導(dǎo)語(yǔ)：習(xí)用金銀花抑菌功能論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀(guān)點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢(xún)客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的探討川產(chǎn)習(xí)用金銀花的抑菌作用。方法平板打孔法。結(jié)果川產(chǎn)習(xí)用金銀花在體外對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、福氏志賀菌、卡他球菌有比較明顯的抑制作用，對(duì)溶血性鏈球菌和鼠傷寒沙門(mén)菌不太敏感。結(jié)論為川產(chǎn)習(xí)用金銀花的利用和深入研究提供了科學(xué)參考。

【關(guān)鍵詞】川產(chǎn)習(xí)用品種；金銀花；體外抑菌;平板打孔法

前言

金銀花FlosLonicerae為常用中藥，具有清熱解毒、通經(jīng)活血、疏風(fēng)散熱之功效。2005年版《中國(guó)藥典》規(guī)定金銀花為忍冬科Caprifoliaceae植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初開(kāi)的花，但我國(guó)作為中藥金銀花流通及使用的品種卻是復(fù)雜的［2］。四川地處西南，為我國(guó)金銀花主要產(chǎn)區(qū)之一，品種比較復(fù)雜。為了客觀(guān)評(píng)價(jià)其品質(zhì)，我們測(cè)定了川產(chǎn)金銀花主要有效成分綠原酸的含量。本實(shí)驗(yàn)以道地正品金銀花河南密縣“密銀花”作對(duì)照，用平板打孔法對(duì)川產(chǎn)金銀花品種細(xì)氈毛忍冬L.similisvar.similis，淡紅忍冬L.acuminata，紅腺忍冬L.hypoglauca，峨嵋忍冬L.similisvar.omeiensis進(jìn)行了體外抑菌作用研究。

一、材料

1.1藥物川產(chǎn)習(xí)用金銀花細(xì)氈毛忍冬、淡紅忍冬、紅腺忍冬、峨嵋忍冬經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)萬(wàn)德光教授鑒定，“密銀花”委托河南中醫(yī)學(xué)院曹繼華教授采集鑒定。

1.2菌種金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）、溶血性鏈球菌（Staphylococcushaemolyticus）、大腸桿菌（Escherichiacoli）、福氏志賀菌（Shigellaflexneri）、鼠傷寒沙門(mén)菌（Salmonellatyphimurium）、肺炎球菌（pneumonococcus）由四川衛(wèi)生干部學(xué)院微生物教研室提供；卡他球菌（Branhamellacatarrhlis）、表皮葡萄球菌（Staphylococcusepidermidis）由成都中醫(yī)藥大學(xué)微生物教研室提供。

1.3試劑瓊脂粉和蛋白胨（購(gòu)自廣州海洋生物有限公司）、牛肉浸出粉（購(gòu)自靈武市泰運(yùn)生化制品有限公司）、脫纖維兔血（自制）、分析純氯化鈉等。

二、方法

2.1培養(yǎng)基的制備

2.1.1營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基取蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化鈉、蒸餾水，按《中國(guó)藥典》規(guī)定比例混合，微溫溶解后，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，濾清，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.2±0.2，在115℃滅菌30min。

2.1.2營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基照上述營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的處方及制法，按《中國(guó)藥典》規(guī)定比例加入適量瓊脂，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.2±0.2，在115℃滅菌30min。

2.1.3血瓊脂培養(yǎng)基將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化，待冷至50℃左右，以無(wú)菌操作加入10%無(wú)菌脫纖維兔血，搖勻，置冰箱備用。

2.2菌液的制備于實(shí)驗(yàn)前將上述保存菌種于相應(yīng)的瓊脂平板上劃線(xiàn)，于37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，取出，用白金環(huán)挑起典型菌落接種營(yíng)養(yǎng)肉湯管中，為了溶血性鏈球菌、肺炎球菌的生長(zhǎng)，后二者需要在血瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)37℃下培養(yǎng)24h，將菌液稀釋成1×107cfu·ml-1，供實(shí)驗(yàn)備用。公務(wù)員之家:

2.3供試液的制備稱(chēng)取川產(chǎn)習(xí)用金銀花藥材及“密銀花”各5g，分別加蒸餾水適量，煎煮3次，第1次40min，后兩次各30min，分別合并水煎液，濃縮至6ml，分別定容于消過(guò)毒的10ml容量瓶中，各得500mg·ml-1的供試液，冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.4抑菌實(shí)驗(yàn)將溶血性鏈球菌、肺炎球菌菌液0.1ml滴在血瓊脂培養(yǎng)基上，其它菌液0.1ml滴在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，用無(wú)菌L型玻棒涂布均勻。用6mm直徑打孔器打孔，每平板打孔3個(gè)，除取孔內(nèi)瓊脂，并向每孔內(nèi)加藥液約0.1ml，放置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h，觀(guān)察并記錄抑菌環(huán)直徑。結(jié)果見(jiàn)表1。表1抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）

三、小結(jié)

參照《微生物和檢驗(yàn)技術(shù)》判定結(jié)果，抑菌圈直徑≥20mm為高敏；抑菌圈直徑為10～19mm為中敏；抑菌圈直徑<10mm為鈍敏?？梢?jiàn)川產(chǎn)4種習(xí)用金銀花對(duì)金黃色葡萄球菌高敏，而“密銀花”對(duì)其為中敏；5種金銀花對(duì)溶血性鏈球菌和鼠傷寒沙門(mén)菌基本都為鈍敏（抑菌環(huán)直徑?jīng)]有大于10mm）；肺炎球菌對(duì)峨嵋忍冬高敏，對(duì)細(xì)氈毛忍冬和紅腺忍冬中敏，對(duì)淡紅忍冬和“密銀花”鈍敏；卡他球菌對(duì)紅腺忍冬和峨嵋忍冬高敏，對(duì)其它3種金銀花中敏；表皮葡萄球菌對(duì)峨嵋忍冬高敏，對(duì)細(xì)氈毛忍冬和淡紅忍冬中敏，對(duì)紅腺忍冬和“密銀花”鈍敏；大腸桿菌對(duì)細(xì)氈毛忍冬和峨嵋忍冬高敏，對(duì)其它3種金銀花中敏；福氏志賀菌對(duì)細(xì)氈毛忍冬、淡紅忍冬和峨嵋忍冬高敏，對(duì)其它兩種金銀花中敏。

【參考文獻(xiàn)】

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典,Ⅰ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：152.

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［3］茍占平，萬(wàn)德光.HPLC法測(cè)定5種1變種金銀花中綠原酸含量［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2004，11（5）：421.

［4］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典,Ⅱ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄83.

［5］王彩玉.常用細(xì)菌培養(yǎng)基制備及注意事項(xiàng)［J］.衛(wèi)生職業(yè)教育，2004，23（12）：102.

［6］楊建江，韓文瑜，杜銳，等.30種中草藥對(duì)耐藥性豬鏈球菌的抑菌試驗(yàn)［J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2004，23（2）：14.