導(dǎo)語(yǔ)：新雪片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的研究與建立新雪片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜法（TLC）對(duì)新雪片中穿心蓮、梔子、冰片進(jìn)行定性鑒別;采用反相高效相色譜法（RPHPLC）測(cè)定新雪片中梔子苷的含量。結(jié)果TLC專屬性強(qiáng)。HPLC準(zhǔn)確可靠。梔子苷在0.256～1.280μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r=0.9999），平均回收率為97.12%，RSD=1.43%（n=6）。結(jié)論該方法可靠、準(zhǔn)確，能有效地控制制劑質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】新雪片；梔子苷；質(zhì)量控制；薄層色譜

QualityStandardforXinxueTablets

Abstract:ObjectiveToeslablishandstudythequalitystandardforXinxuetablets.MethodsConnonAndrographisHerb,CapeJasmineJasmineFruit,BorneolwereidentifiedbyTLC,andGeniposedecontentinTabletswasdeterminedbyRP-HPLC.ResultsTLCmethodwasspecific.HPLCmethodwasaccurateandreliable.TheGeniposedeshowedagoodlinearrelationshipintherangeof0.256～1.280μg(r=0.9999)andaveragerecoverywas97.12%,RSD=1.43%(n=6).ConclusionThismethodisreliable,accurateandcanbeusedtocontrolthequalityofthepreparationeffectively.

Keywords:XinxueTablets;Geniposede;Qualitycontrol;TLC

新雪片為《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)（WS3B281397）·中藥成方制劑》第14冊(cè)所收載，后經(jīng)國(guó)家藥典委員會(huì)修訂（藥品標(biāo)準(zhǔn)頒布件零069），為國(guó)家非典指揮部指定的非典用藥新雪顆粒的不同新劑型,由磁石、石膏、滑石、寒水石、硝石、芒硝、梔子、竹葉卷心、廣升麻、穿心蓮、珍珠層粉、沉香、冰片、人工牛黃14味組成，具有清熱解毒功能，用于各種熱性病之發(fā)熱，如扁桃腺炎、上呼吸道炎、咽炎、氣管炎、感冒所引起的高熱，以及溫?zé)岵≈疅岵唤狻Ｔ瓨?biāo)準(zhǔn)中［鑒別］項(xiàng)只有3個(gè)理化鑒別，1個(gè)薄層色譜鑒別（膽酸、豬去氧膽酸），較簡(jiǎn)單，不足以控制藥品質(zhì)量。為此本文對(duì)新雪片的鑒別、含量測(cè)定進(jìn)行研究，制訂能控制藥品質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與儀器

LabALLiance高效液相色譜儀，Model500檢測(cè)器；UP250H超聲清洗器（功率300W，頻率40kHz，熊貓集團(tuán)南京電子計(jì)量有限公司生產(chǎn)）；硅膠G（青島海洋化工廠）；層析缸（20cm×10cm)；層析柱（內(nèi)徑10mm)；ZF2型三用紫外分析儀（上海市安亭電子儀器廠）；梔子苷、穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯、冰片對(duì)照品（中國(guó)檢定所提供），樣品及陰性樣品（由廣西藥物研究自制）；甲醇（色譜純）；水（重蒸水）；其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1薄層色譜鑒別

2.1.1梔子［1］取本品適量，研細(xì)，取約10g。加甲醇50ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?0ml使溶解，轉(zhuǎn)移至已處理好的柱子（活性炭0.5g，100～200目中性氧化鋁2g，二者混合均勻后，濕法裝柱，內(nèi)徑為1.5cm)上，用甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，濾過(guò)，濾液用正丁醇振搖提取2次，40ml/次，合并正丁醇液。用濃氨試液洗滌2次，10ml/次。棄去洗液，再用水洗滌2次，20ml/次，棄去水洗液，取正丁醇層液，蒸干，加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取梔子苷對(duì)照品，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再按處方比例，取缺梔子的其它藥材按新雪片［制法］制備，再按供試品溶液的制備方法制備，所得溶液作為陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法［1］實(shí)驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-濃氨水（10∶4∶0.3）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.1.2穿心蓮［1］取本品適量，研細(xì)，取約5g，加乙醇30ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加甲醇制成每毫升各含1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。再按處方比例，取缺穿心蓮的其它藥材按新雪片［制法］制備，再按供試品溶液的制備方法制備，所得溶液作為陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法［1］實(shí)驗(yàn)，吸取供試品溶液與陰性對(duì)照溶液各10μl，對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇（4∶3∶0.5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置中，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖2。

2.1.3冰片取本品適量，研細(xì)，取約5g，加乙醚30ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再按處方比例，取缺冰片的其它藥材按新雪片［制法］制備，再按供試品溶液的制備方法制備，所得溶液作為陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法［1］實(shí)驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷醋酸乙酯（8.5：1.5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖3。

2.2含量測(cè)定

2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（20∶80）作為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm。柱溫（23±1℃），理論板數(shù)按梔子苷峰計(jì)算應(yīng)不少于5000。

圖1梔子TLC圖譜（略）

圖2穿心蓮TLC圖譜（略）

圖3冰片TLC圖譜（略）

2.2.2線性關(guān)系考察精密稱取梔子苷對(duì)照品12.8mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液（0.128mg·ml-1）。精密吸取對(duì)照品貯備液（0.128mg·ml-1）1.0，2.0，2.5，3.0，4.0，5.0ml溶液，分別置10ml量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取各溶液20μl，按上述色譜條件測(cè)定峰面積值。以峰面積值為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并求得回歸方程為Y=7.27E5X-1.13E3,r=0.9999?？梢?jiàn)，梔子苷在0.256～1.28μg（濃度1.28～64.0μg·ml-1）間呈良好線性關(guān)系。

2.3精密度實(shí)驗(yàn)取樣品，按正文含量測(cè)定項(xiàng)下方法制成供試品溶液，在選定的色譜條件下，依法操作測(cè)定，重復(fù)進(jìn)樣6次，峰面積平均值為355159，RSD=0.59%。

2.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取樣品，按正文含量測(cè)定項(xiàng)下方法制成供試品溶液，分別在放置0，2，4，6，8，12，24h后，依法測(cè)定，結(jié)果峰面積平均值為375006，RSD=0.29%。表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性好。

2.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一樣品（批號(hào)060201）6份，精密稱定：0.242，0.2157，0.2383，0.2293，0.2056，0.2128g。按供試品溶液的制備方法制備6份供試品溶液，依法測(cè)定，結(jié)果含量平均值為2.10mg·g-1，RSD=0.85%。表明方法重復(fù)性較好。

2.6加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已知含量的樣品（批號(hào)060201，含量為2.1mg/g）6份，精密稱定，置錐形瓶中，分別精密加入梔子苷對(duì)照品（0.128mg/ml）2ml，按供試品溶液的制備方法制備，依法測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。表明本方法回收率較好。

表1梔子苷回收率實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（略）

2.7供試品溶液的制備及測(cè)定取本品，研細(xì)，取約0.2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入50%甲醇20ml，稱定重量，超聲處理40min，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，取續(xù)濾液，再用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，作為供試品溶液。另精密量取梔子苷對(duì)照品貯備液2ml，置10ml量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液（每毫升含25.6μg）。再按處方比例，取除梔子外的其它藥材，按［制法］制備，然后按制供試品溶液方法制備，作為陰性對(duì)照溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，按上述的色譜條件注入液相色譜儀，照高效液相色譜法［1］測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表2及圖4～6。

3討論

新雪片是由磁石、石膏、寒水石、滑石、穿心蓮、竹葉卷心、梔子、沉香、廣升麻、芒硝、硝石、珍珠層粉、人工牛黃、冰片等14味藥材組成，具有清熱解毒功能，用于各種熱性病之發(fā)熱，如扁桃腺炎、上呼吸道炎、咽炎、氣管炎、感冒所引起的高熱以及溫?zé)岵≈疅岵唤狻７街惺?、寒水石、滑石為處方君藥，都是礦物藥材，難以制定薄層色譜和含量測(cè)定方法。穿心蓮、梔子、竹葉卷心為方中臣藥，穿心蓮中的穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯在水中溶解度很低，而在穿心蓮中含量亦較低，加上新雪片的制備方法為水提取，穿心蓮藥材絕大部分為水煮，只有極少部分為粉碎成粉末后壓片而成，這就使得穿心蓮內(nèi)酯的含量在新雪片中的含量更低，故測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯意義不大，竹葉卷心其成分未詳，梔子有明顯的抗菌消炎作用，其主要有效成分為梔子苷，且為全部水提取，故選擇梔子苷作為新雪片定性和定量的指標(biāo)成分。

表26批新雪片樣品測(cè)定數(shù)據(jù)（略）

圖4梔子苷對(duì)照品HPLC圖（略）

圖5陰性對(duì)照品HPLC圖（略）

圖6供試品HPLC圖（略）

通過(guò)薄層色譜實(shí)驗(yàn)，確定了新雪片中梔子、穿心蓮、冰片的薄層色譜鑒別方法，陰性對(duì)照表明其他成分對(duì)本法無(wú)干擾，說(shuō)明該方法專屬性較強(qiáng)，結(jié)果可靠。

本品參照《中國(guó)藥典》2005年版Ⅰ部“梔子”及其制劑中梔子含量測(cè)定方法［1］及有關(guān)文獻(xiàn)，并結(jié)合本品的性質(zhì)特征，進(jìn)行優(yōu)化含量測(cè)定條件，建立本品梔子苷的含量的測(cè)定方法，并就該測(cè)定方法進(jìn)行了方法學(xué)的研究。研究結(jié)果表明，本方法簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，可作為控制新雪片的梔子苷含量方法。

【參考文獻(xiàn)】

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：173，189，附錄VIB，附錄VIQ.