養(yǎng)殖魚類細(xì)菌性敗血癥防制研究
時(shí)間:2022-09-10 09:17:05
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摘要:本文以網(wǎng)箱養(yǎng)殖魚類為研究對象,通過大量實(shí)驗(yàn)探索細(xì)菌性敗血癥的治療方法,解決一直困擾著廣大漁民的一個(gè)難題,取得了一定的療效。
關(guān)鍵詞:網(wǎng)箱養(yǎng)殖魚類;細(xì)菌性敗血癥;治療
淡水養(yǎng)殖魚類細(xì)菌性敗血癥是一種由細(xì)菌引起的淡水魚暴發(fā)病,病原屬于氣單胞菌目(Aeromonadales)、氣單胞菌科(Aeromonadaceae)、氣單胞菌屬(Aeromonas)的嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila),嗜水氣單胞菌革蘭陰性短桿菌,菌中存在的溶血素、胞外蛋白酶等多種生化物質(zhì)是致病因子,其中血溶素是主要的致病因子,可引起血細(xì)胞溶解、腸道和肝脾等重要器官病變壞死,最終引起魚體死亡。自2017年5月份以來,南陽市淡水養(yǎng)殖魚類細(xì)菌性敗血癥發(fā)病率一直較高,尤其是網(wǎng)箱養(yǎng)殖占80%以上,個(gè)別水域甚至達(dá)到100%,并有25%~30%的死亡率。為了綜合防制淡水養(yǎng)殖魚類細(xì)菌性敗血癥,對臨床病例進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀及病理剖檢診斷,使用實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌培養(yǎng)方法確診該病的病原。采用流行病學(xué)方法進(jìn)行流行情況調(diào)查,摸清其流行原因。篩選防制藥物,測定不同濃度藥物的治療效果,制定綜合防制方案,以期盡早控制該病,為淡水養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展提供技術(shù)支持。
1材料與方法
1.1病料組織樣品于2017、2018采集于鎮(zhèn)平、南召、淅川3個(gè)縣區(qū)的3個(gè)水庫發(fā)病的網(wǎng)箱淡水養(yǎng)殖魚類,主要魚種有鰱、鳙、鯉、草魚等,病料樣品為不同品種發(fā)病魚的鰓絲及臟器,采集后于-20℃保存?zhèn)溆谩?.2實(shí)驗(yàn)室診斷1.2.1材料:油鏡顯微鏡、培養(yǎng)箱、普通培養(yǎng)基、蓋玻片、載玻片、接種環(huán)、革蘭氏染色液。1.2.2方法:細(xì)菌平板劃線分離培養(yǎng)法。1.2.3操作步驟1.2.3.1細(xì)菌分離培養(yǎng):采取病魚的鰓絲、臟器,接種普通培養(yǎng)基后,37℃培養(yǎng)24小時(shí),觀察菌落生長情況。1.2.3.2顯微鏡觀察:做涂片,革蘭氏染色,觀察細(xì)菌。1.3藥物(或不同濃度)的篩選與應(yīng)用1.3.1試驗(yàn)藥物及用法氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉):全網(wǎng)箱潑灑,每立方米水體用量0.3g,連用3d;呋喃唑酮(硝基呋喃類抗生素):每100kg魚重用藥3~5g,拌入2.5~3kg餌料內(nèi),制成藥餌投喂,每天一次,連用5~7d;蒽諾沙星(氟奎諾酮類抑菌劑):每100kg魚重用藥5~10g,拌入2.5~3kg餌料內(nèi),制成藥餌投喂,每天一次,連用5~7d。氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉):全網(wǎng)箱潑灑,每立方米水體用量0.6g,連用3d;氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉):全網(wǎng)箱潑灑,每立方米水體用量1.2g,連用3d。1.3.2試驗(yàn)分組對照組:使用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉)潑灑(0.3g/m3水體)進(jìn)行治療;試驗(yàn)1組:使用呋喃唑酮藥餌治療;試驗(yàn)2組:使用恩諾沙星藥餌治療;試驗(yàn)3組:使用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉)潑灑(0.6g/m3水體)治療;試驗(yàn)4組:使用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉)潑灑(1.2g/m3水體)治療。
2結(jié)果與分析
2.1臨床診斷。2.1.1感染品種:通過對幾個(gè)水庫網(wǎng)箱發(fā)病情況的大量調(diào)查,發(fā)現(xiàn)危害對象主要是鰱、鳙、鯉魚,少數(shù)草魚,而且鯉魚一旦發(fā)病,如不及時(shí)控制,死亡率可達(dá)50%。感染年齡:從夏花魚種到成魚均可感染,以2齡成魚為主。2.1.2病理變化:病魚隨感染程度不同,可出現(xiàn)紅細(xì)胞腫大、胞漿內(nèi)嗜伊紅顆粒大量出現(xiàn),胞漿透明化和溶血過程;血管管壁扁平內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、變性、壞死和解體,最終出現(xiàn)毛細(xì)血管破損;肝、脾和腎等實(shí)質(zhì)器官出現(xiàn)被膜病變,間皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞腫脹,膠原纖維等出現(xiàn)壞死、腫脹和纖維素樣變,最后大量彌漫性壞死;被膜也發(fā)生變性、壞死和出血;心肌纖維腫脹、顆粒變性和肌原纖維不清晰,最終心內(nèi)膜基本壞死。2.2實(shí)驗(yàn)室診斷。發(fā)現(xiàn)呈圓形、邊緣整齊、中央隆起、表面光滑、灰白色、半透明狀的菌落;鏡檢為革蘭染色陰性菌,兩端鈍圓、直或略彎的短小桿菌。2.3藥物(或不同濃度)的篩選與應(yīng)用。2.3.1篩選:試驗(yàn)結(jié)果見表1、表2和表3。2.3.2應(yīng)用:從試驗(yàn)結(jié)果來看,使用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉)潑灑(1.2g/m3水體)治療效果較為理想。因?yàn)樵诘B(yǎng)殖中投喂藥物必須拌料,拌料又必須把干燥的顆粒飼料重新加水,降低了飼料入水以后的保持形狀的時(shí)間,影響藥物的吸收量,另外魚一旦發(fā)病,攝食量下降,間接也影響了藥物的效果;而潑灑藥物是很常用的一種治療方法,治療池塘魚病的藥物濃度比較清晰,但對治療網(wǎng)箱魚病的濃度從未見到過明確的報(bào)道,通過實(shí)踐,確定了對網(wǎng)箱魚類潑灑藥物的正確濃度(池塘藥物濃度的4倍),解決了一個(gè)長期困擾治療淡水養(yǎng)殖網(wǎng)箱魚類細(xì)菌性敗血癥的難題。
3綜合防制的建議
控制淡水養(yǎng)殖網(wǎng)箱魚類細(xì)菌性敗血癥的關(guān)鍵是養(yǎng)殖水域的環(huán)境衛(wèi)生和藥物預(yù)防,消滅魚病暴發(fā)的條件。3.1建立良好的消毒制度:魚種盡量就地培育,減少搬運(yùn),并注意下塘前要進(jìn)行魚體消毒。可用15~20mg/L濃度的高錳酸鉀水溶液藥浴10~30min;發(fā)病魚用過的工具要進(jìn)行消毒,耐腐蝕用具浸泡到盛水的水槽中,加入次氯酸鈣使有效游離氯至少達(dá)到200mg/L,靜置過夜;流行季節(jié),用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉),全網(wǎng)箱潑灑,每立方米水體用量1.2g,每半個(gè)月1次,對水體消毒。3.2做好水域環(huán)境衛(wèi)生工作是預(yù)防的關(guān)鍵:民間有漁民用熬制的煙葉兌硫酸酮(每立方米水體用量2mg)定期潑灑網(wǎng)箱對預(yù)防疾病有很好的效果。3.3加強(qiáng)日常管理:正確掌握投飼技術(shù),不投喂變質(zhì)飼料,提高魚體抵抗力;病魚死魚要及時(shí)撈出就地加石灰深埋而不能到處亂扔。
4討論與小結(jié)
4.1關(guān)于診斷。使用臨床診斷與細(xì)菌培養(yǎng)鏡檢相結(jié)合的方法,確診淡水養(yǎng)殖網(wǎng)箱魚類細(xì)菌性敗血癥,該法簡便易行,準(zhǔn)確率高。但需要注意與草魚出血病的區(qū)別,由于臨床出血癥狀相似易帶來混淆,因此,在分析的同時(shí)一定要做好區(qū)別診斷工作。發(fā)病魚的品種不同:本病鯉魚感染率高;草魚出血病草魚感染率高。細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果不同:本病可培養(yǎng)出兩端鈍圓、直或略彎的短小桿菌,革蘭染色陰性;草魚出血病培養(yǎng)不出細(xì)菌。用藥效果不同:本病用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉)潑灑很容易控制;草魚出血病用同樣的方法,很難見到療效。南京農(nóng)業(yè)大學(xué)陳懷青、陸承平等在1991研制出嗜水氣單胞菌毒素檢測試劑盒,可在3~4h內(nèi)作出正確診斷。4.2關(guān)于藥物篩選與評價(jià)。對照組:從以上五組試驗(yàn)對比情況來看,使用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉)潑灑(0.3g/m3水體)進(jìn)行治療效果不理想,由于所用的濃度是針對淡水養(yǎng)殖池塘魚類細(xì)菌性敗血癥治療很有效的,但對發(fā)病的網(wǎng)箱魚類得不到有效控制。試驗(yàn)2、3組:使用呋喃唑酮和蒽諾沙星藥餌治療;在實(shí)際工作操作中非常麻煩,必須連續(xù)用藥5~7d,增加漁民的工作量,而且藥物必須摻水兌在顆粒飼料中,造成飼料入水后很容易散開,既浪費(fèi)飼料又保障不了魚需要攝食的藥物濃度,再加上健康魚搶食能力強(qiáng),病魚搶食能力弱,真正需要治療的魚類得不到足夠的藥物,從試驗(yàn)情況來看效果也不理想。試驗(yàn)4組:使用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉),全網(wǎng)箱潑灑,每立方米水體用量0.6g,操作方便,從試驗(yàn)情況來看,較對照組要好些,但還不理想。試驗(yàn)5組:使用氯殺靈(二氯異氰脲酸鈉),全網(wǎng)箱潑灑,每立方米水體用量1.2g,操作方便,從試驗(yàn)情況來看,較對照組和試驗(yàn)4組效果顯著,每天一次,連用三天后可基本該病的發(fā)展。存在不足與改進(jìn)措施:氯殺靈必須現(xiàn)用現(xiàn)配,越盡快潑灑藥效越好;配制時(shí)必須先倒水后倒藥,順序不能顛倒,否則會(huì)發(fā)生爆炸;沒有用完的氯殺靈必須用塑料袋密封保存,以免影響藥效。4.3關(guān)于綜合防制。4.3.1高溫季節(jié)長期不關(guān)注水質(zhì)調(diào)控,造成養(yǎng)魚水域的氨氮、亞硝酸鹽含量很高,是誘發(fā)該病最直接因素。因此要制定嚴(yán)格的消毒預(yù)防制度,防止疾病的暴發(fā)。4.3.2養(yǎng)殖戶缺乏防病意識(shí),亂扔病死魚導(dǎo)致天然水域病原體增多引發(fā)疾病,因此發(fā)現(xiàn)病魚應(yīng)及時(shí)撈出,就地加生石灰深埋,;4.3.3魚體體質(zhì)下降也是致病原因之一,平時(shí)要正確掌握投飼技術(shù),不投喂變質(zhì)飼料,提高魚體抵抗力。4.3.4近親繁殖,導(dǎo)致魚種體質(zhì)下降,因此應(yīng)選育優(yōu)良品質(zhì)魚種進(jìn)行網(wǎng)箱養(yǎng)殖,而且密度不宜過大。4.3.5對淡水養(yǎng)殖池塘魚類細(xì)菌性敗血癥的研究國內(nèi)有一些,某人自行從市場購入廣東生產(chǎn)的興棉寶除蟲菊類(1000ml/瓶、10%乳油)2瓶,甲胺磷(370g/瓶50%乳油)20瓶,樂果(338g/瓶10%乳油)10瓶。2005年6月22日中午,將買來藥物混合化水后全池潑灑,折合全塘的使用濃度為0.3ppm其中興棉寶0.05ppm、甲胺磷0.18ppm、樂果0.08ppm,三種農(nóng)藥的用量比例是:興棉寶∶甲胺磷∶樂果10∶37∶17。結(jié)果下藥的第二天只死了5kg,第三天基本停止了死魚。但對淡水養(yǎng)殖網(wǎng)箱魚類細(xì)菌性敗血癥的研究還非常少,對池塘全池潑灑很有效的濃度對網(wǎng)箱試用,效果卻很不理想有,有待于在生產(chǎn)實(shí)際中進(jìn)一步探索。4.3.6網(wǎng)箱一般都設(shè)在水庫的叉灣處,漁民聯(lián)合定期對叉灣的水域用生石灰消毒,對調(diào)節(jié)養(yǎng)殖水域的水質(zhì)和預(yù)防疾病都有積極的作用。
總之,隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化程度的提高,養(yǎng)殖水環(huán)境的逐漸惡化,病害問題已經(jīng)越來越嚴(yán)重。因此,應(yīng)當(dāng)將淡水養(yǎng)殖網(wǎng)箱魚類細(xì)菌性敗血癥的防制提到養(yǎng)魚生產(chǎn)管理的議事日程中,避免由此造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。淡水養(yǎng)殖網(wǎng)箱魚類細(xì)菌性敗血癥一旦發(fā)病來勢兇猛,如果及時(shí)治療能夠控制疾病蔓延,但是病重的魚成批死亡很難避免,經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重,所以做好平時(shí)的日常管理和定期消毒,預(yù)防該病的暴發(fā)才是重中之重的事情。
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作者:鄧奇志 單位:河南省南陽農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院
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