光合細(xì)菌浸種對(duì)水稻種生長影響
時(shí)間:2022-07-10 11:13:32
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光合細(xì)菌(photosyntheticbacteria,簡稱PSB)是地球上出現(xiàn)最早、自然界中普遍存在、具有原始光能合成體系的原核生物,是一類以光為能源,在厭氧光照或好氧黑暗條件下利用自然界中有機(jī)物、硫化物、氨氮等為營養(yǎng)進(jìn)行生長和繁殖的微生物[1-2],具有固氮、固碳及氧化分解硫化物和胺類等有毒物質(zhì)的生理生態(tài)特性,其菌體富含多種生理活性物質(zhì)及促生長因子,一些活性菌株還含有抗病毒物質(zhì)[3-4]。目前,光合細(xì)菌已在水產(chǎn)、環(huán)保、醫(yī)藥等方面得到廣泛應(yīng)用[5-9],在農(nóng)業(yè)方面也有相關(guān)研究[10-13]。光合細(xì)菌對(duì)作物生長發(fā)育有促進(jìn)作用,并能促進(jìn)種子萌發(fā),這在小麥、棉花等方面已有相關(guān)研究[14-15]。但光合細(xì)菌與水稻種子萌發(fā)間的關(guān)系目前未見報(bào)道,以水稻品種龍慶稻1號(hào)為材料,研究光合細(xì)菌對(duì)水稻種子萌發(fā)的影響,旨在了解光合細(xì)菌浸種后,水稻種子萌發(fā)過程中生理生化變化,為光合細(xì)菌在水稻上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1材料與方法
1.1供試材料
以水稻品種龍慶稻1號(hào)為供試材料。光合細(xì)菌菌株BYND1是從八一農(nóng)墾大學(xué)舊址魚塘水中經(jīng)富集、分離純化獲得,經(jīng)初步鑒定為沼澤紅假單胞菌。BYND1菌株在缺氧、光照條件下培養(yǎng),在固體平板上,菌落圓凸形,表面濕潤光滑,邊緣整齊,紫紅色;液體培養(yǎng)物的顏色在培養(yǎng)初期淺粉紅色,逐漸變?yōu)榧t色,最后到紫紅色。革蘭氏染色反應(yīng)陰性。BYND1菌株在黑暗好氧、光照好氧下均能生長并形成葉綠素和類胡蘿卜素,培養(yǎng)物呈紅色。光合細(xì)菌菌液采用改良71#培養(yǎng)基,30℃、2000Lx光強(qiáng)光照、厭氧培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間為48h,光合細(xì)菌菌數(shù)約為1010/mL,其檢測方法為平板菌落計(jì)數(shù)法。
1.2試驗(yàn)方法
試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理,分別為PSB發(fā)酵液、用水稀釋10倍的發(fā)酵液、用水稀釋100倍的發(fā)酵液、改良的71#培養(yǎng)基和蒸餾水,處理號(hào)分別為A、B、C、D、E,其中D和E為對(duì)照。選取均勻飽滿的種子,分別用各處理菌液浸種24h后,將種子置于鋪有濾紙的培養(yǎng)皿上萌發(fā),每個(gè)處理5個(gè)皿,每皿100粒種子,萌發(fā)7d。
1.3測定項(xiàng)目與方法
從第2天開始,每天測定種子發(fā)芽率。種子發(fā)芽率=發(fā)芽種子數(shù)/總種子數(shù)×100%;淀粉酶測定方法取剩余種子中胚乳1g,采用3,5-二硝基水楊酸比色法測定α-淀粉酶、β-淀粉酶、(α+β)淀粉酶活性[16];采用考馬斯亮藍(lán)G-250法測定可溶性蛋白含量[17];采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法測定丙二醛(MDA)含量[17]。
1.4數(shù)據(jù)處理
采用DPS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。
2結(jié)果與分析
2.1光合細(xì)菌浸種對(duì)水稻發(fā)芽率的影響
由表1看出,光合細(xì)菌對(duì)水稻發(fā)芽有很大影響,隨時(shí)間推移水稻發(fā)芽率逐漸增加,第1~3天,蒸餾水處理的水稻種子發(fā)芽率最高,光合細(xì)菌原液處理的種子發(fā)芽率最低,不同處理間差異達(dá)到極顯著水平,說明光合細(xì)菌對(duì)種子發(fā)芽有抑制作用;但從第4天開始,稀釋100倍的光合細(xì)菌處理C發(fā)芽率最大,高于對(duì)照D和E,說明一定濃度的光合細(xì)菌菌液能夠提高種子發(fā)芽率。
2.2光合細(xì)菌浸種對(duì)水稻芽長的影響
由表2看出,水稻芽長隨天數(shù)增加逐漸增長,從第5天開始光合細(xì)菌菌液稀釋10倍和100倍的水稻芽長處理要長于對(duì)照處理,第7天各處理均高于對(duì)照,稀釋100倍的水稻芽長最長,達(dá)到3.38cm,不同處理間水稻芽長未達(dá)到顯著水平。
2.3光合細(xì)菌浸種對(duì)水稻種子淀粉酶活性的影響
由表3看出,不同處理α-淀粉酶活性從種子發(fā)芽第1天開始呈逐漸升高趨勢,水稻萌發(fā)前3d,原液處理的α-淀粉酶活性低于對(duì)照,到萌發(fā)后期,光合細(xì)菌處理的水稻種子α-淀粉酶活性高于對(duì)照,各處理中以光合細(xì)菌稀釋100倍處理的α-淀粉酶活性最高,從第2天開始各處理間差異達(dá)到極顯著水平。由表4看出,種子萌發(fā)前3d,各處理間β-淀粉酶活性差異較小,從第4天開始,各處理間β淀粉酶活性差異較大,稀釋10倍和100倍的光合細(xì)菌液處理的種子β-淀粉酶活性要高于對(duì)照。從淀粉酶總體活性來看,在種子萌發(fā)過程中,不同處理間差異達(dá)到顯著或極顯著水平。水稻種子從萌發(fā)第1天開始,淀粉酶活性最低,隨著萌發(fā)時(shí)間延長,淀粉酶活性逐漸升高,光合細(xì)菌處理的總淀粉酶活性要高于對(duì)照,總淀粉酶活性隨種子萌發(fā)率的升高而升高,在萌發(fā)第4天,總淀粉酶活性與種子萌發(fā)率相關(guān)性達(dá)到顯著水平(r=0.895*),說明種子萌發(fā)與淀粉酶活性呈正相關(guān),淀粉酶活性越高越利于種子萌發(fā),這與冉景盛的研究一致[18]。
2.4光合細(xì)菌浸種對(duì)水稻種子可溶性蛋白含量的影響
表6可以看出,稀釋100倍處理的水稻種子萌發(fā)過程中,可溶性蛋白含量在水稻萌發(fā)前3d高于對(duì)照組,差異達(dá)到極顯著水平;之后對(duì)照組的可溶性蛋白含量高于光合細(xì)菌處理,差異也達(dá)到極顯著水平,說明適當(dāng)濃度的PSB浸種會(huì)提早水稻種子萌發(fā)過程中酶的積累,進(jìn)而加速物質(zhì)代謝和轉(zhuǎn)化。
2.5光合細(xì)菌浸種對(duì)水稻種子MDA含量的影響
表7可以看出,在種子萌發(fā)過程中,MDA變化趨勢是隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,各處理MDA含量都呈先緩慢上升,第4天開始迅速上升,第7天有下降的趨勢,不同稀釋度的PSB菌液浸種后,MDA含量均低于對(duì)照組,尤其是第6天和第7天,各處理組極顯著低于對(duì)照組,說明經(jīng)PSB浸種后在種子萌發(fā)過程中降低了脂膜氧化程度,在一定程度上起到了保護(hù)和修復(fù)細(xì)胞膜的作用。
3討論
光合細(xì)菌除富含營養(yǎng)物質(zhì)外,還含有促生長和抗病毒等多種重要活性物質(zhì),以其獨(dú)特的功能在各研究領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。尤其在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中,光合細(xì)菌作為一種生長調(diào)節(jié)劑對(duì)于解除種子休眠、促進(jìn)種子萌發(fā)起到一定作用[13-15]。本研究中,一定濃度的光合細(xì)菌對(duì)種子萌發(fā)起到了促進(jìn)作用,提高了種子發(fā)芽率、促進(jìn)芽的生長。研究得出,適當(dāng)濃度的光合細(xì)菌含量可以增加水稻種子中淀粉酶的總體活性和可溶性蛋白的含量,降低種子中MDA的含量。
當(dāng)然,光合細(xì)菌菌液濃度過高時(shí),對(duì)水稻種子萌發(fā)也有抑制傾向,這是因?yàn)榻N主要是為了增加種子中的水分,激活種子的生命活動(dòng),促進(jìn)種皮和胚對(duì)水分的吸收,軟化種皮,提高種子的呼吸強(qiáng)度,促進(jìn)養(yǎng)分的分解,加速發(fā)芽[19]。而高濃度的光合細(xì)菌菌液浸種會(huì)使種子吸水不完全,不能完全激活種子的生命活動(dòng),但是,光合細(xì)菌發(fā)酵液中含有許多生理活性物質(zhì),會(huì)觸發(fā)和推動(dòng)水解、氧化途經(jīng),修補(bǔ)早期的代謝缺乏[20]。因此,在萌發(fā)過程中,適當(dāng)濃度的光合細(xì)菌處理后,水稻種子的一些指標(biāo)會(huì)優(yōu)于對(duì)照組。
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