導語：如何才能寫好一篇干細胞治療，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

干細胞是具有自我復制和多向分化潛能的原始細胞，是機體的起源細胞， 是形成人體各種組織器官的原始細胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞或組織器官，醫(yī)學界稱其為“萬用細胞”。

■干細胞能治療哪些疾??？

干細胞可以治療的疾病有： 血液系統(tǒng)疾病，免疫系統(tǒng)疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾?。òㄟ\動神經(jīng)元病，腦癱，多發(fā)性硬化，脊髓損傷后的截癱，遺傳性共濟失調(diào)），糖尿病足，股骨頭壞死，腦血管疾病，下肢缺血性疾病，心血管疾病等等。

■干細胞治療安全性及效果如何？

因為干細胞是一種未分化、未成熟的細胞，患者自身的免疫系統(tǒng)對這種未分化細胞的識別能力很低，從而避免了器官移植引起的免疫排斥反應及過敏反應等，使同種異體移植神經(jīng)干細胞變得非常安全。目前，干細胞研究完成了干細胞的臨床前全套安全性實驗，包括急性毒性試驗、長期毒性試驗、致瘤性試驗致畸性試驗、局部刺激試驗、發(fā)熱試驗和免疫毒性試驗。結(jié)果表明，干細胞臨床應用是安全、無毒的。在臨床研究中，經(jīng)過大量的臨床病例研究表明，干細胞治療除了極少數(shù)病人有輕微的發(fā)熱、頭痛外，無嚴重不良反應發(fā)生。

■什么是間充質(zhì)干細胞？

間充質(zhì)干細胞是干細胞家族的重要成員，在體內(nèi)或體外特定的誘導條件下，可分化為脂肪、骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經(jīng)、 肝、心肌、內(nèi)皮等多種組織細胞，連續(xù)傳代培養(yǎng)和冷凍保存后仍具有多向分化潛能，可作為理想的種子細胞用于衰老和病變引起的組織器官損傷修復。

■什么是自體骨髓間充質(zhì)干細胞移植？

利用病人自體的骨髓，通過體外分離、純化，將獲得的骨髓間充質(zhì)干細胞回輸以用來治療多種疾病稱為自體骨髓間充質(zhì)干細胞移植。自體骨髓間充質(zhì)干細胞移植已被廣泛用來治療多種神經(jīng)系統(tǒng)損傷性疾病，相對于神經(jīng)干細胞移植，由于不存在供體受限的問題，目前備受青睞。

■哪些病人可以做自體骨髓間充質(zhì)細胞移植？

自體骨髓間充質(zhì)細胞移植可用來治療各種難治性神經(jīng)系統(tǒng)損傷性疾病，包括脊髓損傷，截癱患者； 腦癱，小腦萎縮； 腦外傷，腦卒中（出血和梗塞），腦炎后遺癥如腦外傷、腦中風導致的長期昏迷、偏癱、失語、精神焦慮、抑郁等后遺癥

神經(jīng)系統(tǒng)退行性病，包括運動神經(jīng)元病如肌萎縮側(cè)索硬化癥，帕金森氏病、阿爾茨海默氏病，遺傳性橄欖橋腦萎縮（OPCA）等。

另外，也可用來治療外周動脈及下肢缺血性疾病，糖尿病及糖尿病足，股骨頭壞死及骨軟化癥， 血管性末梢神經(jīng)炎等難治性疾病。

■自體骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的原理是什么？

神經(jīng)系統(tǒng)很多疾病發(fā)生的原理是神經(jīng)細胞或組織變性死亡，功能減弱或喪失。干細胞具有能夠分裂增殖和向多種細胞分化的生物學特性及能力。所以，通過干細胞移植來替代、修復患者損失的細胞，恢復細胞組織功能，達到治療疾病的目標。自體骨髓間充質(zhì)干細胞移植可能通過：替代作用；神經(jīng)營養(yǎng)作用而達到治療的效果。

■自體骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療的禁忌癥有哪些？

① 高度過敏體質(zhì)或者有嚴重過敏史者 ；

②休克或全身衰竭生命體征不正常及不配合檢查者；

③晚期惡性腫瘤；

④全身感染或局部嚴重感染需抗感染康復后；

⑤合并心、肺、肝、腎等重要臟器的功能障礙；

⑥凝血功能障礙如血友??；

⑦血清學檢查陽性者如艾滋病、乙肝、梅毒等；

⑧染色體或基因缺陷，免疫功能缺陷；

⑨極個別的期望值過高，或者不切合實際的要求者。

■除了自體骨髓間充質(zhì)干細胞治療各種難治性神經(jīng)系統(tǒng)損傷性疾病，還有哪些難治性神經(jīng)系統(tǒng)疾病可以治療？

多發(fā)性硬化，以及惡性膠質(zhì)瘤也可以通過自體免疫細胞回輸?shù)玫捷^好的治療。

■自體骨髓間充質(zhì)干細胞的一般移植療程？

病人首先看干細胞治療中心門診。門診行各項常規(guī)檢查后符合條件的患者將入院一天，完成自體骨髓間充質(zhì)干細胞采集工作，當天患者可出院。

自體骨髓間充質(zhì)干細胞將在國際GMP標準的實驗室里得到分離，純化，體外培養(yǎng)3～4周（根據(jù)患者細胞生長情況而定）。培養(yǎng)完成后患者將再入院一天，通過靜脈注射、腰穿或介入等方法將自體骨髓間充質(zhì)干細胞回輸至患者體內(nèi)。在治療后幾個星期內(nèi)，患者還不會看到或感覺到任何改變，當然也有部分患者可能很快就見到效果。在1個月內(nèi)，有時需要2個月的時間，患者應該可以感覺到癥狀減輕，活動能力增加。一般建議做3個療程，治療結(jié)束后隨訪3～6個月以及長期隨訪。

■干細胞移植治療有沒有副作用？如果有，包括哪些風險？

迄今，干細胞移植治療尚未導致重大的副作用或不良反應。但任何一種療法都可能會有副作用，所以無法肯定副作用不會發(fā)生，但是直到現(xiàn)在，都還未發(fā)現(xiàn)嚴重的副作用。僅有個別病人在腰穿后產(chǎn)生穿刺部位疼痛、輕微頭昏、頭痛及低度發(fā)熱等。

■干細胞移植治療后有無后遺癥？治療后效果持續(xù)時間是多長？

治療后一般沒有后遺癥，干細胞移植后會在患者體內(nèi)長期存活，但其療效則根據(jù)原發(fā)病的不同也不盡相同。對于原致病因素已經(jīng)消除的患者來說，可能會長期有效，但對于致病因素持續(xù)存在的患者而言，則由于致病因素的持續(xù)破壞，其療效難以長期維持，但可以延緩疾病發(fā)展的速度。

篇2

【關鍵詞】帕金森病，干細胞治療，文獻綜述

帕金森病又名震顫麻痹，是一種由于黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元等進行性變性缺失所致的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，隨著人口的老年化，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢。2006年中華醫(yī)學會神經(jīng)病學分會運動障礙及帕金森組制定的診斷標準［1-2］：①運動減少。②至少符合以下1項：a：肌肉僵直；b：靜止性震顫；c：姿勢不穩(wěn)。③至少符合以下4項中的3項：a：單側(cè)起??；b：靜止性震顫；c：逐漸進展；d：發(fā)病后多為持續(xù)性不對稱性受累。盡管近10多年對帕金森病的發(fā)病機制認識及治療手段探索均有長足的進步，但尚無法對其徹底根治。近年來對神經(jīng)系統(tǒng)可塑性的研究及對神經(jīng)再生和干細胞的認識逐漸加深，干細胞工程迅速發(fā)展。干細胞由于具有自我更新能力和多向分化潛能的特性，運用干細胞移植治療帕金森病成為可能，極具發(fā)展前景和應用價值。

1 神經(jīng)干細胞的特點

1.1 神經(jīng)干細胞（NSCs）是一群能自我更新并具有多種分化潛能的細胞，它來源于神經(jīng)組織并可生成神經(jīng)組織，在適當條件下可分化成神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細胞和星形細胞。Ourednik等認為神經(jīng)干細胞是最適合于中樞神經(jīng)系統(tǒng)細胞的替代治療和基因治療的細胞。

1.2 神經(jīng)干細胞可直接來源于胚胎成年哺乳動物的腦組織。在補充適量的促有絲分裂試劑如堿性成纖維細胞生長因子、表皮生長因子或白血病抑制因子后，神經(jīng)干細胞可在無血清的或含血清的培養(yǎng)液中生長。另一個提高增殖和延長培養(yǎng)時間的方法是，在神經(jīng)元祖細胞中轉(zhuǎn)染增殖調(diào)節(jié)基因。V-myc基因可轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細胞，建立長久分化的神經(jīng)干細胞系。最近研究表明，源于胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)各區(qū)域的NSCs具有不同的分化潛能，中腦來源的NSCs（mesencephalic neural stem cells，mNSCs）更易于分化為DA神經(jīng)元，是細胞移植治療PD的理想細胞源。然而由于機體局部微環(huán)境的影響，僅少量mNSCs可在體內(nèi)分化為DA神經(jīng)元。

2 影響神經(jīng)干細胞分化的因素

首先，移植的神經(jīng)干細胞的分化受其本身內(nèi)在性質(zhì)的影響。其次，神經(jīng)干細胞所處的局部微環(huán)境因素和營養(yǎng)因素對神經(jīng)干細胞的分裂和分化也具有一定的誘導作用。移植干細胞的分化與所處環(huán)境的神經(jīng)類型和神經(jīng)發(fā)育階段有關。向體外培養(yǎng)的干細胞中加入不同組合的誘導因子如血清、組織提取液、各種細胞因子等，可使神經(jīng)干細胞繼續(xù)增值或向不同方向誘導分化。神經(jīng)干細胞自然分化為多巴胺能神經(jīng)元的比例只占細胞總數(shù)的0.5％～5％，而在一定條件下，神經(jīng)干細胞向多巴胺能神經(jīng)元分化的比例甚至可達到80％。一些因子在多巴胺能神經(jīng)元的分化中起作用。Nurrl和Ptx3等轉(zhuǎn)錄因子能夠調(diào)節(jié)神經(jīng)細胞向多巴胺能神經(jīng)元分化。膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial cell line derived neurotrophic factor，GDNF）是目前發(fā)現(xiàn)最強的DA神經(jīng)營養(yǎng)因子，然而由于血腦屏障和腦組織結(jié)構的特點，使其應用受到了限制［3］。

3 神經(jīng)干細胞移植后的生物學特性

Alcksandrova 等［4］將源于胚胎大鼠和人胚的神經(jīng)干細胞分別移植于新生及成年大鼠腦內(nèi)，于移植后1個月應用放射自顯影技術觀察，發(fā)現(xiàn)源于胚胎大鼠的神經(jīng)干細胞在移植到成年大鼠腦后并未停止發(fā)育，它能夠繼續(xù)分裂、遷移，形成神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞，免疫組化顯示它能夠表達特異性的神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)肽。將來源于8～12周胚胎的人神經(jīng)干細胞，移植前培養(yǎng)兩周，然后將其移植入大鼠腦內(nèi)，于移植后10～20d，光鏡下，所有的受體腦內(nèi)均可見培養(yǎng)的人神經(jīng)干細胞。成簇的移植細胞位于尾狀核、側(cè)腦室、白質(zhì)、腦皮質(zhì)，移植的細胞周圍可見巨噬細胞，但未見明顯的免疫反應。移植細胞的濃度從注射區(qū)向周圍逐漸減少干細胞中可見有絲分裂細胞，表明在新的微環(huán)境下干細胞仍有增殖潛能。大鼠和人神經(jīng)干細胞移植于成年大鼠腦后，表現(xiàn)相似的生物學行為并分化為神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞。移植后，兩者都可以連續(xù)地進行有絲分裂，從移植區(qū)遷移至受體腦的周圍組織。大鼠腦內(nèi)移植可作為人神經(jīng)干細胞發(fā)育的生物模型。Brustle等將源于8周人胚的神經(jīng)干細胞移植入大鼠胚胎腦室，也可見有神經(jīng)元的分化，移植細胞可以在軸突、神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞、少突膠質(zhì)細胞等各個水平廣泛整合。

成體中區(qū)神經(jīng)系統(tǒng)中存在神經(jīng)干細胞，也可以在體外培養(yǎng)擴增后移植到腦內(nèi)。從成鼠前腦室下帶中分離出神經(jīng)干細胞，然后進行單細胞克隆、擴增、收集，分別移植至大鼠切割海馬傘側(cè)和正常側(cè)的海馬齒狀回中，發(fā)現(xiàn)移植至海馬齒狀回中的神經(jīng)干細胞能夠存活，并可沿正常海馬齒狀回中固有的神經(jīng)干細胞遷移路徑即顆粒下層遷移。切割海馬傘側(cè)海馬內(nèi)存活和遷移的神經(jīng)干細胞明顯多于正常海馬內(nèi)的神經(jīng)干細胞。提示切割海馬傘側(cè)海馬齒狀回內(nèi)促進神經(jīng)干細胞的存活并誘導其遷移、分化的物質(zhì)增強。移植到小鼠嗅球的室管膜下區(qū)的神經(jīng)干細胞可與該處的神經(jīng)元發(fā)生廣泛的整合。將神經(jīng)干細胞移植入大鼠海馬，觀察到由神經(jīng)干細胞分化來的神經(jīng)元與宿主的神經(jīng)元形成功能性的突觸聯(lián)系，體外實驗也證實了這一點。所以，神經(jīng)干細胞有望從解剖和功能上對受到損傷或變性的腦組織進行修復。移植的神經(jīng)干細胞在大鼠腦內(nèi)表現(xiàn)多巴胺的特性。Villa等［5］報道，應用V-myc轉(zhuǎn)染的人胚神經(jīng)干細胞，可以建立人神經(jīng)干細胞系，使體外大量擴增神經(jīng)干細胞成為可能。

對于帕金森病，產(chǎn)生人多巴胺能神經(jīng)元是我們治療的主要目的。胚胎和成年腦組織干細胞均可產(chǎn)生多巴胺能神經(jīng)元，從而為帕金森病的移植治療提供細胞來源。在增殖時，這些細胞形成表達中樞神經(jīng)系統(tǒng)祖細胞標記（nestin）免疫活性的細胞球。在包含有IL-1b，IL-11，LIF和GDNF等分化介質(zhì)中可形成TH免疫活性的細胞，這些細胞表現(xiàn)為多巴胺能神經(jīng)元的形態(tài)學和功能的特性，包括多巴胺的產(chǎn)生和釋放。目前已經(jīng)培育出分化為酪氨酸羥化酶（TH）陽性細胞比例達98%的單克隆神經(jīng)干細胞系。這些細胞可進一步擴增，可在液氮中儲存，復蘇后可以重新擴增。這些單克隆細胞系移植后可產(chǎn)生更高的多巴胺水平。源于人胚胎中腦的神經(jīng)干細胞也可移植于被毀損的大鼠腦內(nèi)，成功地恢復多巴胺水平。

利用神經(jīng)干細胞作為基因治療的載體是一種新興的方法。在體外將外源基因?qū)肷窠?jīng)干細胞，再經(jīng)過培養(yǎng)、擴增，導入腦內(nèi)，可以廣泛用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病及腫瘤的治療。應用單個或多個外源基因?qū)ι窠?jīng)干細胞進行修飾，使其攜帶補充外源性多巴胺基因及營養(yǎng)因子基因，然后導入腦內(nèi)，可用于帕金森病和阿爾茨海默病的治療。植入的神經(jīng)干細胞受局部微環(huán)境的影響，在植入部位分裂增殖為相應的神經(jīng)細胞，補充和替代受損的細胞并與宿主的局部細胞整合，建立功能性突觸聯(lián)系；另一方面，外源基因在移植部位表達，發(fā)揮治療作用。Park等將NT-3（神經(jīng)營養(yǎng)素-3）轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細胞，發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)時分化為神經(jīng)元的比例可達90%，移植到梗死灶后，有20%的細胞可向神經(jīng)元方向分化，移植到缺血半暗帶后，向神經(jīng)元方向分化的比率可達80%。Ryu等［6］將TH聯(lián)合GTPCH-1基因修飾的C17.2系NSC移植到PD鼠模型紋狀體中，發(fā)現(xiàn)NSC能夠很好的存活、遷移和分化，并能明顯地改變動物行為。Kim等采用TH聯(lián)合GTPCH-1基因修飾的永生化系mNSC（HB1.F3）移植治療PD，能改善動物行為，并在移植區(qū)有大量的TH陽性細胞表達，表明NSC是基因治療PD的有效理想載體。研究發(fā)現(xiàn)孤兒核受體（Nurr1）基因可促進NSC系如C17.2分化為DA神經(jīng)元，減少其分化為膠質(zhì)細胞的比例。Nurr1基因修飾后的胚胎干細胞分化為DA神經(jīng)元的比例可從15%增至50%。這些神經(jīng)元能表達中腦特異性的標志物，包括TH，Ret，Pitx3，Enl；而且將這些神經(jīng)元移植到6-羥基多巴胺大鼠模型腦內(nèi)可產(chǎn)生功能性整合，并出現(xiàn)行為學改善。因而Nurr1基因的移植可通過增加外源性DA神經(jīng)元的數(shù)量對PD起治療作用。O’KeeffeFE等［7］過度表達Pirx3于NSCs中，然后暴露于E11，這導致多巴胺能神經(jīng)元細胞分化的明顯增強，再植入6-羥基多巴胺毀損帕金森病大鼠腦內(nèi)，導致明顯運動功能恢復。另外，有大量Girkz陽性NSC起源的A9神經(jīng)元在移植周圍。這證明給予正確的信號，NSC能誘導成多巴胺能神經(jīng)元。Li等通過腺病毒載體將Nurr1轉(zhuǎn)染于NSC后，移植到6-羥基多巴胺大鼠模型腦內(nèi)，發(fā)現(xiàn)其比單純NSC移植治療PD的病理學行為學改善更明顯。膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（GDNF）是目前發(fā)現(xiàn)針對DA神經(jīng)元的一種最有效和特異性的神經(jīng)營養(yǎng)因子。Liu等發(fā)現(xiàn)將表達NTN的C17.2-NSC植入PD模型鼠紋狀體，移植細胞能夠存活、分化，保護DA神經(jīng)元，抵制6-羥基多巴胺對DA神經(jīng)元的毒性并能改善動物旋轉(zhuǎn)行為，其保護效果可持續(xù)4個月以上。褪黑素（MT）具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用。Sharma等［8］應用MT聯(lián)合C17.2-NSC移植治療PD模型，發(fā)現(xiàn)對PD模型損害側(cè)黑質(zhì)紋狀體的TH免疫反應有明顯保護作用。目前，免疫調(diào)節(jié)蛋白或神經(jīng)保護因子聯(lián)合NSC用于細胞移植后免疫應答的調(diào)節(jié)也是PD細胞移植治療的研究熱點。

4 前景與展望

神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病目前已成為一種研究和治療的方向，但對其分子機制、免疫排斥、移植誘導產(chǎn)生的運動等問題還需進一步研究。目前大部分結(jié)論都是基于動物實驗的結(jié)果，能否在人類身上得到類似或更好的結(jié)果還尚未可知，在實用性、技術、神經(jīng)生物學等方面存在一些問題。但隨著分子生物學、基因工程技術的發(fā)展和對神經(jīng)干細胞及帕金森病治療研究的深入，特別是近來對移植誘導產(chǎn)生的運動的鑒定以及分化至多巴胺能神經(jīng)元的新方法的出現(xiàn)［9］，有望對神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病的研究產(chǎn)生更好的推動作用。

參考文獻

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篇3

[中圖分類號] R575.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-7210（2012）08（b）-0107-01

肝硬化代償期因無典型臨床表現(xiàn)易被忽視，失代償期的治療主要有兩個方面，一是病因治療，二是抗纖維化治療。但迄今為止，國內(nèi)外尚無實質(zhì)意義上的抗纖維化藥物或方法投入臨床。而干細胞克服了臨床治療的局限性，為該疾病的治療打開了全新的思路。筆者在臨床工作中，應用干細胞治療肝硬化患者1例，現(xiàn)報道如下：

1 臨床資料

患者，男，27歲，因“腹脹、腹痛9 d，加重2 d”于2010年4月7日住院。既往體健。飲酒約0.25 kg/d，持續(xù)7年?；颊哂谌朐呵? d無明顯誘因出現(xiàn)腹脹腹痛，持續(xù)性發(fā)作，進食后明顯，未在意。2 d前腹脹腹痛明顯加重，飲食量減少，睡眠不佳，大小便正常。入院時查體：體重：76 kg，腹圍：95 cm，血壓：140/70 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），意識清，精神可，全身皮膚黏膜黃染，鞏膜亦輕度黃染，心肺查體無異常，腹部膨隆，上腹部壓痛陽性，無反跳痛，腹肌無緊張，肝腎肋下未觸及，肝上界位于右鎖骨中線第5肋間，移動性濁音陽性，雙下肢無水腫。入科檢查：乙肝五項：HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBcAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（-）。肝功能：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）為557 U/L，谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）為534 U/L，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）為95 U/L，總膽紅素（TBIL）為33 μmol/L，直接膽紅素（DBIL）為16.6 μmol/L，總蛋白（TP）為56.8 g/L，白蛋白（ALB）為25.8 g/L，白蛋白/球蛋白比值（A/G）為0.8。腎功能：正常。腹部彩超：肝硬化并脾大、腹水。大便潛血：陽性。腹部CT：肝硬化并腹水、膽囊炎、雙側(cè)胸腔積液。入院后給予常規(guī)保肝、抗病毒、口服利尿劑及對癥治療。于4月12日、16日、26日分別給予靜脈回輸臍血干細胞5 mL。4月20日抽取自體骨髓200 mL分離提取干細胞后通過造影注入肝動脈。住院期間，密切觀察患者臨床癥狀、體征、肝功能、肝臟彩超及CT。4月21日患者未感明顯腹脹腹痛，體重：71 kg，腹圍：87 cm，血壓：120/70 mm Hg。肝功能：ALT為193 U/L，AST為146 U/L，GGT為80 U/L，TBIL為30.5 μmol/L，DBIL為12.9 μmol/L，TP為63.2 g/L，ALB為26.5 g/L，A/G為0.7。4月26日體重：66 kg，腹圍：80 cm。肝功能：ALT為99 U/L，AST為68 U/L，GGT為73 U/L，TBIL為29.3 μmol/L，DBIL為11.1 μmol/L，TP為65.9 g/L，ALB為30.2 g/L。彩超：肝臟彌漫性改變，少量腹水。患者于4月27日出院，出院后繼續(xù)隨訪觀察，5月14日體重：65 kg，腹圍：86 cm。肝功能：ALT為60 U/L，AST為51 U/L，GGT為68 U/L，TBIL為28.4 μmol/L，DBIL為8.6 μmol/L，TP為78.2 g/L，ALB為38.1 g/L。彩超：肝臟彌漫性改變，未見腹水。7月1日體重：65 kg，腹圍：86 cm。肝功能：完全正常。隨訪1年，肝功能完全正常，無明顯不適癥狀及體征，未見心、腎等臟器損害及腫瘤傾向。

2 討論

肝硬化是指各種原因作用于肝臟，引起肝臟彌漫性、進行性損害，最終導致原有的肝小葉結(jié)構破壞，形成假小葉，在此基礎上出現(xiàn)一系列肝功損害與門脈高壓癥的臨床表現(xiàn)，尤其失代償期患者具有以上典型特征。對失代償期患者，臨床醫(yī)生通常給患者大量的靜脈或口服保肝藥物，對腹水處理采取利尿、補充血漿、白蛋白治療，尤其是晚期患者，多以對癥、支持治療為主，但收效甚微[1]。近年來，我國肝移植技術得到了迅猛的發(fā)展，但由于肝源的緊缺，潛在適合肝移植的患者中，僅有0.04%的患者接受肝移植治療[2]，而且移植后的免疫排斥反應難以解決，移植費用昂貴，對國家、社會、個人均是一種沉重的經(jīng)濟負擔。干細胞移植技術是目前國際上唯一可以與肝移植相媲美的治療肝硬化的新技術。因干細胞具有強大的分化功能，根據(jù)不同的環(huán)境及不同藥物誘導作用可以分化多種組織干細胞[3]。筆者就是根據(jù)這種原理將干細胞種植到肝臟內(nèi)，在肝內(nèi)微環(huán)境中，在干細胞分化誘導劑的作用下使其生長為正常的肝臟細胞，從而代替已經(jīng)衰老的肝細胞，發(fā)揮干細胞功能，從而達到治療的目的。本例患者在3次靜脈回輸臍血干細胞及動脈植入骨髓干細胞后，臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn)，肝功能得到了改善。第1次靜脈回輸后9 d，轉(zhuǎn)氨酶及膽紅素、白蛋白水平均顯著改善，腹水明顯減少，臨床癥狀基本消失。80 d后白蛋白水平、轉(zhuǎn)氨酶及膽紅素水平均正常，未見任何不良反應。隨訪1年患者病情未見反復。從該患者的臨床治療及轉(zhuǎn)歸，可以清楚地認識到干細胞強大的分化功能，并可向肝細胞方向轉(zhuǎn)化。干細胞研究者認為，干細胞移植使許多傳統(tǒng)醫(yī)學難治療的絕癥發(fā)生革命性的變化，也為肝硬化的治療提供了一個新的思路，相信隨著對干細胞研究的不斷深入，此項技術會逐漸得到關注及認可，這也為許多患者帶來新的曙光。

[參考文獻]

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[2] 陳積圣，商昌珍.肝干細胞移植及其應用前景[J].新醫(yī)學，2008，39（11）：704-705.

篇4

【摘要】：如今，治療肝硬化主要有三類方法: 原位肝移植；肝細胞移植；肝臟干細胞移植。前兩種方法由于來源緊缺、費用高昂等缺點，難以成為臨床常規(guī)治療手段。近年來，伴隨著對于細胞研究認識的深入及分子生物學和細胞生物工程技術的發(fā)展，通過干細胞移植治療肝硬化逐漸成為研究的熱點。本文從肝硬化疾病的定義入手，討論了肝干細胞的分類和作用，詳細介紹了肝干細胞治療肝硬化的機制和研究進展。

【關鍵詞】：肝硬化；肝細胞移植；研究進展

各種原因?qū)е碌慕K末期肝病患者內(nèi)科治療療效均欠佳，病情常不能逆轉(zhuǎn)，死亡率極高，肝移植的出現(xiàn)為終末期肝病的治療提供了較為有效的方法，但肝源缺乏、費用昂貴、移植排斥反應免疫抑制劑引起并發(fā)癥等成為限制其廣泛應用的主要原因，為此，國內(nèi)外眾多專家正在努力探索肝衰竭新的治療方法。干細胞具有向肝系細胞分化的潛能以及自身增殖的特性，通過干細胞移植后，能使其在肝臟中沉積并分化為成熟肝細胞以替代受損的肝組織而發(fā)揮功能。

一、 肝硬化疾病概述

肝硬化是一種常見的慢性肝病，可由一種或多種原因引起肝臟損害，肝臟呈進行性、彌漫性、纖維性病變。臨床上經(jīng)常遇到的各種難治性肝病，如門靜脈高壓癥、肝功能不全或衰竭、肝癌等，都是由肝纖維化逐漸演變、發(fā)展而來。肝纖維化及其終末階段肝硬化是全球性的常見病和多發(fā)病，危害性極大。

二、 肝干細胞移植治療肝硬化的優(yōu)勢

原位肝移植能夠從根本上改善肝功能、延長肝硬化患者的生存期，已成為理想的治療選擇，然而由于其供體緊缺、免疫排斥、費用高昂等缺點，使臨床應用受到很大限制，很難成為常規(guī)治療手段。肝細胞移植曾被認為是有希望的治療方法，但大量研究最終證明，移植后的肝細胞在體內(nèi)存活和增殖十分困難，臨床實用價值不大。近年來隨著對細胞研究認識的深入及分子生物學和細胞生物工程技術的發(fā)展，通過干細胞移植治療肝硬化逐漸成為研究的熱點，以肝臟干細胞為種子細胞的基因工程、干細胞工程乃至組織工程作為肝移植的替代方法越來越顯示出良好的應用前景，為肝硬化的治療提供了一種嶄新方法。

三、 肝干細胞分類與作用

目前認為肝臟干細胞分為肝源性干細胞和非肝源性干細胞兩類，其中典型 的肝源性干細胞有卵圓細胞、小肝細胞和肝細胞；非肝源性干細胞有胚胎干細胞、骨髓干細胞、胰腺上皮細胞等。

(一) 肝源性干細胞

1． 肝卵圓細胞

目前對卵圓細胞的起源仍缺乏明確的認識。由于卵圓細胞和骨髓干細胞表達共同的標志物，個體胚胎發(fā)育時肝和骨髓都具有造血功能，因此Oh等［2］認為在一些生理條件下，肝臟的卵圓細胞起源于骨髓。Wang等［3］則認為卵圓細胞不是源自骨髓，而是來自肝臟非實質(zhì)細胞。

2． 小肝細胞

Sasaki等［4］認為小肝細胞是可以分化為成熟肝細胞的定向祖細胞，在培養(yǎng)基中可以選擇性的增殖。

3． 成熟肝細胞

近年來認為它是具有增殖和分化潛能的干細胞。

(二) 非肝源性干細胞

1． 胚胎干細胞

Shiraki等［5］研究表明在不同的培養(yǎng)條件下，胚胎干細胞可以分化為肝細胞。 目前，人胚胎干細胞向肝臟分化多采用擬胚體法(EB)。其最大特點是具有空間 三維結(jié)構，與胚胎發(fā)育過程相仿。但EB的分化隨機性較強，肝細胞誘導效率不高。

2． 骨髓干細胞

骨髓干細胞包括造血干細胞和骨髓間充質(zhì)細胞。Sato等［6］將人骨髓間充質(zhì)干細胞移植入接受丙烯醇治療的大鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)其可以分化為人肝細胞，這些細胞表達肝特異性標志。骨髓源性間充質(zhì)干細胞在一定條件下可以分化生成數(shù)量不多的卵圓細胞。將脂肪間充質(zhì)干細胞移植給肝臟損傷的小鼠，能降低血清中的轉(zhuǎn)氨酶水平，同時增加白蛋白的含量。脂肪間充質(zhì)干細胞較骨髓間充質(zhì)干細胞具有更多的細胞來源、更大的擴增量，研究其肝細胞分化潛能將為肝病的細胞治療提供更為理想的細胞來源。

3． 胰腺上皮細胞

胰腺上皮細胞在一定培養(yǎng)條件下可分化為肝細胞，且表達肝細胞特異的蛋白。

四、 干細胞主要移植方式

1、 經(jīng)肝動脈介入移植

經(jīng)肝動脈介入干細胞移植技術相對成熟，操作簡單，是干細胞移植常用的方法之一。就是在數(shù)字減影機下經(jīng)股動脈插管至肝固有動脈，造影觀察后，經(jīng)肝左、右動脈將干細胞懸液注入肝臟的操作技術。

2、 經(jīng)門靜脈移植

干細胞在體內(nèi)向肝細胞分化需要嗜肝因子及生長因子等刺激因子組成的微環(huán)境，因此門靜脈在理論上是移植的最佳部位。經(jīng)皮經(jīng)肝在超聲下將干細胞直接注入門靜脈，或在 X 射線透視下將導管插入門靜脈造影后將干細胞注入門靜脈，能夠使其最大限度的停留在肝臟，為其在體內(nèi)增殖分化提供合適的微環(huán)境。

五、 肝干細胞治療肝硬化的臨床應用

干細胞移植的實驗研究取得很大成就，也為臨床應用提供了依據(jù)，許多學者和臨床工作者開始了更進一步的臨床研究，在肝硬化疾病的應用研究中干細胞顯示了特有的修復和抗炎作用。

Yannaki等［7］用粒細胞集落刺激因子動員骨髓后收集骨髓干細胞治療2例肝硬化患者，發(fā)現(xiàn)肝內(nèi)血管形成增多，Child、MELD評分改善，術后34周未因為肝硬化而住院治療。Higashiyama等［8］的相關研究證實自體干細胞移植可以改善肝功能，延緩或阻止肝纖維化的發(fā)生，降低并發(fā)癥發(fā)生。Pai等［9］采用自體干細胞移植治療 9 例肝硬化患者也取得相似的療效。

六、 干細胞移植在應用中存在的問題

干細胞能夠自我增殖和定向分化，不僅可以成為肝衰竭患者度過危險期、等待肝源進行肝移植的一個過渡方法，又能直接修復損傷肝臟，作為細胞療法應用于臨床治療肝衰竭、各種終末期肝病。然而，要真正將干細胞移植廣泛應用于臨床目前還有很多的問題需要進一步探究。

主要的問題有：（1）干細胞體外分離培養(yǎng)、鑒定等方面的技術尚未完全成熟；（2） 干細胞直接移植和體外分化后移植治療的適應證及禁忌證；（3）移植方式、部位、最佳時機的選擇以及移植細胞的最佳數(shù)量，如何避免血管栓塞的發(fā)生等細胞移植總是有待進一步探討；（4）需要建立一個有效的體內(nèi)跟蹤體系，以便更好地觀察干細胞在體內(nèi)的歸巢和定位；（5）干細胞移植治療的長期療效和安全性還有待進一步觀察。

七、 展望

目前干細胞移植是世界上最前沿、最熱門的研究熱點，自體干細胞移植在治療肝病方面已在英國、美國、中國取得理想療效，被認為是治療肝病的第2條“終極途徑”。干細胞的來源充足，容易獲得，增殖能力強，可以大量體外擴增，干細胞移植技術成熟，操作相對簡單，安全性高，風險小，數(shù)日可出院，價格低廉，僅為肝臟移植的10%左右，采用自體移植方式可以完全避免移植后排斥反應。自體干細胞移植治療肝臟疾病盡管不能完全替代肝臟移植和人工肝，但具有不可比擬的優(yōu)點，必將使肝臟疾病的治療進入一個嶄新的時代。

篇5

【關鍵詞】自體骨髓干細胞；肝硬化；護理

【中圖分類號】R768【文獻標識碼】B【文章編號】1005-0515(2011)03-0033-01

方法：在嚴格無菌條件下,給患者行髂后上棘局部消毒、麻醉,以18號骨髓穿刺針從髂后上棘進行穿刺,抽取骨髓50~100ml,以4000U肝素抗凝,避免污染。參考Kai Wol-lert的方法,患者骨髓離心去除脂肪層,用等量DMEM培養(yǎng)液稀釋骨髓,制成細胞懸液。將骨髓輕輕加到密度1.073/ml的percoll分離液上,1200rpm離心25min(室溫下)。吸取界面細胞層,用生理鹽水洗脫,1500rpm×5min離心3次,生理鹽水重懸細胞,鏡下記數(shù)所用細胞為1.0×107cells/ml,置于37℃二氧化碳孵箱中待用。X光透視下,經(jīng)股動脈插管至肝固有動脈,注射造影劑,觀察肝內(nèi)血管情況及有無占位病變后,將分離好的骨髓干細胞懸液注入肝內(nèi)。之后用10ml生理鹽水沖洗管腔。劑量為MHCs(5~50)×107/(ml•次)。

術前護理：

1 心理護理

肝硬化患者由于疾病長期折磨,遷延不愈,隨著肝功能降低,癥狀更為突出,往往擔心發(fā)生出血、肝昏迷等癥狀,甚至癌變。目前國內(nèi)針對此病尚無特效的治療方法是造成患者抑郁、焦慮的直接原因。自體骨髓干細胞移植是世界最前沿的醫(yī)療技術,目前國內(nèi)外尚未見過肝臟干細胞移植的報道。干細胞移植后,患者肝臟功能逐漸恢復,相當于促進再生新肝臟,是治療重癥肝病的一條新路。因此護士應主動關心患者,介紹該手術的意義、方法和術中可能出現(xiàn)的并發(fā)癥及采取的相應措施,并同醫(yī)生一起向患者介紹該項技術的先進性、安全性,以消除患者的恐懼心理,增強對手術的信心。

2 術前準備

做好患者的術前準備是手術順利進行的保證。協(xié)助醫(yī)生做好各項檢查,如血常規(guī)、凝血功能、肝功能、電解質(zhì)、心電圖、CT、采集骨髓等,醫(yī)護人員集體討論病歷,以全面了解患者情況;做碘過敏試驗,雙側(cè)腹股溝備皮;訓練患者床上排便;術前晚保證充分的睡眠,術前6 h禁食水。

3 術中護理

3.1 肝硬化患者在接受自體骨髓移植術中病情隨時有可能發(fā)生變化,因此應密切觀察病情變,監(jiān)測生命體征,同時注意觀察患者面部表情變化,發(fā)現(xiàn)問題及時處理,使病人安度危險期,配合醫(yī)生順利完成手術.

3.2 因術中穿刺部位暴露外面時間較長,需注意保暖,消除患者緊張情緒.

4 術后護理

4. 1 嚴密觀察病情變化:每30~60分鐘測呼吸、血壓、脈搏1次,并注意觀察患者有無腹脹、腹痛、頭暈、惡心、心慌、出冷汗及大便的顏色等情況。如有病情變化及時通知醫(yī)生。

4. 2 加強環(huán)境消毒，嚴格執(zhí)行隔離措施:保持病室內(nèi)空氣清新,住單間病房。患者入住前兩天應對病室內(nèi)的病床，診療器材，墻壁地板和生活用品進行消消毒滅菌。手術由專人進行，要求醫(yī)護人員進入病房必須戴無菌帽子，穿隔離衣，戴無菌手套等。

4.3 肝動脈穿刺部位的護理:加強穿刺點部位的按壓與固定，按壓部位準確，延長按壓時間，由常規(guī)的15分鐘延長到30分鐘；局部給予1千克沙袋加壓包扎實12小時，專人護理，密切觀察。延長絕對臥床時間，由常規(guī)24小時延長至36小時。加強護理宣教，講解按壓和制動的重要性以取得患者配合。

4.4 預防并發(fā)癥的護理

4.4.1 發(fā)熱的護理:在病情觀察時一定要注意體溫的變化,以便和感染相鑒別,為治療提供可靠的依據(jù)。

4.4.2 惡心的護理:向患者解釋惡心的原因,提高心理耐受能力,患者給予對癥處理后癥狀緩解。

4.4.4 腹水的護理:肝硬化失代償期出現(xiàn)腹水,患者應采取舒適的半臥位,使其橫膈下降,增加肺活量,減少肺臟瘀血。肝硬化患者抵抗力低,有腹水很容易造成感染,應該加強基礎護理,保持皮膚清潔干燥,口腔清潔,保證足夠的休息和睡眠,增強機體抵抗力。指導患者了解腹水形成的原因和加重因素,學會自我測腹圍、稱體重、密切觀察腹水消長情況,，詢問患者的主觀感受，準確記錄排尿時間及尿量。

4.5 骨髓穿刺點出血的護理:囑患者嚴格臥床休息制動，砂袋加壓包扎按壓穿刺點,給予及時查血常規(guī),并及時給予止血藥。在治療過程中護士隨時注意皮膚有無出血點及紫癜等,同時配合醫(yī)生觀察大小便顏色。

4.6 飲食護理:自體骨髓干細胞移植后不會引起排斥反應,新生的干細胞將部分代替病肝功能?；颊吒闻K將逐漸得到恢復,相當于促進再生新肝臟。多維生素、易消化的清淡飲食,少量多餐,保證營養(yǎng)均衡攝入。輕度腹水者給予足量蛋白質(zhì)、維生素豐富的低鹽飲食,每日攝入的鹽量不超過2g;嚴重水腫時宜用無鹽飲食并限制水的攝入,鈉應限制在2克左右,每日進水量限于500~1000ml左右;多吃含鉀高的食物,預防發(fā)生低血鉀癥。肝功能顯著損害、血氨偏高或有肝性腦病先兆者,應限制或禁食蛋白質(zhì)。嚴禁飲酒。避免進食堅硬粗糙、辛辣刺激性食物。

5 結(jié)論

對于各種終末期肝病,原位肝移植是最理想的治療選擇,但是供體的緊缺、移植后的免疫排斥反應以及高額的治療費用限制了該種治療方法的臨床應用,故迫切需要建立一種簡便、安全并有效的治療方法。骨髓干細胞移植是肝功能衰竭治療的一個新的研究方向。本研究采用肝動脈導管自體骨髓干細胞移植進行失代償期肝硬化治療,旨在探討該治療方法的療效、可行性、安全性和實用性。初步探討了自體骨髓干細胞移植對失代償期肝硬化患者肝功改善的作用,我們相信隨著肝細胞移植治療技術在臨床的應用增加，護理措施出將日臻完善。

參考文獻

[1] 龔麗娟等，肝硬化患者行自體骨髓干細胞移植的護理

[2] 安林靜等，7例肝細胞體內(nèi)移植術患者的護理，中華護理雜志，2006年12月第41卷第12期

篇6

[中圖分類號]R779.6[文獻標識碼]C [文章編號]1673-7210（2007）10（a）-147-01

翼狀胬肉是眼科常見病，其發(fā)病主要與環(huán)境有關，尤其是陽光、沙塵、干燥氣候等慢性刺激。手術是治療翼狀胬肉的有效方法，但傳統(tǒng)手術方法的復發(fā)率高，為降低手術后復發(fā)率，我們采用自體角膜緣干細胞移植治療胬肉，取得了較滿意的臨床效果，現(xiàn)總結(jié)如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

2005年1月～2006年1月，隨機選擇37例50眼翼狀胬肉患者，年齡26～72歲，患病年限2～20年，雙眼13例，左眼11例，右眼13例。胬肉組織浸入角膜內(nèi)≥2 mm，體寬>5 mm,充血肥厚，重型者32例45眼；復發(fā)型5例5眼。

1.2 方法

常規(guī)切除胬肉頭頸部及變性增生組織，松解粘連，依據(jù)結(jié)膜缺損情況取顳上方或鼻上方包括寬0.5 mm角膜上皮和適當大小的結(jié)膜作為植片，上皮面向上，用7-0尼龍線對位間斷縫合于胬肉區(qū)植床上。術畢涂金霉素眼膏包眼。術后第1天起滴點必舒眼液，2 次/d，10 d拆線。

1.3 術后觀察

術眼均有輕度刺痛感，2～3 d后消失，5眼角膜出現(xiàn)淺點樣角膜炎，3 d后消失，角膜上皮恢復，10 d左右結(jié)膜植片愈合良好，植片血管充盈，1個月后邊界分辨模糊。取球結(jié)膜植片處5 d左右上皮愈合，角膜緣部少量新生血管，半月后血管消退，局部恢復原狀。

2 結(jié)果

隨診3～13個月，平均8個月，視力均有不同程度提高，角膜表面光滑，球結(jié)膜平復，未見胬肉復發(fā)。

3 討論

翼狀胬肉治療方法多，雖經(jīng)過手術改進，但術后復發(fā)率高達30％～50％[1]。近年來隨著角膜緣干細胞理論[2]建立，認為翼狀胬肉的發(fā)生是因為病變部位角膜緣干細胞的缺乏或功能障礙。角膜緣干細胞具有細胞更新和組織再生功能，局部受損時可影響結(jié)膜的轉(zhuǎn)向分化而發(fā)生異常[3]。在正常生理條件下，角膜緣的增殖壓力抑制結(jié)膜上皮細胞長入，并防止角膜緣部的結(jié)膜血管入侵，角膜緣功能低下或缺失，可使角膜上皮增殖，能力喪失，結(jié)膜上皮長入和新生血管形成而導致翼狀胬肉發(fā)生。翼狀胬肉的病理研究表明：胬肉內(nèi)主要是大量的增殖纖維而引起其相應的病變[4]。手術的目的是提供健康的角膜緣組織，并使其在角膜創(chuàng)面的修復愈合中發(fā)揮應有的作用。本文用自體角膜緣干細胞移植，重建有功能的角膜緣，通過移植角膜干細胞的增殖分化及細胞的向心性移行來修復角膜表面，防止翼狀胬肉的復發(fā)。本文觀察到有5例從原胬肉部位增生來的新生血管伸展到近角膜緣附近時自行轉(zhuǎn)彎，避開向角膜方向伸展，這一體征現(xiàn)象也得以證實該理論。

角膜緣部干細胞在角膜緣上、下部較多，故選擇移植片以在上下方之角膜緣組織為宜。植片角膜部分可稍帶實質(zhì)，結(jié)膜部分為上皮，將移植片移至缺損區(qū)角膜側(cè)用7-0尼龍線間斷縫合于角膜緣，植片長度同缺損區(qū)域角膜緣長度。結(jié)膜移植片傷口一般10 d左右愈合，故10天拆線為宜，以防過早拆線植片脫落。本手術取材方便，操作簡單，無排斥反應，可達到治療疾病，防止復發(fā)的目的。

[參考文獻]

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[3]王文華,李春龍.自體角膜緣干細胞移植治療翼狀胬肉[J].中國醫(yī)藥導報,2007,4(2):125.

篇7

關鍵詞： 心血管疾病

    1  BMSC向心血管組織細胞分化

    大量實驗數(shù)據(jù)表明，BMSC一旦暴露于多種生理或非生理性刺激下，進一步分化的細胞顯示心肌樣細胞的幾種特征。在這些條件下，體外分化的BMSC 顯示出肌管樣結(jié)構和時間依賴性同步跳動特性；電子顯微鏡分析揭示這些細胞具有心肌細胞樣超微結(jié)構包括典型的肌小節(jié)，中心位核和心房顆粒；并呈現(xiàn)發(fā)育心肌細胞的幾種功能特征包括肽類物質(zhì)的產(chǎn)生、多重結(jié)構收縮性蛋白的表達；它們也顯示出至少具有竇房結(jié)樣和心室樣細胞興奮能力[1-3]。

    已明確介質(zhì)和直接的細胞與細胞之間的接觸均可誘導BMSC分化為心肌細胞。通過與人類心肌細胞共培養(yǎng)，已經(jīng)證實干細胞可以獲得心肌細胞樣的表型特征為表達重鏈肌球蛋白、βactin及肌鈣蛋白T。然而，當BMSC在心肌細胞條件培養(yǎng)基下培養(yǎng)時，僅能觀察到βactin 表達。因此，細胞與細胞之間的直接接觸對于促使BMSC分化為心肌細胞基因譜系的心肌環(huán)境或微環(huán)境的信號傳遞是必須的。而且，人BMSC呈現(xiàn)出細胞與細胞之間的相互偶聯(lián)并通過特殊的縫隙連接與心室肌細胞偶聯(lián)[4，5]。實驗觀察到培養(yǎng)的心房和心室肌心肌細胞與從BMSC分化而來的心肌細胞樣細胞具有驚人的細胞及分子相似性，為更好地理解原始成體細胞和BMSC源性心肌細胞之間的細胞對話邁出了重要的一步。已證實BMSC不僅可分化為心肌細胞，同時還可以分化為血管平滑肌細胞或其前提細胞（vSMC/PC）、祖細胞和內(nèi)皮細胞。這些細胞類型均與血管系統(tǒng)發(fā)生有關，包括血管的生成和擴張。研究表明，新vSMC/PC形成出現(xiàn)在血管周圍間質(zhì)干細胞分化后，呈現(xiàn)血小板源性生長因子B(PDGFB)依賴性過程； 隨后又發(fā)現(xiàn), 在心肌內(nèi)注射BMSC 后，組織病理學和免疫組織化學分析揭示注入的細胞分化為心肌細胞、vSMC/PC 和內(nèi)皮細胞，同時可觀察到血管密度的增加[6]。與此相似，給慢性缺血的狗心肌內(nèi)注射BMSC可產(chǎn)生血管供應增加的效應并改善心功能。免疫熒光分析揭示，內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞出現(xiàn)共區(qū)域化，與肌細胞卻不存在共區(qū)域[7]。因此，這些數(shù)據(jù)表明BMSC成為心梗后病人大量心血管組織細胞成分的一個理想的供體來源。BMSC分化為心肌細胞繼發(fā)新生血管形成和心功能改善的機制與BMSC引起的生長因子的旁分泌有關[8-10]。已經(jīng)證實，F(xiàn)GF2，一種主要的有絲分裂蛋白，是由BMSC產(chǎn)生，并分別刺激定型和未定型的BMSC持續(xù)休眠和增值[11]。未定型的BMSC代表休眠前體的少數(shù)細胞群，而定型和成熟的BMSC產(chǎn)生大量的終末分化的間質(zhì)細胞系[12]。

    以上闡述BMSC 具有分化為幾種心臟表型細胞的潛能，多數(shù)情況是根據(jù)冰凍組織樣本的免疫組織學分析顯示固定細胞的細胞系的特殊細胞標志的共區(qū)域化的實驗依據(jù)為基礎。到目前為止，還沒有證實BMSC 注入后在受體心臟檢測到的已明確的免疫表型是肌原性和（或）血管細胞系分化的真正顯示且不是假象。在骨髓干細胞可塑性研究方法學進一步發(fā)展后，相似的觀點已引起廣泛爭議。因此，目前有必要借助一種合適的可確保實驗結(jié)果準確、可重復及穩(wěn)定的方法學檢測進行BMSC分化為心肌細胞的研究。此將有助于避免不必要的爭議諸如骨髓造血干細胞橫向分化為心臟表型細胞繼而影響心肌再生[13，14]。

    2  臨床前研究

    嚙齒動物如羊、狗、豬或猴梗死模型的實驗研究表明，多種類型細胞進行心臟移植是可行的且有助于改善梗死心肌的收縮功能[15]。這些細胞類型包括自體同源的未純化的骨髓、骨髓單核細胞、純化的骨髓來源的細胞(CD34+ 和（或） CD113+)、心肌細胞、成纖維細胞和肌原細胞。雖然可以變更移植方法（經(jīng)心肌內(nèi)、冠狀動脈內(nèi)或靜脈）、移植細胞的數(shù)量和受體的心臟狀態(tài)，但移植后的免疫或毒性反應仍然不能檢測。

篇8

【關鍵詞】翼狀胬肉 角膜緣干細胞移植術

翼狀胬肉是眼科常見、多發(fā)的眼表疾病， 發(fā)病原因尚不明確， 嚴重時會導致視力下降。治療主要以手術為主，傳統(tǒng)的手術治療方法很多，但術后復發(fā)率高達20%～70%。自2007年12月至2009年12月我們采用胬肉切除聯(lián)合角膜緣上皮干細胞移植治療翼狀胬肉，取得較好的效果?，F(xiàn)報告如下:

1 資料與方法

1.1一般資料

本組接受手術治療的翼狀胬肉患者72例(76眼)，男27例(27眼) ，女45例(49眼)，年齡35～73歲，平均51.5歲。

1.2手術方法

1.2.1常規(guī)手術野消毒鋪巾， 結(jié)膜囊表面麻醉后開瞼器開瞼，2%利多卡因針0.3～0.5ml (無高血壓病史加少量腎上腺素)做胬肉頸部、體部結(jié)膜下浸潤麻醉，顯微鏡下進行手術，位于胬肉頸部平行角膜緣弧形剪開結(jié)膜達上下端正常結(jié)膜組織約1mm，分離球結(jié)膜與胬肉體部組織，近淚阜部。在胬肉頭部前1 mm正常角膜處做淺層角膜剖切，至角膜緣處表層鞏膜處，酌情燒灼創(chuàng)面出血點，將表層角膜連同胬肉頭頸部向顳側(cè)牽拉，切除達淚阜下胬肉組織。于患眼上方取一包括角膜緣干細胞和相鄰區(qū)球結(jié)膜的眼表移植片， 大于胬肉缺損區(qū)結(jié)膜瓣，將移植片放到暴露的鞏膜面上，將結(jié)膜瓣植片角膜緣側(cè)與缺損區(qū)角膜緣側(cè)相吻合，以10-0尼龍線帶淺層鞏膜縫合植片6～8 針，術畢用氧氟沙星眼膏單眼包扎。

1.2.2術后處理 換藥1次/d， 術后7—10d拆線。點復方妥布霉素，4～6 次/d， 至2周后。

1.3療效觀察 治愈：角膜光滑透明，上皮愈合良好，移植片成活，無新生血管或翼狀胬肉樣組織增生。復發(fā)：結(jié)膜充血，新生血管或翼狀胬肉樣組織增生。

2 結(jié)果

2.1術后情況 72例(76眼)術后均無感染，早期有輕度流淚異物感，2～3d角膜上皮恢復，結(jié)膜植片輕度水腫，7d后植片水腫消退，2～3周結(jié)膜充血消退。

2.2手術效果 術后隨訪觀察6～24個月，治愈，角膜上皮光滑平整， 移植片均在位存活，無充血。治愈72例(76眼)，復發(fā)2例(2眼)，復發(fā)率2.8%。比傳統(tǒng)手術的復發(fā)率明顯降低。

3 討論

翼狀胬肉是以結(jié)膜下纖維血管組織異常增生為特征的眼表疾病，其發(fā)生可能與風塵、煙霧、干燥、紫外線等因素有關，但具體原因尚不明確。其發(fā)病機制多認為是紫外線或其他環(huán)境造成鼻、顳側(cè)角膜緣干細胞損傷，導致干細胞屏障功能破壞，引起結(jié)膜下纖維組織增生長入角膜。受傷的干細胞還可能釋放血管增殖因子，加速胬肉的形成。

翼狀胬肉當前治療方式以手術為主，手術方式很多，但復發(fā)率高，因此對翼狀胬肉的治療關鍵是如何解決術后的復發(fā)問題。

隨著角膜緣基質(zhì)層干細胞的增生分化研究表明，角膜緣干細胞是位于角膜緣基底上皮層的特殊細胞，干細胞主宰著細胞的更新和組織的再生，它具有長壽命的特點和極大的細胞分裂、增生的潛能。在正常生理條件下，角膜緣干細胞的高增殖壓力抑制了結(jié)膜上皮細胞的長入，并且防止角膜緣部源于結(jié)膜血管的長入。完整的角膜緣是阻止結(jié)膜向角膜生長的屏障，一旦此屏障破壞，角膜緣干細胞的缺失或功能低下可使角膜上皮細胞增殖能力喪失，增生活躍的結(jié)膜成纖維細胞易于向角膜方向生長，侵入角膜上皮下，并發(fā)炎癥，導致結(jié)膜上皮的長入和新生血管形成，從而導致胬肉形成。角膜緣干細胞移植為胬肉切除區(qū)提供了新的干細胞組織，為重建角膜緣柵狀皺紋、阻止結(jié)膜血管侵入及重建角膜表面起了很重要的作用，從而有效防止胬肉復發(fā)。

采用自體角膜緣上皮移植的方法，為胬肉區(qū)重新提供了角膜干細胞，有助于恢復眼表的生理環(huán)境。通過移植后的角膜緣干細胞的增生、移行，獲得角膜上皮的修復，恢復了眼表的整體，阻止了結(jié)膜細胞向角膜緣生長。

經(jīng)臨床觀察，自體角膜緣移植治療翼狀胬肉較好的解決了角膜及角膜緣上皮修復，隔離翼狀胬肉細胞向角膜生長，有效的抑制胬肉復發(fā)。

該手術安全易行，無需特殊材料，術中、術后并發(fā)癥少，復發(fā)率低，是一種理想、有效的手術方法。

參 考 文 獻

[1]黃榮海.翼狀胬肉發(fā)病機制及臨床治療研究進展.廣西醫(yī)學，2009，31.（3）：444 - 445.

篇9

[關鍵詞]干細胞 胬肉 移植術治療

翼狀胬肉是眼科較為常見的眼表疾病之一。翼狀胬肉組織向角膜中央生長,發(fā)展到一定程度可引起散光、視力下降、眼部不適感及影響美容等,嚴重影響患者的身心健康。單純胬肉切除術復發(fā)率高達20%～30%。近年來,我院采用胬肉切除加自體角膜緣干細胞移植術治療翼狀胬肉,取得了較好的效果,現(xiàn)報告如下。

一、臨床資料

1.一般資料。收集本院2008年7月～2009年7月翼狀胬肉病例90例(105眼),其中男51例,女39例,年齡34歲～71歲,平均56歲,均為原發(fā)性翼狀胬肉,患者術前均進行常規(guī)眼科及全身檢查,對充血性(活動期)翼狀胬肉術前行激素及抗生素點眼3～7天。

2.手術方法。術前術眼常規(guī)消毒,手術在顯微鏡下操作,2%利多卡因予胬肉局部及上方球結(jié)膜下浸潤麻醉,用圓刀片從距胬肉頭部0.5mm處開始剝離至角膜緣予以剪除,繼續(xù)向內(nèi)眥部分離胬肉頸部體部與球結(jié)膜至淚阜處。注意不要損傷內(nèi)直肌,徹底剪除變性結(jié)膜,暴露的鞏膜點狀燒灼止血。于術眼上方取一帶透明角膜約1mm的游離結(jié)膜瓣,盡量少帶筋膜,大小大于或等于鞏膜暴露面積。將移植片平鋪于鞏膜裸區(qū),上皮面向上,角膜緣對角膜緣,予10/0無創(chuàng)傷縫線間斷縫合5～6針,對和結(jié)膜切口,取材創(chuàng)面無需處理,讓其自行修復。上眼膏,包扎。術后1d打開術眼換藥,典必殊眼水點眼4次/d,7～10d拆線,繼續(xù)用藥4～6周。

二、結(jié)果

105眼手術均一次成功,術后多數(shù)患者有不同程度的疼痛、異物感、流淚等。術后24小時后患者疼痛基本消失,僅有異物感,輕流淚,移植瓣少數(shù)充血、水腫,拆線后逐漸減輕,角膜創(chuàng)面光滑、上皮愈合良好。一個月充血水腫基本消失。如角膜緣新生血管豐富,并向角膜緣侵入,提示有復發(fā)的傾向。對105眼術后隨訪6個月～1年,復發(fā)4眼,復發(fā)率3.8%。

三、討論

翼狀胬肉的手術方法有多種:包括單純胬肉切除;胬肉頭部轉(zhuǎn)移術;結(jié)膜瓣轉(zhuǎn)位術;羊膜移植術;角膜緣干細胞移植術等。但無論哪種手術方法術后均有復發(fā)的可能。翼狀胬肉的復發(fā)除與個體差異、手術方式、切除是否徹底、術前及術后用藥是否合理有關外,近年來研究表明它的復發(fā)還與角膜緣干細胞缺乏密切相關,據(jù)1983年ThoftXYZ的理論,胬肉切除術后如局部角膜緣干細胞未得到及時補充,或發(fā)生供給衰竭時,角膜表面的穩(wěn)定性將會遭到破壞,出現(xiàn)各種不同的病理改變,為新生血管侵入、胬肉的復發(fā)創(chuàng)造了條件。胬肉切除術后,角膜緣受損,通過角膜緣干細胞移植后,角膜緣干細胞增殖、移行,使角膜上皮修復并形成穩(wěn)定的具有良好功能的角膜緣“欄柵”結(jié)構,可阻止纖維血管組織形成和入侵,從而抑制胬肉的復發(fā)。筆者認為,角膜緣干細胞移植術治療翼狀胬肉取材方便、費用低,術后患者不適癥狀輕,消退快,復發(fā)少并且不存在免疫排斥問題。故認為這種治療翼狀胬肉手術方法是目前治療費用低,安全性高,效果好的一種較好的手術方法。

參考文獻:

[1]董永鵬,張茂林.翼狀胬肉切除加自體角膜緣干細胞移植治療翼狀胬肉療效觀察.實用醫(yī)學雜志,2007,23(16):2463.

篇10

翼狀胬肉是一種常見的多發(fā)性眼表病，目前認為發(fā)病機制可能是紫外線或其他環(huán)境因素造成鼻，顳側(cè)角膜緣干細胞損傷導致干細胞屏障功能破壞，引起結(jié)膜下纖維組織增生形成翼狀胬肉。手術是治療翼狀胬肉常用方法，但單純翼狀胬肉切除術復發(fā)率高達14%～89%［1］。因此如何降低術后復發(fā)率成為治療翼狀胬肉的難點及棘手問題。自體角膜緣干細胞移植治療翼狀胬肉是目前較為先進的治療方案之一，筆者釆用自體角膜緣干細胞移植治療翼狀胬肉28例，取得了滿意效果，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

1.一般資料

本組病例28例，男12例，女16例，年齡31～72歲，平均45.4歲，所有患者翼狀胬肉頭部伸入角膜3～5 mm，無其他眼病，初發(fā)20例，復發(fā)8例。

2.手術方法

取1%丁卡因表麻，2%利多卡因局麻，所有病例均在顯微鏡下進行，用球結(jié)膜剪將翼狀胬肉頸部與角膜緣分離，從角膜表面撕除或純性剝離翼狀胬肉頭部，分離切除翼狀胬肉及所侵犯的結(jié)膜組織，裸露鞏膜，電凝止血。注意不要傷及淚阜及內(nèi)外直肌。于角膜上方結(jié)膜下注謝2%利多卡因0.2 ml，按摩結(jié)膜使其平整，取角結(jié)膜交界處組織，達透明角膜1 mm，寬約2～3 mm，長約4～6 mm，視翼狀胬肉對角膜組織損害范圍而定，取時盡量取角膜緣上皮，植皮上皮面朝上，平鋪于病變區(qū)的角鞏緣處，植片角鞏緣與植床角鞏緣相吻合，用100縫線縫合結(jié)膜及植片連帶少許鞏膜，固定在鞏膜上，植片中間內(nèi)外固定2針，其余鞏膜創(chuàng)面暴露，取材處創(chuàng)面無需處理。

3.術后處理及觀察

術后結(jié)膜下注射慶大霉素+地塞米松，繃帶包扎2～3天，每天滴典必殊眼藥水，換藥1次，觀察角膜上皮及植皮情況，全身應用抗生素及激素，2～3周拆線，隨訪18～24個月。

4.治愈標準

角膜上皮愈合良好，表面光滑透明，無明顯新生血管及胬肉樣組織。復發(fā):結(jié)膜明顯充血肥厚，角膜創(chuàng)面有新生血管及資肉增生。

結(jié) 果

1.取材處傷口

術眼上方取材處傷口于術后3～4天被新生上皮覆蓋，一周后局部充血及水腫消退，無瘢痕及并發(fā)癥發(fā)生。

2.角膜鞏膜創(chuàng)面

角膜創(chuàng)面上皮自植片的角膜緣向角膜中央移行，術后一周內(nèi)植片及新生上皮水腫，患者有怕光流淚癥狀。術后1～2周角膜創(chuàng)面修復，水腫消退，逐漸恢復光滑透明，術后2～3周拆線，刺激癥狀減輕，鞏膜創(chuàng)面2～3周后逐漸被結(jié)膜上皮覆蓋。

3.角膜緣植片

術后1～2天植片邊界尚清可見，輕水腫，3～5天植片的結(jié)膜緣血管網(wǎng)己恢復微循環(huán)色紅潤邊界模糊，6天后植片水腫消退，與周圍的角膜緣結(jié)膜組織形態(tài)顏色一樣，無排斥反應。

4.隨訪結(jié)果

術后隨訪18～24個月，26例治愈，2例復發(fā)，復發(fā)病例術前均為復發(fā)胬肉，復發(fā)率為7%。胬肉浸入角膜較深者遺留斑翳，少數(shù)有薄翳，大部份角膜透明。

討 論

翼狀胬肉治療的主要方法是手術治療，單純翼狀胬肉切除及翼狀胬肉頭部轉(zhuǎn)位結(jié)膜下埋藏術，術后反應重，并發(fā)癥多及復發(fā)率高［2］，理想的翼狀胬肉手術標準應是簡單易行，并發(fā)癥少，復發(fā)率低。正常情況下角膜緣部的增殖壓力抑制了結(jié)膜上皮及血管長入角膜組織，角膜緣干細胞的缺乏或功能下降可使角膜緣屏障功能破壞，致使結(jié)膜組織長入角膜和新生血管形成［3］。瞼裂部結(jié)膜組織長期受日光及風沙等環(huán)境因素影響，致使局部抗原成份改變而誘發(fā)局部變態(tài)反應，血管通透性增加引起白細胞浸潤，阻礙了干細胞的增殖和分化調(diào)節(jié)，角膜緣屏障功能下降促使結(jié)膜組織和新生血管長入角膜形成翼狀胬肉，因此翼狀胬肉發(fā)生與角膜緣干細胞缺乏有關［4］，認為翼狀胬肉是一種局限性角膜緣缺陷癥。翼狀胬肉切除術后局部角膜緣干細胞未得到及時補充或供給衰竭，角膜表面穩(wěn)定性破壞，出現(xiàn)各種病理改變，為新生血管入侵和翼狀胬肉的復發(fā)創(chuàng)造了條件，此外受損的干細胞還可釋放血管增殖因子，加速翼狀胬肉形成。通過角膜緣干細胞移植，移植干細胞增殖和移行獲得了角膜型上皮修復，恢復眼表面完整性，角膜緣柵欄和屏障作用得以重建和發(fā)揮，有利于阻止新生血管入侵和異常結(jié)膜源性組織增生，達到防止翼狀胬肉復發(fā)的目的［5］。我們采用自體角膜緣干細胞移植治療翼狀胬肉28例，26例治愈，2例復發(fā)，無并發(fā)癥，無排斥反應，取得了滿意效果。筆者認為:自體角膜緣干細胞移植治療翼狀胬肉有如下優(yōu)點:①取材方便，自體組織，不存在排斥反應；②上方有足夠角結(jié)膜組織，可滿足移植需要，如果翼狀胬肉范圍較大，角結(jié)膜組織不夠，可取自健眼角結(jié)膜緣組織來移植；③角結(jié)膜緣植片僅2～3 mm寬，故取材處無需作任何處理，愈合后不留瘢痕，不影響美觀，對日后行青光眼或白內(nèi)障手術切口影響不大；④不需保存，不需昂貴保存設備，適合基層醫(yī)院開展；⑤手術效果良好，復發(fā)率低，遺留瘢痕輕微，是治療翼狀胬肉有效方法，明顯優(yōu)于單純翼狀胬肉切除術。

參考文獻

1］王敏華，龔白明.胬肉的治療方法［M］.中國實用眼科雜志，2002，20(12):891-894.

［2］杜亞振，姜德詠，聶愛光.自體角膜緣干細胞治療翼狀胬肉的臨床分析［J］.中華眼科雜志，2002，38(6):351-354.

［3］李線，周靈，李紹偉.羊膜移植與自體角膜緣移植治療翼狀胬肉的初步療效對照［M］.中國實用眼科雜志，2005，23(8):857-859.