導語：養(yǎng)血調經(jīng)膏質量標準研究論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的建立養(yǎng)血調經(jīng)膏的質量標準。方法采用薄層色譜法對制劑中的丹參、人參、甘草進行定性，采用高效液相色譜法對制劑中的芍藥苷進行定量。結果薄層色譜斑點清晰，陰性無干擾；芍藥苷在0.1872～0.9360μg范圍內呈良好的線性關系，平均回收率為98.24%，RSD為0.85%。結論此法操作簡單，可靠，可用于養(yǎng)血調經(jīng)膏的質量控制。

【關鍵詞】養(yǎng)血調經(jīng)膏；質量標準；高效液相色譜法；薄層色譜法

StudyontheQualityStandardofYangxueTiaojingElectuary

Abstract：ObjectiveToestablishthequalitycontrolmethodofYangxueTiaojingElectuary.MethodsTLCmethodwasusedtoidentifyRadixetRhizomaSalviaeMiltiorrhizae,RadixetRhizomaGinseng,RadixetRhizomaGlycyrrhizaeinYangxueTiaojingElectuary.ThecontentofPaeoniflorinwasdeterminedintheprescriptionbyHPLC.ResultsTheTLCspotsdevelopedwerefairlyclear,andtheblankshowednointerference.HPLCmethodshowedagoodlinearitybetween0.1872～0.9360μgwithanaveragerecoveryof98.24%,RSDwas0.85%.ConclusionThismethodisdependableandeasytooperate.ItcanbeusedtocontrolthequalityofYangxueTiaojingElectuary.

Keywords：YangxueYiaojingElectuary;Qualitystandard;HPLC;TLC

養(yǎng)血調經(jīng)膏是由白芍、丹參、地黃、人參、銀柴胡、甘草、黃芪等12味藥制成的中藥復方膏劑，具有補氣養(yǎng)血、調經(jīng)止帶功效。用于氣血兩虛，身體瘦弱，腰膝酸軟，月經(jīng)不調，崩漏帶下等癥。方中丹參采用乙醇回流提取，其它藥味采用水提。本實驗采用薄層色譜法對方中丹參、人參、甘草進行了定性研究，采用高效液相色譜法對君藥中的芍藥苷進行了定量研究，建立了養(yǎng)血調經(jīng)膏的質量控制方法。現(xiàn)將結果報道如下。

1儀器與試藥

養(yǎng)血調經(jīng)膏（自制）；人參皂苷Rg1，Re，Rb1對照品，甘草對照藥材，丹參酮ⅡA對照品，芍藥苷對照品（均來自中國藥品生物制品檢定所）；乙腈為色譜純，水為重蒸水，其它試劑均為分析純。

硅膠G薄層板（青島海洋化工廠分廠）；島津LC10ATvp高效液相色譜儀，島津SPDATvp檢測器。

2方法與結果

2.1薄層鑒別

2.1.1丹參取本品70g，加甲醇140ml，振搖使混勻，超聲30min，再離心20min，取上清液水浴蒸至稠膏狀，加水20ml攪拌稀釋，加氯仿振搖提取4次（30，30，20，20ml），合并氯仿液，水液備用（人參鑒別用），氯仿液揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。取缺丹參陰性樣品70g，同法制得缺丹參的陰性對照溶液。取丹參酮ⅡA對照品，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法［1］實驗，吸取對照品溶液10μl，供試品溶液與缺丹參陰性對照溶液各20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯（19∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖1。

2.1.2人參取上述丹參鑒別項下的水液用水飽和的正丁醇振搖提取3次（40，40，30ml），合并正丁醇溶液，用氨試液洗滌3次，30ml/次。棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱（10g，內徑1.5cm），用水50ml洗脫，棄去洗脫液，繼用70%乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。取缺人參陰性樣品70g，同法制得缺人參的陰性對照溶液。另取人參皂苷Rg1，Re，Rb1對照品，加甲醇制成每毫升各含1mg的混合溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法［1］試驗，吸取對照品溶液10μl，供試品溶液及陰性對照溶液各20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑正丁醇-醋酸乙酯-稀氨水（550）（4∶1∶5）10℃以下放置過夜的上層溶液，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖2。

2.1.3甘草取本品100g，加甲醇200ml，振搖使混勻，超聲30min，再離心20min，取上清液水浴蒸至無醇味，加水30ml攪拌稀釋，用乙醚振搖提取2次，30ml/次。棄乙醚液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取3次，50ml/次。合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，30ml/次。棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水溶解，上聚酰胺柱（3g，內徑1.5cm），用水洗至無色，用50%乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。取缺甘草陰性樣品100g，同法制得缺甘草的陰性對照溶液。另取甘草對照藥材1.3g，加水100ml煎煮30min，水煎液離心20min后，用脫脂棉濾取上清液，濾液用乙醚振搖提取2次，按上述供試品溶液的制備方法制得對照藥材溶液。照薄層色譜法［1］實驗，吸取上述供試品溶液及陰性樣品溶液各20μl，對照藥材溶液20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲苯-丙酮-甲酸（50∶25∶10∶1）溶液，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品藥材色譜相應的位置上顯相同的一個黃色主斑點，陰性無干擾。結果見圖3。

2.2含量測定

2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適應性色譜柱為C18柱（4.6mm×250mm，5μm）（迪馬公司）；流動相為乙腈-1%醋酸（14∶86）；流速1.0ml/min；檢測波長230nm；進樣10μl；理論板數(shù)為按芍藥苷峰計不低于2500。

圖1丹參TLC（略）

圖2人參TLC（略）

圖3甘草TLC（略）

2.2.2對照品溶液的制備取芍藥苷對照品約10mg，精密稱定，置20ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度搖勻，即得（每毫升含芍藥苷0.05mg）。

2.2.3供試品溶液的制備取本品3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250w，頻率33kHz）40min，取出放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4線性關系的考察精密稱取芍藥苷對照品9.36mg，置20ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密移取1，2，3，4，5ml置25ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度。各精密吸取10μl進樣，按上述色譜條件測定，記錄峰面積，并以峰面積為縱坐標，芍藥苷進樣量為橫坐標作圖，得一直線，以峰面積（Y）對芍藥苷進樣量（X）進行回歸，得回歸方程：Y=1130494.658X+13721,r=0.9991。實驗結果表明，芍藥苷在0.1872～0.9360μg范圍內呈良好線性關系。

2.2.5精密度實驗精密吸取同一芍藥苷對照品溶液10μl，重復進樣5次，記錄芍藥苷峰面積值，其RSD值為1.40%，表明本法精密度良好。

2.2.6穩(wěn)定性實驗取同一批樣品制備的供試品溶液，每隔一定時間進樣10μl，記錄芍藥苷峰面積值，其RSD值為1.15%，結果表明供試品溶液在8h內穩(wěn)定。

2.2.7重復性實驗取同一批樣品，制備5份供試品溶液，按上述色譜條件測定，記錄芍藥苷峰面積值，計算芍藥苷含量，其RSD值為1.98%，表明本法重復性良好。

2.2.8回收率實驗采用加樣回收法，取含量為0.383mg/g的養(yǎng)血調經(jīng)膏約1.5g，精密稱定，分別精密添加濃度為0.46，0.58,0.75mg/ml的芍藥苷對照品溶液1ml再精密加入甲醇24ml，密塞，按上述2.2.3方法制備供試品溶液，測定含量，計算回收率；平均回收率為98.24%，其RSD值為0.85%，結果表明本法具有良好的回收率。見表1。

表1回收率測定結果（略）

2.2.9樣品測定取10批樣品，分別制備供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，以上述色譜條件測定，記錄芍藥苷峰面積值，按外標法計算芍藥苷含量。根據(jù)10批樣品含量測定結果，暫定成品中含白芍以芍藥苷（C23H28O11）計，每克不得少于0.2mg。

圖4缺白芍陰性樣品色譜圖（略）

圖5芍藥苷對照品色譜圖（略）

圖6養(yǎng)血調經(jīng)膏樣品色譜圖（略）

3討論

在人參的鑒別實驗中，曾采用：（1）氯仿醋酸乙酯甲醇水（15∶40∶22∶10）10℃以下放置的下層溶液［1］（2）正丁醇醋酸乙酯水（4∶1∶5）［2］的上層溶液為展開劑，均為斑點不夠清晰，故采用本法中的展開劑。

在甘草的鑒別實驗中，由于甘草中含有黃酮類成分，具有酚羥基，故在供試液制備時采用了上聚酰胺柱，使其與不含酚羥基的成分分離［3］；用水洗脫，去除部分親水性雜質，減少TLC斑點，有利于甘草有效成分的分離；曾采用：（1）氯仿甲醇水（13∶7∶2）10℃以下放置分層的下層溶液；（2）氯仿甲醇溶液（9∶1）為展開劑，均不如本法中的展開劑分離效果好，斑點清晰，故采用本法中的展開劑。

芍藥苷流動相的選擇，曾選用甲醇-水-冰醋酸（20∶80∶1）和乙腈水冰醋酸（10∶90∶1）為流動相，出峰時間較晚，效果均不理想，最后選用乙腈1%醋酸（14∶86）為流動相，其保留時間合適且峰型較好，達到基線分離，且陰性對照無干擾（圖4～6），故選用乙腈1%醋酸（14∶86）為流動相。

【參考文獻】

［1］國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學工業(yè)出版社，2005：69，479，527，附錄VIB.

［2］呂開清，龍新華.中成藥中的藥材薄層色譜鑒別［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：20，167.

［3］肖崇厚.中藥化學［M］.上海：上海科學技術出版社，1996：271，280.