至室溫后，精密加入醋酸乙酯5ml，搖勻，以相同試劑為空白，在450～900nm波長范圍內(nèi)掃描。齊墩果酸對照品在553nm處有最大吸收，樣品溶液在546nm處有最大吸收（見圖1），但在550nm處也有強吸收，故選擇550nm為測定波長。

2.2.3標準曲線的制備精密吸取齊墩果酸對照品溶液(mg/ml)0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50ml分別加入6支具塞試管中，即各試管中標準品的量分別為0.022，0.044，0.088，0.132，0.176，0.220mg，按照“2.2.2”項下操作，按分光光度法［5］,于550nm處測定吸光度。得到吸光度與濃度的方程：A=8.3425C+0.0527,r=0.9995(n=6)。在22～220μg范圍內(nèi)齊墩果酸對照品顯色后的吸光度與濃度呈良好線性關(guān)系。

2.2.4供試品含量測定取“2.1”項下的5組干粉各2.5g，30ml甲醇溶解，稱重，超聲20min，補足損失的重量，搖勻過濾，取續(xù)濾液1ml甲醇定容到100ml，作為供試品溶液。取供試品溶液1ml于10ml具塞試管中，按照標準曲線項下的操作方法測定樣品的吸光度。然后根據(jù)線性方程計算其總皂苷的含量。結(jié)果見表1。表1紫丁香葉中總皂苷不同提取方法含量比較（略）

2.3正交實驗法優(yōu)選紫丁香葉總皂苷醇提工藝通過表1可以看出，不同提取方法直接影響著紫丁香葉總皂苷的測定結(jié)果，雖然超聲波提取法是近幾年發(fā)展起來的提取方法，節(jié)省時間，而且溶劑用量少，但該法出膏率低，提取得到的總皂苷含量較低，不宜采用。綜合考慮，70%乙醇提取總皂苷是比較合適的提取方法。為此，設(shè)計醇提正交，以進一步優(yōu)化醇提工藝。

2.3.1因素水平的確定根據(jù)實際情況，選擇提取次數(shù)（A），提取時間（B），溶媒量（C），醇濃度（D）4個考察因素，每個因素各設(shè)置3個水平。因素水平見表2。

2.3.2實驗方法及指標考察取紫丁香葉100g，按L9(34)正交表安排實驗。共9組實驗，每組兩次平行實驗，以總皂苷含量為指標，測定結(jié)果取其平均值。結(jié)果見表3，方差分析見表4。表2醇提因素水平（略）表3正交實驗結(jié)果（略）

3討論

目前《中國藥典》尚未收錄紫丁香葉，而且尚未見國內(nèi)有關(guān)于紫丁香葉總皂苷含量的報道。本實驗中選用皂苷類比較常見的母核結(jié)構(gòu)——齊墩果酸為對照品，對總皂苷的含量進行測定，不失為一種較好的選擇。

在提取時間因素的水平選擇上，提取時間太長，成本高，不利于生產(chǎn)，時間短提取不完全。因此選擇了1.0，1.5，2.0h3個提取水平；溶媒用量根據(jù)實際的浸漬情況，選擇12，13，14倍量3個水平；同時預(yù)實驗結(jié)果表明50%以下醇提所得總皂苷含量較低，因此選擇50%，70%，90%3種醇濃度水平。表4方差分析（略）

由表3的直觀分析結(jié)果可知，優(yōu)選出的提取工藝為A2>C2>D3>B2。由表4的方差結(jié)果分析可知，A，C因素對醇提工藝均有顯著影響，D因素對醇提有影響，而B因素對結(jié)果沒有影響。因此，為節(jié)省能源，選擇提取1.0h。即最佳提取工藝為A2B1C2D2，即以70%乙醇回流提取2次，1h/次，加醇量為13倍量/次。驗證實驗表明，此提取工藝得到滿意的實驗結(jié)果。

【參考文獻】

［1］孫傳奇．遼寧省中藥資源名錄［M］.沈陽：遼寧省中藥資源普查辦公室，1987：46.

［2］Harbome,J．B．AchemotaxonomicsurveyofflavoriodsinleavesoftheOleaceae［J］.Bot．J．Linn,soc,1980,8(2)：155.

【摘要】目的優(yōu)選紫丁香葉中總皂苷的提取工藝。方法采用香草醛－冰醋酸－高氯酸顯色法，用紫外分光光度計測定不同提取方法下所得紫丁香葉藥材中總皂苷的含量，選出紫丁香葉總皂苷的提取工藝。進而設(shè)定正交實驗，來優(yōu)選最佳提取工藝。結(jié)果總皂苷的最佳提取工藝為70%乙醇回流提取2次，1h/次，加醇量為每次13倍量。結(jié)論此工藝安全、成本低，得到的總皂苷含量高，可作為提取紫丁香葉生產(chǎn)工藝參考。

【關(guān)鍵詞】紫丁香葉總皂苷正交設(shè)計提取工藝