導(dǎo)語(yǔ)：香附總黃酮超聲波提取探究論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1儀器與試劑

1.1儀器KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗器（超聲工作頻率40kHz,江蘇省昆山市超聲儀器有限公司）；UV-755B紫外可見分光光度計(jì)（上海分析儀器總廠）；ZF-I型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠)；SHB-III循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）。

1.2試劑95%乙醇；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁AR；氫氧化鈉AR；三氯化鋁AR；鹽酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；乙酸鎂AR；鎂粉AR；正丁醇AR；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；新鮮香附（采于廣西百色市）。

2方法與結(jié)果

2.1總黃酮成分提取取新鮮香附，烘干，粉碎。稱取香附粉末約6g，加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾。濾渣再加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩25ml左右為止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。

2.2測(cè)定方法依據(jù)以蘆丁為對(duì)照品測(cè)定香附中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時(shí)控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。

2.3定量實(shí)驗(yàn)-總黃酮的含量測(cè)定

2.3.1波長(zhǎng)的選擇取樣品液適量，在0.30ml5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420～700nm波長(zhǎng)范圍測(cè)定絡(luò)合物的吸光度，絡(luò)合物于510nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故測(cè)定時(shí)選用此波長(zhǎng)。

2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取蘆丁對(duì)照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加10%硝酸鋁溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12min，以試劑作空白參比液，于510nm處測(cè)吸光度。結(jié)果見表1。

表1分光光度法測(cè)定蘆丁對(duì)照液吸光度結(jié)果（略）

根據(jù)上表得回歸方程：A=-0.0311+13.5184C，r=0.9999。

2.3.3提取物含量的測(cè)定精密吸取樣品液0.50ml，置10ml容量瓶，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法測(cè)定吸光度A=0.0949，根據(jù)回歸方程：A=-0.0311+13.5184C，計(jì)算樣品中總黃酮的含量C=0.1864mg/ml。

2.3.4回收率實(shí)驗(yàn)精密量取樣品液2.00ml，加入標(biāo)準(zhǔn)蘆丁對(duì)照品2.00ml（0.10mg/ml），同前樣品測(cè)定方法操作測(cè)定吸光度，求出回收率為102.7%。

2.4定性實(shí)驗(yàn)-總黃酮的鑒別

2.4.1顏色反應(yīng)

紫外光下呈色反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點(diǎn)。

濃氨水反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，將濾紙?jiān)诎彼戏窖?.5min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點(diǎn)。

三氯化鋁反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加1％三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點(diǎn)。

乙酸鎂反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點(diǎn)。

鹽酸-鎂粉反應(yīng)：取乙醇提取液1ml于試管中加鎂粉，再加入濃鹽酸數(shù)滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色。

2.4.2紙層析取樣品溶液10μl點(diǎn)在濾紙上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5體積比為展開劑，上行展開5h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見熒光斑點(diǎn)。

3討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)方法工藝簡(jiǎn)單，回收率為102.7%。利用本文所提供的超聲波提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。超聲波可以強(qiáng)化乙醇浸提法，達(dá)到省時(shí)、高效、節(jié)能的目的。此方法采用全物理過(guò)程，無(wú)任何污染，是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑，具有廣闊的應(yīng)用前景。

黃酮類化合物是一大類天然產(chǎn)物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分，具有很高的藥用價(jià)值。在自然界中最常見的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等［5］。天然來(lái)源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過(guò)血腦屏障，能進(jìn)入脂肪組織，進(jìn)而體現(xiàn)出如下功能：消除疲勞、保護(hù)血管、防動(dòng)脈硬化、擴(kuò)張毛細(xì)血管、疏通微循環(huán)、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大腦及其他臟器細(xì)胞的功能。

黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗輻射等作用［8，9］。近年來(lái)，世界上掀起了植物藥開發(fā)的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點(diǎn)倍受青睞，而黃酮類化合物以其廣譜的藥理作用引人矚目，香附分布廣泛。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，香附中含有較為豐富的黃酮。因此，香附具有廣泛的開發(fā)和利用價(jià)值，值得綜合利用，加強(qiáng)資源開發(fā)。

【參考文獻(xiàn)】

［1］黃險(xiǎn)峰，彭國(guó)平.香附的化學(xué)成分及藥理研究進(jìn)展［J］.中藥材，2003，26(1):65.

［2］謝英俊，魯振坤．庫(kù)存薄弱需求強(qiáng)勁香附價(jià)將上升［J］.全國(guó)藥材商情，2005，(10):5.

［3］徐才華，符仙宇．行氣止痛話香附［J］.浙江中醫(yī)雜志，2002，37(6):258.

［4］趙峻．常用中藥識(shí)別與應(yīng)用手冊(cè)，第2版［M］.青島：青島出版社，2004，10:114.

［5］夏杏洲，張輝，魏傳晚.榕樹葉中黃酮類化合物的提取條件研究［J］.食品研究與開發(fā)，2002，23(5):35.

【摘要】目的探討香附總黃酮的提取及鑒別方法，以充分利用香附植物資源，避免資源的浪費(fèi)。方法采用超聲波乙醇浸提法從香附中提取黃酮類物質(zhì)，對(duì)所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證，并用分光光度法測(cè)定含量。結(jié)果測(cè)得樣品中總黃酮的含量C=0.1864mg/ml，回收率為102.7%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過(guò)程，無(wú)任何污染，是提取香附黃酮類物質(zhì)的有效途徑。

【關(guān)鍵詞】超聲波提取香附總黃酮鑒別