導(dǎo)語：三七超微粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的建立三七超微粉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜法鑒別三七；使用激光粒度檢測儀對粒徑進(jìn)行檢測；HPLC法測定三七超微粉中三七皂苷R1，人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1含量。結(jié)果薄層圖譜斑點(diǎn)清晰，可鑒別出與三七的對應(yīng)斑點(diǎn)；三七超微粉的中位徑在15μm以下；三七皂苷R1在0.535～3.210μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=1.000),平均回收率103.08%,RSD=2.80%；人參皂苷Rg1在2.225～13.350μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=1.000),平均回收率100.33%,RSD=2.29%；人參皂苷Rb1在2.205～13.230μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=1.000),平均回收率101.00%,RSD=1.43%。結(jié)論所建立的方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于三七超微粉的質(zhì)量控制

【關(guān)鍵詞】三七超微粉粒徑高效液相薄層色譜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

Abstract:ObjectiveTodevelopaqualitystandardforsupermicropowderofnotoginseng.MethodsQualitativeanalysisofmicropowderofnotoginsengwascarriedoutbyTLC.Theparticlediameterwasdetectedwithlaserscatteringparticlesizedistributionanaslyzer.AnRP-HPLCmethodwasusedforthecontentdeterminationoftheNotoginsensodeR1,ginsenosideRg1,ginsenosideRb1.ResultsThechromatographicspotsofmicropowderofnotoginsengwereidentifiedwithouttheinterferenceofnegativecontrol.Micropowderofparticleaveragediameterwasbelow15μm.NotoginsensodeR1hadagoodlinearityintherangeof0.535～3.210μg(r=1.000),andtheaveragerecoverywas103.08%withRSDof2.80%.GinsenosideRg1hadagoodlinearityintherangeof2.225～13.350μg(r=1.000),andtheaveragerecoverywas100.33%withRSDof2.29%.GinsenosideRb1hadagoodlinearityintherangeof2.205～13.230μg(r=1.000),andtheaveragerecoverywas101.00%withRSDof1.43%.ConclusionThismethodissimple,accurateandrepeatable.ItcanbeusedtodetermineginsenosideRg1，ginsenosideRb1andnotoginsensodeR1inmicropowderofNotoginseng.

Keywords:MicropowderofNotoginseng;Particlediameter;HPLC;TLC;Qualitystandard

三七(RadixNotoginseng)為常見的貴重藥材，目前市場上的三七超微粉已經(jīng)較為普遍，但對三七超微粉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的文獻(xiàn)報(bào)道較少，本課題采用薄層定性鑒別，使用激光粒度檢測儀對三七超微粉的粒徑進(jìn)行檢測，并在參考文獻(xiàn)［1］的基礎(chǔ)上，同時(shí)測定三七超微粉產(chǎn)品中三七皂苷R1，人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量。方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于三七超微粉的質(zhì)量控制。

1儀器與試藥

HP1100高效液相色譜儀，二極管陣列檢測器，四元泵，SartoriusBP211D電子分析天平，乙腈、甲醇（HPLC級），水為重蒸餾水，人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1，人參皂苷Re，三七皂苷R1對照品及三七對照藥材(均由中國藥品生物制品檢定所提供)，三七超微粉樣品為本實(shí)驗(yàn)室制備。

2方法與結(jié)果

2.1薄層鑒別取本品0.8g，加水5滴，攪勻，加以水飽和正丁醇5ml，密塞，振搖10min，放置2h，離心，取上清液，加3倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置使分成層（必要時(shí)離心），取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)?ml甲醇使溶解，作為供試品。取人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1，人參皂苷Re及三七皂苷R1加甲醇制成1ml各含0.5mg的混和溶液，作為對照品溶液。另取三七對照藥材0.8g，照供試品溶液制備方法，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法［《中國藥典》（2005版）Ⅰ部附錄ⅥB］實(shí)驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板上，以三氯甲烷－甲醇－水（13∶7∶2）10℃下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，檢視。供試品色譜中，在對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。如圖1。

1.三七混和對照品2.三七對照藥材3，4，5.三七超微粉樣品

圖1三七超微粉薄層鑒別圖（略）

2.2三七超微粉粒徑檢測取3批三七超微粉樣品，每批取0.07g，加1ml乙醇潤濕后，加50ml水，超聲1min后立即使用激光粒度檢測儀進(jìn)行檢測。結(jié)果表明所取樣品的中位徑均在15μm以內(nèi)。結(jié)果見表1和圖2。

表1三七超微粉粒徑檢測結(jié)果（略）

圖2三七超微粉粒徑檢測

2.3三七超微粉含量測定

2.3.1色譜條件分析依利特ODS柱（150mm×4.6mm,5μm）；檢測波長203nm；柱溫20℃；流速為1ml/min,流動(dòng)相A(乙腈)和B（水）進(jìn)行梯度洗脫。結(jié)果見表2。

表2梯度洗脫程序表（略）

2.3.2標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1和三七皂苷R1適量用甲醇溶解制備成含三七皂苷R1對照品0.107mg/ml，人參皂苷Rg1對照品0.455mg/ml和人參皂苷Rb1對照品0.441mg/ml的混和對照品溶液，用0.45μm微孔濾膜過濾后備用。

2.3.3供試品溶液的制備精密稱取三七超微粉約1g，精密加入甲醇50ml，稱定重量，放置過夜，置80℃水浴上回流煮沸2h，放冷，用甲醇補(bǔ)足重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用0.45μm微孔濾膜過濾即得。

2.3.4測定法分別精密吸取對照品和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定峰面積積分值。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

2.3.5色譜分離結(jié)果在上述色譜條件下，人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1和三七皂苷R1與共存的其他化學(xué)成分達(dá)到良好的分離。結(jié)果見圖3。

1.三七皂苷R12.人參皂苷Rg13.人參皂苷Rb1

a三七對照品b三七超微粉樣品

圖3三七超微粉高效液相色譜圖譜（略）

2.3.6標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備取標(biāo)準(zhǔn)品混和溶液，分別進(jìn)樣5，7，10，15，20，25，30μl，以峰面積為縱坐標(biāo)Y，進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)X進(jìn)行線性回歸。結(jié)果見表3。

2.3.7精密度實(shí)驗(yàn)取同一份供試品溶液,按上述色譜條件,連續(xù)進(jìn)樣6次,測定峰面積積分值,三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1的RSD分別為1.45%，1.81%，2.02%。

2.3.8穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一份樣品溶液,放置0,1,2,4,6,8h,按上述色譜條件,分別測定峰面積積分值,三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1的RSD分別為1.68%，1.81%，2.43%。

2.3.9重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精密稱取同一批的三七超微粉樣品6份,按上述方法試驗(yàn),分別測定樣品中三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1的含量，結(jié)果三七皂苷R1的平均含量為0.82%，RSD為1.84%；人參皂苷Rb1的平均含量為3.36%，RSD為2.38%；人參皂苷Rg1的平均含量為3.01%，RSD為2.54%。

2.3.10加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已知含量的同一批號樣品,研細(xì),精密稱取6份,每份約1g(相當(dāng)于含三七皂苷R1約0.0081g，人參皂苷Rg1約0.0308g和人參皂苷Rb10.0307g)，按上述方法實(shí)驗(yàn),分別測定樣品中三七皂苷R1，人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量,結(jié)果平均回收率分別為103.08%,100.33%，101.00%，RSD分別為2.80%，2.29%，1.43%(n=6)。結(jié)果見表4。

表3三七超微粉標(biāo)準(zhǔn)曲線（略）

表4三七超微粉加樣回收率（略）

2.3.11樣品含量測定按上述色譜條件和測定方法,對自制的三七超微粉樣品進(jìn)行含量測定,測定結(jié)果。結(jié)果見表5。

表5樣品含量測定結(jié)果（略）

3結(jié)論

超微粉碎技術(shù)是為適應(yīng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的需要而發(fā)展起來的一種新技術(shù)，三七經(jīng)超微粉碎后，其粉體性質(zhì)發(fā)生了某些變化，這些變化可能會(huì)對三七超微粉的質(zhì)量有影響，為此，我們對三七超微粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究。

采用薄層鑒別、粒徑檢測和含量測定相結(jié)合的方法對三七超微粉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，結(jié)果三七超微粉的薄層鑒別清晰，與對照品在同位置顯相相同，粒徑檢測可見其中位徑在10.74μm，含量測定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

對三七超微粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，也為控制市面上各種三七超微粉制劑建立了可控的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有利于規(guī)范市場。

4討論

在薄層鑒別時(shí)，考察了流動(dòng)相三氯甲烷醋酸乙酯甲醇水（15∶40∶22∶10），發(fā)現(xiàn)在展開后斑點(diǎn)較散，不圓整，使用三氯甲烷甲醇水（13∶7∶2）后，斑點(diǎn)圓整，分離度好。

本研究在粒徑控制上，不僅使用了激光粒度檢測儀進(jìn)行測定，還考查了使用電鏡觀察超微粉粒徑，觀察發(fā)現(xiàn)超微粉粒徑均較小，符合中位徑在15μm以下的要求，由于電鏡在粒徑大小的控制方法上有一定難度，故只作為參考，不納入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果見圖4。

圖4三七超微粉電鏡檢測結(jié)果（略）

本研究以三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1為定量指標(biāo)，在《中國藥典》的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，出峰時(shí)間在35min能較好地分離樣品中待測成分，此方法更加簡便、可行。

考察DiamonsilTMC18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm）和HypersilODSC18(150mm×4.6mm,5μm)不同色譜柱對樣品中皂苷分離的影響，結(jié)果證明兩種不同型號的色譜柱均有較好的分離效果。

【參考文獻(xiàn)】

［1］國家藥典委員會(huì).中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：10