牛耳楓與辣蓼提取物研究論文

時(shí)間:2022-02-28 04:49:00

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牛耳楓與辣蓼提取物研究論文

1材料與儀器

1.1試藥腸胃康顆粒劑(海口市制藥廠生產(chǎn),批號(hào)060709,規(guī)格:每袋袋裝8g);牛耳楓與辣蓼提取物(NLWE)(黑色粉末,自制,每克樣品相當(dāng)于原生藥10.0g);阿司匹林腸溶片(昆明云健制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)20060320,規(guī)格25mg);硫酸阿托品注射液(天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)0601181,規(guī)格:2ml∶1mg);伊文思藍(lán)(中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上海試劑公司生產(chǎn),批號(hào)20030714,規(guī)格1.0g);乙酰膽堿(Ach)(上海三愛(ài)思試劑有限公司生產(chǎn),批號(hào)20030620,規(guī)格:1);氯化鋇(BaCl2)(廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn),批號(hào)040503-2,規(guī)格500g)。

1.2動(dòng)物昆明種小鼠,體重18~22g,合格證號(hào)2006A070;Wistar大鼠,體重180~220g,合格證號(hào)2006A07;豚鼠,體重250~300g,合格證號(hào)2006A067。以上動(dòng)物均由中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。適應(yīng)環(huán)境一周,自由飲水進(jìn)食。

1.3儀器YLS-6B智能熱板儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站);BL-420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司);ZH-Z型離體器官測(cè)量系統(tǒng)(安徽省淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司);UV22401PC紫外分光光度計(jì)(日本島津);分析電子天平(北京瑞利,精度0.1mg)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果均以±s表示,劑量資料比較,采用t檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)軟件為SPSS13.0。

2方法及結(jié)果[1,2]

2.1對(duì)醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增加的影響實(shí)驗(yàn)方法:取50只昆明種小鼠,體重18~20g,雌雄各半,隨機(jī)分為5組(n=10),正常對(duì)照組:灌胃(ig)給予等容生理鹽水;腸胃康顆粒陽(yáng)性對(duì)照組10.0g·kg-1ig;阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組0.2g·kg-1ig;牛耳楓與辣蓼提取物劑量為生藥20.0和10.0g·kg-1ig高、低劑量組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)提取物高、低劑量組)。各組動(dòng)物按0.5ml/20g體重給藥,每天分別給藥1次,連續(xù)給藥3d,末次給藥后0.5h,各鼠尾靜脈注射0.5%伊文思蘭鹽水溶液0.1ml/10g隨即腹腔注射醋酸溶液0.2ml/只,20min后處死動(dòng)物,輕揉腹部1min吸取4ml沖洗液,于3000r/min離心10min,取上清液于610nm處比色測(cè)定吸光度,記錄A值,計(jì)算抑制率,進(jìn)行組間比較。結(jié)果見(jiàn)表1。

抑制率(%)=(對(duì)照組A-給藥組A)/對(duì)照組A×100%

結(jié)果表明:牛耳楓與辣蓼提取物高劑量、提取物低劑量組、阿司匹林組均對(duì)醋酸誘導(dǎo)的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高有顯著抑制作用(P<0.01),腸胃康顆粒組對(duì)醋酸誘導(dǎo)的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高無(wú)抑制作用。

表1腸胃康顆粒及提取物對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(略)

與正常對(duì)照組比較,△P<0.01,△△P>0.05;n=10

2.2對(duì)熱板所致小鼠疼痛的影響[3]實(shí)驗(yàn)方法:篩選痛閾值為5~30s之間的雌性昆明小鼠75只,體重18~20g,隨機(jī)分成5組(n=15),正常對(duì)照組,腸胃康顆粒陽(yáng)性對(duì)照組,阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組,牛耳楓與辣蓼提取物劑量高、低劑量組。各組動(dòng)物給藥方法,給藥途徑及劑量均同“2.1”項(xiàng),每天分別給藥1次,連續(xù)給藥3d后,末次給藥后15,30,60,90,120min用熱板法測(cè)量痛閾值。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2腸胃康顆粒及提取物對(duì)熱板法所致小鼠疼痛的影響(略)

與自身藥前痛閾比較,**P<0.01,*P>0.05

結(jié)果表明,正常對(duì)照組實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)變化,阿司匹林組90minP<0.05,均值大于自身給藥前痛閾值;而其他組,P>0.05或P<0.05但其平均痛閾值均小于自身給藥前痛閾值。結(jié)果顯示,除阿司匹林外,其他組受試藥均無(wú)鎮(zhèn)痛作用。

2.3對(duì)離體豚鼠回腸平滑肌的影響[4,5]取豚鼠,按常規(guī)法制備離體回腸標(biāo)本,標(biāo)本置于18ml盛有臺(tái)氏液的浴槽中,通氧,(38.0±0.5)℃恒溫,張力負(fù)荷1g,用記錄儀描記運(yùn)動(dòng)曲線,平衡30min,穩(wěn)定后加入0.1ml0.1%Ach,記錄收縮高度;隨后用臺(tái)氏液清洗回腸及浴槽兩次,5min后注入0.5ml10%牛耳楓與辣蓼提取物高劑量溶液,30s后,再注入0.1%0.1mlAch,記錄反應(yīng)高度,用臺(tái)氏液清洗浴槽兩次,更換回腸,按照以上方法進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn),記錄數(shù)據(jù)作為一組數(shù)據(jù)值。隨后將牛耳楓與辣蓼提取物低劑量溶液0.5ml組、26%腸胃康顆粒溶液0.5ml組及0.05%阿托品0.05ml組,按以上實(shí)驗(yàn)同法操作。對(duì)0.6ml1%BaCl2組所致豚鼠回腸收縮的影響,亦按上述方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,進(jìn)行組間比較,計(jì)算抑制率。結(jié)果見(jiàn)表3~4。

抑制率(%)=(給藥前收縮幅度-給藥后收縮幅度)/給藥前收縮幅度×100%

表3腸胃康顆粒及提取物對(duì)豚鼠回腸平滑肌的作用(略)

與BaCl2比較,*P<0.001;與提取物高劑量組比較,#P>0.05;n=10

表4腸胃康顆粒及提取物對(duì)豚鼠回腸平滑肌的作用(略)

與Ach比較,#P>0.05,*P<0.001;n=10

結(jié)果表明:腸胃康顆粒、提取物高劑量、提取物低劑量皆對(duì)BaCl2引起的腸痙攣有明顯的解痙作用(P<0.001),提取物高劑量組、提取物低劑量組作用結(jié)果無(wú)明顯差別(P>0.05),顆粒組亦無(wú)明顯差別,對(duì)乙酰膽堿引起的腸痙攣均無(wú)解痙作用。

2.4對(duì)乙醇致胃粘膜損傷的作用[6,7]取40只Wistar大鼠隨機(jī)分為4組(n=10),雌雄各半,正常對(duì)照組,灌胃(ig)給予等容生理鹽水;腸胃康顆粒陽(yáng)性對(duì)照組10.0g·kg-1ig;牛耳楓與辣蓼提取物劑量為生藥5.0g和10.0g·kg-1ig劑量組。各組動(dòng)物按2ml/200g體重給藥,每天分別給藥1次,連續(xù)給藥3d,禁食48h,最后1次給藥后1h灌胃95%乙醇1ml,正常飲水,1h后處死大鼠,結(jié)扎賁門(mén)和幽門(mén),取出注入5ml生理鹽水,于10%甲醛溶液中固定10min,沿胃大彎剪開(kāi)沖洗觀察結(jié)果。計(jì)算腺胃部出現(xiàn)潰瘍點(diǎn)的數(shù)目及測(cè)量潰瘍長(zhǎng)度,依據(jù)GUTH法計(jì)算胃黏膜損傷指數(shù),(每個(gè)出血點(diǎn)計(jì)1分,糜爛計(jì)2分,潰瘍長(zhǎng)度小于1mm計(jì)3分,大于1mm小于2mm計(jì)4分,長(zhǎng)度在2mm以上計(jì)5分)將計(jì)分相加即為該只動(dòng)物的潰瘍指數(shù),比較組間差異并計(jì)算出潰瘍抑制率。結(jié)果見(jiàn)表5。

抑制率(%)=(空白對(duì)照組潰瘍指數(shù)-藥物治療組潰瘍指數(shù))空白對(duì)照組潰瘍指數(shù)×100%

表5腸胃康顆粒及提取物抗乙醇引起胃粘膜損傷的作用(略)

與正常對(duì)照組比較,*P<0.05;與提取物高劑量組比較,#P>0.05;與腸胃康顆粒組比較,△P<0.05;n=10

結(jié)果表明,各組與空白組比較均有效(P<0.05),但腸胃康顆粒組效果最好。而且提取物高低劑量組作用結(jié)果無(wú)明顯差別(P>0.05),與腸胃康顆粒比較差別較大(P<0.05)。

3討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,牛耳楓與辣蓼提取物具有降低毛細(xì)血管通透性、解痙及抗乙醇引起的胃粘膜損傷作用,但無(wú)鎮(zhèn)痛作用,可用于急性胃腸炎的治療。

Ach是膽堿受體激動(dòng)劑,激動(dòng)胃腸道平滑肌上的M膽堿受體,可引起平滑肌收縮。阿托品是膽堿受體阻斷藥,通過(guò)阻斷M受體而拮抗Ach對(duì)平滑肌的收縮作用。離體豚鼠回腸實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,NLWE對(duì)Ach引起的腸痙攣則無(wú)解痙作用,提示其無(wú)阻斷M受體的作用。Ca2+在介導(dǎo)平滑肌收縮反應(yīng)中起核心作用,平滑肌收縮通過(guò)興奮-收縮偶聯(lián)過(guò)程而實(shí)現(xiàn)[8]。BaCl2是通過(guò)釋放細(xì)胞內(nèi)的Ca2+而引起腸管平滑肌痙攣[9]。NLWE對(duì)BaCl2引起的腸痙攣有明顯的解痙作用,提示其具有鈣拮抗作用。因此,可以推測(cè)NLWE是通過(guò)拮抗Ca2+而不是通過(guò)阻斷M膽堿受體來(lái)起到解痙作用的。

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【摘要】目的研究牛耳楓與辣蓼提取物的抗急性胃腸炎的作用。方法采用冰醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性法、熱板法、豚鼠回腸平滑肌運(yùn)動(dòng)法和95%乙醇致大鼠胃潰瘍法來(lái)觀察提取物的抗炎、鎮(zhèn)痛、解痙和抗胃潰瘍作用。結(jié)果牛耳楓與辣蓼提取物對(duì)醋酸誘導(dǎo)的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高有顯著抑制作用(P<0.01),而無(wú)鎮(zhèn)痛作用,對(duì)BaCl2引起的腸痙攣有明顯的解痙作用(P<0.001),對(duì)乙酰膽堿引起的腸痙攣無(wú)解痙作用,同時(shí)具有減小95%乙醇對(duì)大鼠胃粘膜損傷的作用。結(jié)論牛耳楓與辣蓼提取物具有很好的抗炎、解痙及抗乙醇引起的胃粘膜損傷作用,對(duì)胃腸道有很好的保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】牛耳楓辣蓼提取物抗炎鎮(zhèn)痛解痙