導(dǎo)語：黃芩的新型提取方法論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的探索黃芩的新型提取方法。方法采用紫外分光光度法測(cè)定黃芩苷含量,比較水提法與液-液連續(xù)萃取法對(duì)黃芩苷提取率的差別。結(jié)果水提法與液-液連續(xù)萃取法對(duì)黃芩苷提取率差異有顯著性。結(jié)論液-液連續(xù)萃取法是一種新型高效提取方法。

【關(guān)鍵詞】黃芩;液-液連續(xù)萃取法

【Abstract】ObjectiveTostudyanewextractionmethodforbaicalininradixscutellariae.MethodsUltravioletspectrophotometrymethodwasusedtodeterminethecontentofbaicalin.Theabstractionrateofbaicalinbywaterextractionwascomparedtothatofliquid-liquidcontinuousextractionmethod.ResultsTherewasasignificantdifferencebetweenthetwomethods.ConclusionTheliquid-liquidcontinuousextractionmethodisanewandhighefficiencyseparationmethod.

【Keywords】RadixScutellariae;liquid-liquidcontinuousextractionmethod

黃芩(RadixScutellariaebaicalensis)為唇形科植物黃芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)的干燥根。具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎之功,用于發(fā)熱煩躁、肺熱咳嗽、瀉痢熱淋、濕熱黃疸、胎動(dòng)不安、癰腫瘡毒等癥[1]。主要有效成分是黃酮類:黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩苷、漢黃芩素等。黃芩根中含有黃芩酶,能夠促進(jìn)黃芩苷和漢黃芩苷水解,生成黃芩黃素和漢黃芩黃素,黃芩黃素分子中帶有三個(gè)鄰位的酚羥基,性質(zhì)不穩(wěn)定,容易被氧化轉(zhuǎn)為醌類衍生物,質(zhì)量隨之降低[2]。目前黃芩提取方法有水提取酸沉淀法、超聲法、超濾法、醇提取酸沉淀法、微波提取法等,而常用的為水提取酸沉淀法,但水提取存在黃芩有效成分提取不完全、提取出的雜質(zhì)較多等缺點(diǎn),因此本文采用液-液雙向萃取法提取黃芩有效成分[3],并與常用的水提法進(jìn)行比較。

1儀器與試劑

1.1儀器PHS-3C精密pH計(jì)(上海雷磁儀器廠);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A(上海亞榮生化儀器廠);SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵(河南省鞏義適英峪儀器廠);UV1700(日本島津);BS2245電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);紫外分析儀;超聲清洗儀。

1.2試藥黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)生物制品檢定所);無水乙醇、磷酸、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O、鹽酸、醋酸、95%乙醇均為分析純,黃芩藥材經(jīng)蘭州大學(xué)藥學(xué)院生藥研究所馬志剛教授鑒定為唇形科植物黃芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)的干燥根,粉碎過60目篩;磷酸鹽緩沖液自配(以磷酸溶液及磷酸氫二鈉溶液配制pH值為2、3、4、5、6、7的磷酸緩沖液)。

2方法與結(jié)果

2.1黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制[4]精密稱取干燥至恒重的黃芩苷對(duì)照品10.29mg,加70%乙醇超聲溶解,定容于50ml容量瓶中。精密量取黃芩苷對(duì)照品液(0.2058mg/ml)0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml分別置于25ml容量瓶中,加入20ml0.2mol/L鹽酸,再加70%乙醇至刻度,搖勻。于276nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,隨行試劑空白。以吸光度A為縱坐標(biāo),濃度C為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程為:Y=0.0551X-0.0021,R2=0.9993(n=6),黃芩苷在4.116~24.696mg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。見圖1。

2.2提取方法

2.2.1液-液雙向萃取[3]精密稱取黃芩藥材粉末約5g,以煮沸的pH=2的磷酸緩沖液30ml燙過,冷卻至38℃左右接入液-液雙向萃取儀中(即圖2中a瓶)。從回流管上端以漏斗加入乙酸乙酯至b瓶的1/3處,a瓶浸入38℃左右的油浴中,b瓶進(jìn)行加熱攪拌,使乙酸乙酯形成回流?；亓魈崛?h后收集乙酸乙酯液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上回收乙酸乙酯,藥材提取物備用,同法提取6組。見圖2。

2.2.2普通方法提取精密稱取黃芩藥材粉末約5g,提取3次,第一次以10倍量沸水燙過煎煮2h,第二、三次分別加8倍量水進(jìn)行煎煮,每次1h,合并煎液,濾過,濾液加2mol/L鹽酸(80℃)調(diào)節(jié)pH值至2保溫1h,靜置24h,濾取沉淀,用水洗至pH5.0,繼用70%乙醇洗滌至pH7.0,低溫干燥,即得,同法提取6組。2.3樣品測(cè)定于樣品提取物中加入少量70%乙醇微熱使溶解,轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中,超聲溶解30min,以70%乙醇定容,濾過,棄去初濾液,精密吸取5.0ml續(xù)濾液以70%乙醇定容于50ml量瓶中,精密吸取1.0ml置于25ml容量瓶中,加入20ml0.2mol/L鹽酸,再加70%乙醇至刻度,搖勻。于276nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

2.4薄層檢視黃芩苷對(duì)照品的70%乙醇溶液作為對(duì)照品溶液、黃芩液-液雙向萃取樣品提取物及普通方法樣品提取物的70%乙醇溶液作為供試品溶液,照薄層色譜法試驗(yàn),以毛細(xì)管吸取上述溶液,分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上,以醋酸為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。

2.5提取物含量比較所得含量為每克黃芩藥物中所含的黃芩苷的毫克數(shù)。Levene方差齊性檢驗(yàn)F=4.794,P=0.053>0.05,可認(rèn)為兩總體方差相等。取t=-8.148,df=10,P=0.000<0.05,可認(rèn)為普通提取與液-液雙向萃取所得m提/m藥之間差異有顯著性。見表1。表1兩種提取方法提取黃芩苷的含量對(duì)比

2.6薄層檢視結(jié)果薄層檢視顯示兩種方法提取物的供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,均顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

3討論

由上述結(jié)果可以看出筆者所采用的新提取方法液-液雙向萃取法所提取的提取物具有黃酮的特征反應(yīng),薄層檢視也說明此法可提取出黃芩苷等黃酮類化合物,經(jīng)SPSS分析可知兩種提取方法的差異有顯著性,即液-液雙向萃取法所得黃芩中總黃酮的含量遠(yuǎn)高于通常采用的水提法,可作為一種高效的黃芩有效成分提取的新方法。

【參考文獻(xiàn)】

1陳柏君.高山林.余國(guó)奠.黃芩及其同屬藥用植物研究進(jìn)展.中國(guó)野生植物資源,2003,18(3):20-24.

2孫秀英.中藥黃芩的研究概況.中醫(yī)藥信息,1993,5:32-34.

3賀殿,吳勇杰,賈忠,等.液-液連續(xù)萃取方法及裝置:中國(guó),200410073368.7[P],2005-08-24.

4黃啟華.紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液中黃芩苷的含量.中成藥,2000,22(12):836.