血細胞范文

時間:2023-03-27 04:23:44

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血細胞

篇1

1臨床資料

1.1正確的取材部位 骨髓穿刺理想部位是髂后上棘和髂前上棘處進行,因為其髓腔比較大髓液較豐富,比較容易獲得符合要求的骨髓標本,且此處易定位和操作。骨髓造血呈所謂向心學說分布,造血組織往往分布不均,且某些病變只局限于局部,所以對一些疑難病例最好是多部位穿刺或取骨髓活檢。

1.2合適的取材量及滿意的涂片制作 骨髓取材嚴格來講是難以有滿意的結(jié)果,因為灶性造血影響骨髓稀釋[2]。根據(jù)報導記載,抽0.1~0.2 ml的骨髓,仍有可能混入50%的外周血。根據(jù)筆者的經(jīng)驗抽取0.5 ml左右是最為理想的,抽取骨髓后,將髓液置于玻片一端,然后在其下墊兩張玻片,使髓液自然流下,再用推片取黏稠部分,體積大、密度大的有核細胞及帶骨髓小粒的部分涂片,涂片要求厚薄均勻,頭體尾明顯,手持玻片迅速搖動使其風干。這就要求操作者動作熟練,經(jīng)驗豐富。傳統(tǒng)的方法對操作者要求比較高,如果動作慢,易造成骨髓凝固,從而使細胞分布不均而影響到鏡檢結(jié)果。

2 骨髓涂片由于要用油鏡仔細觀察細胞的細微結(jié)構(gòu),所以對染色質(zhì)量要求很高

2.1載玻片的清潔 新購置的載玻片用1%的稀鹽酸浸泡24 h,除去游離堿質(zhì),再用流水沖洗干凈,必要時用95%乙醇浸泡1 h,然后烘干備用。

2.2染液及染色方法的選擇 在保證標本及染液質(zhì)量前提下,染色技術(shù)直接影響骨髓片的質(zhì)量。要根據(jù)染色時室溫高低,涂片厚薄,有核細胞數(shù)量多少等不同來確定染色時間,可將帶染液的玻片置于顯微鏡下觀察,當有核細胞著色良好再染上1~2 min為好,這就要求操作者具體分析,靈活掌握。

2.3骨髓涂片的觀察 首先用低倍鏡觀察整張涂片。觀察涂片染色是否合格,了解骨髓有核細胞的增生程度,計數(shù)全片巨核細胞數(shù),尤其是注意觀察片尾及周邊部位有無異常細胞。用油鏡觀察細胞形態(tài)、比例、分類計數(shù)等。選擇涂片上有核細胞分布均勻、形態(tài)舒展、清晰可辨的部位進行觀察和分類。至少分類計數(shù)200個有核細胞,必要時分類500個。當辯認某一類不典型細胞時,單純靠形態(tài)學是有一定欠缺的,應配合相應的組織化學染色來確定,特別是在區(qū)分一些急性白血病時,組織化學染色起了重要的鑒別作用。

3幾種主要血細胞正常形態(tài)

3.1粒細胞系統(tǒng)形態(tài)

3.1.1原始粒細胞 胞體圓形或類橢圓形。胞核較大,約占細胞的2/3以上,核染色質(zhì)呈細粒狀,排列均勻,無濃集,核膜較模糊。核仁2~5個,較小,清楚。胞質(zhì)量少,呈透明天藍色,繞于核周,無顆粒。

3.1.2早幼粒細胞 胞體圓或橢圓形。胞核大,核染色質(zhì)較原粒粗糙,核仁可見或消失。胞質(zhì)量較多,呈淡藍、藍或深藍色,漿內(nèi)含紫紅色非特異性的天青胺藍顆粒。

3.1.3中幼粒細胞 ①中性中幼粒細胞:胞體圓形。胞核橢圓形或一側(cè)開始扁平,染色質(zhì)聚集成索塊狀,核仁消失。胞質(zhì)量多,內(nèi)含中等量、大小較一致的特異的中性顆粒。②嗜酸性中幼粒細胞:胞核與中性中幼粒細胞相似。胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大、均勻、排列緊密、桔紅色的特異的嗜酸性顆粒。③嗜堿性中幼粒細胞:胞核橢圓形,輪廓不清楚,核染色質(zhì)較模糊。胞質(zhì)內(nèi)及核上含有數(shù)量不多、排列零亂、大小不等的紫黑色特異的嗜堿性顆粒。

3.1.4晚幼粒細胞 ①中性晚幼粒細胞:呈圓形,胞核明顯凹陷,但其凹陷程度一般不超過核假設直徑的一半。核染色質(zhì)粗糙,排列更緊密。胞質(zhì)量多,染淺紅色,充滿中性顆粒。②嗜酸性晚幼粒細胞:胞核在中央或偏一側(cè),呈腎形或橢圓形。胞質(zhì)充滿著嗜酸性顆粒。③嗜堿性晚幼粒細胞:胞核固縮呈腎形,輪廓模糊。胞質(zhì)內(nèi)及核上含有少量、分布不勻的嗜堿性顆粒。

3.1.5桿狀核粒細胞 ①中性桿狀核粒細胞:胞體圓形。胞核凹陷程度超過核假設直徑的一半,形態(tài)彎曲成帶狀,核染色質(zhì)粗糙呈塊狀,核兩端鈍圓染深紫紅色。胞質(zhì)充滿中性顆粒。②嗜酸性桿狀核粒細胞:胞體圓形。胞核與中性桿狀粒細胞相似。胞質(zhì)充滿著粗大的桔紅色嗜酸性顆粒。③嗜堿性桿狀核粒細胞:胞核呈模糊桿狀。胞質(zhì)內(nèi)及胞核上含有紫黑色、大小不勻、數(shù)量較少的嗜堿性顆粒。

3.1.6分葉核粒細胞 ①中性分葉核粒細胞:胞體圓形。胞核分葉狀,常分2~5葉,核染色質(zhì)濃集或呈較多小塊。胞質(zhì)豐富,漿內(nèi)分布著細小紫紅色中性顆粒。②嗜酸性分葉核粒細胞:胞核多分為兩葉。胞質(zhì)充滿著粗大呈桔紅色嗜酸性顆粒。③嗜堿性分葉核粒細胞:胞核可分3~4葉或分葉不明顯。胞質(zhì)嗜堿性顆粒呈紫黑色,大小不一,分布不均,常掩蓋在核上。

3.2紅細胞系統(tǒng)形態(tài)

3.2.1原始紅細胞 圓形或橢圓形,邊緣常有鈍角狀或瘤狀突起。胞核圓形、居中或稍偏于一旁,約占細胞直徑的4/5,核染色質(zhì)呈顆粒狀,比原始粒細胞粗而密,核仁1~2個,胞質(zhì)量少,深藍色,不透明,在核周圍常形成淡染區(qū)。

3.2.2早幼紅細胞 圓形或橢圓形。胞核圓或橢圓形,占細胞2/3以上,核染色質(zhì)可濃集成粗密的小塊,核仁模糊或消失,胞質(zhì)量多,染不透明藍或深藍色,仍可見瘤狀突起及核周淡染區(qū)。

3.2.3中幼紅細胞 圓形。胞核圓形或橢圓形,約占細胞的1/2,核染色質(zhì)凝聚成索條狀或塊狀,其中有明顯空隙,核仁消失。胞質(zhì)內(nèi)血紅蛋白形成逐漸增多,可呈嗜多色性。

3.2.4晚幼紅細胞 圓形,胞核圓形,居中或偏位,占細胞1/2以下,核染色質(zhì)聚集成數(shù)個大塊或凝縮成紫黑色團塊狀,胞質(zhì)量較多,淺灰或淺紅色。

3.2.5網(wǎng)織紅細胞 為晚幼紅細胞剛脫核的分化階段,胞質(zhì)內(nèi)仍含嗜堿物質(zhì),屬未成熟紅細胞。

3.2.6紅細胞 形態(tài)呈雙面微凹之圓盤狀,中央較薄,邊緣較厚,染色后呈淡紅略帶紫色,中央部分淡染,無核。

3.3血小板 胞體很小,呈星形、橢圓形、逗點狀或不規(guī)則形。胞質(zhì)染淺藍色或淡紅色,中心部位有細小紫紅色顆粒,但無細胞核。

參考文獻:

篇2

【關(guān)鍵詞】

血細胞分析;復檢規(guī)則;探討

作者單位:030012山西省人民醫(yī)院檢驗科

近年來,隨著血細胞分析技術(shù)的完善和設備的更新,全血細胞計數(shù)(CBC)和白細胞分類計數(shù)(DC)檢測結(jié)果的精密度和準確度明顯提高,各級醫(yī)院血細胞分析儀已基本普及。然而,血細胞自動分析領(lǐng)域存在諸多問題,如果實驗室只根據(jù)血細胞分析儀的分類結(jié)果,而不作涂片分類直接發(fā)報告,則易造成漏診和誤診,全血細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)的復檢(review)問題近年來已受到相關(guān)學術(shù)團體與專家的高度重視與關(guān)注1]。就我院制定的血細胞分析復檢規(guī)則進行匯報如下:

1 材料與方法

1.1 標本 選取本院2011年1~6月門診和住院患者乙二胺四乙酸二鉀抗凝全血標本8820份,按臨床標本的檢測流程和方法在采血后4 h內(nèi)進行全血細胞分析檢測。

1.2 儀器與試劑 日本sysmex公司生產(chǎn)的XE2100全自動血細胞分析儀及原裝配套試劑、校準物及質(zhì)控物。Olympus顯微鏡購自日本奧林巴斯光學工業(yè)株式會社。儀器的校準:sysmex公司工程師利用SCS1000全血校準物對sysmex XE2100全血細胞分析儀進行校準。采用配套的兩水平echeck全血質(zhì)控物進行室內(nèi)質(zhì)量控制,保證結(jié)果的精密度和準確性。

1.3 根據(jù)本院情況制定的復檢標準 ①無白細胞自動分類結(jié)果。②白細胞總數(shù)低于2.5×109/L、高于25×109/L。③白細胞自動分類結(jié)果某種細胞百分比結(jié)果嚴重異常:中性分葉粒細胞大于或等于0.85、淋巴細胞≥0.60、單核細胞≥0.15、嗜酸性粒細胞≥0.10、嗜堿性粒細胞≥0.03。④儀器的其他提示;E:血紅蛋白

1.4 檢測方法 所有標本按臨床標本的檢測流程和方法進行全血細胞分析檢測),并全部推片染色,由本室工作經(jīng)驗超過10年并有中級以上技術(shù)職稱的技術(shù)人員按操作。血細胞顯微鏡檢查異常判斷標準:①細胞:形態(tài)異常(分葉過多、中毒顆粒、空泡變性等異常結(jié)構(gòu)、異型淋巴細胞>2%、桿狀粒細胞>5%、存在不成熟幼稚細胞。②紅細胞:存在有核紅細胞、大小不一、染色形態(tài)異常等。③血小板:血小板凝聚、嚴重體積異常等。

1.5 評估指標2] 包括真假陽性率、真假陰性率、靈敏性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、總有效率、檢驗效能和復檢率。靈敏性(%)=真陽性數(shù)/(真陽性數(shù)+假陰性數(shù))×100%;特異性(%)=真陰性數(shù)/(真陽性數(shù)+假陰性數(shù))×100%;陽性預測值(%)=真陽性數(shù)/(真陽性數(shù)+假陽性數(shù))×100%;陰性預測值(%)=真陰性數(shù)/(真陰性數(shù)+假陰性數(shù))×100%;總有效率=真陽性率+真陰性率;檢驗效能(%)=(真陽性數(shù)一假陰性數(shù))/復檢數(shù)×100%;復檢率=真陽性率+假陽性率。

2 結(jié)果

根據(jù)復檢規(guī)則分析8820份標本的儀器檢測數(shù)據(jù),并統(tǒng)計計算真假陽性例、真假陰性、并計算真假陽性及真假陰性率,具體見表1.

表1

標本復檢規(guī)則評估指標(例,%)

評估指標份率(%)

真陽性114913.0

假陽性239727.2

真陰性487655.3

假陰性3984.5

依據(jù)以上數(shù)據(jù),并根據(jù)評估指標計算,靈敏性為74.2%,特異性67.0%,陽性預測值32.4%,陰性預測值92.5%,總有效率68.3%,檢驗效能21.2%,復檢率40.2%。

3 討論

傳統(tǒng)的血細胞分析是采用手工方法。20世紀50年代,wallace Coulter利用電阻抗原理設計制造出第一臺血細胞計數(shù)儀,使這項常規(guī)工作進入自動化。70年代某些血細胞計數(shù)儀采用細胞化學染色技術(shù),以著色的和未著色的細胞對光的吸收和散射程度不同來鑒別外周血成熟細胞,從而實現(xiàn)了自動WBC分類計數(shù)。20世紀80年代以來,血細胞分析技術(shù)進展迅速,“血細胞計數(shù)儀”也在不經(jīng)意間被稱為“血細胞分析儀”3]。

由于人力成本的增加,加之缺乏訓練有素和有經(jīng)驗的技術(shù)人員,使臨床實驗室在不影響質(zhì)量的前提條件下,有減少手工操作需求和趨勢。全血細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)自動分析系統(tǒng)在正常情況下計數(shù)WBC、RBC、PLT和對特征明顯的成熟wBc分類計數(shù)結(jié)果明顯優(yōu)于人工檢查結(jié)果;血細胞自動分析得到廣泛應用。

各醫(yī)院檢驗科過分依賴于自動化血細胞分析結(jié)果,對全血細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)異常結(jié)果基本不進行或很少進行人工顯微鏡涂片鏡檢(microscopic smear review)或人工分類計數(shù)(manual differential count) 涂片復審,實際鏡檢率在0~15%,大部分醫(yī)院鏡檢率

通過我們制定的血細胞分析復檢規(guī)則,假陰性率為4.5%,低于國際血液學復檢專家組提出的最大可接受假陰性率,該復檢規(guī)則的復檢率為40.2%,嚴格執(zhí)行工作量較大。

由于觀察者的技術(shù)水平的不同和涂片中細胞分布的差異,故要充分認識顯微鏡檢查的局限性。承擔血涂片復審者必須是血液細胞形態(tài)學專業(yè)技術(shù)人員;長期從事基礎檢驗專業(yè)者或經(jīng)過血液學實驗室訓練后的年輕技師僅可承擔血涂片“篩查”工作;而未從事基礎檢驗和血液學檢驗者,或未經(jīng)血液學實驗訓練的基礎檢驗年輕技師,不能從事本項工作。

血細胞分析復檢規(guī)則制定時應注意,儀器型號不同、報警信息指標的臨界值設置不同則靈敏性不同,因此不同實驗室在應用相同的規(guī)則時,陽性預測值、陰性預測值和檢驗效能會出現(xiàn)差異。各實驗室應該根據(jù)醫(yī)院患者的來源、儀器的性能對規(guī)則進行一定的調(diào)整,以滿足臨床需要5]。

參 考 文 獻

[1] 孫芾,王厚芳,于傻峰,等.血細胞顯微鏡復檢標準的制定及臨床應用.中華檢驗醫(yī)學雜志,2005,28(3):155157.

[2] 中華人民共和國衛(wèi)生部.中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準一白細胞分類計數(shù)參考方法.人民衛(wèi)生出版杜,2005,12(01).

[3] 曾婷婷,左成華,郭曼英,等.光學法血小板計數(shù)作為低血小板標本復檢方法的可行性研究.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2007,22(6):3941.

篇3

【關(guān)鍵詞】 全血細胞減少癥;病因分析

全血細胞減少(PCP)是指外周血中白細胞、紅細胞及血小板均減少,引起全血細胞減少的疾病很多,除血液系統(tǒng)疾病外,非造血系統(tǒng)疾病也可引起。本文對152例全血細胞減少癥的病因進行了分析,以便提高對PCP的認識,提高診斷的準確率,現(xiàn)報道如下。

臨床資料

1.一般資料 152例為我院2000年10月~2010年2月門診和住院治療的患者,其中,男67例,女85例,年齡14~85歲,平均46歲。均連續(xù)進行至少2次血常規(guī)檢查,其中WBC

2.方法 所有病例均進行骨髓細胞形態(tài)學檢查,部分病例做骨髓活檢及其他相關(guān)檢查。統(tǒng)計引起全血細胞減少癥病因中造血系統(tǒng)疾病及非造血系統(tǒng)疾病所占比例。結(jié) 果 1.造血系統(tǒng)疾病123例(占80.9%):①再生障礙性貧血(AA)47例(占30.9%),其中,慢性再生障礙性貧血42例,急性再生障礙性貧血5例;②急性白血病(AL)35例(占23.0%),其中,AMLM3型21例,AMLM2型8例,AMLM5型4例,ALL 2例;③巨幼細胞貧血(MA)19例(占12.5%);④骨髓增生異常綜合征(MDS)14例(占9.2%),其中,難治性貧血(RA)8例,難治性貧血伴原始細胞增多(RAEB)6例;⑤原發(fā)性骨髓纖維化(MF)3例(占2.0%);⑥惡性組織病2例(占1.3%);⑦自身免疫性溶血(AIHA)2例(占1.3%);⑧Evans綜合征1例(占0.7%)。

2.非造血系統(tǒng)疾病29例(占19.1%):①慢性肝病脾功能亢進10例(占6.6%);②系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)5例(占3.3%);③敗血癥4例(占2.6%);④結(jié)核2例(占1.3%);⑤骨髓轉(zhuǎn)移癌3例(占2.0%);⑥一過性造血功能停滯2例(占1.3%);⑦原因不明患者3例(占2.0%),其骨髓增生活躍,溶貧相關(guān)檢查呈陰性,予激素、靜脈丙種球蛋白治療有效。 討 論 全血細胞減少癥病因復雜,不僅常見于血液系統(tǒng)疾病,而且亦可見于非血液系統(tǒng)疾病。據(jù)統(tǒng)計,血液系統(tǒng)疾病約占全血細胞減少病因的80%,非血液系統(tǒng)疾病約占20%,其中再生障礙性貧血居首位[1]。文獻報道最常見的排列順序為再生障礙性貧血、急性白血病、脾功能亢進、自身免疫性疾病等。但近年來文獻報道排序有所變化,趙曉紅[2]回顧分析排在首位為巨幼細胞性貧血。本組資料顯示,造血系統(tǒng)疾病是全血細胞減少的常見病因,占80.9%(123例),非造血系統(tǒng)疾病亦不少見,占19.1%(29例),本文152例病因統(tǒng)計達15種,AA 仍是引起全血細胞減少的最常見原因(占30.9%)。

本組資料顯示在造血系統(tǒng)疾病中,引起全血細胞減少的最常見原因是AA,其次是急性白血病、巨幼細胞貧血(MA)、骨髓增生異常綜合征(MDS),尚見于溶血性貧血、惡性組織細胞病、骨髓纖維化等。引起AA的原因為各種因素導致骨髓造血功能衰竭,眾多研究表明AA很可能是一種新認識的自身免疫性疾病[3],目前認為骨髓造血功能衰竭與異常免疫介導損傷造血細胞抑制造血有關(guān),AA在診斷上不難,根據(jù)臨床表現(xiàn)、骨髓穿刺、骨髓活檢大多患者可以確診。部分急性白血病患者外周血僅表現(xiàn)為三系輕度減少,如不行外周血涂片及骨穿檢查極易漏診,在全血細胞減少的急性白血病中以急性早幼粒細胞白血病(M3)最為常見,其原因在于異??寺≡錾种屏斯撬璧恼T煅δ?,導致正常細胞增生受抑。MA和MDS是導致全血細胞減少較為常見的原因,骨髓無效性造血是基本病因,MA主要為葉酸和(或)維生素B12缺乏而導致DNA合成障礙,使血細胞成熟障礙及無效造血;MDS病因起源于造血干細胞,骨髓細胞病態(tài)造血,原位溶血,外周血細胞無效生成。兩者所占比例相近,且都有形態(tài)異常,MA骨髓中三系細胞均可發(fā)生巨幼樣變或病態(tài)造血,且多見于老年人,有時與MDS難以鑒別,但兩者是預后完全不一樣的疾病,治療上可以先試用葉酸和維生素B12治療, 無效者才考慮MDS 的診斷。溶血性疾病AIHA及Evans綜合征是由于自身抗體破壞了血細胞而導致全血細胞減少,血象、骨髓象結(jié)合溶血及其他相關(guān)檢查可作出診斷。惡性組織細胞病(MH)診斷相對較困難,臨床上出現(xiàn)持續(xù)高熱、肝脾淋巴結(jié)腫大、全血細胞減少、病情逐漸惡化、肝功能異常等征象,應高度懷疑MH[4]。該病是由于異常細胞克隆增生抑制了骨髓正常造血,導致正常血細胞的增生受抑而造成PCP。骨髓纖維化則是由于正常造血組織發(fā)生纖維增生而被抑制,骨髓造血功能衰竭,骨髓活檢可以確診。

本組資料顯示非造血系統(tǒng)疾病引起的全血細胞減少共占19.1%,主要由以下四大類疾病引起:即慢性肝病、結(jié)締組織病、感染性疾病、惡性腫瘤。慢性肝臟疾病是比較常見的病因, 除了與肝硬化、脾功能亢進有關(guān)外,與肝炎病毒對造血干細胞的抑制作用,病毒介導的自身免疫異常產(chǎn)生抗干細胞抗體,病毒損傷骨髓的微環(huán)境等有關(guān)[5]。結(jié)締組織病引起的全血細胞減少,其原因可能是產(chǎn)生自身抗體破壞了相應的血細胞,其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡是最常見的疾病。感染性疾病也可引起PCP,可能與繼發(fā)性脾功能亢進、毒素對造血的抑制、免疫功能的紊亂、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)機能亢進或機體內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變有關(guān),本組主要見于敗血癥、結(jié)核。惡性腫瘤引起的全血細胞減少,主要原因為轉(zhuǎn)移腫瘤細胞破壞了骨髓造血功能或腫瘤毒素引起骨髓壞死,也可能與營養(yǎng)不良導致造血原料缺乏或免疫功能紊亂影響血細胞代謝及生存期縮短有關(guān)。其他病因如藥物或者化學物質(zhì)所致的一過性造血功能停滯在本組中見2例,有時與AA難以鑒別,但兩者病程及預后不同,可以進行回顧性診斷。

免疫相關(guān)性全血細胞減少癥(IRP)是近年來發(fā)現(xiàn)的一個綜合征,為免疫反應介導的全血細胞減少癥,是因產(chǎn)生抗骨髓未成熟造血細胞自身抗體而引起的血細胞減少癥候群,這也是IRP不同于AA、MDS、PNH以及其他血細胞減少癥的本質(zhì)所在[6]。部分患者有骨髓增生低下或骨髓病態(tài)造血,易與AA及MDS混淆,但IRP患者骨髓紅系比例不低或增高,常規(guī)溶血試驗陰性,網(wǎng)織紅比例不低,重要的是骨髓單個核細胞coombs試驗陽性,且對激素和靜注丙球治療反應良好,可以鑒別。本組觀察的2例原因不明的全血細胞減少患者鑒于條件未做骨髓單個核細胞檢查,但對腎上腺皮質(zhì)激素、靜脈丙種球蛋白療效好,考慮可能為IRP。

引起全血細胞減少的病因很多,對于全血細胞減少病人,臨床醫(yī)生往往習慣考慮到血液系統(tǒng)疾病的可能性,而忽視非血液系統(tǒng)疾病的因素,正確的診斷和鑒別診斷對疾病的治療有著重要意義,臨床醫(yī)生必須進行全面詳細的檢查,減少誤診和漏診,提高診斷的準確率

參考文獻

[1]羅紹凱,洪文德.血液和造血系統(tǒng)疾病典型病例分析[M].北京:科學技術(shù)文獻出版社, 2001:328.

[2]趙曉紅,王 晨,王 智.全血細胞減少癥144例病因分析[J].交通醫(yī)學,2008,22(6):670-671.

[3]Young N S. Pat hophysiologic mechanisms in acquired aplastic anemia[J].Hematology Am,2006,(1):72-77.

[4]張 宏,李 軍,傅晉翔.全血細胞減少371例病因分析[J].中國血液流變學雜志,2007,17(1):64-65,148.

篇4

慢性粒細胞白血病(CML)是一種造血干細胞的惡性克隆及骨質(zhì)增殖類疾病,主要特點是包含已成熟及未成熟各階段的外周血粒細胞過多生成,血象及骨髓象是CML診斷的重要參考依據(jù),CML患者血象顯示中WBC升高明顯,RBC和Hb初期階段正常,而加速、急變時期會出現(xiàn)驟降情況,PLT與慢性期為正常范圍或稍微升高,但急變期也會出現(xiàn)驟降情況,骨髓象在急變期時,原粒與早期幼粒細胞則超過30%,同時PH染色體呈現(xiàn)陽性,白細胞不斷上升,呈現(xiàn)典型血象及骨髓象變化,患者NAP中性粒細胞的活性逐步減弱或呈現(xiàn)陰性、PH染色體為陽性,同時BCR-ABL基因融合,由此可以確定為CML的診斷結(jié)果。

關(guān)鍵詞:慢性粒細胞白血?。患毎螒B(tài)學;血液學;進展研究

【中圖分類號】

R249 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763(2014)07-0258-01

CML是一種造血干細胞的惡性克隆及骨質(zhì)增殖類疾病[[1],病理為慢性期-加速期-急變期。該病發(fā)病率約為萬分之一,占成年人白血病比重的15-20%左右,可發(fā)病于任何年齡段,其中40-50歲為高發(fā)人群,男性發(fā)病率略高于女性[2]。本文以血液檢驗等相關(guān)資料作為闡述對象,對CML血細胞形態(tài)展開綜述。

1 CML的檢測診斷方法

CML檢測診斷除了對患者詢問病史以外,還需白細胞分類記數(shù)、外周血細胞記數(shù),骨髓穿刺法涂版記數(shù)、生化檢查、骨髓活檢、熒光原位雜交、染色體本核型分析及BCR/ABL基因檢測等診斷方法。

2 CML診斷和鑒別診斷

2.1 血象

2.1.1 白細胞計數(shù)量明顯升高,初期為(10-50)×109?L-1,最高可達到1000×109?L-1,同時中性粒細胞迅速增殖,并呈現(xiàn)出各個階段的粒細胞,主要包含15-40左右的中幼粒細胞及20-40%的晚期幼粒細胞,早幼粒細胞和原始粒細胞在5%以下,加速及急變期原細胞開始增殖,分葉與桿狀核粒細胞也同時升高,嗜堿粒細胞可升高到10-20%,嗜酸粒細胞則升到5-10%,NAP活性減弱或呈陰性,此外少數(shù)非典型CML病患的單核細胞可增殖10-20%,原始及幼稚單核僅為少數(shù),多數(shù)為成熟的單核細胞,隨著病情不斷發(fā)展,原始粒細胞會持續(xù)增殖,加速期超過10%,急變期可超過20%。

2.1.2 血紅蛋白與紅細胞早期多為正常,少數(shù)稍微下降,但隨病情進展,初期多數(shù)患者的Hb為90-100g/L,主要為正細胞及正色素貧血,分類偶見核紅細胞、多染紅細胞及點彩紅細胞,如果患者Hb、RBC突然降低,則表明可能存在急變。

2.1.3 初診病例中血小板增殖通常為35-50%,僅有小部分患者的PLT為正常范圍或稍微增殖,此外PLT形態(tài)正常,但會出現(xiàn)中等以及較大的血小板出現(xiàn),極個別患者外周血內(nèi)生成巨核細胞,如果PLT不斷增殖突然降低,或者持續(xù)偏低突然增殖都表明存在急變的可能,具體見下表。

2.2 骨髓象

2.2.1 粒細胞系統(tǒng)比率迅速增殖,其中以中幼、晚幼及中性桿狀細胞為主要增殖對象,原始粒細胞小于10%,大部分幼粒細胞會伴有核漿發(fā)育異常,并很可能出現(xiàn)分裂相。嗜酸及嗜堿粒細胞開始增殖,嗜酸粒細胞可達5%-15%間,嗜堿粒細胞可達3%-10%間,并多為成熟粒細胞。此外淋巴細胞與單核細胞的比例降低,少部分患者的粒系病態(tài)造血顯著明顯,嗜酸及嗜堿粒細胞比例正常,而單核細胞比例增加,且形態(tài)異常。

2.2.2 紅細胞系統(tǒng)在早期仍然增殖,但低于粒細胞,晚期紅細胞系統(tǒng)因受到抑制而發(fā)生降低。

2.2.3 巨核細胞明顯增多,超過300-1200個/片。同時血小板大多呈堆或片狀。

2.2.4 NAP活性減弱或呈陰性,治療過程中可有效增加其活性,而復發(fā)時再次降低。

2.3 骨髓活檢:

加速期階段原粒及早幼粒細胞的數(shù)值大約處于慢性期和急變期之間,急變期階段原粒及早幼粒細胞超過30%,具體見表2。

3 討論

CML是一種造血干細胞的惡性克隆及骨質(zhì)增殖類疾病[1]。主要以包含已成熟及未成熟各階段的外周血粒細胞過多生成為主要臨床特點,這其中嗜酸粒細胞與嗜堿粒細胞增殖比重約為95%,非典型CML在4%-5%間。集結(jié)在患者骨髓中的CML不但會阻礙正常造血功能,還會通過血液擴散至全身,同時伴有貧血、感染、出血以及器官浸潤等癥狀產(chǎn)生[3]。臨床中主要以血象及骨髓象是CML診斷的重要參考依據(jù),CML患者血象顯示中WBC升高明顯,RBC和Hb初期階段正常,而加速、急變時期會出現(xiàn)驟降情況,PLT與慢性期為正常范圍或稍微升高,但急變期也會出現(xiàn)驟降情況,骨髓象在急變期時,原粒與早期幼粒細胞則超過30%,同時PH染色體呈現(xiàn)陽性,白細胞不斷上升,呈現(xiàn)典型血象及骨髓象變化,患者NAP中性粒細胞的活性逐步減弱或呈現(xiàn)陰性、PH染色體為陽性,同時BCR-ABL基因融合,由此可以確定為CML的診斷結(jié)果??偠灾?,血象及骨髓象作為CML診斷的主要參考依據(jù)具有重要臨床意義。

參考文獻

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篇5

【摘要】目的:探討利用血細胞分離機對血液病患者進行血液成分單采或置換治療的護理。方法:對43例患者進行116例次血液成分單采、自體造血干細胞采集、血漿置換治療時,術(shù)前進行細致的心理護理、充分的術(shù)前檢查及其他完善的術(shù)前準備;術(shù)中對血細胞分離機的熟練操作、保護好血管通路、密切觀察病情變化、預防低鈣血癥、過敏反應的發(fā)生;術(shù)后壓迫針眼、繼續(xù)病情觀察,抽血送檢,了解單采或置換的效果。結(jié)果:116例次達到滿意療效,但有17.9%發(fā)生口唇麻木、腹脹、惡心等不良反應。結(jié)論:充分的采集前準備,采集中熟練操作機器,密切觀察病情,加強采集后巡視,有利于提高采集產(chǎn)品的質(zhì)量及治療效果,保護病人安全。

【關(guān)鍵詞】胞單采術(shù);不良反應;護理

隨著醫(yī)學技術(shù)的不斷發(fā)展與進步,血細胞成分單采術(shù)已廣泛地應用于血液病、腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、免疫性疾病等。我科自2009年9月-2011年12月,采用美國百特公司CS3000血細胞分離機以來,為廣大血液病、風濕病患者帶來了福音,治療效果明顯,大大減輕了患者的病痛。CS3000血細胞分離機是一整的連續(xù)式離心設備,它的工作原理是:建立一個體外循環(huán),血液成分通過細胞分離機的離心作用,達到單采患者的某一血液成分,然后根據(jù)治療目的廢棄或用置換液替代或做某種處理后回輸自身的治療手段1。

1. 方法與資料

1.1 方法:采用百特公司C-S3000Plus血細胞分離機(美國Baxter)進行血細胞分離及干細胞采集和血漿置換等,選取病人兩條靜脈通路,應用專用的16號一次性穿刺針,穿刺肘正中靜脈或貴要靜脈建立采血及回輸閉合式通路(嚴禁在此管路中進行靜脈輸液),如靜脈條件差,可選擇頸內(nèi)、鎖骨下靜脈或股靜脈置管,一般選擇雙側(cè)股靜脈置管,采集過程中囑患者穿刺肢體適當制動2,雙針連續(xù)循環(huán),復方枸櫞酸鈉(ACD-A)抗凝,全血流速35mL/min-65mL/min,循環(huán)血量4000mL-12000 mL。1.2資料:從2009年9月—2011年12月, 43例患者中,血漿置換59次,單采白細胞34次,干細胞采集9次,紅細胞采集6次,血小板采集8次;總計116次。

2. 結(jié)果

2.1 不良反應:116次病人中有口唇麻木11例,占9.4%;腹脹、惡心4例,占3.4%;一過性心動過速2例,占1.7%;輸血漿發(fā)生皮疹2例占1.7%;煩躁不安2例,占1.7%;不良反應占總?cè)藬?shù)的17.9%。

2.2 輸液安排不合理及宣教不到位:血漿置換前輸入脂肪乳及血細胞單采前進食牛奶、雞蛋各一例,占1.7%

3. 護理

3.1 術(shù)前護理

3.1.1 用物及環(huán)境的準備 分離室單采室每天常規(guī)消毒,打開空調(diào)凈化系統(tǒng),保持適宜溫度(22℃-25℃)、濕度(50%-60%),濕度過大或過小會影響機器的運行。熟練掌握血細胞分離機的操作,根據(jù)不同采集類型,選擇不同的程序、耗材,安裝、預沖并根據(jù)患者情況輸入?yún)?shù),備好常規(guī)急救藥品、吸氧裝置、吸痰裝置、監(jiān)護儀等。

3.1.2 病人的準備 采集前遵醫(yī)囑查血常規(guī)、電解質(zhì)、凝血常規(guī)等,了解患者各項檢驗數(shù)值。告知采集當日早晨禁食牛奶、蛋黃,以免影響單采效果。術(shù)前應少量進食清淡飲食,也不能空腹上機進行單采術(shù),易導致術(shù)中產(chǎn)生不良反應,適量飲水。評估靜脈血管情況:術(shù)前3天禁止在肘部大血管處穿刺,盡可能保護血管,靜脈條件差的準備作深靜脈留置。并囑患者解完大小便后方可上機。同時給予心電監(jiān)護,針對病人不同心理做好心理疏導,講解血細胞去除術(shù)的目的、優(yōu)點及安全性,靜脈穿刺由有經(jīng)驗的高年資護士操作,取得病人信任,減輕其焦慮與恐懼,以良好的心態(tài)接受手術(shù)。

3.2 術(shù)中護理

3.2.1 指導病人配合手術(shù) 協(xié)助病人取較為舒適,由于單采術(shù)時間較長,固定2 -4 h,病人會感到肢體麻木、手臂酸痛,本組病人有15例感覺此不適感,協(xié)助挪動手臂位置或給予按摩四肢,減輕疲勞不適。6例病人因手固定不良出現(xiàn)穿刺部位血腫后給予重穿。醫(yī)護人員經(jīng)常詢問病人,特別注意言談,用鼓勵和安慰性語言,使其放松,穩(wěn)定情緒。

3.2.2 密切觀察機器的運行情況隨時觀察全血流量、血漿流量、抗凝劑滴速。滴速過慢易導致血液抗凝不充分,不利于血液成分的去除,還可以引起管道堵塞造成機器報警;過快過量進人體內(nèi),易導致低鈣抽搐。及時處理采集過程中機器報警,常見的報警為進路或返路壓力過高,一般均為病人肢體移動引起穿刺部位血流量不足導致報警,根據(jù)不同報警查找原因及時處理,保證分離術(shù)順利進行。3.2.3 密切觀察生命體征和病情變化 耐心聽取病人主訴,了解病人有無四肢麻木、心慌等低鈣血癥的現(xiàn)象。在單采術(shù)進行后90min或ACD-A抗凝劑用量達到250mL時,注意觀察有否低血鈣癥狀,尤其女性患者,表現(xiàn)為口唇麻木、畏寒、嚴重者出現(xiàn)手足抽搐、心動過速等3。在本組中有11例訴出現(xiàn)口周、舌、手足麻木及針刺感,但未出現(xiàn)手足抽搐,此時應加快葡萄糖酸鈣點滴速度,能夠減少低鈣血癥的發(fā)生。5分鐘左右癥狀消失。4例病人出現(xiàn)腹脹、惡心,給與止吐對癥處理后15分鐘緩解。2例病人在血漿置換時出現(xiàn)心律加快及血壓下降,無胸悶氣緊癥狀,氧飽和度在95以上,經(jīng)減慢血液流速及加快輸入血漿速度,10分鐘后癥狀緩解。這主要與體內(nèi)血液進入治療管路致使外周血容量減少及體內(nèi)縮血管反應有關(guān),故在開始時血流量不宜過大,約在40mL/分鐘左右,然后緩慢階梯性增加至目標流量,有助于減少心律加快及低血壓的發(fā)生。2例病人輸血漿時出現(xiàn)皮疹,瘙癢,主要與供血血漿中抗白細胞抗體有關(guān),可誘發(fā)過敏反應,據(jù)文獻報道發(fā)生率為0%-12%4,予地塞米松5-10mg靜脈注射或非那根25mg肌注或口服,30分鐘后癥狀緩解。2例出現(xiàn)煩躁不安均為血栓性血小板性紫癜患者,這與本身疾病有關(guān),主要表現(xiàn)為神經(jīng)精神癥狀,給予地西泮靜脈點滴后癥狀可緩解。

3.3 術(shù)后護理

3.3.1 穿刺處的保護:去除術(shù)采用的是16號采血針,故穿刺針眼較大,我科的病人大多數(shù)為血液病及貧血病人,術(shù)后拔針后要按壓15-30分鐘,至不出血為止,以減少穿刺局部皮膚淤血乃至血腫,以免給需二次單采患者的靜脈穿刺增強難度5。用無菌紗塊覆蓋穿刺點,囑患者保持局部干燥,24h內(nèi)不能沾水,交代注意事項,觀察出血和低血鈣情況。嚴密觀察并做好交接班。本組拔針后無一例血腫發(fā)生。

3.3.2 術(shù)后病人可出現(xiàn)直立性低血壓,故應囑病人術(shù)后4 h盡量臥床休息,起床動作宜緩慢,輕柔,以免發(fā)生暈厥。

3.3.3 密切觀察病人病情變化,定時監(jiān)測生命體征,飲食上補充必要的營養(yǎng),可進食含鈣高的牛奶、骨頭湯等,若發(fā)生問題及時妥善處理。

3.3.4 術(shù)后應及時檢查血常規(guī)、電解質(zhì),以了解分離效果,做好各項記錄。

4. 小結(jié)

通過以上對血液成分單采術(shù)的術(shù)前、術(shù)中、術(shù)后整個過程的護理,總結(jié)出合理安排責任心強、技術(shù)過硬護理人員,可明顯提高穿刺成功率,減少并發(fā)癥的發(fā)生。同時嚴格的無菌觀念、豐富的臨床經(jīng)驗,要具備敏銳的觀察能力和判斷能力,具有一定臨床經(jīng)驗的護士能及時與患者做好溝通,做好術(shù)前針對病人作詳細講解,消除病人顧慮,指導患者配合手術(shù),加強術(shù)中監(jiān)護,及時處理不良反應,并以嚴謹、科學、負責的態(tài)度做好每一環(huán)節(jié)的工作,保證單采術(shù)的圓滿完成。

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篇6

1 導致PLT計數(shù)升高的因數(shù)

1.1 標本放置時間[1、2] PLT是體積較小的血細胞,易于黏附聚集和破壞,王新花等[1]認為標本放置時間越長,破壞越多,同時,紅細胞也不例外,血細胞分析儀計數(shù)PLT時,誤將紅細胞碎片以為是PLT而計入,造成測定結(jié)果假陽性增高,既時測定和Ih測定有非常顯著性差異;建議取標本后一定要在30min內(nèi)測定。

1.2 樣品溶血不完全 肖景珠[3]報道溶血不完全不但影響白細胞計數(shù)和分類,的準確性.而且影響下一例樣品的PLT計數(shù),由于紅細胞碎片沖洗不徹底,造成PLT假性升高;郭露等[4]也認為殘留于測定杯壁的溶血素可將紅細胞破壞成2.0fl左右的碎屑,導致PLT計數(shù)結(jié)果偏高。

1.3 試劑質(zhì)量 根據(jù)有關(guān)會議[5]精神,強調(diào)使用儀器相匹配的原裝或高質(zhì)量的試劑, 尤其是PLT的結(jié)果,直接反映試劑的質(zhì)量,進口試劑價格過于昂貴,目前,國產(chǎn)試劑存在一定的質(zhì)量問題,如過濾不徹底、細菌污染等因素而使基礎值偏高,與儀器不匹配;試劑廠家應繼續(xù)努力,爭取生產(chǎn)出高質(zhì)量的國產(chǎn)化試劑。

1.4 地線和電源 血細胞分析儀要求良好的接地效果,如地線未接或接地不良,均可形成靜電脈沖信號而影響PLT計數(shù);其主要表現(xiàn)在PLT直方圖的起點偏左,并形成許多小峰,這種情況一定要先排除地線和電源的因素,再尋找其他原因。

1.5 藥物影響 有些藥物可以影響PLT的計數(shù),錢敏等[6]報道患者輸用脂肪乳后影響PLT計數(shù),認為脂肪乳劑中的脂肪乳顆粒直徑和患者PLT相近,導致輸入脂肪乳的患者PLT會出現(xiàn)假性增高,并建議患者輸用脂肪乳后如需檢測PLT最好在5—6h以后,如出現(xiàn)PLT過高時應隨時和臨床聯(lián)系,最后經(jīng)血片觀察方可報出結(jié)果。

2 導致PLT減少的因素

2.1 采血是否規(guī)范和順利 李永紅等[7]認為采血是否順利是造成PLT偏低的一個重要因素,靜脈經(jīng)多次穿刺而引起的水腫及皮下出血時,因組織損傷后,組織凝血因子易于混入血液標本,從而產(chǎn)生肉眼看不見的小凝塊,是造成血細胞分析儀測定結(jié)果偏低的常見原因,建議這種標本必須重新采血測定;吸取標本量不足也是造成PLT減少的一個原因,同時會造成白細胞和紅細胞的計數(shù)減少;另外,標本未經(jīng)混勻既上機測定是造成PLT結(jié)果偏低的又一個容易忽視的因素,所以操作時一定要規(guī)范,充分混勻后再上機測定.

2.2 抗凝劑的影響 要獲得比較可靠的PLT結(jié)果,抗凝劑的影響也是一個很重要因素,郭建等[8]作試驗證實采用EDTA—K2與肝素抗凝對比有顯著性差異,肝素抗凝可使PLT計數(shù)明顯偏低,其原因可能是:EDTA可使離體后的PLT離散,成為單個顆粒通過計數(shù)小孔,而肝素可使PLT表面結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,形成肝素和PLT復會體,引起PLT在較短時間內(nèi)凝聚,使PLT計數(shù)時結(jié)果偏低通過血片觀察也看到EDTA抗凝血片中的PLT呈單個散在分布,肝素抗凝的血片中PLT則大多數(shù)成聚集狀態(tài)。

2.3 藥物的影響 長期應用某些藥物如地高辛,雙氫克尿塞、甲基多巴、青霉素等,可引起PLT減少,這些藥物與血漿蛋白結(jié)合形成抗原,刺激機體產(chǎn)生抗PLT抗體;這種抗藥源性PLT減少常在停藥后15—2d恢復正常。

2.4 輸血的影響 大量輸入血液制品時會引起PLT減少,這種情況導致的PLT減少一般在4—6d后恢復正常,另外,某些患者在輸血后一周左右,突然發(fā)生全身性紫癜,PLT計數(shù)明顯減少,這是因為患者對外源性PLT抗原產(chǎn)生同種免疫,再次輸入相應的PLT后產(chǎn)生PLT特異性抗原—抗體復合物,使輸入的受體破壞,也使患者自身PLT破壞,結(jié)果計數(shù)明顯減低。

綜上所述,血球計數(shù)儀的引進和使用,促進了血液學檢驗技術(shù)的發(fā)展,只要注意影響PLT計數(shù)的有關(guān)思想因素,做到正確使用和分析,必要時進行涂片和直接計數(shù),以確保計數(shù)結(jié)果的準確性,會更好的服務于臨床。

參 考 文 獻

[1] 王新花,高海英.末梢標本放置時間對PLT測定結(jié)果影響,臨床檢驗雜志,1997,15(5):278.

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[3] 肖景珠,趙慧斌,李峰等.血細胞分析儀計數(shù)PLT的影響因素分析,臨床檢驗雜志,1998,16(5):309.

[4] 郭露,江詠梅,李文勝等.紅細胞與PLT體積分布直方圖在判斷PLT計數(shù)中的作用,臨床檢驗雜志,1996,14(6):313.

[5] 全國血液學自動化分析質(zhì)量控制研討會紀要,中華醫(yī)學檢驗雜志,1995,18(6):125.

[6] 錢敏,張杰,童明慶.病人輸入脂肪乳后PLT計數(shù)準確性的探討,臨床檢驗雜志,2001,19(4):252.

篇7

【摘要】不同廠家生產(chǎn)的五分類血球儀在檢測原理上不盡相同,在白細胞分類上更是使用了不同的檢測方法和試劑,但從根本上講,其檢測原理大致分為電阻抗法與光散射法兩部分。本文對紅細胞計數(shù)原理、血小板計數(shù)原理、白細胞計數(shù)原理、白細胞分類原理、網(wǎng)織紅細胞檢測原理分別加以闡述。

【關(guān)鍵詞】五分類血球儀;血細胞計數(shù);白細胞分類

目前,具有白細胞五分類功能的血球儀已廣泛應用于各級醫(yī)院的臨床檢驗科,我們常見的國外品牌有Beckman-Coulter、ABX、Sysmex、Bayer、日本光電;在國內(nèi)已經(jīng)有邁瑞(MINDRAY)公司生產(chǎn)幾個型號的五分類血球儀投入醫(yī)療市場。雖然現(xiàn)代不同品牌五分類血球儀的計數(shù)及分類方法不盡相同,有些還采用了與流式細胞儀相同的先進技術(shù)[1],但從根本上講,其檢測原理大致分為兩部分,即電阻抗法與光散射法[2],本文重點就五分類血球儀對血樣標本中各類細胞的計數(shù)及分類方法加以闡述。

1  紅細胞檢測原理

1.1  紅細胞計數(shù)(RBC)、血細胞比容(HCT)、紅細胞分布寬度(RDW)一般采用電阻抗法。

1.2  血紅蛋白濃度(HGB)測定:采用溶血比色法。血標本在溶血劑的作用下,紅細胞破壞,溶血素與血紅蛋白結(jié)合成穩(wěn)定的氰化血紅蛋白,在特定波長下比色,吸光度的變化與液體中血紅蛋白含量成正比,溶血液在流經(jīng)比色池時儀器根據(jù)吸光度計算出HGB的含量[3]。

1.3  平均紅細胞體積(MCV)、紅細胞平均血紅蛋白含量(MCH)、紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)是根據(jù)RBC、HCT、HGB計算而得。

2  血小板計數(shù)原理

2.1  電阻抗法:血小板測定與紅細胞計數(shù)原理一致,儀器將直徑2~30 fl的顆粒統(tǒng)計為血小板,大于36 fl的顆粒統(tǒng)計為紅細胞[4]。

2.2  光學法:根據(jù)Mie理論,當球形化的血小板單個通過激光照射區(qū)時,儀器在兩個角度測定激光的散射強度;高角度主要測細胞的折射指數(shù)(RI),它與細胞的密度有關(guān);低角度主要測細胞體積的大小。血小板的體積在1~30fl, RI在1.35~1.40。微機對存儲的測量信息進行分析處理,得出血小板計數(shù)結(jié)果。

3  白細胞計數(shù)原理

3.1  電阻抗法:血細胞是一種不良導體,將血液標本稀釋、溶血后制成白細胞懸液,在負壓的作用下,懸液流經(jīng)一個帶有微孔的恒壓電路時,每個細胞會產(chǎn)生一個電阻脈沖信號,這些信號經(jīng)過微機的放大、甄別、整形等處理,最后計算出單位體積內(nèi)的白細胞數(shù)。

3.2  光學法:血標本在稀釋液和溶血劑的作用下制成一定濃度的白細胞懸液,根據(jù)流體力學的鞘流技術(shù)原理,使得白細胞一一流經(jīng)儀器檢測器,每個細胞在通過檢測器時都會受到一束固定波長的激光照射,微機根據(jù)光的折射、反射、前向角等信號識別和計數(shù)細胞[5]。

4  白細胞分類原理

4.1  單一電阻法:在溶血素的作用下,白細胞發(fā)生皺縮,儀器根據(jù)白細胞顆粒產(chǎn)生的電阻脈沖信號的數(shù)量計算出單位容積內(nèi)白細胞總數(shù);再根據(jù)脈沖信號的強弱計算出細胞體積。經(jīng)微機處理檢測數(shù)據(jù)后,得到以體積為橫坐標、以相對數(shù)量為縱坐標的白細胞分布二維直方圖。將白細胞分為小細胞群(以淋巴細胞為主)、中間類型細胞群(以單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞、部分幼稚細胞為主)和大細胞群(以成熟中性粒細胞為主)。

4.2  體積、電導、光散三射法:血標本在特殊的稀釋液和溶血劑作用下紅細胞被破壞,但白細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)仍保持自然狀態(tài)。當白細胞在鞘流的引導下流經(jīng)檢測器時,會同時受到V、C、S3種技術(shù)的檢測。V是利用電阻抗法測定細胞體積;C是利用高頻電磁波,根據(jù)各種細胞核漿的電導性不同測理細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、核漿比例;S是利用光散射原理測量細胞內(nèi)顆粒的大小密度等結(jié)構(gòu)特性。計算機根據(jù)3種技術(shù)得到的資料綜合分析,將中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞一一分開,以白細胞分類散點圖顯示這些細胞,并提示異常淋巴細胞、幼稚細胞、有核細胞、抗溶血紅細胞等信息[6]。

4.3  多角度消偏振激光散射法:血標本在特殊鞘液的作用下,紅細胞內(nèi)血紅蛋白游離出細胞外,紅細胞變得透明,而白細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)和膜結(jié)構(gòu)基本保持自然狀態(tài)。當細胞懸液的鞘流經(jīng)過檢測器時,儀器從4個不同的角度得到每個細胞的光信號,這4個角度分別為0°前向角光散射測定細胞的大??;7°~10°狹角光散射測定細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)及其復雜特征; 90°垂直光散射測定細胞內(nèi)部顆粒和胞漿成分;90°消偏振光散射利用嗜酸性細胞內(nèi)顆粒特有的消偏振特性,將嗜酸性細胞直接分離。計算機綜合4個角度的光信號,將白細胞分類,并提供提示信息和相關(guān)圖譜。

4.4  電阻抗與射頻技術(shù)分類法:通過4個不同的檢測系統(tǒng)完成白細胞的分類:嗜酸性細胞、嗜堿性細胞利用特有的抗酸和抗堿能力,在各自特殊試劑的作用下,進入獨立通道直接計數(shù);在直流電和交流電的同時作用下,儀器根據(jù)細胞大小以及細胞內(nèi)部的核結(jié)構(gòu)、核漿比例、胞漿顆粒等信息區(qū)分中性、淋巴、單核細胞;幼稚細胞由于其膜上脂質(zhì)成分比成熟細胞少,在硫化氨基酸的保護下具有一定的抗溶血能力,有獨立的通道內(nèi)直接計數(shù)。

4.5  光散射與細胞過氧化物酶染色法:血標本進入儀器,在一系列的預處理液和白細胞過氧化物酶染色后流經(jīng)檢測器。每個細胞在激光束的照射下,各類細胞因過氧化物酶含量不同,具有不同的光吸收信號;根據(jù)每個細胞的前向角大小可以得到細胞的體積數(shù)據(jù),同時儀器有單獨的嗜堿性細胞直接計數(shù)通道,計算機根據(jù)這些信息得出細胞分類結(jié)果[7]。

5  網(wǎng)織紅細胞檢測原理

5.1  反射光測定法:網(wǎng)織紅細胞經(jīng)亞甲藍染色后,胞漿內(nèi)的RNA與染料結(jié)合形成藍色顆粒。此顆粒在激光的照射下會產(chǎn)生特殊的反射光,而成熟紅細胞沒有特性。儀器根據(jù)反射光信號可以計算網(wǎng)織紅細胞的百分比(Ret%)、絕比值(Ret#)、網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)(RMI)等相關(guān)指標。

5.2  發(fā)射光測定法:網(wǎng)織紅細胞的RNA與吖啶橙、堿性槐黃等熒光染料結(jié)合后在一定波長的激光照射下發(fā)出固定波長的熒光。儀器根據(jù)發(fā)光細胞的數(shù)量和光強度信號以及紅細胞測定的相關(guān)參數(shù)可以得到網(wǎng)織紅細胞絕對值、高熒光強度網(wǎng)織紅細胞(HFR)百分比、中熒光強度網(wǎng)織紅細胞(MFR)百分比、低熒光強度網(wǎng)織紅細胞(LFR)百分比、網(wǎng)織紅細胞平均體積(MCVr)、網(wǎng)織紅細胞分布寬度(RDWr)、網(wǎng)織紅細胞蛋白分布寬度(HDWr)、網(wǎng)織紅細胞濃度(HCr)、網(wǎng)織紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHCr)等參數(shù)[8]。

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篇8

關(guān)鍵詞 外周血細胞 形態(tài)學 鏡檢

儀器:邁瑞B(yǎng)C-2600血球分析儀,XSP-2C光學顯微鏡。

傳統(tǒng)意義上所謂“三大(血、尿、糞)常規(guī)”檢驗,尤其血常規(guī)檢驗,在各級醫(yī)院檢驗科的臨床基礎實驗室日常工作量中,占有大部分的份額。而近年來由于對血細胞的超微結(jié)構(gòu)、血細胞免疫學、血細胞遺傳學、分子生物學、骨髓造血微環(huán)境、基質(zhì)細胞、造血干細胞及細胞因子等的研究,推動了血液臨床與實驗室新知識的迅速發(fā)展。新的技術(shù)步入實驗醫(yī)學,特別是血細胞分析儀的自動化,不斷提高了血細胞計數(shù)的精確性和準確性,促進了醫(yī)學檢驗的發(fā)展,基本取代了先前的血常規(guī)檢查方法。

然而,在全國普及血細胞分析儀應用的同時,由于對儀器功能的局限性認識不足,忽視了血細胞形態(tài)學方面的檢查。據(jù)統(tǒng)計,有了自動化血細胞分析儀后,由于各種各樣的原因使得外周血涂片的鏡檢率大幅下降,有的甚至均不進行鏡檢。目前血細胞分析儀技術(shù)的確先進,它能提供血細胞數(shù)量和血細胞形態(tài)的幾十個參數(shù),是今后的發(fā)展方向,不過我們應該清醒地認識到,血細胞分析儀至今沒有哪項技術(shù)或哪些參數(shù)是能夠完全取代顯微鏡檢查結(jié)果的。

血液常規(guī)檢驗(俗稱血常規(guī))是臨床上用于疾病診斷和治療中最常用的檢驗項目,它的檢驗內(nèi)容主要包括血細胞數(shù)目和血細胞形態(tài)學檢查兩個方面,從某種意義上講,血細胞形態(tài)學檢查更具實用價值。例如:白細胞檢查可以了解機體被感染的病因和感染程度,血液系統(tǒng)惡性疾?。ò籽 ⒘馨土龅龋┑脑\斷和療效評估,甚至某些遺傳性疾病的診斷:紅細胞檢查對于貧血的鑒別診斷和病因分析:血小板檢查有助于血栓病的診斷:血細胞形態(tài)學檢查更是血液寄生蟲病的“金標準”。但因目前,臨床醫(yī)師比較重視血常規(guī)檢查內(nèi)容中數(shù)量的異常,而檢驗人員這方面的知識也比較匱乏等多種原因,造成檢驗人員過于依賴血細胞自動分析儀,容易導致血液系統(tǒng)等疾病的漏診,甚至誤診,從而延誤了病情,有的還引起了醫(yī)療糾紛。一些患者經(jīng)常往返于各家大小醫(yī)院,對有些簡單的疾病被搞得復雜化,有些復雜的疾病又不能明確診斷,而延誤治療時機使疾病進一步惡化,造成了無法挽回的惡果。隨著患者自我保護意識、法律意識的增強,如不改變這一現(xiàn)狀,這類醫(yī)療糾紛必將呈明顯增加地趨勢。

例1:患者,女,79歲,臨床記錄有冠心病、心衰史,因發(fā)燒、咳嗽就診,查血象。血球儀檢測結(jié)果為:WBC 53.2×109>/sup>/L,N 0.777,L 0.72%,HB 87g/L,RBC 2.87×1012/L,PT 309×109>/sup>/L。

例2:患者,男,50歲,也是因發(fā)燒就診,查血象,血球儀檢測結(jié)果為:WBC 38.6×109>/sup>/L,N 0.186,L 0.812,HB 122g/L,RBC 3.75×1012/L,PT 66×109>/sup>/L。

例1與例2都進行了手工計數(shù)與涂片染色鏡檢,其中病例1油鏡下可見到幼稚的粒細胞,細胞呈毒性改變,可見中毒顆粒和空泡,占分類的15%,成熟的粒細胞76%,淋巴細胞9%,建議臨床考慮類白血病反應,尋找原發(fā)病,作骨髓象檢查以便進一步確診;而例2卻以淋巴細胞為主(細胞中等大小,多呈圓形,部分有不規(guī)則形狀),占分類的80%,粒細胞為20%,PT計數(shù)減低,詢問病史,病人為慢性乙肝病人,肝硬化,腎盂前性高血壓,建議臨床作尿液分析檢測,其結(jié)果為尿蛋白(++),白細胞(+++),酮體(+),亞硝酸鹽(+),隱血(++),建議臨床考慮傳染性單核細胞增多癥,并作進一步檢查確診。

例3:患者,女,30歲,因感覺頭暈、臉色蒼白就診,臨床申請查血象,血球分析儀檢測結(jié)果為:WBC 3.3×109>/sup>/L,N 61.8%,L 34.7%,HB 67g/L,PT 72×109>/sup>/L,RBC 1.33×1012/L。涂片鏡檢可見視野中白細胞數(shù)減少,其中中性粒細胞減少,而淋巴細胞比例相對增加,紅細胞形態(tài)基本正常,建議臨床考慮再生障礙性貧血的可能,作骨髓象檢查以便確診。

以上所見,檢驗人員應認識到對外周血細胞形態(tài)學檢查的重要性,在加強與臨床溝通的基礎上,不過于依賴血細胞自動分析儀,應認識到實際上很多血細胞形態(tài)學方面的變化儀器是無法作出正確地判斷。因血細胞形態(tài)易受人為因素的影響,如涂片制備、染色、觀察部位等(如果標本為靜脈血,抗凝劑將影響血小板的分布),即使是正常的血細胞也會有較大的變化,何況異常的血細胞更是種類多,且變化更大。例如典型的原始細胞如果在血膜厚、染色深的情況下,非常容易誤認為是小淋巴細胞。所以一定要在強調(diào)操作規(guī)范的前提下,掌握各種血細胞形態(tài)的變化及特點,才能真正認識各種細胞,只有在不斷地重復“理論學習-臨床實踐-考核”,不斷加強業(yè)務水平,這樣檢驗步驟及結(jié)果報告才會更規(guī)范、內(nèi)容更豐富、結(jié)果也更可信。

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篇9

關(guān)鍵詞 全自動血細胞分析儀 性能 評價doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.30.210

XT-1800i血細胞分析儀是日本希森美康公司近年新出的一款全自動五分類血細胞分析儀,具有檢測速度快,故障率低,準確度高和精密度高,操作簡單等特點,可提供多種測量方式和24種檢測參數(shù),能很好地滿足實驗室的需要。根據(jù)國際血液學標準委員會(ICSH)和美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)的相關(guān)文件,對其各檢測項目進行了測試和評價,檢測報告如下。

資料與方法

試劑和儀器:XT-1800i血細胞分析儀及其專用試劑,Olympus光學顯微鏡。

標本:靜脈血2ml(EDTA-K2抗凝),均來自我院門診健康體檢。

結(jié) 果

檢測前先做本底測定和質(zhì)控,在允許范圍內(nèi)后,才能進行測試。

統(tǒng)計方法:用EXCEL對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,用函數(shù)CORREL計算相關(guān)系數(shù),差異用t檢驗。

精密度測定:批內(nèi)精密度檢測:選擇高、中、低值3份標本,每份連續(xù)測定11次,第1次結(jié)果不用,統(tǒng)計后10次結(jié)果,計算各項目(WBC、RBC、HGB、PLT、HCT)的變異系數(shù)CV。批間精密度檢測:中值質(zhì)控品連續(xù)測定20天,然后計算上述各項目的變異系數(shù)CV,見表1和表2。

攜帶污染率檢測:選取高、低值的WBC、RBC、PLT、HGB標本先連續(xù)測定高值標本3次(H1、H2、H3),再連續(xù)測定低值標本3次(L1、L2、L3),依據(jù)公式:攜帶污染率(%)=[(L1-L3)/(H3-L3)]×100,計算出各項目的污染率,見表3。

線性測定:參照NCCLS文件規(guī)定線性測定方法,隨機選取高值全血標本,用生理鹽水作倍比稀釋10%、20%、40%、60%、80%、100%,然后在XT-1800i上進行測定,每份標本連續(xù)測量5次[1],將均值計為測量值,然后將測量結(jié)果與各稀釋濃度理論值作對比,分別并計算出各項目相關(guān)系數(shù),見表4。

白細胞分類結(jié)果準確度檢測:隨機取100份標本,分別制備2張血片,由兩名經(jīng)驗豐富的技師按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》采用雙盲法進行染色細胞分類[2]。每張血片計數(shù)200個白細胞(NE:中性粒細胞,LY:淋巴細胞,MO:單核細胞,EO:嗜酸性粒細胞,BA:嗜堿細胞),取均值計為結(jié)果。然后與XT-1800i分析儀的測定值進行比較,見表5。

討 論

XT-1800i血細胞分析儀,其核心原理仍然是核酸熒光染色結(jié)合半導體激光以及流式細胞術(shù)。RBC/PLT檢測采用電阻法和雙鞘流檢測,降低顆粒回流、側(cè)向通過等不足。采用SLS-HGB法檢測HGB,對于WBC值偏高的標本,可以徹底溶解WBC,避免對HGB比色的干擾。專用WBC/BASO和WBC/DIFF檢測通道,提高了準確率,可以最大限度地較少幼稚細胞漏檢的可能。

綜上可知,表1顯示批內(nèi)CV值小于規(guī)定值,重復性好,表2 CV0.98,相關(guān)性好。表5中兩組數(shù)據(jù)比較,P>0.05,可知XT-1800i血細胞分析儀在白細胞的分類方面與人工分類基本無差別,準確度高,但也有要注意的時候,特別是一些異常的細胞或者寄生蟲,儀器結(jié)果可能有一定偏差,因此,當細胞計數(shù)值過高或者過低,散點圖或直方圖異常,異常 表1 XT-1800i血細胞分析儀批內(nèi)精密度測定結(jié)果(%)報警等的時候,必須要求手工復片,并應制定相應的復檢標準。

總之,通過檢測XT-1800i血細胞分析儀的各項指標,該機器具有檢測速度快,重復性好,攜帶污染率小,白細胞分類準確度高等優(yōu)點,是一種性能優(yōu)良的全自動血細胞分析儀,在實驗室大批量標本檢測時,有效地提高了效率和準確度,很好地滿足實驗室的工作要求。

參考文獻

篇10

【摘要】目的:討論我院同型號的兩臺血細胞分析儀進行檢測結(jié)果之間的可比性。方法:比對試驗以檢驗醫(yī)學中心使用的血細胞計數(shù)儀為比對試驗,門診使用的計數(shù)儀為試驗儀器,使用8個患者的新鮮標本,先后在兩臺儀器進行檢測(WBC、RBC、HB、HCT、PLT)5個項目,通過算出其相關(guān)系數(shù)及回歸方程,對得出的結(jié)果進行評估。結(jié)果:試驗儀器重復性試驗除PLT外均不符合要求;比對試驗除PLT不接受外,其余檢測項目結(jié)果可以接受。結(jié)論:兩臺血細胞分析儀器具有有良好的相關(guān)性,測得的結(jié)果相對偏差都在允許范圍之內(nèi),應定時進行對比,以保證檢測結(jié)果的準確性。

【關(guān)鍵詞】血細胞分析儀;比對試驗;質(zhì)量控制

我院現(xiàn)有兩臺血細胞分析儀,它們分別在門診檢驗室及住院部檢驗室,為了防止在實際臨床的測定中對校準物的定值、儀器校準和儀器使用中的漂移等各種因素導致同一患者的血液先后在不同儀器測定結(jié)果存在差異,所以特別對我院兩臺血細胞分析儀進行比對。

1 資料及方法

1.1 一般資料:這兩臺血細胞分析儀均為CELLDYN 1700全自動血細胞分析儀及統(tǒng)一使用原廠配套試劑,以住院部檢驗室使用的CELLDYN 1700全自動血細胞分析儀為比對儀器,門診血液室使用的CELLDYN 1700全自動血細胞分析儀為試驗儀器與其進行比對。

1.2 方法:通過重復性的試驗用患者新鮮血液標本分別在兩臺儀器進行連續(xù)性的測定10次,來計算其精密度;比對試驗每日隨機選取8份新鮮血,先后用兩臺儀器測定WBC、RBC、HB、HCT、PLT 5項參數(shù),其中每份測定兩次,取其平均值,連續(xù)測定7 d[1];試驗儀器(X)測定范圍的檢驗:X的分布范圍是否合適,可用相關(guān)系數(shù)(r)進行估計,r≥0.975則為范圍合適,直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠;重復試驗評價。

1.3 統(tǒng)計學方法:通過SPSS 10.0進行計算得出其相關(guān)系數(shù)、回歸方程及CV值。

2 結(jié)果

2.1 比對儀器各測定項目重復性試驗結(jié)果均符合要求。試驗儀器重復性試驗結(jié)果只有PLT結(jié)果達到要求,其余項目均超出要求。結(jié)果見表1。

2.2 各檢驗數(shù)據(jù)可靠,r均>0.975。兩臺儀器的相關(guān)性見表2。

3 討論

通過試驗,我們認為如果有使用兩臺或兩臺以上同一型號的儀器時,即使統(tǒng)一使用配套試劑,但在日常工作中可能操作及保養(yǎng)情況存在差異,往往也會導致檢驗結(jié)果出現(xiàn)偏差。根據(jù)目前,同一檢驗科使用兩臺或兩臺以上的血細胞計數(shù)儀相當普遍,通過 ISO 15189臨床實驗室質(zhì)量保證之內(nèi)審要求在同一實驗室使用2種以上型號的血液分析儀時,應當進行必要的性能校準,建立不同實驗室間的比對制度。兩臺儀器在所檢測的各個項目的各個濃度對比過程中,均存在較好的相關(guān)性,預期偏倚均在可接受的范圍內(nèi)[2]。通過試驗發(fā)現(xiàn),試驗儀器重復性較差,只有PLT檢測結(jié)果符合要求,且比對試驗中PLT項目不接受,與比對儀器檢測結(jié)果存在一定的偏差。所以在使用兩臺或兩臺以上不同型號的血細胞計數(shù)儀時,都普遍認為因儀器檢測系統(tǒng)的不一致性,不同型號儀器應該定期進行比對試驗,以保證相互檢驗結(jié)果的可比性[3,4]。所以,在使用兩臺或兩臺以上同型號血細胞分析儀時,除使用統(tǒng)一的配套試劑,在對儀器進行定標、校準、保養(yǎng)及維護的時間應同時進行,操作人員也應統(tǒng)一培訓,保證操作的正確性,同時應建立比對制度,定期對使用儀器進行比對,確保檢驗結(jié)果的可比性。

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