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【關(guān)鍵詞】幽門螺桿菌

近年來，臨床治療幽門螺桿菌（Helicobacterpylori，Hp）遇到了很大困難，Hp耐藥的問題日益嚴(yán)重，如何選擇更有效的西藥和研究中藥對Hp的治療，是擺在消化科醫(yī)生面前的重要任務(wù)之一。本實驗選用中藥胃復(fù)春片對Hp的體外試驗，旨在探討中藥胃復(fù)春片對幽門螺桿菌可能的抑制作用和臨床意義。

1材料與方法

1.1實驗材料

(1)菌種：Hp標(biāo)準(zhǔn)菌株NCTC11637由浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)系醫(yī)學(xué)細(xì)菌研究室提供。近期從臨床胃炎或消化性潰瘍患者胃黏膜活檢標(biāo)本中分離了60株Hp，經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)鑒定證實為Hp后保存于-70℃。(2)藥物：受試藥物胃復(fù)春片由杭州市胡慶余堂藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，每片重0.359g；批號060618；國藥準(zhǔn)字Z20040003。對照藥麗珠得樂（枸櫞酸鉍鉀顆粒），由麗珠集團麗珠制藥廠生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H10900086。將胃復(fù)春片碾成粉末，加滅菌蒸餾水4℃浸泡24h，濾除殘渣，100℃水溫15min滅菌。枸櫞酸鉍鉀顆粒先用滅菌蒸餾水溶解，然后0.22μm濾膜過濾除菌。上述試驗藥和對照藥再用滅菌蒸餾水配制成所需濃度的溶液。

1.2實驗方法

(1)細(xì)菌培養(yǎng)基：采用含5%脫纖維羊血的哥倫比亞瓊脂（法國梅麗埃公司），作為分離和培養(yǎng)Hp的培養(yǎng)基，同時該培養(yǎng)基也作為藥敏試驗的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。脫纖維羊血購自杭州康裕貿(mào)易有限公司，Hp培養(yǎng)時環(huán)境氣體條件是5%O2、10%CO2及85%N2（杭州特種氣體廠提供）。(2)藥敏試驗培養(yǎng)基：將上述哥倫比亞培養(yǎng)基加熱充分溶解，冷卻至60℃左右時加入終濃度為5%脫纖維羊血，再分別加入不同稀釋度的上述藥物溶液，使培養(yǎng)基所含藥物的濃度分別為0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56、5.12、10.24mg/ml，傾注平板，37℃孵育24h檢菌合格后置4℃?zhèn)溆谩?3)藥物最低抑菌濃度(MIC)測定：采用二倍平皿稀釋法。刮取新鮮培養(yǎng)的Hp菌苔，用滅菌生理鹽水充分混勻，用麥?zhǔn)媳葷岱ㄅ渲瞥?×107/ml的菌液。取各菌液5μl點種于含藥物的平板上，37℃培養(yǎng)72h后觀察結(jié)果。以50%和90%Hp菌株的生長被抑制為該藥物的50%最低抑菌濃度（MIC50）和90%最低抑菌濃度（MIC90）。實驗中同時設(shè)置不加任何藥物、正常培養(yǎng)的對照。

2結(jié)果

正常對照中60株Hp均生長良好。受試藥胃復(fù)春片和對照藥麗珠得樂對60株Hp臨床分離菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株NCTC11637的MIC測定結(jié)果見表1。表1胃復(fù)春片和麗珠得樂對60株Hp及NCTC11637的MIC測定結(jié)果（略）

3討論

Hp是一種微需氧的革蘭陰性螺旋形細(xì)菌，主要棲居于人胃黏膜的黏液層，被認(rèn)為是慢性胃炎、消化性潰瘍的重要致病因素，并與胃癌的發(fā)生也有一定關(guān)系。新近研究發(fā)現(xiàn)Hp感染與胃腸外疾病如心血管疾病等也有一定相關(guān)性。因此，Hp感染及其相關(guān)疾病已成為一個嚴(yán)重的問題。Hp在人群中感染率約為60%～70%，慢性胃炎或消化性潰瘍患者中可高達70%～90%左右。人胃是Hp感染的主要棲居場所。隨著對抗Hp感染治療的深入，發(fā)現(xiàn)Hp耐藥的問題日益嚴(yán)重。據(jù)國外資料報道，Hp對克拉霉素的耐藥率在3%～14%［1～3］，對甲硝唑的耐藥率在20%～40%［4］，某些發(fā)展中國家可高達50%～80%［5］。國內(nèi)資料顯示，克拉霉素的耐藥率為6.1%～25%［6～9］，且有上升的趨勢。

中成藥胃復(fù)春片是純中藥制劑，臨床廣泛用于慢性淺表性胃炎、萎縮性胃炎、腸腺化生、腸上皮不典型增生、功能性消化不良等癥。本實驗結(jié)果表明，胃復(fù)春片具有一定的體外抑制Hp作用，雖然達到MIC90所需的藥物濃度是麗珠得樂的4倍。在先前作者的研究也表明，某些藥物雖無具備直接抑制Hp的成分，但確有抑制Hp的作用［10］。國內(nèi)應(yīng)用中藥對Hp治療進行了許多研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)確有30～40味中藥或6個以上復(fù)方有不同程度的抗Hp作用。某些中藥及非抗生素類非鉍劑類西藥對Hp的抑菌作用，推測除了直接作用外可能與其改變了Hp賴以生存的局部胃內(nèi)環(huán)境有關(guān)。胃復(fù)春可能亦有此作用。椐此作者認(rèn)為抗生素耐藥現(xiàn)象日益嚴(yán)重的今天，不斷開發(fā)治療Hp的新藥，包括中西醫(yī)結(jié)合治療，是避免耐藥菌株產(chǎn)生的有效方法，中藥及非抗生素類非鉍劑類西藥作為抗Hp的二線或后續(xù)治療的作用，值得臨床進一步研究。

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